Rrm2b基因或其蛋白在肝癌转移中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及肿瘤诊疗领域。具体地，本发明涉及RRM2B基因或其蛋白在肝癌转移 诊断和治疗中的应用。
【背景技术】
[0002] 原发性肝癌是一种严重危害人类健康的恶性肿瘤，而包括中国在内的东亚地区是 肝癌的高发区，由于其恶性程度高、预后不良，在中国原发性肝癌已经成为第二位致死性肿 瘤。其中肝细胞癌化巧atocellular carcinoma,肥C)占原发性肝癌的90%W上。研究表 明肝癌的发生与病毒性肝炎及摄入黄曲霉素污染的食物等等有密切关系，其发生发展与癌 基因异常表达及抑癌基因失活密切相关。肥C发生发展的分子机制十分复杂，目前尚不完全 清楚。因此，进一步探索研究新的基因功能改变与肝癌发生发展及其恶性特征的关系，对掲 示其发生发展的精确分子机制、设计合理的治疗方案及判断预后，进一步提高肝癌的治疗 水平具有重要意义。
[0003] 核巧酸是DNA和RNA的构件分子，核巧酸生物合成的奈乱广泛影响正常细胞的生 理功能，最终导致正常细胞的恶性转化，由于肿瘤细胞具有无限增殖的能力，机体必须为其 需要提供更多的核巧酸。因此核巧酸代谢在肿瘤的发生和发展中发挥非常重要的作用。研 究表明有一系列关键的酶调节核巧酸的合成和修饰，其中核糖核巧酸还原酶（RR)就是其 中的一个。
[0004] 在人体中RR由有H个亚基构成，一个大亚基（RRM1)和两个小亚基（RRM2和 RRM2B)构成。每个亚基所起的作用各不相同，如RRM1被广泛认同为抑癌基因，RRM2和RRM2B 则被认为通过p53的调节影响DNA修复。然而，关于该两个亚基的具体功能和作用机制的 研究颇有争议，尤其是RRM2B，目前尚未明确该基因的作用机制W及在癌症中起到的具体作 用。
[0005] 因此，本领域迫切需要进行对肿瘤相关基因的研究，尤其是在中国发病率很高的 肝癌的相关基因，并阐明该些基因与肝癌的发生、发展的关系，并且为肝癌的诊断和治疗提 供新的思路。
【发明内容】
[0006] 本发明提供了一种诊断肝癌转移的标志物RRM2B，W及RRM2B在治疗肝癌转移中 的应用。
[0007] 本发明第一方面，提供了 一种核糖核巧酸还原酶亚基 M2lURibonucleoside-di地OS地ate reductase subunit M2B，RRM2B)基因或其蛋白检测试 剂的用途，用于制备诊断肝癌细胞转移的试剂盒。
[0008] 在另一优选例中，所述的转移包括肝内转移和肝外转移。
[0009] 在另一优选例中，所述的肝外转移包括肺转移、骨转移、或脑转移。
[0010] 在另一优选例中，所述的RRM2B基因或其蛋白来自哺乳动物，较佳地，来自晒齿动 物（小鼠或大鼠）或灵长动物（例如人）；更佳地，来源于人。
[0011] 在另一优选例中，所述的RRM2B基因的编码序列如SEQ ID NO. ;42佑enbank ID : NM_015713. 4)：
【主权项】
1. 核糖核苷酸还原酶亚基 M2B(Ribonucleoside_diphosphate reductase subunit M2B，RRM2B)基因或其蛋白检测试剂的用途，其特征在于，用于制备诊断肝癌细胞转移的试 剂盒。
2. 如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的RRM2B基因或其蛋白检测试剂包括 RRM2B的特异性抗体、特异性扩增引物、探针或芯片。
3. 如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的检测是测定肝癌组织、或正常肝组织 样品。
4. 一种用于检测肝癌细胞转移的诊断试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒含有一容器， 所述容器中含有检测RRM2B蛋白或mRNA的检测试剂；以及标签或说明书，所述标签或说明 书注明所述试剂盒用于检测肝癌细胞转移。 5. RRM2B基因、蛋白或其促进剂的用途，其特征在于，用于制备抑制肝癌或抑制肝癌细 胞转移的药物组合物。
6. 如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物包括治疗有效量的RRM2B 基因、蛋白或其促进剂，和药学上可接受的载体。
7. -种筛选用于抑制肝癌细胞转移的候选化合物的方法，其特征在于，包括步骤： (a) 测试组中，在肝癌细胞的培养体系中添加测试化合物，并观察所述测试组的细胞中 RRM2B的表达量和/或活性；在对照组中，在相同细胞的培养体系中不添加测试化合物，并 观察对照组的所述细胞中RRM2B的表达量和/或活性； 其中，如果测试组中细胞的RRM2B的表达量和/或活性高于对照组，就表明该测试化合 物是对RRM2B的表达和/或活性有促进作用的抑制肝癌细胞转移的化合物；和/或 (b) 对于步骤（a)中获得的候选化合物，测试所述候选化合物对肝癌细胞转移的抑制 作用。
8. 如权利要求7所述的方法，其特征在于，在步骤（b)中包括步骤：向测试组肝癌细胞 的培养体系中添加测试化合物，并观察肝癌细胞移动的距离的数量和/或侵袭情况；向对 照组肝癌细胞的培养体系中不添加测试化合物，并观察肝癌细胞移动的距离的数量和/或 侵袭情况；其中，如果测试组中肝癌细胞的迁移距离或侵袭数量显著小于对照组，就表明该 测试化合物是对肝癌细胞转移有抑制作用的化合物。
9. 一种RRM2B抑制剂的用途，其特征在于，用于制备促进肝癌细胞转移的组合物或试 剂。
10. -种RRM2B基因的表达载体，其特征在于，所述的表达载体具有以下元件： (i) 启动子元件； (ii) RRM2B编码序列；和 (iii) 终止密码子元件； 其中，所述的启动子元件与Egrl不结合。
【专利摘要】本发明公开了RRM2B基因或其蛋白在肝癌转移中的应用。具体地，本发明提供了核糖核苷酸还原酶亚基M2B(Ribonucleoside-diphosphate reductase subunit M2B，RRM2B)基因或其蛋白检测试剂的用途，其用于制备诊断肝癌细胞转移的试剂盒。此外，本发明还提供了RRM2B对肝癌转移具有抑制作用。为肝癌转移提供了诊断和治疗的新途径。
【IPC分类】G01N33-574, G01N33-573, A61K48-00, C12N15-85, C12Q1-02, C12Q1-68, A61K38-44, A61P35-00
【公开号】CN104630338
【申请号】CN201310606030
【发明人】李锦军, 田华, 李红, 葛超, 张立行
【申请人】上海市肿瘤研究所
【公开日】2015年5月20日
【申请日】2013年11月8日