对唾液酸结合性IG样凝集素15具特异性的抗体及其用途的制作方法

背景技术：

1、唾液酸结合性ig样凝集素15(siglec15)是聚糖识别蛋白的siglec家族的成员。siglec蛋白在各种类型的白细胞上表达，并且经由结合至细胞外结构域的配体和介导细胞内信号传导转导在调节免疫应答中发挥重要作用。

2、发现siglec15在人类癌细胞和肿瘤浸润性髓样细胞上被上调。据报道，siglec15是一种抑制抗原特异性t细胞应答的免疫抑制剂。因此，siglec15被认为是癌症免疫疗法的潜在治疗靶标。

技术实现思路

1、本公开至少部分地基于结合至人唾液酸结合性ig样凝集素15(siglec15)的抗体的开发。此类抗siglec15抗体显示出对人siglec15的高结合亲和力和特异性。此外，某些示例性抗体(例如，克隆2020ep32-h11)能够诱导针对表达siglec15并激活免疫细胞的细胞的抗体依赖性细胞毒性(adcc)。此外，示例性h11的克隆(以单克隆抗体形式)显示了如在食蟹猴中观察到的期望的药代动力学特征(例如，长半衰期和低毒性)。因此，预期本文公开的抗siglec15抗体经由调节免疫应答和/或中和siglec15阳性细胞或siglec15依赖性信号而具有高治疗效果。

2、因此，本公开的一个方面的特征在于结合唾液酸结合性ig样凝集素15(siglec15)的分离的抗体。此类抗体与参考抗体结合至相同的表位，或者与所述参考抗体竞争结合至siglec15。所述参考抗体可以是以下中的一种：2019ep47-a02、2019ep47-a05、2019ep47-a10、2019ep47-c12、2020ep032-a08、2020ep032-a12、2020ep032-b03、2020ep032-h11、2020ep032-c09、2020ep083-g11、2020ep083-h01和2020ep085-g5。

3、在一些实施例中，本文公开的抗siglec15抗体可以包含：(a)重链互补决定区1(hccdr1)、重链互补决定区2(hc cdr2)和重链互补决定区3(hc cdr3)，其中所述hc cdr1、hccdr2和hc cdr3共同地与所述参考抗体的所述重链cdr至少80％相同；和/或(b)轻链互补决定区1(lc cdr1)、轻链互补决定区2(lc cdr2)和轻链互补决定区3(lc cdr3)，其中所述lccdr1、lc cdr2和lc cdr3共同地与所述参考抗体的所述轻链cdr至少80％相同。在一些实例中，与所述参考抗体的所述hc cdr相比，本文公开的抗siglec15抗体的所述hc cdr共同地含有不超过8个氨基酸残基变异。可替代地或此外，与所述参考抗体的所述lc cdr相比，抗siglec15抗体的所述lc cdr共同地含有不超过8个氨基酸残基变异。

4、在一些情况下，本文公开的抗siglec15抗体可以包含与所述参考抗体的vh至少85％相同的vh，和/或与所述参考抗体的vl至少85％相同的vl。在一些情况下，抗siglec15抗体对在细胞表面上表达的siglec-15具有小于约50nm的结合亲和力。在一些实例中，抗siglec15抗体具有小于10nm的结合亲和力。在一些实例中，抗siglec15抗体对在细胞表面上表达的siglec15具有小于5nm的结合亲和力。在一些实例中，抗siglec15抗体对在细胞表面上表达的所述siglec15具有小于1.5nm的结合亲和力。

5、在一些实例中，本文公开的抗siglec15抗体包含与参考抗体相同的重链互补决定区(hc cdr)和相同的轻链互补决定区(lc cdr)。在具体实例中，所述抗siglec15抗体包含与所述参考抗体相同的vh和相同的vl。

6、本文公开的任何抗siglec15抗体可以是人抗体。可替代地，它可以是人源化抗体。在一些情况下，所述抗siglec15抗体是全长抗体。可替代地，它可以是其抗原结合片段。在一些情况下，所述抗siglec15抗体可以是单链可变片段(scfv)抗体。在一些情况下，所述抗体是包含所述scfv的融合多肽。

7、另一方面，本公开的特征在于一种核酸或核酸组，所述核酸或核酸组共同地编码本文公开的任何抗siglec15抗体。在一些情况下，本文公开的核酸组是指两个核酸分子，各自编码所述抗体的一条链并且共同地编码所述抗体的重链和轻链。在一些实施例中，所述核酸或核酸组是载体或载体组，例如，表达载体或表达载体组。本文还提供了一种宿主细胞，所述宿主细胞包含编码本文公开的任何抗siglec15抗体的任何核酸或核酸组。

8、在又一方面，本公开的特征在于一种药物组合物，所述药物组合物包含本文公开的任何抗siglec15抗体、根据权利要求1至12中任一项所述的任何编码核酸、根据权利要求13至15中任一项所述的核酸或多种核酸或根据权利要求16所述的宿主细胞，以及药学上可接受的载剂。

