光学活性(S或R)-α-氨基酸及光学活性(S或R)-α-氨基酸酯的制造方法

专利名称：光学活性(S或R)-α-氨基酸及光学活性(S或R)-α-氨基酸酯的制造方法
技术领域：
本发明涉及由a-氨基酸酯(外消旋体混合物)同时获得光学活性(S 或R) -(x-氨基酸和作为其对映体酯的光学活性(R或S) -a-氨基酸酯的方 法。这些光学活性a-氨基酸及其酯是可以用作具有生理活性的天然物及药 品的原料或合成中间体的化合物(例如，参见非专利文献1、专利文献1-5)。
背景技术：
以往，作为光学活性a-氨基酸及其酯的利用脂肪酶进行对映选择性水 解反应的制造方法，例如已公开了在猪胰脏脂肪酶、源于洋葱伯克霍尔德 菌(假单胞菌)(Burkholderia cepacia (Pseudomonas cepacia))的月旨肪酶、 源于酒曲菌(Rhizopus)的脂肪酶的存在下，使各种氨基酸酯在水中仅选 择性地水解为对映体中的一种，从而得到光学活性(S)-氨基酸及光学活 性(R)-氨基酸酯的方法(例如，参见非专利文献2)。
但是，这些方法要使用大量的酶，总的来说，作为酶对对映体之间的 选择性指标的E值低，当作为生成物的光学活性羧酸为水溶性时，反应完 成后不容易100%地从水溶液中回收，此外还存在着在大量水的存在下基 质本身水解导致光学纯度下降的问题。还有，E值作为光学理论上的光学 分离选择性的指标得到了广泛应用(例如，参见非专利文献3)。
另外，作为以往光学活性cc-氨基酸及其酯的利用蛋白酶进行对映选择 性水解反应的制造方法，例如公开了在a-糜蛋白酶、卡斯柏格枯草杆菌、 枯草杆菌蛋白酶BPN，的存在下，使酪氨酸乙酯在乙腈中仅选择性地水解 为对映体中的一种，从而得到光学活性(S)-酪氨酸及光学活性(R)-酪 氨酸酯的方法(例如，参见非专利文献4)。其中改变乙腈中的水含量进行 了各种反应，相对于溶剂乙腈为5 10%时得到了最好的结果。
但是，在水含量相对于基质为10当量以下这种极少量的体系中，水解并不进行。在该文献采用的体系中，不容易完全抑制氨基酸酯本身的水 解，并且基质相对于溶剂的浓度低，在工业上是不可取的方法。
另外，作为以往光学活性a-氨基酸及其酯的利用蛋白酶进行对映选择 性水解反应的制造方法，例如公开了在ct-糜蛋白酶、卡斯柏格枯草杆菌、 枯草杆菌蛋白酶BPN'的存在下，使酪氨酸乙酯在乙腈-水混合溶剂中仅选
择性地水解为对映体中的一种，从而得到光学活性(s)-酪氨酸及光学活
性(R)-酪氨酸酯的方法(例如，参见非专利文献4)。其中改变乙腈中的 水含量进行了各种反应，当水相对于溶剂乙腈为5 10% (v/v)时得到了 最好的结果。
但是，对于上述反应体系，在水含量相对于基质为10当量以下这种 极少量的体系中，水解并不进行，另外，也未提起。在本发明使用的体系 中，作为基质使用的水量大，不容易完全抑制氨基酸酯本身的水解，并且 基质相对于溶剂的浓度低，在工业上是不可取的方法。
非专利文献1: J. Med. Chem.， 46, 4533(2003)
非专利文献2: Chirality., 8， 418(1996)
非专利文献3: J. Am. Chem. Soc., 104,7294(1982)
非专利文献4: Biotechnology Letters, 13, (5)， 317(1991)
非专利文献5:"化学辞典"，东京化学同人出版，948页(2000年)
专利文献1: WO9706162
专利文献2: WO2005063198
专利文献3: WO2004084812
专利文献4: WO9803473
专利文献5: WO200505130
发明内容
本发明的课题在于解决上述问题，通过简便的方法，利用使用酶的水 解反应以高E值由a-氨基酸酯(外消旋体混合物)同时制造光学活性(S 或R) -a-氨基酸和作为其对映体酯的光学活性(R或S) -a-氨基酸酯的方法。以往，通过(X-氨基酸酯(外消旋体混合物)的对映选择性水解来制造 CC-氨基酸通常是按以下方法进行，g卩，在水解酶的存在下，在以水为主的 溶剂中使大量水和外消旋体的p-氨基酸酯反应。其原因是认为对于作为基 质的外消旋体OC-氨基酸酯的水解反应，水量越多，就越能促进反应。为了 解决上述问题，本发明人进行深入研究，从而发现一种新型反应体系，其 中在脂肪酶或蛋白酶的存在下，通过在有机溶剂中使水和OC-氨基酸酯(外 消旋体混合物)进行反应，基本上完全抑制了由水引起的易水解基质(卩-氨基酸酯)本身发生水解(这导致光学纯度下降)，并且可以完全回收通
常因具有水溶性而难以分离的光学活性a-氨基酸，与以往技术相比，该反
应体系提高了收率、选择性、操作性等，作为工业制造方法更有优势。
本发明涉及通式(n)表示的光学活性(S或R) -a-氨基酸及通式(III) 表示的光学活性(R或S) -ct-氨基酸酯的制造方法，其特征在于，在脂肪 酶或蛋白酶的存在下，在有机溶剂中使水和通式(I)表示的作为外消旋体 混合物的a-氨基酸酯的对映体中的仅一种进行反应；
式中，R表示可以具有取代基的烷基、烯基、炔基、环垸基、芳垸基、杂 芳烷基、芳基或杂芳基，W表示可以具有取代基的烷基；
式中，R及W与上述同义，*表示不对称碳原子，但是具有与通式(II) 的化合物相反的立体绝对构型。
本发明还涉及光学活性(R或S) -a-氨基酸酯的酸盐的制造方法，其
式中，R与上述同义，*表示不对称碳原子;中从上述通式(II)表示的光学活性(S或R) -a-氨基酸和上述通式(III) 表示的光学活性(R或S)-oi-氨基酸酯的混合物中分别分离出两种物质后， 使得到的光学活性(R或S) -a-氨基酸酯和酸进行反应；
式中，R及W与上述同义，*表示不对称碳原子，但是具有与通式(II) 的化合物相反的立体绝对构型。
根据本发明，可以通过简便的方法，利用使用酶的水解反应以高E值 由a-氨基酸酯(外消旋体混合物)同时制造光学活性(S或R) -a-氨基酸 和作为其对映体酯的光学活性(R或S) -a-氨基酸酯的方法。
具体实施例方式
化合物(I)中的R表示可以具有取代基的烷基、烯基、炔基、环烷 基、芳垸基、杂芳基垸基、芳基或杂芳基，Ri表示可以具有取代基的烷基。
上述R中可以具有取代基的烷基中的垸基是直链状或支化链状的碳 原子数为1~10的垸基，例如可以列举甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、 己基、庚基、辛基、壬基及癸基等烷基，优选甲基、乙基、正丙基、异丙 基、正丁基及正辛基等碳原子数为1~8的烷基，更优选甲基及乙基等碳原 子数为1 2的垸基。还有，这些基团包括各种异构体。
关于可以具有取代基的烷基中的取代基，例如可以列举氟原子、氯原 子、溴原子、碘原子等卤素原子；羟基；甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧 基等碳原子数为1 4的垸氧基；氨基；及二甲氨基、二乙氨基等被碳原子 数为1~6的烷基二取代的二垸基氨基；氰基；硝基等，但是优选氟原子、 氯原子、羟基、氨基及二烷基氨基。
式中，R与上述同义，*表示不对称碳原子;作为这种可以具有取代基的烷基，可以具体地列举例如氟甲基、氯甲
基、羟甲基、甲氧基甲基、氨甲基、二甲氨基甲基、2-氯乙基、2，2-二氯 乙基、2-羟基乙基及2-氰基乙基等，但优选氟甲基、氯甲基、羟甲基、氨 甲基、二甲氨基甲基、2-氯乙基及2-氰乙基。
作为上述R中可以具有取代基的烯基中的烯基，例如可以列举乙烯 基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基及癸烯 基等碳原子数为2~10的烯基，优选乙烯基、丙烯基、丁烯基及戊烯基等 碳原子数为2~5的烯基，更优选乙烯基、1-丙烯及2-丙烯等碳原子数为2 3 的烯基。还有，这些基团包括各种异构体。
关于可以具有取代基的烯基中的取代基，例如可以列举氟原子、氯原 子、溴原子、碘原子等卤素原子；羟基；甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧 基等碳原子数为l-4的烷氧基；氨基；及二甲氨基、二乙氨基等被碳原子 数为1~6的烷基二取代的二烷基氨基；氰基；硝基，但是优选氟原子、氯 原子、羟基、氨基及二烷基氨基。
作为这种具有取代基的烯基，可以具体地列举例如l-氟乙烯基、1-氯 乙烯基、1-羟基乙烯基、1-甲氧基乙烯基、1-氨基乙烯基、1-氰基乙烯基、 2-氟乙烯基、2-氯乙烯基、2-羟基乙烯基、2-甲氧基乙烯基、2-氨基乙烯基、
2- 氰基乙烯基、1，2-二甲氨基乙烯基、l-氟-2-丙烯基、l-氯-2-丙烯基、1-羟基-2-丙烯基、l-甲氧基-2-丙烯基、l-氨基-2-丙烯基、l-氰基-2-丙烯基、
3- 氟-l-丙烯基、3-氯-l-丙烯基、3-羟基-2-丙烯基、3-甲氧基-2-丙烯基、3-氨基-2-丙烯基、2-氰基-2-丙烯基、3，3-二甲氨基-2-丙烯基及3,3-二氯-2-丙 烯基等，优选l-氟乙烯基、l-氯乙烯基、1-羟基乙烯基、1-氨基乙烯基、 1-氰基乙烯基、l-氟-2-丙烯基、l-氯-2-丙烯基及l-氰基-2-丙烯基。
作为上述R中可以具有取代基的炔基中的炔基，例如可以列举乙炔 基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基、庚炔基、辛炔基、壬炔基及癸炔 基等碳原子数为2~10的炔基，优选乙炔基、丙炔基、丁炔基及戊炔基等 碳原子数为2 5的炔基，更优选乙炔基、1-丙炔及2-丙炔等碳原子数为2~3 的炔基。还有，这些基团包括各种异构体。
关于可以具有取代基的炔基中的取代基，例如可以列举氟原子、氯原 子、溴原子、碘原子等卤素原子；羟基；甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等碳原子数为1 4的烷氧基；氨基；二甲氨基、二乙氨基等被碳原子数 为1 6的烷基二取代的二烷基氨基；氰基及硝基，但是优选氟原子、氯原 子、羟基、氨基及二垸基氨基。
作为这种具有取代基的炔基，可以具体地列举例如2-氟乙炔基、2-氯
乙炔基、2-羟基乙炔基、2-甲氧基炔基、2-氨基乙炔基、2-氰基乙炔基、1-氟-2-丙炔基、l-氯-2-丙炔基、l-羟基-2-丙炔基、l-甲氧基-2-丙炔基、1-氨 基-2-丙炔基、l-氰基-2-丙炔基、1，1-二氯-2-丙炔基及1，1-二氨基-2-丙炔基 等，但是优选2-氟乙炔基、2-氯乙炔基、2-羟基乙炔基、2-氨基乙炔基、
1- 氟-2-丙炔基及U-二氯-2-丙炔基。
上述R中可以具有取代基的环烷基中的环垸基是碳原子数为3 10的 环烷基，例如可以列举环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛 基、环壬基及环癸基之类的环烷基(还有，这些基团包括各种异构体)， 但优选环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基及环辛基等碳原子数为 3~8的环烷基，更优选环丙基、环丁基、环戊基及环己基等碳原子数为3 6 的环烷基。
