GTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCG
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AGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGTCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTGG
GTTTTACCAGAAGTGGCTAGTCTAACCGCAAGGAGGACGGTCACCACGGTAGGAATTCCGGGT 实施例3:伯克霍尔德菌ID03的底物广谱性测定
利用实施例1中的菌液，采用含氮元素的无机盐培养基((NH4)2SO4 2.0 g/L、KH2PO42.0 g/L、Na2HPO4.12H20 3.28 g/L、FeCl3 0.00025 g/L)培养，5% 接菌量，具体考察了菌株ID03以多种化合物为唯一碳源生长，包括苯甲酸、色氨酸、苯酚、儿茶酚、水杨酸、吲哚等，各种化合物浓度为50 mg/L?
[0026]实施例4:不同吲哚浓度对伯克霍尔德菌ID03好氧降解吲哚及菌株生长情况利用实施例1中的菌液，采用100 mL无机盐培养基培养，5%接菌量，吲哚浓度为(mg/
L):100和200。30。。，150 rpm，一定时间间隔取2 mL菌液，检测吲哚剩余浓度。图1和图2为伯克霍尔德菌ID03对不同浓度吲哚的好氧降解曲线及菌株生长曲线。结果表明，菌株ID03在以吲哚为唯一碳源、氮源和能源的培养基中可使吲哚发生降解，100和200 mg/L浓度的吲哚完全降解的时间分别为14和60 h，菌株ID03达到生长稳定期的时间分别为84和144 ho结果表明菌株ID03具有较强的吲哚的降解能力，而在吲哚降解完后，菌株能利用代谢产物进行二次生长。
[0027]实施例5:不同温度对伯克霍尔德菌ID03好氧降解吲哚的情况
利用实施例1中的菌液，采用100 mL无机盐培养基培养，5%接菌量，吲哚浓度为100mg/L，温度为(V):20、25、30、35、40。150 rpm，好氧培养24 h，检测吲哚剩余浓度。图3为不同温度对伯克霍尔德菌ID03好氧降解吲哚的实验结果。结果表明，不同温度会影响菌株ID03好氧降解吲哚的能力，所述菌株ID03在25-35°C温度范围内对吲哚的降解率均可达95%以上，菌株具有较好的温度适应性。
[0028]实施例6:不同pH对伯克霍尔德菌ID03好氧降解吲哚的情况
利用实施例1中的菌液，采用100 mL无机盐培养基培养，5%接菌量，吲哚浓度为100mg/L, pH 为:3、4、5、6、6.8 (自然 pH)、8、9、10、11。30。。，150 rpm，好养培养 24 h 后，检测吲哚剩余浓度。图4为不同pH对伯克霍尔德菌ID03好氧降解吲哚的实验结果。结果表明，不同PH会影响菌株ID03好氧降解吲哚的能力，该菌株ID03在pH为4_8的范围内，对吲哚的降解率均可达到95%以上，菌株具有较好的pH适应性。
[0029]实施例7:不同转速对伯克霍尔德菌ID03好氧降解吲哚的情况
利用实施例1中的菌液，采用100 mL无机盐培养基培养，5%接菌量，吲哚浓度为100mg/L，转速为(rpm):0、50、100、150、200、250。30°C，好氧培养24 h后，检测吲哚剩余浓度。图5为不同转速对伯克霍尔德菌ID03好氧降解吲哚的实验结果。结果表明，菌株ID03在
0-250 rpm的范围内，对吲哚的降解率均可达到95%以上。其中在零转速的情况下，菌株也能很好的降解吲哚，表明该菌降解吲哚时对氧气需求量不高，具有更好的实际应用前景。
[0030]实施例8:不同金属离子对伯克霍尔德菌ID03好氧降解吲哚的情况
利用实施例1中的菌液，采用100 mL无机盐培养基培养，5%接菌量，吲哚浓度为100mg/L,加入的金属离子为 Fe2+、Mg2+、Mn2+、Ca2+、Zn2+、Cd2+、Se4+、Co2+、Ni2+、Ag2+、Cu2+，每种金属离子加入的浓度为0.1、0.5、1.0 mmol/L，转速为150 rpm，30°C，好养培养，12 h、24 h分别取样检测剩余吲哚浓度。图6为12 h时不同金属离子对伯克霍尔德菌ID03好氧降解吲哚的实验结果。结果表明，Fe2+、Mg2+对菌株ID03降解吲哚起到促进作用，12 h时加入0.5、1.0mmol/L Fe2+的培养基中菌株ID03已经将吲哚完全降解。不同浓度的Mn 2+、Ca2+、Zn2+离子会抑制菌株ID03约15-20%的降解，Cd2+、Co2+和0.5、1.0 mmol/L Se 4+会严重抑制菌株ID03的降解，Ni2+、Ag2+、Cu2+的加入几乎会完全抑制菌株ID03降解吲哚。图7为24 h时不同金属离子对伯克霍尔德菌ID03好氧降解吲哚的实验结果。结果表明，0.5 mmol/L Se4+抑制菌株ID03 50%左右的吲哚降解能力，Se4+ (1.0 mmol/L)、Co2+、Ni2+、Ag2+、Cu2+的加入使得菌株ID03在24 h内对吲哚的降解率小于10%。
[0031]实施例9:不同氮杂环化合物对伯克霍尔德菌ID03好氧降解吲哚的情况
利用实施例1中的菌液，采用100 mL无机盐培养基培养，5%接菌量，吲哚浓度为100mg/L，分别加入100 mg/L苯酚、吡啶、喹啉，转速为150 rpm，30°C，好氧培养，12 h、24 h分别取样检测剩余吲哚浓度。图8为不同氮杂环化合物对伯克霍尔德菌ID03好氧降解吲哚的实验结果。结果表明，前12小时，苯酚对菌株ID03降解吲哚效率几乎没有影响，吡啶抑制菌株ID03 15%左右的降解吲哚效率，而喹啉完全抑制了菌株ID03对吲哚的好氧降解。24小时后菌株ID03在苯酚、吡啶、喹啉分别存在时，吲哚的降解率均达到95%以上。
【主权项】
1.一株好氧降解π引噪的伯克霍尔德菌{Burkholderia 577.)，其特征在于:该菌株的登记入册编号为CGMCC N0.10457，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研宄所，保藏日期为2015年I月28日。2.根据权利要求1所述的一株好氧降解吲哚的伯克霍尔德菌，其特征在于:所述菌株的培养条件采用无机盐培养基的组分为2.0 g/L KH2PO4,3.28 g/L Na2HPO4-12H20,0.205 g/L MgS04*7H20、和0.00025 g/L FeCl3，在121 °C高温高压灭菌20 min的无机盐培养基中添加100 mg/L吲噪，30°C，150 rpm条件震荡培养。3.权利要求1所述的一株好氧降解吲哚的伯克霍尔德菌的应用，其特征在于:所述菌株应用于吲哚的降解。
【专利摘要】一株好氧降解吲哚的伯克霍尔德菌及其应用，属于微生物技术领域。该菌株分离自反应器活性污泥，2015年1月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.10457。经16S rRNA基因序列测定，菌株IDO3与Burkholderia具有较高的相似性，因此该菌分类命名为Burkholderiasp. IDO3，菌株16S rRNA基因序列的GenBank登录号为KP895480。该菌株对吲哚具有较强的降解能力，还具有良好的pH和温度耐受性，显示了其在含高浓度吲哚废水处理中的应用前景。CGMCC No.1045720150128
【IPC分类】C12N1/20, C02F3/34, C02F103/10, C02F101/38, A62D3/02, C12R1/01
【公开号】CN104946563
【申请号】CN201510331725
【发明人】曲媛媛, 刘紫嫣, 马桥, 沈文丽, 厉舒祯, 由胜男, 裴晓芳, 张世明, 王经伟, 李端行, 张照婧, 李会杰
【申请人】大连理工大学
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年6月16日