一种肝素钠粗品提取方法
【技术领域】
:
[0001]本发明涉及一种肝素钠提取方法，特别是涉及一种肝素钠粗品提取方法。
【背景技术】
:
[0002]肝素钠是一种酸性粘多糖，具有强抗凝作用，主要存在于哺乳动物的肠粘膜中，是临床抗血栓疾病的首选药物，国家大量出口的贵重生化药品。
[0003]传统的制取肝素钠主要有两种方法，一种是盐解，一种是酶解。盐解方法的主要缺点是肝素钠的产量偏低，酶解方法的主要缺点是肠渣都被分解，污染比较严重。
【发明内容】
:
[0004]本发明的目的在于提供一种减少污染，同时能够提高肝素钠产量的肝素钠粗品提取方法。
[0005]本发明的目的由如下技术方案实施:一种肝素钠粗品提取方法，其包括如下步骤:
(I)盐解；⑵吸附；⑶清洗树脂；⑷树脂脱附；(5)沉淀；(6)酒精分解；(7)干燥；其中，
[0006](I)盐解:将新鲜小肠粘膜绞碎，将绞碎的所述新鲜小肠粘膜和水按1:3的质量比混合后，抽入反应罐中加盐或盐水调整盐度至5.9-6.1度，加食用碱调整pH值为9-9.3后，直接升温至95-97?并保温9-10分钟进行盐解，盐解后捞出肠渣并收集作为饲料，剩余肠粘膜和水的混合液；
[0007](2)吸附:用80-100目滤网过滤所述肠粘膜和水的混合液，过滤后滤液抽入吸附罐中，然后向所述吸附罐中注入清水，所述滤液与所述清水的体积比为1:1，调节水温到58-60°C，此时调整盐度至2.5-3度，加入备用的树脂进行吸附，所述树脂与所述新鲜小肠粘膜的体积比是0.75:100 ；
[0008](3)清洗树脂:吸附完毕后，收集吸附后所述树脂，用40_50°C所述清水清洗吸附后所述树脂2-3遍，洗去吸附后所述树脂表面油脂及杂质；
[0009](4)树脂脱附:将清洗后所述树脂滤干，然后将清洗后所述树脂放入脱附灌中，然后再向所述脱附灌中加入20度盐水，清洗后所述树脂与所述盐水的体积比为2:1，搅拌10分钟，进行盐度调整，调整盐度至17-18度，调整pH值到8.3-8.5，然后加温至55_60°C搅拌2-2.5小时进行第一次脱附，第一次脱附完毕后收集第一次脱附树脂和第一次脱附滤液；然后对所述第一次脱附树脂进行第二次脱附，此时要求盐度不能低于20度，加温55-60°C，搅拌2-2.5小时；然后收集第二次脱附树脂和第二次脱附滤液；收集起来的所述第二次脱附树脂装在滤网中，放入20-25?的盐水中浸泡后重复用于所述步骤(2);树脂主要起吸附作用，由于采取清水浸泡，使树脂充分扩张，又采用两次不同浓度的盐水进行浸泡，使树脂吸附的肝素钠充分洗脱出来，既增加了肝素钠的提取量，又提高了树脂的反复吸附能力。
[0010](5)沉淀:收集所述第二次脱附滤液用做下一次的第一次脱附循环使用；将所述第一次脱附滤液收集到沉淀桶中，将PH值调整为9-12，沉淀12小时以上，碱蛋白和其他杂质就会分离出来，并且沉淀于所述沉淀桶桶底；
[0011](6)酒精分解:沉淀后将所述沉淀桶上面的清液抽出来过滤，向过滤后清液中边搅拌边加入盐酸，调整所述过滤后清液pH为中性，然后边搅拌边向所述过滤后清液中加入70度以上的酒精，调整所述过滤后清液的酒精度至30-35度，再调整pH值为8-9，沉淀24-48小时，形成酒精上清液和肝素钠浆糊；
[0012](7)干燥:将所述酒精上清液抽出，收集所述肝素钠浆糊，并将收集的所述肝素钠浆糊用棉布吊滤24小时，然后取出，烘干制得成品肝素钠。
[0013]具体的，所述树脂为强碱性离子交换树脂。
[0014]本发明的优点在于，分离出的肠渣作为饲料，第二次脱附滤液用做下一次的第一次脱附循环使用，解决了污染的问题；本发明提高了盐度，传统方法使用的盐度是四度，本专利使用的盐度是六度，提高了肝素钠的产量。以一万根羊原肠为例，传统盐解的方法生产
