一种灵芝孢子多糖的制备方法
【专利说明】_种灵芝孢子多糖的制备方法
[0001]
技术领域
[0002]本发明涉及中药材提取技术，具体地说，涉及一种灵芝孢子多糖的制备方法。
【背景技术】
[0003]录芝Ganoderma是多孔菌科真菌赤芝和紫芝的总称，味甘性平，具有扶正固本，补气安神，益气血，健脾胃的作用。灵芝孢子是灵芝成熟时从菌盖弹射的孢子，近十几年来，科研人员对灵芝孢子的功效进行了大量研宄，发现灵芝孢子具有提高机体免疫，抑制肿瘤，抗辐射等作用。灵芝孢子含有蛋白质、氨基酸类、多糖糖肽类、腺苷类、留醇类、三萜类、生物碱类、脂肪酸类等化学物质。多糖是灵芝孢子的主要活性成分之一，随着灵芝孢子提取物在保健及医药领域的需求不断增加，灵芝孢子多糖的应用也越来越广泛。
[0004]常见的灵芝孢子多糖浓缩干燥工艺是减压浓缩和真空干燥。减压浓缩和真空干燥受热时间长，加热过程难免会引起焦化，从而增加多糖的灰分量。唐庆九等人报道了 “一种灵芝孢子粉多糖及其制备方法”(CN104193840A)，该方法把灵芝孢子进行醇提除杂、药渣再水提、水提液减压浓缩、浓缩液醇沉、沉淀加水溶解、冷冻干燥得孢子多糖。该方法采用了冷冻干燥，虽然比真空干燥缩短了孢子多糖直接受热的时间，但是冻干工艺的工时长，耗电能多，成本高，不利于工业化生产。本发明采用喷雾干燥法，瞬间受热，对孢子多糖的破坏非常小，所得孢子多糖的颜色和粒度均匀，而且工时缩短，使成本低，更容易实现产业化。
[0005]灵芝孢子多糖的提取纯化过程中，多糖被提取纯化的同时，无机盐也被提取纯化，传统多糖提纯工艺获得的孢子多糖的含量越高，其灰分含量也越高。刘英梅等人报道了“灵芝孢子粉中多糖提取工艺的研宄，中成药，2006，28 (3):332~335”，该方法提取次数较多，无机盐的含量较高，并使用了减压浓缩，提高了孢子粉多糖的灰分。本发明采用材质为醋酸纤维素(CA)或聚乙烯醇(PVA)，截留分子量不大于1000的滤膜浓缩，不但可以快速地低温浓缩，还可以有效除去无机盐类杂质，使得孢子多糖的灰分含量大大降低。本发明通过利用材质为醋酸纤维素(CA)或聚乙烯醇(PVA)，截留分子量为1000的滤膜进行浓缩，可以获得20%和60%两种纯度的孢子多糖。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是提供一种产品质量高、操作简便、生产工时短、成本低，适合工业化生产的灵芝孢子多糖的制备方法。
[0007]本发明的目的通过以下步骤来实现:
一种灵芝孢子多糖的制备方法，该方法包括如下步骤:
(1)灵芝孢子破壁粉碎，超临界0)2流体萃取孢子油；
(2)水提:取提取油后的残余物，加15~30倍体积量水，80-1000C，提取1~3次，每次1~3小时，合并提取液，离心，取上清液； (3)膜浓缩:上清液置膜分离设备，利用材质为醋酸纤维素(CA)或聚乙烯醇(PVA)，截留分子量在1000以下的滤膜进行浓缩，直至膜分离设备中剩余溶液的相对密度为
1.04—1.08g/ml。
[0008](4)喷雾干燥:利用喷雾干燥机将浓缩液干燥成粉末，即灵芝孢子多糖。
[0009]与现有技术相比，本发明具有如下有益效果:
(1)本发明采用超微粉碎破壁，可使灵芝孢子的破壁率达到99%以上，使多糖等有效成分在提取过程中能完全被提取出来；
(2)采用材质为醋酸纤维素(CA)或聚乙烯醇(PVA)，截留分子量在1000以下的滤膜浓缩，缩短了浓缩时间，避免了高温浓缩引起的焦化，还能除去分无机盐等杂质，减少了最终产物的灰分含量；通过不同材质的滤膜浓缩可获得不同纯度的孢子多糖。
