本发明属于基因工程,具体涉及红树植物白骨壤内源启动子amgt1p5及其应用。
背景技术:
1、白骨壤(avicennia marina(forsk.)vierh.)是马鞭草科(verbenaceae)海榄雌属(aricennia)的一种红树林先锋种,在我国分布十分广泛。在红树植物中,白骨壤是耐盐碱、耐水淹、耐贫瘠、抗风浪、抗低温的物种。一般陆生植物的细胞内渗透压范围为5-10个大气压,而白骨壤最高可达62个大气压。白骨壤主干四周长有细棒状的出水呼吸根,帮助其进行气体交换,其叶肉内有泌盐细胞,能把叶内的多余的盐分排出叶面,保证了植株能从沼泽性盐渍土中吸取足够的水分和养分,这让它成为耐水淹和耐盐能力最强的红树植物之一,可生长于60‰盐度的海滩,高者甚至可达90‰。
2、目前红树类植物耐盐机制虽然有大量研究成果,但仍不十分透彻,一些方面仍然存在争议和未知。我国地域辽阔,海岸线绵长。不仅有大量的滨海盐碱地,还有内陆盐碱地。其中只有少部分改良利用,绝大部分仍未脱盐及不断遭受盐渍危害。在影响农作物产量的各种因素中,干旱和盐碱所造成的减产达40%。如水稻是对盐碱中度敏感的作物。研究红树植物的耐盐机制,利用耐盐基因和耐盐相关启动子培育转基因耐盐植物,对开发利用盐碱地,提高粮食产量,具有十分重要的意义。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供红树植物白骨壤内源启动子amgt1p5及其应用,以解决上述现有技术存在的问题,该启动子含有已报道的盐诱导顺式作用元件gt1-motif(ggttaa),可以为后续红树植物耐盐机制研究提供新的借鉴,也能够调控转基因植物中外源基因的表达,本发明为转基因植物的外源基因表达提供了新的工具和选择,具有十分重要的意义。
2、本发明提供了如下方案:
3、本发明提供一种红树植物白骨壤的内源启动子amgt1p5,所述内源启动子amgt1p5的核苷酸序列如seq id no.1所示。
4、本发明还提供上述的内源启动子amgt1p5在制备表达外源基因的重组载体中的应用。
5、本发明还提供一种表达外源基因的重组载体,包括上述的内源启动子amgt1p5。
6、本发明还提供一种表达外源基因的宿主细胞,包括上述的重组载体。
7、进一步地,所述宿主细胞为大肠杆菌宿主细胞。
8、本发明还提供上述的内源启动子amgt1p5、重组载体或宿主细胞在构建转基因植物中的应用,所述内源启动子amgt1p5在所述转基因植物中驱动外源基因的表达。
9、进一步地,所述植物为双子叶植物或单子叶植物。
10、进一步地,所述双子叶植物包括烟草;所述单子叶植物包括洋葱。
11、本发明还提供一种在转基因植物中驱动外源基因表达的方法,包括利用含有上述内源启动子amgt1p5的生物材料,构建得到转基因植物,利用所述内源启动子amgt1p5驱动所述外源基因表达的步骤。
12、进一步地,所述生物材料为上述的重组载体或宿主细胞。
13、本发明公开了以下技术效果:
14、本发明基于红树植物白骨壤的优良耐盐性能,开发了一种白骨壤来源的启动子amgt1p5(核苷酸序列如seq id no.1所示),该启动子amgt1p5能够调控转基因植物(包括双子叶植物和单子叶植物)中外源基因的表达。本发明为转基因植物的外源基因表达提供了新的工具和选择,具有十分重要的意义。
1.一种红树植物白骨壤的内源启动子amgt1p5,其特征在于,所述内源启动子amgt1p5的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.一种如权利要求1所述的内源启动子amgt1p5在制备表达外源基因的重组载体中的应用。
3.一种表达外源基因的重组载体,其特征在于,包括权利要求1所述的内源启动子amgt1p5。
4.一种表达外源基因的宿主细胞,其特征在于,包括权利要求3所述的重组载体。
5.根据权利要求4所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌宿主细胞。
6.一种如权利要求1所述的内源启动子amgt1p5、权利要求3所述的重组载体或权利要求4或5所述的宿主细胞在构建转基因植物中的应用,其特征在于,所述启动子amgt1p5在所述转基因植物中驱动外源基因的表达。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述植物为双子叶植物或单子叶植物。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述双子叶植物包括烟草;所述单子叶植物包括洋葱。
9.一种在转基因植物中驱动外源基因表达的方法,其特征在于,包括利用含有权利要求1所述的内源启动子amgt1p5的生物材料,构建得到转基因植物,利用所述内源启动子amgt1p5驱动所述外源基因表达的步骤。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述生物材料为权利要求3所述的重组载体或权利要求4或5所述的宿主细胞。