关于可以具有取代基的环垸基中的取代基，可以列举碳链原子数为 1~6的烷基、氟原子、氯原子、溴原子、碘原子等卤素原子；羟基；甲氧 基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等碳原子数为1~4的烷氧基；氨基；二甲氨 基、二乙氨基等被碳原子数为1 6的烷基二取代的二垸基氨基；氰基及硝 基，但是优选氟原子、氯原子、羟基、氨基及二垸基氨基。
作为这种具有取代基的环垸基，可以具体地列举例如l-氟环丙基、2-氯环丙基、3-氟环丁基、甲氧基环丙基、氨基环戊基、二甲氨基环己基、
2- 氯环丙基、2,2-二氯环己基、2-羟基环丁基及2-氰基环己基等，优选氟环 丙基及氯环丁基。
作为上述R中可以具有取代基的芳垸基中的芳烷基，例如可以列举苄 基、l-萘甲基、2-萘甲基、苯乙基、苯丙基及苯丁基等碳原子数为6~14的 芳基在碳原子数为1~6的烷基上进行取代而形成的芳垸基，但优选苄基、 l-萘甲基、2-萘甲基、l-苯乙基、2-苯乙基、3-苯丙基及3-苯丁基等芳基在 碳原子数为1~4的垸基上进行取代而形成的芳垸基，特别优选苄基、1-萘 甲基、2-萘甲基等芳基在甲基上进行取代而形成的芳垸基。还有，这些基团包括各种异构体。
关于可以具有取代基的芳烷基中的取代基，例如可以列举甲基、乙基、 丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等碳原子数为1 10 的烷基(还有，这些基团包括各种异构体)；羟基；硝基；氟原子、氯原 子、溴原子、碘原子等卤素原子；甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊 氧基、己氧基、庚氧基、辛氧基、壬氧基、癸氧基等碳原子数为1~10的 垸氧基(还有，这些基团包括各种异构体)；苄氧基、苯乙氧基、苯丙氧 基等碳原子数为7~10的芳垸氧基(还有，这些基团包括各种异构体)；苯 氧基、萘氧基等碳原子数为6~20的芳氧基(还有，这些基团包括各种异 构体)；甲氧基甲氧基、甲氧基乙氧基等硕原子数为2 12的垸氧基垸氧基 (还有，这些基团包括各种异构体)；甲氨基、乙氨基等单垸基氨基(还 有，这些基团包括各种异构体)；二甲氨基、二乙氨基等被碳原子数为1~6 的垸基二取代的二烷基氨基(还有，这些基团包括各种异构体)；甲酰氨 基、乙酰氨基、苯甲酰氨基等碳原子数为1~12的酰氨基(还有，这些基 团包括各种异构体)；硝基；氰基及三氟甲基等碳原子数为1 12的卤化垸 基。
作为这种具有取代基的芳烷基，可以具体地列举例如2-氟苄基、3-氟 苄基、4-氟苄基、3，4-二氟苄基、2，4-二氟苄基、2-氯苄基、3-氯苄基、4-氯苄基、2,4-二氯苄基、3，4-二氯苄基、2-溴苄基、3-溴苄基、4-溴苄基、 2,4-二溴节基、3,4-二溴节基、2-碘节基、3-碘节基、4-碘节基、2,3-二碘苄 基、3，4-二碘苄基、2-甲基节基、3-甲基苄基、4-甲基苄基、2-乙基苄基、
3- 乙基苄基、4-乙基苄基、2-羟基苄基、3-羟基苄基、4-羟基苄基、2-甲氧 基苄基、3-甲氧基苄基、4-甲氧基苄基、2,4-二甲氧基苄基、3，4-二甲氧基 苄基、2-乙氧基苄基、4-乙氧基苄基、2-三氟甲基苄基、4-三氟甲基苄基、
4- 苄氧基苄基、2-硝基苄基、3-硝基苄基、4-硝基苄基、2-氰基苄基、3-氰 基苄基、4-氰基苄基、4-二甲氨基苄基、4-甲酰氨基苄基、2-乙酰氨基苄基、 3-乙酰氨基苄基、4-乙酰氨基苄基、4-苯甲酰氨基苄基、l-萘甲基、2-萘甲 基、2- (2-氟苯基)乙基、2- (3-氟苯基)乙基、2- (4-氟苯基)乙基、2-
(3,4-二氟苯基)乙基、2- (2，4-二氟苯基)乙基、2- (2-氯苯基)乙基、 2- (3-氯苯基)乙基、2- (4-氯苯基)乙基、2- (2,4-二氯苯基)乙基、2-(3,4-二氯苯基)乙基、2- (2-溴苯基)乙基、2- (3-溴苯基)乙基、2- (4-溴苯基)乙基、2- (2，4-二溴苯基)乙基、2- (3，4-二溴苯基)乙基、2- (2-碘苯基)乙基、2- (3-碘苯基)乙基、2- (4-碘苯基)乙基、2- (2,3-二碘 苯基)乙基、2- (3,4-二碘苯基)乙基、2- (2-甲苯基)乙基、2- (3-甲苯 基)乙基、2- (4-甲苯基)乙基、2- (2-乙苯基)乙基、2- (3-乙苯基)乙 基、2- (4-乙苯基)乙基、2- (2-羟基苯基)乙基、2- (4-羟基苯基)乙基、 2- (2-甲氧基苯基)乙基、2- (3-甲氧基苯基)乙基、2- (4-甲氧基苯基) 乙基、2- (2,4-二甲氧基苯基)乙基、2- (3，4-二甲氧基苯基)乙基、2- (2-乙氧基苯基)乙基、2- (4-乙氧基苯基)乙基、2- (2-三氟甲基苯基)乙基、
2- (4-三氟甲基苯基)乙基、2- (4-节氧基苯基)乙基、2- (2-硝基苯基) 乙基、2- (3-硝基苯基)乙基、2- (4-硝基苯基)乙基、2- (2-氰基苯基) 乙基、2- (3-氰基苯基)乙基、2- (4-氰基苯基)乙基、2- (4-二甲氨基苯 基)乙基、2- (4-甲酰氨基苯基)乙基、2- (2-乙酰氨基苯基)乙基、2-
(3-乙酰氨基苯基)乙基、2- (4-乙酰氨基苯基)乙基、2- (4-苯甲酰氨基 苯基)乙基、3- (2-氟苯基)丙基、3- (4-氟苯基)丙基、3- (4-氯苯基) 丙基、3- (4-溴苯基)丙基、3- (4-碘苯基)丙基、3- (2-氯苯基)丙基、
3- (2-甲氧苯基)丙基、3- (4-甲氧苯基)丙基、3- (3，4-二甲氧基苯基) 丙基、3- (4-三氟甲基苯基)丙基、3- (2-三氟甲基苯基)丙基、3- (4-硝 基苯基)丙基、3- (4-氰基苯基)丙基及3- (4-乙酰氨基苯基)丙基等， 但优选2-氟苄基、3-氟苄基、4-氟苄基、2-氯苄基、3-氯苄基、4-氯苄基、
2- 溴苄基、3-溴苄基、4-溴苄基、2-碘苄基、3-碘苄基、4-碘苄基、2-甲基 节基、3-甲基节基、4-甲基节基、2-羟基苄基、4-羟基苄基、2-甲氧基苄基、
3- 甲氧基苄基、4-甲氧基苄基、3，4-二甲氧基苄基、2-三氟甲基苄基、4-三 氟甲基苄基、4-苄氧基苄基、2-硝基苄基、3-硝基苄基、4-硝基苄基、2-氰基苄基、3-氰基苄基、4-氰基苄基、4-甲酰氨基苄基、3-乙酰氨基苄基、
4- 乙酰氨基苄基、4-苯甲酰氨基苄基、l-萘甲基、2-萘甲基、2- (2-氟苯基) 乙基、2- (3-氟苯基)乙基、2- (4-氟苯基)乙基、2- (2-氯苯基)乙基、 2- (3-氯苯基)乙基、2- (4-氯苯基)乙基、2- (2-溴苯基)乙基、2- (3-溴苯基)乙基、2- (4-溴苯基)乙基、2- (2-碘苯基)乙基、2- (3-碘苯基) 乙基、2_ (4-碘苯基)乙基、2- (2-甲苯基)乙基、2- (3-甲苯基)乙基、2- (4-甲苯基)乙基、2- (2-乙苯基)乙基、2- (2-羟基苯基)乙基、2- (4-羟基苯基)乙基、2- (2-甲氧基苯基)乙基、2- (3-甲氧基苯基)乙基、2-
(4-甲氧基苯基)乙基、2- (2，4-二甲氧基苯基)乙基、2- (3,4-二甲氧基 苯基)乙基、2- (2-三氟甲基苯基)乙基、2- (4-三氟甲基苯基)乙基、2-
(4-节氧基苯基)乙基、2- (2-硝基苯基)乙基、2- (3-硝基苯基)乙基、 2- (4-硝基苯基)乙基、2- (2-氰基苯基)乙基、2- (3-氰基苯基)乙基、
2- (4-氰基苯基)乙基、2- (2-乙酰氨基苯基)乙基、2- (3-乙酰氨基苯基) 乙基、2- (4-乙酰氨基苯基)乙基、2- (4-苯甲酰氨基苯基)乙基、3- (2-氟苯基)丙基、3- (4-氟苯基)丙基、3- (4-氯苯基)丙基、3- (4-溴苯基) 丙基、3- (4-碘苯基)丙基、3- (2-氯苯基)丙基、3- (2-甲氧苯基)丙基、
3- (4-甲氧苯基)丙基、3- (3,4-二甲氧基苯基)丙基、3- (4-三氟甲基苯 基)丙基、3- (2-三氟甲基苯基)丙基、3- (4-硝基苯基)丙基、3- (4-氰 基苯基)丙基及3- (4-乙酰氨基苯基)丙基，更优选2-氟苄基、4-氟苄基、 2-氯苄基、4-氯苄基、2-溴苄基、4-溴苄基、2-碘苄基、4-碘苄基、2-甲基 节基、4-甲基苄基、4-羟基苄基、2-甲氧基苄基、3-甲氧基苄基、4-甲氧基 节基、3,4-二甲氧基苄基、2-三氟甲基苄基、4-三氟甲基苄基、4-苄氧基苄 基、2-硝基苄基、4-硝基苄基、2-氰基苄基、3-氰基苄基、4-氰基苄基、3-乙酰氨基苄基、4-乙酰氨基苄基、l-萘甲基、2-萘甲基、2- (2-氟苯基)乙 基、2- (4-氟苯基)乙基、2- (2-氣苯基)乙基、2- (4-氯苯基)乙基、2-
(2-溴苯基)乙基、2- (4-溴苯基)乙基、2- (2-碘苯基)乙基、2- (4-碘 苯基)乙基、2- (2-甲苯基)乙基、2- (4-甲苯基)乙基、2- (2-乙苯基) 乙基、2- (4-羟基苯基)乙基、2- (2-甲氧基苯基)乙基、2- (4-甲氧基苯 基)乙基、2- (3,4-二甲氧基苯基)乙基、2- (2-三氟甲基苯基)乙基、2-
(4-三氟甲基苯基)乙基、2- (4-苄氧基苯基)乙基、2- (2-硝基苯基)乙 基、2- (4-硝基苯基)乙基、2- (2-氰基苯基)乙基、2- (4-氰基苯基)乙 基、2- (2-乙酰氨基苯基)乙基及2- (4-乙酰氨基苯基)乙基，特别优选 2-氟苄基、4-氟苄基、2-氯苄基、4-氯苄基、2-溴苄基、4-溴苄基、2-碘苄 基、4-碘苄基、2-甲基苄基、4-甲基苄基、4-羟基苄基、2-甲氧基苄基、4-甲氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、2-三氟甲基苄基、4-三氟甲基苄基、4-节氧基节基、2-硝基节基、4-硝基苄基、2-氰基苄基、3-氰基苄基、4-氰基苄基、3-乙酰氨基苄基、4-乙酰氨基苄基、l-萘甲基及2-萘甲基。
作为上述R中可以具有取代基的杂芳烷基中的杂芳垸基，例如可以列 举2-吡啶基甲基、3-吡啶基甲基、3-吡啶基甲基、2-噻嗯基甲基、3-噻嗯 基甲基、2-咪唑基、4-咪唑基、2-噻嗯基甲基、3-B引哚基甲基、2-吡啶基乙 基、2-噻嗯基乙基、2-吡啶基丙基、2-吡啶基丁基等碳原子数为6~14的杂 芳基在碳原子数为1~6的烷基上进行取代而形成的杂芳烷基，但优选2-吡啶基甲基、2-噻嗯基甲基、3-吲哚基甲基、2-吡啶基乙基、2-噻嗯基乙基 等杂芳基在碳原子数为1 2的烷基上进行取代而形成的杂芳垸基，更优选 2-吡啶基甲基、2-噻嗯基甲基、3-吲哚基甲基等杂芳烷基在甲基上进行取 代而形成的杂芳烷基。还有，这些基团包括各种异构体。
作为上述R中可以具有取代基的杂芳烷基中的可具有取代基的杂芳 基，例如可以列举2-呋喃基、3-呋喃基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、 2-吡咯基、3-吡咯基、2-噻嗯基、3-噻嗯基、2-吲哚基、3-吲哚基、2-咪唑 基、4-咪唑基、3-吡唑基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、2-喹啉及3-喹啉基。