[0010](3)采用喷雾干燥法，瞬间受热，对孢子多糖的破坏非常小，产品颜色和粒度均匀，干燥工时缩短，成本降低，容易实现产业化。
[0011]【具体实施方式】:
实施例1:
取灵芝孢子，破壁粉碎，超临界0)2流体萃取孢子油，称量提油后的剩余物500.0g,加入15倍体积量水，90°C提取2次，每次2小时，合并提取液，离心，上清液置卷式纳滤仪中，用反渗透膜过滤浓缩至相对密度为1.10g/ml (25°C)的浓缩液后，浓缩液喷雾干燥得黄白色灵芝孢子多糖粉43.5g，收率为8.7%，经检验，孢子多糖的含量以无水葡萄糖(C6H12O6)计为21.3%，灰分含量为3.23%。
[0012]实施例2:
取灵芝孢子，破壁粉碎，超临界0)2流体萃取孢子油，称量提油后的剩余物500.0g，加入15倍体积量水，90°C提取2次，每次2小时，合并提取液，离心，上清液蒸发浓缩至相对密度为1.13g/ml (70°C)的浓缩液后，浓缩液喷雾干燥得黄褐色灵芝孢子多糖52.0g，收率为
10.4%，经检验，孢子多糖的含量以无水葡萄糖(C6H12O6)计为19.52%，灰分含量为7.35%。
[0013]实施例3:
取灵芝孢子，破壁粉碎，超临界0)2流体萃取孢子油，称量提油后的剩余物500.0g,加入20倍体积量水，100°C提取2次，每次2小时，合并提取液，离心，上清液置卷式纳滤仪中，用截留分子量为1000的超滤膜过滤浓缩至相对密度为1.08g/ml (25°C )的浓缩液后，浓缩液喷雾干燥得灰白色灵芝孢子多糖25.5g，收率为5.1%，经检验，孢子多糖的含量以无水葡萄糖(C6H12O6)计为61.22%，灰分含量为3.17%。
[0014]实施例4:
取灵芝孢子，破壁粉碎，超临界0)2流体萃取孢子油，称量提油后的剩余物500.0g,加入20倍体积量水，100°C提取2次，每次2小时，合并提取液，离心，上清液置卷式纳滤仪中，用截留分子量为1000的超滤膜过滤浓缩至相对密度为1.06g/ml (25°C )的浓缩液后，浓缩液真空干燥得黄褐色灵芝孢子多糖26.2g，收率为5.24%，经检验，孢子多糖的含量以无水葡萄糖(C6H12O6)计为52.34%，灰分含量为10.17%。
[0015]实施例5:
取灵芝孢子，破壁粉碎，超临界0)2流体萃取孢子油，称量提油后的剩余物500.0g,加入20倍体积量水，100°C提取2次，每次2小时，合并提取液，离心，上清液减压浓缩至相对密度为1.12g/ml (65°C)的浓缩液后，浓缩液真空干燥得黄褐色灵芝孢子多糖55.8g，收率为
11.26%，经检验，孢子多糖的含量以无水葡萄糖(C6H12O6)计为18.77%，灰分含量为15.38%。
[0016]实施例6:
取灵芝孢子，破壁粉碎，超临界0)2流体萃取孢子油，称量提油后的剩余物500.0g,加入30倍体积量水，100°C提取2次，每次2小时，合并提取液，离心，上清液置卷式纳滤仪中，用截留分子量为1000的超滤膜过滤浓缩至相对密度为1.10g/ml (20°C)的浓缩液后，浓缩液喷雾干燥得灰白色灵芝孢子多糖25.13g，收率为5.06%，经检验，孢子多糖的含量以无水葡萄糖(C6H12O6)计为61.8%，灰分含量为2.76%ο
[0017]实施例7:
取灵芝孢子，破壁粉碎，超临界0)2流体萃取孢子油，称量提油后的剩余物500.0g，加入25倍体积量水，100°C提取3小时，提取液离心，上清液置卷式纳滤仪中，用截留分子量为1000的超滤膜过滤浓缩至相对密度为1.05g/ml (30°C )的浓缩液后，浓缩液喷雾干燥得灰白色灵芝孢子多糖26.27g，收率为5.25%，经检验，孢子多糖的含量以无水葡萄糖(C6H12O6)计为61.6%，灰分含量为3.03%。
