一种牡蛎活性肽制备方法及用该方法制备的牡蛎活性肽产品与流程

本发明涉及属于生物信息学和食品生物，具体涉及一种牡蛎活性肽制备方法及用该方法制备的牡蛎活性肽产品。

背景技术：

1、牡蛎是一种富含优质蛋白质、微量元素和多种生物活性物质的水产品，具有很高的营养价值和药用价值。牡蛎蛋白质中含有多种氨基酸，其中一些氨基酸可以形成具有抗氧化、抗肿瘤、抗菌、降血压、降血糖、免疫调节等生物活性的小分子肽段，具有良好的溶解性、稳定性和生物利用率，即活性肽。

2、目前，制备活性肽的主要方法是利用酶法水解动植物蛋白质，得到不同长度和组成的肽段，然后通过分离纯化和生物活性检测，筛选出具有目标活性的肽段。这种方法的优点是可以模拟人体消化过程，产生与人体相容性高的活性肽。但是，这种方法也存在一些缺点，如酶解过程难以控制，产物复杂多样，分离纯化成本高，筛选效率低等，难以筛选出具有目标生物活性的活性肽。

3、为了提高活性肽的制备效率和质量，一些研究者尝试利用计算机模拟酶解和生物信息学方法来指导活性肽的制备过程。计算机模拟酶解是一种利用计算机软件模拟不同酶对蛋白质进行水解的过程，可以预测出不同酶组合情况下进行复合水解后的产物（肽段）。生物信息学方法是一种利用数据库和算法对肽段进行结构和功能的分析和预测，可以筛选出具有特定特征和活性的肽段。这些方法可以节省实验时间和成本，并提高活性肽的筛选效率。

4、然而，现有的计算机模拟酶解和生物信息学方法仍然存在一些不足之处。例如，计算机模拟酶解不能完全反映实际酶解过程中可能发生的变化和影响因素，如温度、ph、盐度、抑制剂等；同时模拟酶解所得产物存在生物利用度较低以及体内活性不理想等问题。因此，仅仅依靠计算机模拟酶解和生物信息学方法来指导活性肽的制备还不够可靠和有效。

5、本发明提出了一种牡蛎活性肽制备方法及用该方法制备的牡蛎活性肽产品。里宾斯基五规则（lipinski’s rule of five）是一种用于评估药物候选分子的口服吸收性和生物利用率的经验规则，其原理是根据分子量、氢键供体数、氢键受体数、极性表面积和对数分配系数等五个参数来判断一个分子是否具有良好的生物活性特征。本发明将这一规则应用于活性肽的筛选过程，以提高活性肽的生物利用度和稳定性。本发明还结合了计算机模拟酶解和生物活性预测的方法，以提高活性肽的制备效率和质量。

技术实现思路

1、为解决上述背景技术中提出的问题，进一步优化活性肽的制备过程。本发明提供了一种充分结合生物信息学和食品生物技术，通过对每个肽段进行里宾斯基五规则的评估和生物活性预测，根据模拟结果选择最优的酶种类和酶解条件，并指导实际的酶解工艺，提高牡蛎活性肽的制备效率和质量，经济、高效地制备具有目标活性的牡蛎肽产品。

2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、作为本发明的第一部分，一种牡蛎活性肽制备方法，包括以下步骤：

4、s1、基于牡蛎的蛋白质序列，利用计算机模拟酶解，计算不同酶组合情况下进行复合水解后的肽段产物；

5、s2、对所述肽段进行里宾斯基五规则的评估筛选，并对筛选出的肽段进行目标活性预测，根据所述预测结果选定酶种类和酶解条件；

6、s3、对牡蛎肉按照步骤s2中选定的酶种类和酶解条件进行酶解，得到牡蛎酶解产物；

7、s4、验证所述牡蛎酶解产物的目标功效。

8、作为本技术方案的进一步阐述：

9、优选地，步骤s4中的所述目标功效包括抗氧化、抗菌、降血压、降血糖和免疫调节。

10、优选地，步骤s2中里宾斯基五规则的评估条件包括：0.3 kda≤分子量≤1.5 kda，氢键供体数≤5，氢键受体数≤10，极性表面积≤140 å²，-1≤对数分配系数logp≤5。

11、优选地，利用biopep-uwm数据库对所述经过里宾斯基五规则评估、筛选出的肽段进行目标活性预测，根据所述预测结果，以产生最多种类和数量的具有所述目标功效的多肽为目的，确定酶种类和酶解条件。

