点阵激光杀菌实验方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医学领域，具体而言，涉及一种0)2点阵激光杀菌实验方法。
【背景技术】
[0002] 0)2激光最早于1963年由Kumar Patel发明，于20世纪70年代得到迅猛发展，主 要用于皮肤巧、皮肤附属器肿瘤等皮肤损坏，至20世纪80年代，CA激光被用于治疗光老 化。20世纪90年代后，超短脉冲CA和连续波CA激光的发展大大提高了该激光的有效性 和安全性，通过快速照射使组织汽化焦化面积减小，减轻热损伤、减少并发症。
[000引随着2003年点阵激光技术的发展，C02点阵激光问世。C02点阵激光属于剥脱性点 阵激光，在照射皮肤表面产生表皮汽化剥脱的微热区，区域间的皮肤保持完好，刺激周围胶 原再生，W利于更快的皮肤修复。目前0)2激光主要用于除皱、巧疲、瘦疮疲痕等，但利用CA 激光杀菌鲜有报道。本实验的目的在于通过初步体外试验，探究(A点阵激光杀菌效果，W 期提供更广泛的临床应用前景。
【发明内容】
[0004] 本发明提供一种0)2点阵激光杀菌实验方法，用W通过0)2点阵激光实现杀菌效 果。
[0005] 为达到上述目的，本发明提供了一种CA点阵激光杀菌实验方法，包括W下步骤：
[0006] 对第一菌种和第二菌种分别进行无菌操作，接种于固体培养基中，并置于37C的 细菌培养箱中培养2化；
[0007] 从固体培养基中提取第一菌种的单个菌落接种于5ml的第一液体培养基中，从固 体培养基中提取第二菌种的单个菌落接种于5ml的第二液体培养基中，并分别置于37C、 转速为21化/min的恒温摇床培养1她；
[0008] 从第一液体培养基取2. 5ml培养液加入10ml的第H液体培养基中，从第二液体培 养基取2. 5ml培养液加入10ml的第四液体培养基中，并分别置于37C、转速为21化/min的 恒温摇床抬养1她；
[0009] 根据比浊法，通过与麦氏比浊管比浊，将第H液体培养基和第四液体培养基的菌 液分别制备成H种浓度的菌液；
[0010] 通过移液枪分别取每一菌种每一浓度的菌液0. 5ml均匀涂布于培养皿，其中每一 菌种每一浓度的菌液分别各涂4个培养皿，每一菌种每一浓度的菌液对应的4个培养皿中 的3个作为平衡样本，分别对应一种照射能量强度的激光，其余1个作为对照样本，并分别 自然风干；
[0011] 利用CA点阵激光对涂布细菌的培养皿中也进行照射，其中每一种菌H种浓度对 应的3个培养皿分别采用照射能量强度为3J、8J、12J的C〇2点阵激光单独照射1ms，其中 C〇2点阵激光的点阵密度2mm，照射面积为2cmX 2cm ;
[0012] 将每一菌种每一浓度的菌液对应的照射后的3个培养皿及作为对照的培养皿置 于37°C的细菌培养箱中培养24h ;
[0013] 于照射后第1天至第7天连续观察放置于37C的细菌培养箱中的、被激光照射后 的3个培养皿及作为对照的培养皿上有无菌落生长，如有菌落生长，则计数细菌W菌落形 成单位（C即，Colony-Forming Units)表示。
[0014] 可选的，第一菌种为大肠杆菌，第二菌种为葡萄球菌。
[001引 可选的，H种浓度为l0Vml、l07ml、l07ml。
[0016] 可选的，〔化点阵激光的波长为10600皿。
[0017] 可选的，C〇2点阵激光通过W下方式获得；控制器控制二氧化碳激光器输出激光光 束至扫描器，在控制器对扫描器的控制下形成点阵分布的光束，并经聚焦镜片聚焦后形成 光束更细的激光光束，得到Ch点阵激光，同时控制器对0)2点阵激光的密度、强度和单点激 光束的能量进行监控，并与对应的设定值进行比较，根据比较结果控制激光能量衰减动态 平衡补偿器实现对0)2点阵激光的自动调节并保持稳定的激光能量输出。
【附图说明】
[0018] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本 发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可W 根据该些附图获得其他的附图。
[0019] 图1为本发明一个实施例的c〇2点阵激光杀菌实验方法流程图。
【具体实施方式】
[0020] 下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完 整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于 本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动前提下所获得的所有其他 实施例，都属于本发明保护的范围。
[002。 图1为本发明一个实施例的C02点阵激光杀菌实验方法流程图。如图所示，C02点 阵激光杀菌实验方法包括W下步骤：
[0022] S110,对第一菌种和第二菌种分别进行无菌操作，接种于固体培养基中，并置于 37C的细菌培养箱中培养24h ;
[0023] 例如，第一菌种可W为大肠杆菌，第二菌种可W为葡萄球菌。
[0024] S120,从固体培养基中提取第一菌种的单个菌落接种于5ml的第一液体培养基 中，从固体培养基中提取第二菌种的单个菌落接种于5ml的第二液体培养基中，并分别置 于37C、转速为21化/min的恒温摇床培养1她；
[00巧]S130,从第一液体培养基取2. 5ml培养液加入10ml的第H液体培养基中，从第 二液体培养基取2. 5ml培养液加入10ml的第四液体培养基中，并分别置于37C、转速为 21化/min的恒温摇床培养1她；
[0026] S140,根据比浊法，通过与麦氏比浊管比浊，将第H液体培养基和第四液体培养基 的菌液分别制备成H种浓度的菌液；
[0027] 例如，H种浓度为 l〇Vml、l〇7ml、l〇7ml。
[002引 S150,通过移液枪分别取每一菌种每一浓度的菌液0. 5ml均匀涂布于培养皿，其 中每一菌种每一浓度的菌液分别各涂4个培养皿，每一菌种每一浓度的菌液对应的4个培 养皿中的3个作为平衡样本，分别对应一种照射能量强度的激光，其余1个作为对照样本， 并分别自然风干；
[0029] S160,利用0)2点阵激光对涂布细菌的培养皿中也进行照射，其中每一种菌H种浓 度对应的3个培养皿分别采用照射能量强度为3J、8J、12J的CA点阵激光单独照射1ms，其 中C〇2点阵激光的点阵密度2mm，照射面积为2cmX 2cm ;
[0030] 其中，CA点阵激光的波长为10600皿。
[0031] 例如，CA点阵激光通过W下方式获得；控制器控制二氧化碳激光器输出激光光束 至扫描器，在控制器对扫描器的控制下形成点阵分布的光束，并经聚焦镜片聚焦后形成光 束更细的激光光束，