0.59个亿单位的肝素钠，另外生产肠渣一千千克；传统酶解的方法生产0.83个亿单位的肝素钠，不出产肠渣。本专利生产0.83个亿单位的肝素钠，出产一千千克的肠渣；本发明既能达到酶解的出药率也不会浪费生产中所产生的肠渣，从而达到生产的最高效益。
【具体实施方式】
:
[0015]实施例1:一种肝素钠粗品提取方法，其包括如下步骤:⑴盐解；(2)吸附；(3)清洗树脂；⑷树脂脱附；(5)沉淀；(6)酒精分解；(7)干燥；其中，
[0016](I)盐解:将新鲜小肠粘膜绞碎，将绞碎的所述新鲜小肠粘膜和水按1:3的质量比混合后，抽入反应罐中加盐或盐水调整盐度至5.9度，加食用碱调整pH值为9后，直接升温至95°C并保温10分钟进行盐解，盐解后捞出肠渣并收集作为饲料，剩余肠粘膜和水的混合液；
[0017](2)吸附:用80目滤网过滤所述肠粘膜和水的混合液，过滤后滤液抽入吸附罐中，然后向所述吸附罐中注入清水，所述滤液与所述清水的体积比为1:1，调节水温到58°C，此时调整盐度至2.5度，加入备用的树脂进行吸附，所述树脂与所述新鲜小肠粘膜的体积比是 0.75:100 ；
[0018](3)清洗树脂:吸附完毕后，收集吸附后所述树脂，用50°C所述清水清洗吸附后所述树脂2遍，洗去吸附后所述树脂表面油脂及杂质；
[0019](4)树脂脱附:将清洗后所述树脂滤干，然后将清洗后所述树脂放入脱附灌中，然后再向所述脱附灌中加入20度盐水，清洗后所述树脂与所述盐水的体积比为2:1，搅拌10分钟，进行盐度调整，调整盐度至17度，调整pH值到8.3，然后加温至55°C搅拌2小时进行第一次脱附，第一次脱附完毕后收集第一次脱附树脂和第一次脱附滤液；然后对所述第一次脱附树脂进行第二次脱附，此时要求盐度不能低于20度，加温55°C，搅拌2小时；然后收集第二次脱附树脂和第二次脱附滤液；收集起来的所述第二次脱附树脂装在滤网中，放入20°C的盐水中浸泡后重复用于所述步骤(2);树脂主要起吸附作用，由于采取清水浸泡，使树脂充分扩张，又采用两次不同浓度的盐水进行浸泡，使树脂吸附的肝素钠充分洗脱出来，既增加了肝素钠的提取量，又提高了树脂的反复吸附能力。
[0020](5)沉淀:收集所述第二次脱附滤液用做下一次的第一次脱附循环使用；将所述第一次脱附滤液收集到沉淀桶中，将PH值调整为9，沉淀12小时以上，碱蛋白和其他杂质就会分离出来，并且沉淀于所述沉淀桶桶底；
[0021](6)酒精分解:沉淀后将所述沉淀桶上面的清液抽出来过滤，向过滤后清液中边搅拌边加入盐酸，调整所述过滤后清液pH为中性，然后边搅拌边向所述过滤后清液中加入70度以上的酒精，调整所述过滤后清液的酒精度至30度，再调整pH值为8，沉淀24小时，形成酒精上清液和肝素钠浆糊；
[0022](7)干燥:将所述酒精上清液抽出，收集所述肝素钠浆糊，并将收集的所述肝素钠浆糊用棉布吊滤24小时，然后取出，烘干制得成品肝素钠。
[0023]具体的，所述树脂为强碱性离子交换树脂。
[0024]实施例2:—种肝素钠粗品提取方法，其包括如下步骤:⑴盐解；(2)吸附；(3)清洗树脂；⑷树脂脱附；(5)沉淀；(6)酒精分解；(7)干燥；其中，
[0025](I)盐解:将新鲜小肠粘膜绞碎，将绞碎的所述新鲜小肠粘膜和水按1:3的质量比混合后，抽入反应罐中加盐或盐水调整盐度至6.1度，加食用碱调整pH值为9.3后，直接升温至97°C并保温9分钟进行盐解，盐解后捞出肠渣并收集作为饲料，剩余肠粘膜和水的混合液；
[0026](2)吸附:用100目滤网过滤所述肠粘膜和水的混合液，过滤后滤液抽入吸附罐中，然后向所述吸附罐中注入清水，所述滤液与所述清水的体积比为1:1，调节水温到60°C，此时调整盐度至3度，加入备用的树脂进行吸附，所述树脂与所述新鲜小肠粘膜的体积比是0.75:100 ；
[0027](3)清洗树脂:吸附完毕后，收集吸附后所述树脂，用40°C