9、此外，本公开提供了一种用于在受试者中抑制siglec-15或siglec-15+细胞的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用任何有效量的本文公开的任何药物组合物。在一些实施例中，所述药物组合物包含如本文公开的抗siglec15抗体。在一些实施例中，所述受试者是具有siglec15+疾病细胞，例如，肿瘤细胞或免疫细胞的人类患者。在一些实例中，人类患者患有siglec15+癌症。实例包括非小细胞肺癌(nsclc)、卵巢癌、乳腺癌、头颈癌、肾癌、胰腺癌、子宫内膜癌、尿路上皮癌、甲状腺癌、结肠癌、结肠直肠癌、黑色素瘤、肝癌或胃癌。

10、此外，本公开提供了一种用于检测siglec-15的存在的方法，所述方法包括：(i)使如本文公开的抗siglec15抗体与怀疑含有siglec-15的样品接触，以及(ii)检测所述抗体与siglec-15的结合。在一些情况下，所述抗siglec15抗体可以与可检测的标记缀合。在一些情况下，所述siglec-15在细胞表面上表达。在一些实施例中，所述接触步骤通过向受试者施用所述抗体来进行。

11、本公开的特征还在于一种产生结合至siglec-15的抗体的方法，所述方法包括：(i)在允许结合siglec-15的抗体的表达的条件下，培养包含编码本文公开的任何抗siglec15抗体的核酸的宿主细胞；以及(ii)从细胞培养物中采集如此产生的抗体。

12、本公开还包括抗siglec15抗体或包含此类的药物组合物，所述抗体用于治疗与siglec15相关的疾病或病症，例如，癌症或免疫病症；或者所述抗体在制备用于治疗靶疾病的药物中的用途。

13、在以下描述中阐述本发明的一个或多个实施例的细节。本发明的其它特征或优点将根据以下附图和以下对几个实施例的详细描述并且还根据所附权利要求变得显而易见。

1.一种结合唾液酸结合性ig样凝集素15(siglec15)的分离的抗体，其中所述抗体结合至与参考抗体相同的表位或相对于所述参考抗体竞争结合至siglec-15，并且其中所述参考抗体选自由2019ep47-a02、2019ep47-a05、2019ep47-a10、2019ep47-c12、2020ep032-a08、2020ep032-a12、2020ep032-b03、2020ep032-h11、2020ep032-c09、2020ep083-g11、2020ep083-h01和2020ep085-g5组成的群组。

2.根据权利要求1所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：

3.根据权利要求1或权利要求2所述的分离的抗体，其中与所述参考抗体的所述hc cdr相比，所述抗体的所述hc cdr共同地含有不超过8个氨基酸残基变异；和/或其中与所述参考抗体的所述lc cdr相比，所述抗体的所述lc cdr共同地含有不超过8个氨基酸残基变异。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含与所述参考抗体的vh至少85％相同的vh，和/或与所述参考抗体的vl至少85％相同的vl。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体对在细胞表面上表达的siglec15具有小于约50nm的结合亲和力，任选地其中所述结合亲和力小于10nm。

6.根据权利要求5所述的分离的抗体，其中所述抗体对在细胞表面上表达的siglec15具有小于5nm，任选地1.5nm的结合亲和力。

7.根据权利要求1所述的分离的抗体，所述抗体包含与所述参考抗体相同的重链互补决定区(hc cdr)和相同的轻链互补决定区(lc cdr)。

8.根据权利要求7所述的分离的抗体，所述抗体包含与所述参考抗体相同的vh和相同的vl。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体是人抗体或人源化抗体。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体是全长抗体或其抗原结合片段。

11.根据权利要求1至9中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体是单链抗体(scfv)。

12.根据权利要求11所述的分离的抗体，其中所述抗体是包含所述scfv的融合多肽。

13.一种核酸或核酸组，所述核酸或核酸组共同地编码根据权利要求1至12中任一项所述的抗体。

14.根据权利要求13所述的核酸或核酸组，所述核酸或核酸组是载体或载体组。

15.根据权利要求14所述的核酸或核酸组，其中所述载体是表达载体。

16.一种宿主细胞，所述宿主细胞包含根据权利要求13至15中任一项所述的核酸或核酸组。

17.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至12中任一项所述的抗体、根据权利要求13至15中任一项所述的核酸或多种核酸或根据权利要求16所述的宿主细胞以及药学上可接受的载剂。

18.一种用于在受试者中抑制siglec15或siglec15+细胞的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用任何有效量的根据权利要求17所述的药物组合物。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述受试者为具有siglec-15+致病细胞的人类患者。

20.根据权利要求18或权利要求19所述的方法，其中所述受试者为具有siglec15+疾病细胞的人类患者，任选地，其中所述疾病细胞为肿瘤细胞或免疫细胞。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述人类患者患有siglec15+癌症，所述癌症任选地选自由非小细胞肺癌(nsclc)、卵巢癌、乳腺癌、头颈癌、肾癌、胰腺癌、子宫内膜癌、尿路上皮癌、甲状腺癌、结肠癌、结肠直肠癌、黑色素瘤、肝癌和胃癌组成的群组。

22.一种用于检测siglec-15的存在的方法，所述方法包括：

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述抗体与可检测标记缀合。

24.根据权利要求22或权利要求23所述的方法，其中所述siglec-15在细胞表面上表达。

25.根据权利要求22至24中任一项所述的方法，其中所述接触步骤通过向受试者施用所述抗体来进行。

26.一种产生结合至siglec-15的抗体的方法，所述方法包括：