专利名称:一种用固定化酶辅助萃取大豆油的方法
技术领域：
本发明涉及食用油脂加工领域的一种用固定化酶辅助萃取大豆油的方法。
背景技术：
目前从油料种子中提油方法主要有压榨法和溶剂浸出法，这些方法虽出油率高，但在压榨或浸出前大多数油料需进行蒸炒或烘烤热处理，不但设备复杂，
溶剂萃取时间长，料液比增大，造成能源的浪费，随着国际上对营养与环境保护的追求及特种油脂热的兴起，其他制油方法也得到了广泛的发展。
公开号CN200910157273. 6的发明专利公开了一种大豆油脂的提取方法，该方法 是用挤压膨化预处理与生物酶相结合的方法分离大豆油脂，分离得到的乳化油经破乳后无需精炼即可获得高质量的油，但此方法酶制剂的价格高，不易重复利用，同时要大量的热量去除料液中的水分。
本发明采用固定化酶法破坏蛋白质和油脂的结合力，酶制剂得到重复利用，然后再采用溶剂萃取提取大豆油脂，萃取时间缩短，从而减少了工业生产的成本。
发明内容
为了减少工业生产的成本，本发明提供了一种具有工艺简单，操作安全、污染少、投资少，固定化酶可以重复使用，且萃取时间短的一种适合大规模生产的固定化酶辅助萃取大豆油的方法。
本发明解决技术问题所采用的技术方案是一种用固定化酶辅助萃取大豆油的方法，其工艺步骤如下
第一步是复合膜的制备将15g醋酸纤维素在60°C温度下，溶于85g 二甲基甲酰胺中得到铸膜液，将醋酸纤维素铸膜液用刮刀涂在聚四氟乙烯膜的表面，干燥后形成醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜；
第二步是酶的固定化把醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜置于三角瓶中，加入浓度为
O.0Γ0. 06g/mL醋酸纤维素酶液和10(T200ml的Na2HPO4 /柠檬酸缓冲液，吸附时间2 3h，反应温度5(T60°C，搅拌速度16(T200r/min，反应结束后取出酶膜缠绕在圆柱体的表面上制得固定化纤维素酶柱；重复上述过程把醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜置于三角瓶中，力口入浓度为O. 05、. 07g/ml碱性蛋白酶液和10(T200ml的硼砂/硼酸缓冲液，吸附时间2 3h，反应温度4(T50°C，搅拌速度20(T260r/min，反应结束后取出酶膜缠绕在圆柱体的表面上制得固定化蛋白酶柱；
第三步是固定化纤维素酶柱酶解条件的确定，在真空条件下，通入65°C直接蒸汽相对湿度控制在70%-80%来调节胚片的水分，先利用固定化纤维素酶柱连续碾压胚片，在3(T70°C的条件下酶解f6h，然后再利用固定化蛋白酶柱连续碾压胚片，结束后取出料胚进行溶剂浸出；
第四步是固定化蛋白酶柱酶解条件度的确定，在真空条件下，通入65°C直接蒸汽相对湿度控制在70%-80%来调节胚片的水分，先利用固定化纤维素酶柱进行酶解，然后再利用固定化蛋白酶柱连续碾压胚片，在4(T80°C的条件下酶解f6h，酶解结束后，取出料胚进行溶剂浸出；
第五步是浸出时间的确定，取出大豆胚片用有机溶剂乙醚进行溶剂浸出，浸出时间为2(T60min，残油达到O. 5%。
本发明的有益点是
本发明与传统的提油工艺不同，通过调节蒸汽来调节料胚中水分的含量，用固定化酶柱和料胚动态接触从而达到固态酶解的目的，以减少了植物细胞壁与蛋白质及油脂之间相互作用力，再利用溶剂进行萃取，从而在短时间就可内完成萃取过程。同时固定化酶柱可连续作用料胚24h以上，酶活力仍保持80%。 具体实施方式
具体实施方式
一本实施方式的步骤如下
步骤一复合膜的制备将15g醋酸纤维素在60°C温度下，溶于85g 二甲基甲酰胺中得到铸膜液，将醋酸纤维素铸膜液用刮刀涂在聚四氟乙烯膜的表面，干燥后形成醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜；
步骤二 酶的固定化把醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜置于三角瓶中，加入浓度为
O.oro. 06g/mL醋酸纤维素酶液和10(T200ml的Na2HPO4 /柠檬酸缓冲液，吸附时间2 3h，反应温度5(T60°C，搅拌速度16(T200r/min，反应结束后取出酶膜缠绕在圆柱体的表面上制得固定化纤维素酶柱；重复上述过程把醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜置于三角瓶中，力口入浓度为O. 05、. 07g/ml碱性蛋白酶液和10(T200ml的硼砂/硼酸缓冲液，吸附时间2 3h，反应温度4(T50°C，搅拌速度20(T260r/min，反应结束后取出酶膜缠绕在圆柱体的表面上制得固定化蛋白酶柱；
