一种白玉花胶肽及其制备方法和应用

：本发明涉及食品发酵技术及生物活性肽制备，具体为一种具有改善皮肤状态功效的白玉花胶肽及其制备方法和应用。

背景技术：

0、技术背景：

1、衰老是机体随着年龄增加而发生不可逆的功能减退，进而发生死亡的自然现象。随着经济社会的高速发展，衰老引起的疾病不断增加。皮肤是人体最大的保护器官，皮肤衰老不仅引起皮肤功能减退，严重的会出现肿瘤，还可能引发一些生理、心理问题，因此对预防和延缓皮肤衰老的研究以及相关产品的开发显得尤为重要。

2、花胶，富含胶质、维生素和矿物质等多种营养成分，是理想的高蛋白低脂肪食品。花胶中的胶原蛋白，又称胶原质，其独特的三螺旋结构对皮肤起到保湿、美白等作用。胶原蛋白肽是胶原蛋白水解后得到的产物，分子量小，易被吸收，能够有效改善皮肤弹性和水分含量，具有抗衰老、抗疲劳和抗氧化等多种功效，在伤口修复、保健品、食品等领域具有广泛应用的价值。

3、花胶肽的制备，大部分是从鱼皮、鱼鳞、鱼鳔等海洋制品提取得到抗氧化肽，以及与其他活性物质组合成美容护肤产品或饮品。目前，胶原蛋白的提取大部分仍采用醋酸、乳酸等化学试剂进行溶胀，以利于后期进行酶解，但在制备过程中使用的化学溶剂，效率较低、容易污染环境，也造成一定的资源浪费。

4、本发明以鲜山药提取物(山药多糖)为微生物生长的营养基质，对乳酸芽孢杆菌、植物乳杆菌等益生菌的生长和代谢具有一定的促进作用；接种乳酸芽孢杆菌du-106、植物乳杆菌nbk-ma2以及巴氏醋杆菌as1.41两种及以上微生物法复配发酵产酸代替乳酸等化学试剂，在多种益生菌和酶的协同作用下，产酸使发酵体系ph降低，促进花胶溶胀，提高胶原蛋白溶出，利于提高胶原蛋白的酶解效率，减少环境污染；同时花胶中加入山药提取物，经复合益生菌发酵作用，达到提高多肽得率和花胶肽的抗氧化能力，提高生物降解率，进而提高花胶肽的营养和使用价值。因此，本发明将提供一种改善皮肤健康的白玉花胶肽，将其作为绿色功能性物质，提高花胶肽在食品和化妆品行业的经济价值，具有广阔的应用前景。

技术实现思路

0、
技术实现要素：

1、本发明的目的在于针对目前存在的问题，提供一种能够改善皮肤状态的白玉花胶肽，主要以干制白玉花胶为原料，经复合菌种发酵结合生物酶解技术，获得分子量小，无色无味的白玉花胶肽，具有抗氧化和保湿护肤功效。

2、本发明提供的技术方案之一，是一种白玉花胶肽的制备方法，以干制白玉花胶为原料，去杂蛋白、脱脂后得到白玉花胶胶原蛋白溶液；加入山药提取物作为培养基质，接入复合益生菌进行发酵得到白玉花胶胶原蛋白发酵液；加入蛋白酶酶解后得到白玉花胶胶原蛋白酶解液；后处理得花胶肽产品。具体地，包括以下步骤：

3、s1、原料的预处理：将干制白玉花胶剪小，研磨粉碎，过60目筛，得到颗粒均一的花胶粉末；

4、s2、去杂蛋白、脱脂：花胶粉末浸泡于naoh溶液中搅拌膨胀，水洗至中性后，添加正丁醇溶剂进行脱脂，所述溶剂添加量按料液比1:30～60添加，在nacl-超声协同作用下，进行脱脂和除去杂蛋白，弃去上清液，得到白玉花胶胶原蛋白液；

5、进一步地，花胶粉末浸泡于0.1mol/l naoh溶液中搅拌膨胀24h；

6、进一步地，搅拌速率：5～150r/min，时间：24h，温度：4～20℃；超声功率：100～500w，处理时间：12～36h，nacl浓度：0.5～2mol/l；

