1.一种木聚糖酶突变体xyn10的制备方法,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述方法步骤(a)中,培养可分两个阶段,第一阶段主要用于菌体(或细胞)的生长,第二阶段主要用于诱导表达目标产物。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述方法步骤(b)中,回收所述木聚糖酶突变体xyn10的方法包括盐析、沉淀、超滤、液相层析等技术及这些技术的组合,其中液相层析可以用凝胶排阻、亲和、离子交换、疏水、反相等层析技术。
4.一种木聚糖酶突变体xyn10的制备方法,包括如下步骤:
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述方法步骤(a)中,所述的载体选自pet系列载体、pqe系列载体、ppic系列载体或pgapz系列载体。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述方法步骤(a)中,酵母宿主细胞选自毕赤酵母、酿酒酵母或汉森酵母。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述方法步骤(a)中,编码所述木聚糖酶突变体xyn10的基因的核苷酸序列如seq id no:2所示,所述的载体为酵母表达载体ppic9h上,所述的酵母菌为gs115。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述方法步骤(c)中,所述的his亲和层析柱纯化过程为:先用含10-40mmol/l咪唑,100-400mmol/l nacl,10-40mmol/l tris,ph为7.3-9.0的wash buffer清洗层析柱,洗至层析树脂不带培养基颜色,最后用250-450mmol/l咪唑,100-400mmol/l nacl,10-40mmol/l tris,ph为7.3-9.0为的buffer进行洗脱,得到目标蛋白木聚糖酶突变体xyn10。
9.根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于:所述方法步骤(c)中,所述的his亲和层析柱纯化过程为:先用含25-35mmol/l咪唑,150-350mmol/l nacl,25-35mmol/l tris,ph为8.0-9.0的wash buffer清洗层析柱,洗至层析树脂不带培养基颜色,最后用250-350mmol/l咪唑,150-350mmol/l nacl,25-35mmol/l tris,ph为8.0-9.0为的buffer进行洗脱,得到目标蛋白木聚糖酶突变体xyn10。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于:所述方法步骤(c)中,所述的his亲和层析柱纯化过程为:先用含30mmol/l咪唑,300mmol/lnacl,30mmol/l tris,ph为8.5为的wash buffer清洗层析柱,洗至层析树脂不带培养基颜色,最后用300mmol/l咪唑,300mmol/lnacl,30mmol/l tris,ph为8.5为的buffer进行洗脱,得到目标蛋白木聚糖酶突变体xyn10。