12、优选地，利用biopep-uwm数据库对所述经过里宾斯基五规则评估筛选出的肽段进行ace抑制活性预测，确定所述酶种类和酶解条件为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶以及胰蛋白酶。

13、优选地，所述胃蛋白酶的酶解条件为：温度37摄氏度，ph 1.3；所述木瓜蛋白酶的酶解条件为：温度为25摄氏度，ph 6.2；所述胰蛋白酶的酶解条件为：温度为37摄氏度，ph8.5。

14、作为本发明的第二部分，一种牡蛎活性肽产品，由牡蛎肉酶解制备而成，制备过程按照所述的牡蛎活性肽制备方法进行。

15、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

16、其一、本发明利用计算机模拟酶解，通过计算不同酶组合情况下进行复合水解后的产物，以节省实验时间和成本；结合里宾斯基五规则，对每个肽段进行评估，筛选出符合特定条件的肽段，从而提高了活性肽的生物利用度；利用biopep-uwm数据库进行生物活性预测，选择具有目标活性的多肽，为制备功能性食品或药物提供了有力支持。

17、其二、本发明利用里宾斯基五规则和计算机模拟酶解的方法可以有效地指导牡蛎活性肽的制备，提高了活性肽的筛选效率和生物活性水平，为开发新型牡蛎功能食品或药物提供了一种新的思路和技术手段，可以更加高效地制备具有多种生物活性的牡蛎活性肽，满足市场对功能性食品和药物的需求，在牡蛎活性肽领域具有广泛的应用前景和商业价值。

技术特征：

1.一种牡蛎活性肽制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的牡蛎活性肽制备方法，其特征在于：步骤s4中的所述目标功效包括抗氧化、抗菌、降血压、降血糖和免疫调节。

3.根据权利要求2所述的牡蛎活性肽制备方法，其特征在于：步骤s2中里宾斯基五规则的评估条件包括：0.3 kda≤分子量≤1.5 kda，氢键供体数≤5，氢键受体数≤10，极性表面积≤140 å²，-1≤对数分配系数logp≤5。

4.根据权利要求3所述的牡蛎活性肽制备方法，其特征在于：利用biopep-uwm数据库对所述经过里宾斯基五规则评估、筛选出的肽段进行目标活性预测，根据所述预测结果，以产生最多种类和数量的具有所述目标功效的多肽为目的，确定酶种类和酶解条件。

5.根据权利要求4所述的牡蛎活性肽制备方法，其特征在于：利用biopep-uwm数据库对所述经过里宾斯基五规则评估筛选出的肽段进行ace抑制活性预测，确定所述酶种类和酶解条件为胃蛋白酶、木瓜蛋白酶以及胰蛋白酶。

6.根据权利要求5所述的牡蛎活性肽制备方法，其特征在于：所述胃蛋白酶的酶解条件为：温度37摄氏度，ph 1.3；所述木瓜蛋白酶的酶解条件为：温度为25摄氏度，ph 6.2；所述胰蛋白酶的酶解条件为：温度为37摄氏度，ph 8.5。

7.一种牡蛎活性肽产品，由牡蛎肉酶解制备而成，其特征在于：所述制备过程按照如权利要求1～6任一项所述的牡蛎活性肽制备方法进行。

技术总结
本发明公开一种牡蛎活性肽制备方法，包括以下步骤：S1、基于牡蛎的蛋白质序列，利用计算机模拟酶解，计算不同酶组合情况下进行复合水解后的肽段产物；S2、对所述肽段进行里宾斯基五规则的评估筛选，并对筛选出的肽段进行目标活性预测，根据所述预测结果选定酶种类和酶解条件；S3、对牡蛎肉按照步骤S2中选定的酶种类和酶解条件进行酶解，得到牡蛎酶解产物；S4、验证所述牡蛎酶解产物的目标功效；本发明还公开一种牡蛎活性肽产品，由牡蛎肉酶解制备而成，制备过程按照所述的牡蛎活性肽制备方法进行。本发明根据模拟结果选择最优的酶种类和酶解条件，并指导实际的酶解工艺，提高牡蛎活性肽的制备效率和质量。

技术研发人员：龚聪聪,赵勇,卜明灯,黄凯,黄浩,梁锦益
受保护的技术使用者：广州康兮乐健康科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15