7、优选地，正丁醇脱脂溶剂按料液比1：50添加到花胶中，nacl浓度为1mol/l；

8、s3、山药提取物(山药多糖)：将山药洗净，去皮，按山药:水(1:5，m:v)比例加水，煮沸，3h后过滤，将滤渣进一步捣碎，再将滤液加回进行煮沸提取1h，过滤后将滤液旋蒸浓缩至原液的1/5，按1:1(v:v)的比例加入95％的乙醇，醇沉过夜，离心，弃去上清夜，重复2-3次，真空冷冻干燥，即得到粗山药多糖，将提取的粗多糖按1:3(m:v)的比例加入蒸馏水，混匀，加入粗多糖质量1/4(v:m)的氯仿——正丁醇(5:1)混合液，振摇20min，离心，上清即为无蛋白山药多糖，即山药提取物。

9、s4、发酵：在s2获得的白玉花胶胶原蛋白溶液中，按花胶粉末原料质量添加5～15％的山药提取物(s3制备)，作为微生物生长的营养基质，接种乳酸芽孢杆菌du-106、植物乳杆菌nbk-ma2、巴氏醋酸杆菌as1.41中的两种或三种复合发酵(菌粉浓度为1×1012cfu/g花胶粉末原料)，20～36℃发酵3～6d，静置发酵，得到白玉花胶胶原蛋白发酵液；

10、进一步地，按照活菌数，乳酸芽孢杆菌du-106:植物乳杆菌nbk-ma2:巴氏醋杆菌as1.41的接种比例为1:0.5:0.5～1:2:2；

11、优选地，乳酸芽孢杆菌du-106：植物乳杆菌nbk-ma2：巴氏醋杆菌as1.41＝1:1:1，发酵温度为28℃，发酵天数为5d；

12、优选地，将乳酸芽孢杆菌du-106、植物乳杆菌nbk-ma2、巴氏醋酸杆菌as1.41混合菌粉添加到生理盐水中，活化30min后，接种至发酵基质中；

13、s5、酶解：向s4制备的发酵液中加入花胶原料质量0.5～1.5％的复合蛋白酶，在37～55℃搅拌水解2～4h，最后得到白玉花胶胶原蛋白酶解液；

14、进一步地，所述复合蛋白酶为胃蛋白酶和中性蛋白酶(1:1)；

15、优选地，复合蛋白酶按1％加入；

16、s6、灭酶、脱色脱腥：将酶解液加热至85～100℃，同时，按干花胶原料质量比加入1～3％活性炭，在50～150r/min搅拌10～30min，灭酶、脱色、脱腥同步进行，离心，取上清液；

17、s7、膜过滤、浓缩干燥：步骤s6上清液使用无机纳滤膜过滤，截留分子量为1000da，进一步浓缩后真空冷冻干燥获得花胶肽产品；

18、进一步地，纳滤时间为15～30min；然后在50～55℃下旋蒸浓缩至酶解液体积的30～50％；

19、进一步地，真空冷冻干燥时间20～30h，温度-20～-35℃。

20、本发明提供的技术方案之二，是技术方案之一制备的白玉花胶肽。

21、本发明提供的技术方案之三，是技术方案之二所述白玉花胶肽的应用，特别是在改善皮肤状态中的应用，或者制备改善皮肤状态的化妆品、食品或药品中的应用；所述白玉花胶肽具有良好的抗氧化和保湿护肤功效。

22、本发明的有益效果：

23、1、现有技术大部分采用乳酸、醋酸等化学试剂对花胶进行溶胀，产生资源浪费和环境污染等问题。而本发明基于乳酸芽孢杆菌du-106、植物乳杆菌nbk-ma2和巴氏醋杆菌as1.41三种菌种的复合发酵技术，结合山药提取物(山药多糖)作为菌种的营养来源，能够促进乳酸芽孢杆菌等益生菌的生长，在复合菌种的发酵作用下，产生乳酸、醋酸等代谢产物，有利于发酵体系ph降低，促进花胶的溶胀，从而实现胶原蛋白的充分溶出，有利于后续的胶原蛋白酶解过程，提高花胶肽的产量。与此同时，该发酵过程还能提升花胶肽的抗氧化能力，提高整体的生物降解率。利用乳酸芽孢杆菌du-106、植物乳杆菌nbk-ma2和巴氏醋杆菌as1.41的复合发酵技术，结合山药提取物的应用，本发明可为花胶加工提供一种可持续的、环境友好的方法。

24、2、本技术经接种乳酸芽孢杆菌du-106、植物乳杆菌nbk-ma2、巴氏醋杆菌as1.41的复配菌种发酵得到的花胶肽，具有良好抗氧化和保湿护肤功效，可以用于补充皮肤流失的胶原，修复皮肤损伤，将在高档化妆品、保健食品等与人体健康相关的行业上具有良好的应用前景。