作为可以具有取代基的杂芳基的取代基，可以列举甲基、乙基、丙基、 丁基等碳原子数为1 4的烷基(还有，这些基团包括各种异构体)；羟基； 氯原子、溴原子、碘原子、氟原子等卤素原子；乙氧基等碳原子数为2 4 的烷氧基(还有，这些基团包括各种异构体)；氨基；硝基；氰基及三氟 甲基等碳原子数为1~4的卤化烷基。
作为这种可以具有取代基的杂芳基，可以具体地列举例如2- (3-甲基) 呋喃基、2- (4-甲基)呋喃基、2- (3-乙基)呋喃基、2- (4-乙基)呋喃基、 2- (3-氟)呋喃基、2- (3-氯)呋喃基、2- (3-羟基)呋喃基、2- (3-甲氧 基)呋喃基、2- (3-氨基)呋喃基、2- (3-硝基)呋喃基、2- (3-氰基)呋 喃基、2- (3-甲基)吡啶基、2- (4-甲基)吡啶基、2- (3-乙基)吡啶基、 2- (4-乙基)吡啶基、2- (3-氟)吡啶基、2- (4-氯)吡啶基、2誦(3-羟基) 吡啶基、2- (3-甲氧基)吡啶基、2- (3-氨基)吡啶基、2- (3-硝基)吡啶 基、2- (3-氰基)吡啶基、2- (3,5-二氯)吡啶基、3- (2-氯)吡啶基、2-(3-甲基)吡咯基及2- (3-甲基)噻嗯基等，但优选2- (3-甲基)呋喃基、 2- (3-氟)呋喃基、2- (3-甲基)吡啶基、2- (3-氟)吡啶基、2- (3-硝基) 吡啶基、2- (3-氰基)吡啶基及2- (3，5-二氯)吡啶基。作为这种可以具有取代基的杂芳烷基，可以具体地列举例如2- (3-甲
基)呋喃基甲基、2- (4-甲基)呋喃基甲基、2- (3-乙基)呋喃基甲基、2-(4-乙基)呋喃基甲基、2- (3-氟)呋喃基甲基、2- (3-氯)呋喃基甲基、 2- (3-羟基)呋喃基甲基、2- (3-甲氧基)呋喃基甲基、2- (3-氨基)呋喃 基甲基、2- (3-硝基)呋喃基甲基、2- (3-氰基)呋喃基甲基、2- (3-甲基) 吡啶基甲基、2- (4-甲基)吡啶基甲基、2画(3-乙基)吡啶基甲基、2- (4-乙基)吡啶基甲基、2- (3-氟)吡啶基甲基、2- (4-氯)吡啶基甲基、2-(3-羟基)吡啶基甲基、2- (3-甲氧基)吡啶基甲基、2- (3-氨基)吡啶基 甲基、2- (3-硝基)吡啶基甲基、2- (3-氰基)吡啶基甲基、2- (3,5-二氯) 吡啶基甲基、3- (2-氯)吡啶基甲基、2- (3-甲基)吡咯基甲基及2- (3-甲基)噻嗯基甲基等，但优选2- (3-甲基)呋喃基甲基、2- (3-氟)呋喃 基甲基、2- (3-甲基)吡啶基甲基、2- (3-氟)吡啶基甲基、2- (3-硝基) 吡啶基、2- (3-氰基)吡啶基甲基及2- (3，5-二氯)吡啶基甲基。
作为上述R中可以具有取代基的芳基中的芳基，可以列举苯基、萘基、 蒽基、菲基、联苯基及联萘基。
作为可以具有取代基的芳基中的取代基的，可以列举甲基、乙基、丙 基、丁基等碳原子数为1~4的垸基(还有，这些基团包括各种异构体)； 羟基；氯原子、溴原子、碘原子、氟原子等卤素原子；乙氧基等碳原子数 为2 4的垸氧基(还有，这些基团包括各种异构体)；二氧化亚甲基等碳 原子数为1 4的二氧化亚烷基；硝基；氰基及三氟甲基等碳原子数为1~4 的卤化垸基。
作为这种可以具有取代基的芳基，可以具体地列举例如2-甲苯基、3-甲苯基、4-甲苯基、2,3-二甲苯基、2,6-二甲苯基、2，4-二甲苯基、3，4匿二甲 苯基、三甲苯基、2-羟基苯基、3-羟基苯基、4-羟基苯基、2,3-二羟基苯基、 2,4-二羟基苯基、3,4-二羟基苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、2，3-二氯苯基、2，4-二氯苯基、3，4-二氯苯基、3，5-二氯苯基、2-溴苯基、3-溴 苯基、4-溴苯基、2-碘苯基、3-碘苯基、4-碘苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、 4-氟苯基、2,3-二氟苯基、2，4-二氟苯基、3，4-二氟苯基、3-溴-5-氯-2-羟基 苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，3-二甲氧基苯基、 2,4-二甲氧基苯基、3,4-二甲氧基苯基、3,5-二甲氧基苯基、3,4-二氧化亚甲基苯基、4-乙氧基苯基、4-丁氧基苯基、4-异丙氧基苯基、1-苯氧基苯基、4-苄氧基苯基、4-三氟甲基苯基、2-硝基苯基、3-硝基苯基、4-硝基苯基、 4-氰基苯基、4-甲氧羰基苯基、1-萘基及2-萘基等，但优选苯基、2-甲苯 基、3-甲苯基、4-甲苯基、2，3-二甲苯基、2-羟基苯基、3-羟基苯基、4-羟 基苯基、2,3-二羟基苯基、2，4-二羟基苯基、3，4-二羟基苯基、2-氯苯基、3- 氯苯基、4-氯苯基、2,3-二氯苯基、2，4-二氯苯基、3，4-二氯苯基、3,5-二 氯苯基、2-溴苯基、3-溴苯基、4-溴苯基、2-碘苯基、3-碘苯基、4-碘苯基、2- 氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、3，4-二氟苯基、3-溴-5-氯-2-羟基苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2,3-二甲氧基苯基、2，4-二甲 氧基苯基、3，4-二甲氧基苯基、3,5-二甲氧基苯基、3,4-二氧化亚甲基苯基、4- 乙氧基苯基、4-三氟甲基苯基、4-硝基苯基、4-氰基苯基、1-萘基及2-萘基，更优选苯基、2-甲苯基、3-甲苯基、4-甲苯基、2,3-二甲苯基、4-羟 基苯基、3,4-二羟基苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、2,3-二氯苯基、 2,4-二氯苯基、3,4-二氯苯基、3，5-二氯苯基、2-溴苯基、3-溴苯基、4-溴苯 基、4-碘苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、3，4-二氟苯基、2-碘苯基、 3_碘苯基、4-碘苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2,3-二甲氧基苯基、2,4-二甲氧基苯基、3，4-二甲氧基苯基、3，5-二甲氧基苯基、 3,4-二氧化亚甲基苯基、4-三氟甲基苯基、4-硝基苯基、l-萘基、2-萘基及3- 吡啶基，特别优选苯基、2-甲苯基、3-甲苯基、4-甲苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、2,3-二氯苯基、2,4-二氯苯基、3，4-二氯苯基、3,5-二氯 苯基、2-溴苯基、3-溴苯基、4-溴苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、 3,4-二氟苯基、2-碘苯基、3-碘苯基、4-碘苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基 苯基、4-甲氧基苯基、2,3-二甲氧基苯基、3，4-二甲氧基苯基、3，5-二甲氧 基苯基或3,4-二氧化亚甲基苯基。作为上述R中可以具有取代基的杂芳基中的杂芳基，例如可以列举 2-呋喃基、3-呋喃基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-吡咯基、3-吡咯 基、2-噻嗯基、3-噻嗯基、2』引噪基、3』引哚基、2-咪唑基、4-咪唑基、3-吡唑基、2-嘧啶基、4-嘧啶基及喹啉基。作为可以具有取代基的杂芳基的取代基，可以列举甲基、乙基、丙基、 丁基等碳原子数为1~4的垸基(还有，这些基团包括各种异构体)；羟基;氯原子、溴原子、碘原子、氟原子等卤素原子；乙氧基等碳原子数为2~4 的烷氧基(还有，这些基团包括各种异构体)；氨基；硝基；氰基及三氟 甲基等碳原子数为1 4的卤化烷基。作为这种可以具有取代基的杂芳基，可以具体地列举例如2-(3-甲基) 呋喃基、2- (4-甲基)呋喃基、2- (3-乙基)呋喃基、2- (4-乙基)呋喃基、 2- (3-氟)呋喃基、2- (3-氯)呋喃基、2- (3-羟基)呋喃基、2- (3-甲氧 基)呋喃基、2- (3-氨基)呋喃基、2- (3-硝基)呋喃基、2- (3-氰基)呋 喃基、2- (3-甲基)吡啶基、2醫(4-甲基)吡啶基、2- (3-乙基)吡啶基、 2- (4-乙基)吡啶基、2- (3-氟)吡啶基、2- (4-氯)吡啶基、2- (3-羟基) 吡啶基、2- (3-甲氧基)吡啶基、2- (3-氨基)吡啶基、2- (3-硝基)吡啶 基、2- (3-氰基)吡啶基、2- (3,5-二氯)吡啶基、3- (2-氯)吡啶基、2-(3-甲基)吡咯基及2- (3-甲基)噻嗯基等，但优选2- (3-甲基)呋喃基、 2- (3-氟)呋喃基、2- (3-甲基)吡啶基、2- (3-氟)吡啶基、2- (3-硝基) 吡啶基、2- (3-氰基)吡啶基及2- (3,5-二氯)吡啶基。化合物(I)中的R'表示可以具有取代基的烷基。上述R1中可以具有取代基的烷基中的烷基是直链状或支化链状的碳 原子数为1 10的垸基，例如可以列举甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、 己基、庚基、辛基、壬基、癸基之类的烷基，优选甲基、乙基、正丙基、 异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基等直链状或支化链状 的碳原子数为1 6的烷基，更优选甲基、乙基、正丙基、正丁基、异丁基 等直链状或支化链状的碳原子数为1~4的烷基。还有，这些基团包括各种 异构体。作为可以具有取代基的烷基中的取代基，例如可以列举氟原子、氯原 子、溴原子、碘原子等卤素原子；羟基；甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧 基等碳原子数为1~4的垸氧基；二甲氨基、二乙氨基等被碳原子数为1~6 的烷基二取代的二垸基氨基；及氰基，但是优选氟原子、氯原子、甲氧基、 乙氧基、羟基及氰基，更优选氟原子、氯原子、甲氧基及乙氧基。作为这种可以具有取代基的垸基，可以具体地列举例如氟甲基、2-氟 乙基、2-氯乙基、2,2-二氟乙基、2,2-二氯乙基、2,2,2-三氯乙基、2,2,2-三 氟乙基、2-甲氧基乙基、2-乙氧基乙基、甲氧基甲基、2-羟基乙基、2-氰基乙基、2-溴乙基、2-二甲氨基、2-氯丙基、3-氯丙基等，优选2-氯乙基、 2,2,2-三氯乙基、2，2，2-三氟乙基、甲氧基甲基、2-甲氧基乙基及2-乙氧基 乙基。关于本发明的反应中使用的脂肪酶，优选使用可从酵母或细菌中分离 的微生物的脂肪酶，更优选源于洋葱伯克霍尔德菌(假单胞菌)的脂肪酶 (例如，AmanoPS (77乂工yfV厶社制)等)。另外，关于本发明的 反应中使用的蛋白酶，可以使用例如源于脊椎动物的胰脏、米曲霉 (Aspergillus Olyzae)、蜂蜜曲霉(Aspergillus Melleus)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)、嗜熟脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)等的蛋白酶。