一种稳定表达TRPV4的细胞系及其构建方法与应用

技术特征：

1.一种稳定表达trpv4的细胞系，其特征在于，所述细胞系的保藏编号为cgmccno.45608。

2.一种重组慢病毒载体，其特征在于，所述重组慢病毒载体包括trpv4基因的表达盒。

3.根据权利要求2所述的重组慢病毒载体，其特征在于，所述重组慢病毒载体选自pslenti、plenti、pclenti、plvx中的至少之一。

4.根据权利要求3所述的重组慢病毒载体，其特征在于，所述重组慢病毒载体为pslenti-sfh-egfp-p2a-puro-cmv-trpv4-3xflag-wpre载体。

5.一种重组慢病毒载体系统，其特征在于，所述重组慢病毒载体系统包括权利要求2-4中任一项所述的重组慢病毒载体和慢病毒包装载体、慢病毒包膜蛋白表达载体。

6.一种构建稳定表达trpv4的细胞系的方法，其特征在于，所述方法包括：

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述受体细胞包括源自灵长目细胞、鼠源细胞中的任意一种；

8.权利要求1所述的稳定表达trpv4的细胞系、权利要求2-4中任一项所述的重组慢病毒载体、权利要求5所述的重组慢病毒载体系统在开发和筛选trpv4干预药物、探索trpv4功能中的用途。

9.一种trpv4激动剂的筛选方法，其特征在于，所述方法包括：

10.一种trpv4抑制剂或拮抗剂的筛选方法，其特征在于，所述方法包括：

技术总结
本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种稳定表达TRPV4的细胞系及其构建方法与应用，所述方法包括步骤：预先制备重组质粒pSLenti‑SFH‑EGFP‑P2A‑Puro‑CMV‑Trpv4‑3xFLAG‑WPRE；将所述重组质粒感染HEK293T细胞，培养预定时间后获得含TRPV4的慢病毒颗粒；将所述慢病毒颗粒感染HEK293T细胞，采用含有嘌呤霉素的培养基对慢病毒感染的HEK293T细胞进行抗性筛选，获得稳定表达TRPV4的细胞系。本发明构建的细胞系可用于探索TRPV4的分子功能及特性，为揭示TRPV4在体内的生理功能，并针对其特性开展基础、应用和药物研究提供了研究工具和平台。

技术研发人员：智维佳,王丽峰,胡向军,林仲武,马丽贞,邹勇,李颖
受保护的技术使用者：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/22