[0018]实施例8:
取灵芝孢子，破壁粉碎，超临界0)2流体萃取孢子油，称量提油后的剩余物500.0g,加入25倍体积量水，90°C提取2次，每次2.5小时，合并提取液，离心，上清液置卷式纳滤仪中，用截留分子量为1000的超滤膜过滤浓缩至相对密度为1.07g/ml (30°C )的浓缩液后，浓缩液喷雾干燥得灰白色灵芝孢子多糖25.88g，收率为5.18%，经检验，孢子多糖的含量以无水葡萄糖(C6H12O6)计为62.1%，灰分含量为3.19%。
[0019]实施例9:
取灵芝孢子，破壁粉碎，超临界0)2流体萃取孢子油，称量提油后的剩余物500.0g,加入20倍体积量水，95°C提取2次，每次2.5小时，合并提取液，离心，上清液置卷式纳滤仪中，用反渗透膜过滤浓缩至相对密度为1.15g/ml (20°C)的浓缩液后，浓缩液喷雾干燥得灰白色灵芝孢子多糖42.92g，收率为8.58%，经检验，孢子多糖的含量以无水葡萄糖(C6H12O6)计为20.47%，灰分含量为3.28%ο
[0020]实施例10:
取灵芝孢子，破壁粉碎，超临界0)2流体萃取孢子油，称量提油后的剩余物500.0g,加入30倍体积量水，95°C提取2次，每次1.5小时，合并提取液，离心，上清液置卷式纳滤仪中，用反渗透膜过滤浓缩至相对密度为1.llg/ml (25°C)的浓缩液后，浓缩液喷雾干燥得灰白色灵芝孢子多糖43.86g，收率为8.77%，经检验，孢子多糖的含量以无水葡萄糖(C6H12O6)计为20.36%，灰分含量为3.49%ο
【主权项】
1.一种灵芝孢子多糖的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤: (1)灵芝孢子破壁粉碎，超临界CO2流体萃取灵芝孢子油； (2)水提:取提取油后的残余物，加15~30倍体积量水，80-1000C，提取1~3次，每次1~3小时，合并提取液，离心，取上清液； (3)膜浓缩:上清液置膜分离设备，利用材质为醋酸纤维素(CA)或聚乙烯醇(PVA)，截留分子量在1000以下的滤膜进行过滤浓缩，直至膜分离设备中剩余溶液的相对密度为1.04—1.08g/ml ； (4)喷雾干燥:利用喷雾干燥机将浓缩液干燥成粉末，即灵芝孢子多糖。2.根据权利要求1所述的灵芝孢子多糖的制备方法，其特征在于:步骤(I)所述的破壁粉碎方法是指超微粉碎，灵芝孢子的破壁率要求达到99%以上。3.根据权利要求1所述的灵芝孢子多糖的制备方法，其特征在于:步骤(I)所述的超临界0)2流体萃取孢子油的灵芝孢子粉粒度为10~20目，物料水分为4~10%。4.根据权利要求1所述的灵芝孢子多糖的制备方法，其特征在于:步骤(4)所述的喷雾干燥的工艺参数为:物料温度50~80°C，进风温度155~200°C，粉末粒度在10um~100um，水分小于4% ο
【专利摘要】本发明公开了一种灵芝孢子多糖的制备方法。该方法将灵芝孢子破壁粉碎，超临界CO2流体萃取孢子油，然后对提油后的剩余物进行水提、膜浓缩、喷雾干燥，得灵芝孢子多糖。本发明提供的方法操作简便、生产周期短、成本低、节能环保。本发明得到的灵芝孢子多糖系喷雾干燥粉，粉末颜色粒度均匀，灰分含量低。
【IPC分类】C08B37/00
【公开号】CN104945528
【申请号】CN201510395385
【发明人】陈亮, 罗爱勤, 施家辉, 李菁, 林秀仙
【申请人】广州白云山汉方现代药业有限公司
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年7月8日