还有，脂肪酶或蛋白酶可以直接使用天然形态或作为固定化酶的市售 制品，可以单独使用或两种以上混合使用。另外，也可以将市售制品中的 酶固定剂除去后进行使用。关于上述脂肪酶或蛋白酶，也可以对天然形态的物质或作为固定化酶 的市售制品进行化学处理或物理处理后进行使用。作为上述化学处理或物理处理的方法，可以具体地列举例如使脂肪酶 或蛋白酶溶解在缓冲液中(必要时也可以存在有机溶剂)，直接或搅拌后 进行冷冻干燥等方法。还有，冷冻干燥是将水溶液及含有水分的物质迅速 冷却到冰点以下的温度，减压至该冷冻物的水蒸汽压以下，通过升华除去 水，从而对物质进行干燥的方法(例如，参见非专利文献3)。还有，通过 该处理，可以提高催化剂活性(反应性及选择性等)。作为上述缓冲液，例如可以列举磷酸钠水溶液、磷酸钾水溶液等无机 盐的水溶液；醋酸钠水溶液、醋酸铵水溶液、柠檬酸钠水溶液等有机酸盐 的水溶液，但优选使用磷酸钠水溶液、磷酸钾水溶液、醋酸铵水溶液。还 有，这些缓冲液可以单独使用或两种以上混合使用。上述缓冲液的浓度优选为0.01~2摩尔/L，更优选为0.05~0.5摩尔/L， 缓冲液的pH值优选为4~9，更优选为7 8.5。冷冻时使用的缓冲液的量没有特别的限制，只要是能够完全溶解脂肪 酶或蛋白酶的浓度即可，但优选相对于lg脂肪酶或蛋白酶为 10ml 1000ml，更优选为10ml 100ml。上述脂肪酶或蛋白酶的使用量相对于lg化合物(I)优选为0.1~1000mg，更优选为1 200mg。本发明的反应是在脂肪酶或蛋白酶的存在下，在有机溶剂中进行。在 本发明的反应中，脂肪酶或蛋白酶涉及在反应溶液中实质上以悬浮态存在 下进行的反应，但是溶解时也没有问题。还有，本发明中的"有机溶剂" 是指水解中使用的反应溶剂为有机溶剂，并且从反应体系中除去脂肪酶或 蛋白酶(也存在含有固定剂的情况)及结晶析出的生成物等后，有机溶剂 中溶解的液体部分表现为不发生相分离的状态(即，水(也可以含有后述 的无机盐或有机盐)、基质及有机溶剂形成一个相的状态)。作为本发明的反应中使用的水，通常可以使用离子交换水或蒸馏水等 精制水，但是水中也可以含有磷酸钠、磷酸钾等无机盐，或醋酸钠、醋酸 铵、柠檬酸钠等有机盐。关于这些无机盐或有机盐的量，优选以相对于水 为0.01 10mol/L的量进行使用，更优选0.1 lmol/L。还有，也可以预先将 上述无机盐或有机盐溶解在水中，配制成缓冲液后用于反应。上述水的使用量是所使用的有机溶剂的溶解度以下的量(因为如果超 过溶解度，则液体部分会产生相分离)，上限随化合物(I)的种类而变化， 但优选相对于化合物(I) 1摩尔为0.5-10摩尔，更优选为0.5~5.0摩尔， 进一步优选为1.0~3.0摩尔，特别优选为1.5~2.5摩尔。还有，虽然取决于 化合物(I)的种类，但水的使用量相对于化合物(I) 1摩尔超过10摩尔 时，例如会导致使光学纯度下降的化合物(I)的本身水解、水稍微不溶于 有机溶剂而呈现悬浮状态(液体部分产生相分离的状态)，从而出现了不 能期待进行长时间反应等的状态，因此应当将水的使用量调节到有机溶剂 的溶解度以下，优选10摩尔以下。作为上述有机溶剂，例如可以列举正戊烷、正己烷、正庚烷、正辛垸、 环戊垸、环己烷及环戊烷等脂肪族烃类；苯、甲苯及二甲苯等芳香族烃类; 二乙基醚、叔丁基甲基醚、二异丙基醚、环戊基甲基醚、四氢呋喃及1，4-二噁烷等醚类；丙酮及甲乙酮等酮类，但优选正己烷、正庚垸、环戊垸、 环己烷、甲苯、二异丙基醚、叔丁基甲基醚及环戊基甲基醚，特别优选环 己垸、甲苯及叔丁基甲基醚。还有，这些有机溶剂可以单独使用或两种以 上混合使用。上述有机溶剂的使用量相对于lg化合物(I)优选为2 200mL，更优选为5~80mL。上述水和有机溶剂的比率没有特别限制，所使用的水量是 相对于有机溶剂的溶解度以下的量(即，低于在有机溶剂中达到饱和的量) 即可。本发明的反应最好在有表面活性剂的存在下进行。作为使用的表面活 性剂，例如可以使用聚乙二醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯月桂基醚、聚 乙烯鲸蜡基醚、聚氧乙烯辛基苯基醚等非离子性表面活性剂；3-[ (3-氯酰 胺丙基)-二甲基铵基]-2-羟基-1-丙磺酸盐、3-[ (3-氯酰胺丙基)-二甲基铵 基]-l-丙磺酸盐等两性表面活性剂；二辛基磺基琥珀酸酯钠盐、十二垸基 磺酸钠、三(羟甲基)氨基甲垸十二烷基硫酸盐等阴离子表面活性剂；鲸 蜡基三甲基溴化铵及鲸蜡基二甲基乙基溴化铵等阳离子表面活性剂，但优 选非离子表面活性剂，更优选聚乙二醇、聚乙烯鲸蜡基醚、聚氧乙烯辛基 苯基醚，特别优选聚氧乙烯辛基苯基醚。还有，这些表面活性剂可以单独 使用或两种以上混合使用。上述表面活性剂的使用量相对于lg化合物(0优选为10 1000mg， 更优选为50 200mg。本发明的反应可以按以下方法进行，例如将化合物(1)、脂肪酶或蛋 白酶、水(如果需要，可以含有无机盐或有机盐)及有机溶剂进行混合， 一边搅拌一边进行反应等。此时的反应温度优选为0 8(TC，更优选为10 50 。C，特别优选30 45t:，反应压力没有特别限制。还有，反应中脂肪酶或 蛋白酶实质上为悬浮液状态，另外，虽然也取决于化合物(I)的种类，反 应进行的同时化合物(I)可能形成白色固体而沉淀，但是这些悬浮及沉淀 对反应没有什么影响。对于由本发明的反应得到的化合物(II)及化合物(III)，例如反应完 成后化合物(II)析出时，可以在反应液中添加适当的有机溶剂(例如， 乙腈、丙酮等)并进行过滤，得到化合物(11)，通过浓縮有机层来得到化 合物(m)。另外，当反应完成后，化合物(II)不析出时，例如调节pH值，用水萃取出化合物(n)，再调节pH值并用有机溶剂进行萃取，将得到的有机层浓縮，得到化合物(II),通过对用水萃取化合物(II)时分离的有机层进行浓縮，可以得到化合物(ni)。还有，对于得到的化合物(n) 及化合物(m)，可以通过晶析、重结晶、蒸馏、柱色谱等常规方法进行进一步精制。在本发明中，从水和通过反应生成的上述通式(II)表示的光学活性(S或R) -a-氨基酸和上述通式(III)表示的光学活性(R或S) -cc-氨基 酸酯的混合物中分别分离出各物质后，通过使得到的光学活性(R或S)-a-氨基酸酯和酸反应，可以制得光学活性(R或S) -a-氨基酸酯的酸盐。作为可以用于上述反应的酸，例如可以列举盐酸、硫酸、醋酸、对甲 苯磺酸、草酸、甲酸及碳酸，但优选使用盐酸。上述酸的使用量相对于1摩尔化合物(III)优选为0.5 2.0摩尔，更 优选为0.9 1.5摩尔。另外，上述反应优选在有机溶剂中进行。作为这种有机溶剂，例如可 以列举选自醚类、酮类、酯类、脂肪族烃类及芳香族烃类的至少一种有机 溶剂。上述有机溶剂的使用量相对于lg化合物(III)优选为1 50mL，更优 选为3 20mL。上述反应可以按以下方法进行，例如将化合物(III)、酸及有机溶剂 进行混合， 一边搅拌一边进行反应。此时的反应温度优选为-20 8(TC，更 优选为-10 50'C，特别优选-5 4(TC，反应压力没有特别限制。对于通过本发明的反应得到的光学活性(R或S) -oc-氨基酸酯的酸盐， 可以通过晶析、重结晶、蒸馏、柱色谱等常规方法进行进一步精制。实施例以下，列举实施例对本发明进行具体说明，但本发明的范围并不局限 于这些实施例。参考例1 (2-氨基-3-苯基丙酸乙酯(外消旋体混合物)的合成)在乙醇10.0mL (171mmo1)中，添加2-氨基-3-苯基丙酸(外消旋体 混合物)2.00g (12.1mmo1)及浓硫酸1.42g (14.5mmo1)， 一边搅拌一边 在60。C下反应4小时。反应完成后，对得到的反应液进行减压浓縮，然后 添加6mol/L的氢氧化钠水溶液，将反应液的pH值调节到8.5。接着添加 叔丁基甲基醚10mL及水4mL进行萃取，用无水硫酸镁干燥有机层。过滤 后对滤液进行减压浓縮，得到作为无色液体的2-氨基-3-苯基丙酸乙酯(外消旋体混合物)2.34g (以2-氨基-3-苯基丙酸(外消旋体混合物)为基准 的分离收率89.0%)。还有，2-氨基-3-苯基丙酸乙酯(外消旋体混合物)的物性值如下。 H画NMR (S (ppm)， CDC13): 1.22 (t， 3H， J=7.1Hz)、 2.85 (dd， 1H, J=7.8、 13.5Hz)、 3,06 (dd， 1H， J=5.4、 13,5Hz)、 3.69 (dd， 1H， J=5.4、 7.8Hz)、 4.14 (q， 2H， J=7.1Hz)、 7.17-7.30 (m， 5H) 13C-NMR(S(ppm)， CDC13): 14.2， 41.2， 55.9， 60.8， 126.7， 128.5， 129.3， 137.4， 175.0MS (CI， i-C4H10) m/z: 194 (MH+)实施例1 ((S) -2-氨基-3-苯基丙酸及(R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯的合成) 在饱和了水的叔丁基甲基醚l.OOmL中，添加2-氨基-3-苯基丙酸乙酯 (外消旋体混合物)lOOmg (0.517mmol)、源于洋葱伯克霍尔德菌(假单 胞菌)的脂肪酶(AmanoLipasePS(商品名)，K !i 、_y于社制)20.0mg， 一边搅拌一边在3(TC下进行反应。156小时后，在反应混合物中添加丙酮 0.5mL进行过滤，得到(S) -2-氨基-3-苯基丙酸36.111^ (以2-氨基-3-苯基 丙酸乙酯(外消旋体混合物)为基准的分离收率42.2%)和脂肪酶的混 合物。用常规方法将(S) -2-氨基-3-苯基丙酸衍生为(S) -2- (2-呋喃甲酰 氨基)-3-苯基丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液相色谱测定光学纯 度时，结果为96.5。/。ee。用常规方法将(R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯衍生为(R) -2- (2-呋喃 甲酰氨基)-3-苯基丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液相色谱测定光 学纯度时，结果为89.5Mee。还有，本反应中的E值为170。高速液相色谱的分析条件光学活性2- (2-呋喃甲酰氨基)-3-苯基丙酸乙酯柱Chiralcel OJ-H (0.46cmOx25cm，夕、、一 ir少化学工业制)溶剂己烷/异丙醇(=8/2 (容量比))流速0.5mL/min温度30°C波长220nm另外，(S) -2-氨基-3-苯基丙酸的物性值如下。 'H-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 3.12 (dd， 1H， J=8.0、 14.5Hz)、 3.29 (dd， 1H， J=5.2、 14.5Hz)、 3.99 (dd， 1H， J=5.2、 8.0Hz)、 7.32-7.45 (m， 5H) 13C-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 39.2， 58.9， 130.5， 132.0， 132.2， 138.0， 176.8MS (CI， i-C4H10) m/z: 166 (MK) 比旋光度..