步骤三固定化纤维素酶柱酶解条件的确定，在真空条件下，通入65°C直接蒸汽相对湿度控制在70%-80%来调节胚片的水分，先利用固定化纤维素酶柱连续碾压胚片，在3(T70°C的条件下酶解f6h，然后再利用固定化蛋白酶柱连续碾压胚片，结束后取出料胚进行溶剂浸出；
步骤四固定化蛋白酶柱酶解条件度的确定，在真空条件下，通入65°C直接蒸汽相对湿度控制在70%-80%来调节胚片的水分，先利用固定化纤维素酶柱进行酶解，然后再利用固定化蛋白酶柱连续碾压胚片，在4(T80°C的条件下酶解f6h，酶解结束后，取出料胚进行溶剂浸出；
步骤五浸出时间的确定，取出大豆胚片用有机溶剂乙醚进行溶剂浸出，浸出时间为2(T60min，残油达到O. 5%。
具体实施方法二 本实施方法与具体实施方法一不同点在于步骤三中固定化纤维素酶柱碾压大豆胚片的温度为40-60°C，碾压时间为f3h，其它组成和步骤与具体实施方法一相同。
具体实施方法三本实施方法与具体实施方法一不同点在于步骤四中固定化蛋白酶柱碾压胚片的温度为5(T70°C，碾压时间为f3h，其它组成和步骤与具体实施方法一相同。
具体实施方法四本实施方法与具体实施方法一不同点在于步骤五中选用的浸出时间为3(T50min，其它组成和步骤与具体实施方法一相同。
权利要求
1.一种用固定化酶法提取大豆油的方法，其特征在于该方法包括以下步骤 步骤一复合膜的制备将15g醋酸纤维素在60°C温度下，溶于85g 二甲基甲酰胺中得到铸膜液，将醋酸纤维素铸膜液用刮刀涂在聚四氟乙烯膜的表面，干燥后形成醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜； 步骤二 酶的固定化把醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜置于三角瓶中，加入浓度为O.oro. 06g/mL醋酸纤维素酶液和10(T200ml的Na2HPO4 /柠檬酸缓冲液，吸附时间2 3h，反应温度5(T60°C，搅拌速度16(T200r/min，反应结束后取出酶膜缠绕在圆柱体的表面上制得固定化纤维素酶柱；重复上述过程把醋酸纤维素/聚四氟乙烯复合膜置于三角瓶中，力口入浓度为O. 05、. 07g/ml碱性蛋白酶液和10(T200ml的硼砂/硼酸缓冲液，吸附时间2 3h，反应温度4(T50°C，搅拌速度20(T260r/min，反应结束后取出酶膜缠绕在圆柱体的表面上制得固定化蛋白酶柱； 步骤三固定化纤维素酶柱酶解条件的确定，在真空条件下，通入65°C直接蒸汽相对湿度控制在70%-80%来调节胚片的水分，先利用固定化纤维素酶柱连续碾压胚片，在3(T70°C的条件下酶解f 6h，然后再利用固定化蛋白酶柱连续碾压胚片，结束后取出料胚进行溶剂浸出； 步骤四固定化蛋白酶柱酶解条件度的确定，在真空条件下，通入65°C直接蒸汽相对湿度控制在70%-80%来调节胚片的水分，先利用固定化纤维素酶柱进行酶解，然后再利用固定化蛋白酶柱连续碾压胚片，在4(T80°C的条件下酶解f6h，酶解结束后，取出料胚进行溶剂浸出；
步骤五浸出时间的确定，取出大豆胚片用有机溶剂乙醚进行溶剂浸出，浸出时间为2(T60min，残油达到O. 5%。
2.按照权利要求
I所述的提取方法，其特征在于步骤(3)中所述的酶解的优选参数是加入固定化纤维素酶柱，酶解温度45飞5°C，酶解时间2 3h。
3.按照权利要求
I所述的提取方法，其特征在于步骤(4)中所述的酶解的优选参数是加入固定化蛋白酶柱，酶解温度55飞5°C，酶解时间2 3h。
4.按照权利要求
I所述的提取方法，其特征在于步骤(5)中所述的浸出时间为30 40mino
专利摘要
本发明与传统的提油工艺不同，通过调节空气中的相对湿度来调节料坯中水分的含量，用固定化酶柱和料坯动态接触从而达到固态酶解的目的，以减少了植物细胞壁与蛋白质及油脂之间相互作用力，利用溶剂进行萃取，仅用35min完成萃取过程，残油达到0.5%，同时固定化酶柱可连续作用料坯24h以上，酶活力仍保持80%。酶解结束后的坯片，这将很大程度的降低了工业化生产的成本，与传统的提油相比具有工艺简单，操作安全、污染少、投资少等优点。
文档编号C12N11/12GKCN102816639SQ201210331581
公开日2012年12月12日 申请日期2012年9月10日
发明者于殿宇, 王立琦, 张立国, 江连洲, 时敏, 张春艳, 李万振, 宋鹏, 刘鑫, 王玥, 邹小雨, 宋云花 申请人:东北农业大学导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan