茶尺蠖触角酯酶EoblCXE27基因和该基因的干扰RNA及其应用

本发明属于生物，具体涉及茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因和该基因的干扰rna及其应用。

背景技术：

1、茶尺蠖(ectropis obliqua prout)属鳞翅目(lepidoptera)尺蛾科(geometridae)，是我国茶园的重大鳞翅目害虫，其主要取食茶树叶片进行危害，爆发严重时可将茶树叶片取食待尽，对我国茶叶的安全生产造成严重的危害，导致巨大的经济损失。当前，化学农药仍是茶尺蠖防治的主要利措施，化学农药的使用容易导致茶尺蠖产生抗药性，以及茶叶中农药残留的增加，引发茶叶质量安全问题。

2、联苯菊酯是拟除虫菊酯类农药的一种，具有杀虫广谱、高效击倒的特性，触杀和胃毒作用强大，在茶园防治茶尺蠖上得到广泛使用。目前在茶园防治中，由于联苯菊酯的广泛使用导致茶尺蠖对其敏感性降低，耐药性上升。

3、触角酯酶属于羧酸酯酶carboxylesterases(cxes)α/β水解酶家族，广泛分布于生物体内。cxes在昆虫代谢内源和外源化学物质的过程中具有多种功能，cxes可参与昆虫对包括拟除虫菊酯类农药的解毒过程等。cxes氨基酸序列含有催化三联体ser-his-asp，能够催化酯键的断裂，从而达到降解酯类物质的目的。cxes可以通过螯合来阻断杀虫剂与相关靶基因之间的相互作用，从而介导昆虫对杀虫剂的抗性。

4、rna干扰(rna interference，rnai)是指在进化过程中高度保守的、由双链rna(double-stranded rna，dsrna)诱发的、同源mrna高效特异性降解的现象。小干扰rna(small interfering rna，sirna)是一类双链rna分子，长度为20-25个碱基对，能够有效干扰或抑制目标基因的表达过程。

5、因此，研究茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因及其小干扰rna对绿色防治茶尺蠖具有一定的指导意义。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供一种茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因和该基因的干扰rna及其应用的技术方案。

2、本发明具体采用以下技术方案：

3、本发明第一方面提供了所述的茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因在防治茶尺蠖中的应用。

4、本发明第二方面提供了所述的茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因在调控茶尺蠖对联苯菊酯敏感性中的应用。

5、进一步，所述应用为：利用基因干扰手段干扰所述茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因表达，进而提高茶尺蠖对联苯菊酯敏感性。

6、进一步，所述基因干扰具体采用茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因sirna，所述sirna的正义序列如seq id no.1所示，反义序列如seq id no.2所示。

7、本发明第三方面提供了靶向干扰茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因表达的sirna，所述sirna的正义序列如seq id no.1所示，反义序列如seq id no.2所示。

8、本发明第四方面提供了所述的sirna在防治茶尺蠖中的应用。

9、本发明第五方面提供了所述的sirna在调控茶尺蠖对联苯菊酯敏感性中的应用。

10、本发明第六方面提供了一种提高茶尺蠖对联苯菊酯敏感性的方法，其具体是将茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因sirna导入茶尺蠖体内，降低触角酶基因的表达量，从而提高茶尺蠖对联苯菊酯的敏感性，所述sirna的正义序列如seq id no.1所示，反义序列如seqid no.2所示。

11、本发明利用sirna对茶尺蠖触角酯酶基因进行干扰。结果显示，茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因在幼虫与雌成虫注射sieoblcxe27后均能被成功干扰。相比于对照组，触角酯酶eoblcxe27基因干扰后的茶尺蠖幼虫对联苯菊酯的敏感性显著升高。该发明将有助于研发以触角酯酶eoblcxe27基因为靶向的茶尺蠖绿色防控技术。

技术特征：

1.茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因在防治茶尺蠖中的应用。

2.茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因在调控茶尺蠖对联苯菊酯敏感性中的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述应用为：利用基因干扰手段干扰所述茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因表达，进而提高茶尺蠖对联苯菊酯敏感性。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述基因干扰具体采用茶尺蠖eoblcxe27基因sirna，所述sirna的正义序列如seq id no.1所示，反义序列如seq id no.2所示。

5.靶向干扰茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因表达的sirna，其特征在于所述sirna的正义序列如seq id no.1所示，反义序列如seq id no.2所示。

6.如权利要求5所述的sirna在防治茶尺蠖中的应用。

7.如权利要求5所述的sirna在调控茶尺蠖对联苯菊酯敏感性中的应用。

8.一种提高茶尺蠖对联苯菊酯敏感性的方法，其特征在于将茶尺蠖触角酯酶eoblcxe27基因sirna导入茶尺蠖体内，降低触角酶基因的表达量，从而提高茶尺蠖对联苯菊酯的敏感性，所述sirna的正义序列如seq id no.1所示，反义序列如seq id no.2所示。

技术总结
茶尺蠖触角酯酶EoblCXE27基因和该基因的干扰RNA及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了茶尺蠖触角酯酶EoblCXE27基因的应用以及干扰RNA的应用。结果显示，茶尺蠖触角酯酶EoblCXE27基因在幼虫与雌成虫注射siEoblCXE27后均能被成功干扰。相比于对照组，触角酯酶EoblCXE27基因干扰后的茶尺蠖幼虫对联苯菊酯的敏感性显著升高。该发明将有助于研发以触角酯酶EoblCXE27基因为靶向的茶尺蠖绿色防控技术。

技术研发人员：孙亮,杨奉水,高梦园,夏晴,郭华伟,肖强
受保护的技术使用者：中国农业科学院茶叶研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13