[a]25D—26.5° (c0.5， H20)还有，将得到的光学活性2-氨基-3-苯基丙酸的.比旋光度和和光纯药工 业(株)目录中记载的(S) -2-氨基-3-苯基丙酸的比旋光度的符号([a]25D 一33.4 一35.0。 (c2， H20))进行比较，确定绝对构型。(R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯的物性值与参考例1中所示的值相同。高速液相色谱的分析条件.-光学活性2- (2-呋喃甲酰氨基)-3-苯基丙酸乙酯 柱Chiralcel OJ-H (0,46cmOx25cm，夕、Vir/^化学工业制) :己烷/异丙醇(=8/2 (容量比)) :0.5mL/min :3(TC :220nm，(S) -2-氨基-3-苯基丙酸的物性值与实施例1中所示的值相同。 (R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯的物性值与参考例1中所示的值相同。 参考例2 (2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)的合成)在乙醇lO.OmL (171mmo1)中，添加2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸(外 消旋体混合物)2.00g (10.9mmo1)及浓硫酸1.29g (13.1mmo1)， 一边搅 拌一边在6(TC下反应4小时。反应完成后，对得到的反应液进行减压浓縮， 然后添加6mol/L的氢氧化钠水溶液，将反应液的pH值调节到8.5。接着 添加醋酸乙酯10mL及水4mL进行萃取，用无水硫酸镁干燥有机层。过滤 后对滤液进行减压浓縮，得到作为无色液体的2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸 乙酯(外消旋体混合物)1.97g (以2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸(外消旋体 混合物)为基准的分离收率85.1%)。剂速度长外溶流温波另还有，2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)的物性值 如下。'H-NMR (5 (ppm)， CDC13): 1.25 (t， 3H， J=7.1Hz)、 2.88 (dd， 1H， J=7.8、 13.6Hz)、 3,07 (dd， 1H， J=5.5、 13.6Hz)、 3.71 (dd， 1H， J=5.5、 7.8Hz)、 4.17 (q， 2H， J=7.1Hz)、 6.91-7.00 (m， 3H)、 7.26 (m， 1H) 13C-NMR(5(ppm)， CDC13): 14.2， 40.8， 55.7， 61.1， 113.7， 113.8， 116.1， 116.3， 125.01， 125.02， 129.9， 130.0， 139.9， 140.0， 161.9， 163.9， 174.7 MS (CI， i-C4H10) m/z: 212 (MH+)实施例2 ((S) -2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (3-氟苯基) 丙酸乙酯的合成)在饱和了水的叔丁基甲基醚l.OmL中，添加2-氨基-3- (3-氟苯基)丙 酸乙酯(外消旋体混合物)100mg (0.473mmo1)、源于洋葱伯克霍尔德菌 (假单胞菌)的脂肪酶(Amano Lipase PS (商品名)，7"々Ki; 、乂于社制) 30.0mg，在30。C下迸行反应。48小时后，在反应混合物中添加丙酮0.5mL 进行过滤，得到(S) -2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸3Umg (以2-氨基-3-(3-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)为基准的分离收率40.5%) 和脂肪酶的混合物。用常规方法将(S) -2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸衍生为(S) -3- (3-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液 相色谱测定光学纯度时，结果为98.0%ee。用常规方法将(R) -2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸乙酯衍生为(R) -3-(3-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高 速液相色谱测定光学纯度时，结果为82.8%ee。 还有，本反应中的E值为258。高速液相色谱的分析条件光学活性3- (3-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯 柱Chiralcel OJ-H (0.46cmOx25cm，夕'^ ir少化学工业制) 溶剂己烷/异丙醇(=9/1 (容量比)) 流速0.5mL/min 温度30°C波长220nm另外，(S) -2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸的物性值如下。 'H-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 3.02 (dd， 1H， J=8.6、 14.6Hz)、 3.31 (dd， 1H， J=4.5、 14.6Hz)、 3.77 (dd， 1H， J=4.5、 8.6Hz)、 7,00 (m， 1H)、 7.08 (m， 1H)、 7.12 (m， 1H)、 7.34 (m， 1H) 13C-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 37.9， 57.3， 115.1， 115.2， 117.1， 117,3， 126.32， 126.34， 131.6， 131.7， 140.0， 140.1， 163.5， 165.5， 173.4 MS (CI， i-C4H10) m/z: 184 (MH+) 元素分析Cakd: C， 59.01%; H， 5,50%; N， 7.65% Found: C， 57.86%; H， 5.46%; N， 7.90% (R) -2-氨基-3- (3-氟苯基)丙酸乙酯的物性值与参考例2中所示的 值相同。参考例3 (2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)的合成)在乙醇10.0mL (171mmo1)中，添加2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸(外 消旋体混合物)2.00g (10.9mmo1)及浓硫酸1.29g (13.1mmo1)， 一边搅 拌一边在6(TC下反应4小时。反应完成后，对得到的反应液进行减压浓縮， 然后添加6mol/L的氢氧化钠水溶液，将反应液的pH值调节到8.5。接着 添加叔丁基甲基醚10mL及水4mL进行萃取，用无水硫酸镁干燥有机层。 过滤后对滤液进行减压浓缩，得到作为无色液体的2-氨基-3- (4-氟苯基) 丙酸乙酯(外消旋体混合物)1.95g (以2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸(外消 旋体混合物)为基准的分离收率84.6%)。还有，2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)的物性值 如下。'H-薩R (5 (ppm)， CDC13): 1.23 (t， 3H， J=7.1Hz)、 2.96 (dd， 1H，J=7.6、 13，7Hz)、 3.04 (dd， 1H， J=5.5、 13.7Hz)、 3.68 (dd， 1H， J=5.5、7.6Hz)、 4.16 (q， 2H， J=7.1Hz)、 6.99 (m， 2H)、 7.17 (m， 2H)13C-NMR(5(ppm)， CDC13): 14.2， 40.2， 55.9， 61.0， 115.2， 115.4， 130.75，130.81， 132.97， 133.00, 160.9， 162.9， 174.9MS (CI， i-C4H10) m/z: 212 (MH+)元素分析Calcd: C， 62.55%; H， 6.68%; N， 6.63%Found: C， 61.19%; H， 6.54%; N， 6.51% 实施例3 ((S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (4-氟苯基) 丙酸乙酯的合成)在饱和了水的叔丁基甲基醚1.0mL中，添加2-氨基-3- (4-氟苯基)丙 酸乙酯(外消旋体混合物)100mg (0.473mmo1)、源于洋葱伯克霍尔德菌 (假单胞菌)的脂肪酶(Amano Lipase PS (商品名)，7AKy :y于社制) 30.0mg， 一边搅拌一边在3(TC下进行反应。56小时后，在反应混合物中 添加丙酮0.5mL进行过滤，得到(S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸36.7mg (以2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)为基准的分离收 率42.3%)和脂肪酶的混合物。用常规方法将(S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸衍生为(S) -3- (4-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液 相色谱测定光学纯度时，结果为99.1%ee。用常规方法将(R) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯衍生为(R) -3-(4-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高 速液相色谱测定光学纯度时，结果为91.2n/。ee。 还有，本反应中的E值为698。高速液相色谱的分析条件光学活性3- (4-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯 柱Chiralcel OJ-H (0.46cm<Dx25cm，夕、Vir少化学工业制) 溶剂己烷/异丙醇(=8/2 (容量比)) 流速0.5mL/min温度30°C波长220nm另外，(S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸的物性值如下。 'H-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 3.00 (dd， 1H， J=8.5、 14.7Hz)、 3.27 (dd， 1H， J=4.5、 14.7Hz)、 3.74 (dd， 1H， J=4.5、 8.5Hz)、 7.05 (m， 2H)、 7.31 (m， 2H)13C-NMR (S (ppm)， CD3OD): 37.5， 57.6， 116.5， 116,6， 132.2， 132.3， 133.2， 133.3， 162.9， 164.6， 173.6MS (CI， i-C4H10) m/z: 184 (MH+) 元素分析Calcd: C， 59.01%; H， 5.50%; N， 7,65% Found: C， 58.73%; H， 5.49%; N， 7.68% (R) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯的物性值与参考例3中所示的 值相同。参考例4 (2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)的合成)在乙醇5.00mL (85.7mmo1)中，添加2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸(外 消旋体混合物)l.OOg (4.10mmo1)及浓硫酸482mg (4.92mmo1)， 一边搅 拌一边在6(TC下反应4小时。反应完成后，对得到的反应液进行减压浓縮， 然后添加6mol/L的氢氧化钠水溶液，将反应液的pH值调节到8.5。接着 添加叔丁基甲基醚10mL及水4mL进行萃取，用无水硫酸镁干燥有机层。 过滤后对滤液进行减压浓縮，得到作为无色液体的2-氨基-3- (4-溴苯基) 丙酸乙酯(外消旋体混合物)916mg (以2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸(外 消旋体混合物)为基准的分离收率82.5%)。还有，2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)的物性值 如下。'H-雨R (5 (ppm)， CDC13): 1.25 (t, 3H， J=7.1Hz)、 2.83 (dd, 1H， J=7.7、 13.7Hz)、 3.03 (dd， 1H， J=5.5、 13.7Hz)、 3.68 (dd， 1H， J=5.5、 7.7Hz)、 7.08 (m， 2H)、 7.42 (m， 2H)13C-NMR(S(ppm)， CDC13): 14.2， 40.4， 55.7， 6U， 120.8， 131.1， 131.7， 136.3， 174.7MS (CI， i-C4H10) m/z: 272 (Mf) 元素分析Calcd: C， 48.55%; H， 5.19%; N， 5.15% Found: C， 47.71%; H， 5.21%; N， 5.06% 实施例4 ((S) -2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (4-溴苯基) 丙酸乙酯的合成)在饱和了水的叔丁基甲基醚l.OmL中，添加2-氨基-3- (4-溴苯基)丙 酸乙酯(外消旋体混合物)200mg (0.367mmo1)、源于洋葱伯克霍尔德菌(假单胞菌)脂肪酶(Amano Lipase PS (商品名)，K !i 、7于社制) 30.0mg， 一边搅拌一边在3(TC下进行反应。56小时后，在反应混合物中200680030867.5说明书第24/34页添加丙酮0.5mL进行过滤，得到(S) -2-氨基-3-苯基丙酸36.2mg (以2-氨基-3-(4-溴苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)为基准的分离收率:41.8%) 和脂肪酶的混合物。用常规方法将(S) -2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸衍生为(S) -3- (4-溴苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液 相色谱测定光学纯度时，结果为98.5%ee。用常规方法将(R) -2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸乙酯衍生为(R) -3-(4-溴苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高 速液相色谱测定光学纯度时，结果为87.7%ee。还有，本反应中的E值为388。 高速液相色谱的分析条件光学活性3- (4-溴苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯柱Chiralcel OJ-H (0.46cmOx25cm，夕、V i /W七学工业制)溶剂己烷/异丙醇(=8/2 (容量比)) 流速0.5mL/min 温度30°C 波长220nm另外，(S) -2-氮基-3- (4-溴苯基)丙酸的物性值如下。 H-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 2.99 (dd， 1H， J=8,4、 14.6Hz)、 3.25 (dd， 1H， J=4.5、 14.6Hz)、 3.74 (dd， 1H， J=4.5、 8.4Hz)、 7.22 (m， 2H)、 7.48 (m， 2H)13C-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 37,7， 57.3， 122.2， 132.4， 133.0， 136.6， 173.5MS (CI， i-C4H10) m/z: 244 (MH+) 元素分析Calcd: C， 44.29%; H， 4.13%; N， 5.74% Found: C， 43.95%; H， 4.06%; N， 5.66% (R) -2-氨基-3- (4-溴苯基)丙酸乙酯的物性值与参考例4中所示的 值相同。参考例5 (2-氨基-3- (2-萘基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)的合成) 在乙醇9.0mL (154mmo1)中，添加2-氨基-3-(萘基)丙酸(外消旋体混合物)1.80g (8.36mmol)及浓硫酸1.23g (12.5mmol)，一边搅拌一 边在6(TC下反应6小时。反应完成后，对得到的反应液进行减压浓縮，然 后添加6mol/L的氢氧化钠水溶液，将反应液的pH值调节到8.5。接着添 加叔丁基甲基醚18mL及水4mL进行萃取，用无水硫酸镁干燥有机层。过 滤后对滤液进行减压浓缩，得到作为淡黄色液体的2-氨基-3- (2-萘基)丙 酸乙酯(外消旋体混合物)1.73g (以2-氨基-3- (2-萘基)丙酸(外消旋体 混合物)为基准的分离收率85.0%)。还有，2-氨基-3- (2-萘基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)的物性值如下。'H-丽R (S (ppm)， CDC13): 1.20 (t， 3H， J=7.1Hz)、 1.58 (s， 2H)、 3.00 (dd， 1H，风9、 13.5Hz)、 3.23 (dd， 1H， J=5,3、 13.5Hz)、 3.78 (dd， 1H， J=5.3、 7.9Hz)、 4.15 (q， 2H， J=7.1Hz)、 7.31 (dd， 1H， J=1.7、 8.4Hz)、 7.39-7.45 (m， 2H)、 7.64 (m， 1H)、 7.76-7.79 (m， 3H) 13C-NMR(5(ppm)， CDC13): 14.2， 40.2， 55.9， 61.0， 115.2， 115.4， 130.75， 130.81， 132.97， 133.00， 160.9， 162.9， 174.9 MS (EI) m/z: 243 (M+) MS (CI， i-C4H10) m/z: 244 (函+) 元素分析Calcd: C， 74.05%; H， 7.04%; N， 5.76% Found: C， 72.89%; H， 6.72%; N， 5.58% 实施例5 ((S) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (2-萘基)丙 酸乙酯的合成)在饱和了水的叔丁基甲基醚2.0mL中，添加2-氨基-3- (2-萘基)丙酸 乙酯(外消旋体混合物)200mg (0.822mmo1)、源于洋葱伯克霍尔德菌(假 单胞菌)脂肪酶(Amano Lipase PS(商品名)，7》H， 、7于社制)10.0mg， 一边搅拌一边在30'C下进行反应。168小时后，在反应混合物中添加叔丁 基甲基醚2.0mL进行清洗，得到(S) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸86.1mg (以2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)为基准的分离收 率43.0%)和脂肪酶的混合物。另外，过滤后对滤液进行减压浓縮，得到作为淡黄色液体的(R) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸乙酯110 mg (以2-氨基-3- (2-萘基)丙酸乙酯(外29消旋体混合物)为基准的分离收率55.0%)。用常规方法将(S) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸衍生为(S) -2- (2-呋喃 甲酰氨基)-3- (2-萘基)-丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液相色谱 测定光学纯度时，结果为99.3。/。ee。用常规方法将(R) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸乙酯衍生为(R) -2- (2-呋喃甲酰氨基)-2- (2-萘基)丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液相 色谱测定光学纯度时，结果为79.3%ee。还有，本反应中的E值为711。 高速液相色谱的分析条件光学活性3- (2-呋喃甲酰氨基)-3- (2-萘基)丙酸乙酯柱ChiralcelOJ-H (0.46cmOx25cm，夕、Vir^化学工业制)溶剂己烷/异丙醇(=8/2 (容量比))流速0,5mL/min温度30°C波长220nm另外，(S) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸的物性值如下。 'H-丽R (5 (ppm)， D20): 3.41 (dd， 1H， J=7.7、 14.6Hz)、 3.53 (dd， 1H， J=5.7、 14.6Hz)、 4.50 (dd， 1H， J=5.7、 7.7Hz)、 7,46 (d， 1H，风4Hz) 7.57-7.61 (m， 2H)、 7.84 (s， 1H)13C-NMR (5 (ppm)， D20): 38.6， 56.8， 129.4， 129.67， 130.0， 130.6，131.4， 131.8， 134.4， 135.4， 136.1， 174.0MS (EI) m/z: 215 (M+)MS (CI， i-C4H10) m/z: 216 (MH+)(R) -2-氨基-3- (2-萘基)丙酸乙酯的物性值与参考例5中所示的值相同。参考例6 (2-氨基-3- (3-吲哚基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)的合成)在乙醇5.0mL (85.6mmo1)中，添加2-氨基-3- (3』引哚基)丙酸(外 消旋体混合物)l.OOg (4.90mmo1)及浓硫酸0.96g (9,79mmo1)， 一边搅 拌一边在6(TC下反应4小时。反应完成后，对得到的反应液进行减压浓縮， 然后添加6mol/L的氢氧化钠水溶液，将反应液的pH值调节到8.5。接着添加叔丁基甲基醚10mL及水4mL进行萃取，用无水硫酸镁干燥有机层。 过滤后对滤液进行减压浓縮，得到作为无色液体的2-氨基-3- (3-吲哚基) 丙酸乙酯(外消旋体混合物)0.97g (以2-氨基-3- G』引哚基)丙酸(外消 旋体混合物)为基准的分离收率85.0%)。还有，2-氨基-3- (3』引哚基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)的物性值 如下。'H-丽R (3 (ppm)， D20): 1.21 (t， 3H， J=7.0Hz)、 1.63 (s， 2H)、 3.01 (dd， 1H， J=7.9、 14.4Hz)、 3.25 (dd， 1H， J=4.8、 14.4Hz)、 3.80 (dd，1H， J=4.8、 7.9Hz)、 4.14 (q， 2H， J=7.0Hz)、 6.90 (s， 1H)、 7,06-7.26 (m， 3H)、 7.59 (d， 1H， J=7.9Hz)、 9.07 (s， 1H)13C-NMR (S (ppm)， CDC13): 14.1， 49.4， 55.0， 61.0， 110.6， 111.4， 118.6，119.2， 121.8， 123.3， 127.5， 136.4， 175.4MS (EI) m/z: 232 (M+)MS (CI， i-C4H10) m/z: 233 (MH+)实施例6 ((S) -2-氨基-3- (3-吲哚基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (3-卩引哚基) 丙酸乙酯的合成)在饱和了水的叔丁基甲基醚4.0mL中，添加2-氨基-3- (3-吲哚基)丙 酸乙酯(外消旋体混合物)200mg (0,822mmo1)、源于洋葱伯克霍尔德菌 (假单胞菌)的脂肪酶(Amano Lipase PS (商品名)，7少K!i 、;/于社制) 10.0mg， 一边搅拌一边在3(TC下进行反应。108小时后，过滤反应混合物， 用叔丁基甲基醚2.0mL进行洗涤，得到(S) -2-氨基-3- (3』引哚基)丙酸 78.3mg (以2-氨基-3- (3』引哚基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)为基准的 分离收率44.5%)和脂肪酶的混合物。另外，过滤后对滤液进行减压浓缩，得到作为无色液体的(R) -2-氨 基-3- (3』引哚基)丙酸乙酯106mg (以2-氨基-3- (3-吲哚基)丙酸乙酯(外 消旋体混合物)为基准的分离收率53.0%)。用常规方法将(S) -2-氨基-3- (3-吲哚基)丙酸衍生为(S) -2- (2-氟苯基)-3- (3』引哚基)丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液相色谱 测定光学纯度时，结果为98.7%"。用常规方法将(R) -2-氨基-3- (3』引哚基)丙酸乙酯衍生为(R) -2-(2-氟苯基)-3- (3』引哚基)丙酸乙酯，使用釆用光学活性柱的高速液相色谱测定光学纯度时，结果为81.8%ee。 还有，本反应中的E值为392。高速液相色谱的分析条件光学活性2- (2-呋喃甲酰氨基)-3- (3』引哚基)丙酸乙酯 柱Chiralcel OJ-H (0.46cmd)x25cm，夕、V ir/P化学工业制)溶剂己烷/异丙醇(=8/2 (容量比))流速1.0mL/min 温度30°C 波长220nm另外，(S) -2-氨基-3- (3-刚哚基)丙酸的物性值如下。 'H-薩R (S (ppm), D20): 3.43 (dd， 1H, J=7.0、 15.4Hz)、 3.50 (dd， 1H， J=5.5、 15.4Hz)、 4.40 (dd， 1H， J=5.5、 7.0Hz)、 7.21-7.69 (m， 5H) 13C-NMR (5 (ppm)， D20): 29.2， 56.8， 109.7， 115.6， 121.8， 123.1， 125,8， 129.0， 130.1， 139.9， 175.1 MS (EI) m/z: 204 (M+) MS (CI， i-C4H10) m/z: 205 (MH+)(R) -2-氨基-3- G』引哚基)丙酸乙酯的物性值与参考例6中所示的 值相同。实施例7 ((S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (4-氟苯基) 丙酸乙酯的合成)在饱和了水的叔丁基甲基醚2.0mL中，添加2-氨基-3- (4-氟苯基)丙 酸乙酯(外消旋体混合物)200mg (0.947mmo1)、 a-糜蛋白酶l.Omg， 一 边搅拌一边在3(TC下进行反应。84小时后，过滤反应混合物，得到(S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸70.8mg (以2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯 (外消旋体混合物)为基准的分离收率40.8%)。用常规方法将(S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸衍生为(S) -3- (4-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液 相色谱测定光学纯度时，结果为98.1%"。用常规方法将(R) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯衍生为(R) -3-(4-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液相色谱测定光学纯度时，结果为83.3%ee。 还有，本反应中的E值为271。高速液相色谱的分析条件光学活性3- (4-氟苯基)-2- (2-呋喃甲酰氨基)丙酸乙酯 柱Chiralcel OJ-H (0.46cmOx25cm，夕、V "fe少化学工业制) 溶剂己垸/异丙醇(=9/1 (容量比)) 流速0.5mL/min 温度30°C波长220nm另外，(S) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸的物性值与实施例3中所示值 相同。(R) -2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯的物性值与参考例3中所示的 值相同。参考例7 (2-氨基-4-甲基戊酸乙酯(外消旋体混合物)的合成)在乙醇40mL (69mmo1)中，添加2-氨基-4-甲基戊酸(外消旋体混合 物)4.00g (8.36mmo1)及浓硫酸4.49g (61.0mmo1)， 一边搅拌一边在60 x:下反应6小时。反应完成后，对得到的反应液进行减压浓縮，然后添加 6mol/L的氢氧化钠水溶液，将反应液的pH值调节到8.5。接着添加二氯 甲烷40mL及水10mL进行萃取，用无水硫酸镁干燥有机层。过滤后对滤 液进行减压浓縮，得到作为无色液体的2-氨基-4-甲基戊酸乙酯(外消旋体 混合物)3.79g (以2-氨基-4-甲基戊酸(外消旋体混合物)为基准的分离 收率78.0%)。还有，2-氨基-4-甲基戊酸乙酯(外消旋体混合物)的物性值如下。 'H-NMR(S (ppm)， CDC13): 0.92-0.95 (m， 6H)、 1.28 (t， 3H， J=7.1Hz)、 1.39-1.45 (m， 1H)、 1.50 (s， 2H)、 1.53-1.59 (m， 1H)、 1.74-1.81 (m， 1H)、 3.45 (dd， 1H, J=5.6、 8.7Hz)、 4.17 (q、 2H、 J二7.1HZ) 13C-NMR (5 (ppm)， CDC13): 14.2， 21,9， 23.0， 24.8, 44.2， 52.9， 60.7, 176.7MS (CI， i-C4H10) m/z: 160 (MH+)实施例8 ((S) -2-氨基-4-甲基戊酸及(R) -2-氨基-4-甲基戊酸乙酯的合成) 在饱和了水的叔丁基甲基醚2.0mL中，添加2-氨基-4-甲基戊酸乙酯 (外消旋体混合物)画mg (0.63mmo1)、 a-糜蛋白酶l.Omg， 一边搅拌一边在3(TC下进行反应。64小时后，过滤反应混合物，用叔丁基甲基醚2.0mL进行洗涤，得到(S) -2-氨基-4-甲基戊酸37.1mg (以2-氨基-3- (4-氟苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)为基准的分离收率45.0°/。)。另外，过滤后对滤液进行减压浓縮，得到作为无色液体的(R) -2-氨基-4-甲基戊酸乙酯50mg (以2-氨基-4-甲基戊酸乙酯(外消旋体混合物)为基准的分离收率50.0%)。用常规方法将(S) -2-氨基-4-甲基戊酸衍生为(S) -2-苯甲酰氨基-4-甲基戊酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液相色谱测定光学纯度时，结果为98.2%ee。用常规方法将(R) -2-氨基-4-甲基戊酸乙酯衍生为(R) -2-苯甲酰氨 基-4-甲基戊酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液相色谱测定光学纯度 时，结果为88.8。/。ee。还有，本反应中的E值为323。 高速液相色谱的分析条件光学活性2-苯甲酰氨基-4-甲基戊酸乙酯柱Chiralcel OD-H (0.46cmOx25cm，夕、V七/W七学工业制)溶剂己垸/异丙醇(=9/1 (容量比))流速0.5mL/min温度30°C 波长220nm另外，(S) -2-氨基-4-甲基戊酸的物性值如下。 'H-NMR (5 (ppm)， D20): 0.96-1.01 (m， 6H)、 1.74-1.90 (m， 3H)、 4.11 (m， 1H)13C-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 23.9， 24.5， 26.8， 41.6， 54.3， 175,2 MS (CI， i-C4H10) m/z: 132 (MH4) 元素分析Calcd: C， 54.94%; H， 9,99%; N， 10.68% Found: C， 54.42%; H， 9.83%; N， 10.73%(R) -2-氮基-4-甲基戊酸乙酯的物性值与参考例7中所示的值相同。参考例8 (2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)的合 成)在乙醇6.0mL (103mmo1)中，添加2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸 (外消旋体混合物)600mg (3.07mmo1)及浓硫酸603mg (6.15mmo1)， 一边搅拌一边在6(TC下反应4小时。反应完成后，对得到的反应液进行减 压浓缩，然后添加6mol/L的氢氧化钠水溶液，将反应液的pH值调节到 8.5。接着添加叔丁基甲基醚6mL及水2mL进行萃取，用无水硫酸镁干燥 有机层。过滤后对滤液进行减压浓縮，得到作为无色液体的2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)618mg (以2-氨基-3- (4-甲氧 基苯基)丙酸(外消旋体混合物)为基准的分离收率90.0%)。还有，2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)的物 性值如下。'H-NMR (S (ppm)， CDC13): 1.25 (t, 3H， J=7.1Hz)、 1.58 (s， 2H)、 2.82 (dd， 1H， J=7.8、 13.7Hz)、 3.02 (dd， 1H， J=5.4、 13.7Hz)、 3.66 (dd， 1H， J=5.4、 7.8Hz)、 3.79 (s， 3H)、 1.17 (q， 2H， J=7.1Hz)、 6.82-6.86 (m， 2H)、 7,10-7.12 (m， 2H) 13C-NMR (5 (ppm)， CDC13): 14.2， 40.3， 55.3， 56.1， 60.9， 114.0， 129.3， 130.3， 158.6， 175.1 MS (CI， i-C4H10) m/z: 224 (MPf) 元素分析Calcd: C， 64.55%; H， 7.67%; N， 6.27% Found: C， 64.27%; H， 7.27%; N， 6.17% 实施例9 ((S) -2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸及(R) -2-氨基-3- (4-甲 氧基苯基)丙酸乙酯的合成)在饱和了水的叔丁基甲基醚4.0mL中，添加2-氨基-3-(4-甲氧基苯基) 丙酸乙酯(外消旋体混合物)200mg (0.900mmo1)、源于洋葱伯克霍尔德 菌(假单胞菌)的脂肪酶(Amano Lipase PS (商品名)，7小K U 、7于社 制)10.0mg， 一边搅拌一边在30。C下进行反应。96小时后，过滤反应混 合物，用叔丁基甲基醚2.0mL进行洗涤，得到(S) -2-氨基-3- (4-甲氧基 苯基)丙酸90.0mg (以2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯(外消旋体混合物)为基准的分离收率48.6%)和脂肪酶的混合物。另外，过滤后对滤液进行减压浓縮，得到作为淡黄色液体的(R) -2-氨基_3_ (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯100mg (以2-氨基-3- (4-甲氧基苯基) 丙酸乙酯(外消旋体混合物)为基准的分离收率50.0°/。)。用常规方法将(S) -2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸衍生为(S) -2-(2-呋喃甲酰氨基)-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯，使用采用光学活性柱 的高速液相色谱测定光学纯度时，结果为99.0%ee。用常规方法将(R) -2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯衍生为(R) -2- (2-呋喃甲酰氨基)-2- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯，使用采用光学活性 柱的高速液相色谱测定光学纯度时，结果为98.8。/。ee。还有，本反应中的E值为1042。高速液相色谱的分析条件光学活性3- (2-呋喃甲酰氨基)-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯 柱Chiralcel OJ-H (0.46cmd)x25cm，夕、V i /W七学工业制) 溶剂己垸/异丙醇(=8/2 (容量比)) 流速0.5mL/min 温度30°C 波长220nm另外，(S) -2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸的物性值如下。 'H-固R (S (ppm)， CD3OD): 3.20 (dd， 1H， J=7.4、 14.7Hz)、 3.30 (dd， 1H， J=5.6、 14.7Hz)、 4.36 (dd， 1H， J=5.6、 7.4Hz)、 5.06 (s, 3H)、 7.00-7.02 (m， 2H)、 7.27-7.29 (m， 2H)13C-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 37,6， 57,0， 58.4， 117.6， 129.2， 133.7， 161.4， 174.1MS (EI) m/z: 195 (M+) MS (CI， i-C4H10) m/z: 196 (MH+) 元素分析Calcd: C， 61.53%; H， 6.71%; N， 7.18% Found: C， 60.40%; H， 6.56%; N， 7,04% (R) -2-氨基-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯的物性值与参考例8中所 示的值相同。实施例10 ((R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯盐酸盐的合成)在饱和了水的叔丁基甲基醚80mL中，添加2-氨基-3-苯基丙酸乙酉旨(外 消旋体混合物)4.00g (20.7mmo1)、源于洋葱伯克霍尔德菌(假单胞菌) 的脂肪酶(Amano Lipase PS (商品名)，7V^卜、、iJ y^社制)800mg， 一 边搅拌一边在3(TC下进行反应。168小时后，过滤反应混合物，用硫酸镁 进行干燥，然后进行过滤、减压浓縮，在残渣中加入环己垸12mL。在0 。C下向得到的环己烷溶液中添加盐酸乙醇溶液(盐酸含量为24.3重量％) 1.52g (盐酸lO.lmmoI)，在相同温度下搅拌1小时。过滤反应混合物，得 到作为白色结晶的(R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯盐酸盐1.90g (以2-氨基 -3-苯基丙酸乙酯(外消旋体混合物)为基准的分离收率40.0%)。用常规方法将(R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯盐酸盐衍生为(R) -2- (2-呋喃甲酰氨基)-3-苯基丙酸乙酯，使用采用光学活性柱的高速液相色谱测 定光学纯度时，结果为97.P/。ee。 高速液相色谱的分析条件光学活性3- (2-呋喃甲酰氨基)-3- (4-甲氧基苯基)丙酸乙酯柱ChiralcdOJ-H (0,46cmOx25cm，夕、、一 ir/W七学工业制)溶剂..己烷/异丙醇(=8/2 (容量比))流速0.5mL/min温度30°C波长220nm另外，(R) -2-氨基-3-苯基丙酸乙酯盐酸盐的物性值如下。 H-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 1.27 (t， 3H， J=7.2Hz)、 3.26 (dd， 1H， J=7.3、 14.5Hz)、 3.33 (dd， 1H， J=6.2、 14.5Hz)、 4,30 (q， 4H， J=7.2Hz)、 4.40 (dd， 1H， J=6.2、 7.3Hz)、 7.30-7.47 (m， 5H) "C-NMR (5 (ppm)， CD3OD): 16.0， 38.5， 57.0， 66.4， 130.9， 132,0， 132.2， 136.6， 172.4 MS (CI， i-C4H10) m/z: 194 (Mf) 元素分析Calcd: C， 57.52%; H， 7.02%; N， 6.10% Found: C， 57.29%; H， 6.81%; N， 6.13%工业实用性本发明涉及由a-氨基酸酯(外消旋体混合物)同时获得光学活性(S 或R) -a-氨基酸和作为其对映体酯的光学活性(R或S) -a-氨基酸酯的方法。这些光学活性(X-氨基酸及其酯是可以用作具有生理活性的肽及内酰胺类抗生素的原料或合成中间体的化合物。
权利要求
1、一种通式(II)表示的光学活性(S或R)-α-氨基酸及通式(III)表示的光学活性(R或S)-α-氨基酸酯的制造方法，其特征在于，在脂肪酶或蛋白酶的存在下，在有机溶剂中使水和通式(I)表示的作为外消旋体混合物的α-氨基酸酯的对映体中的仅一种进行反应；式中，R表示可以具有取代基的烷基、烯基、炔基、环烷基、芳烷基、杂芳烷基、芳基或杂芳基，R1表示可以具有取代基的烷基；式中，R与上述同义，*表示不对称碳原子；式中，R及R1与上述同义，*表示不对称碳原子，但是具有与通式(II)的化合物相反的立体绝对构型。
2、 根据权利要求1所述的制造方法，其中，使用的水量相对于作为外消旋体混合物的a-氨基酸酯1摩尔为0.5~10摩尔。
3、 根据权利要求1或2所述的制造方法，其中，月旨肪酶是源于Burkholderia cepacia (Pseudomonas cepacia)的月旨肪酶。
4、 根据权利要求1所述的制造方法，其中， 反应体系内存在缓冲液。
5、 根据权利要求4所述的制造方法，其中，缓冲液是选自磷酸钠、磷酸钾、醋酸钠、醋酸铵及柠檬酸钠中的至少 一种物质的水溶液。
6、 根据权利要求1~5中任一项所述的制造方法，其中， 脂肪酶或蛋白酶在缓冲液的存在下经过冷冻干燥。
7、 根据权利要求1~6中任一项所述的制造方法，其中， 反应中存在选自非离子表面活性剂、两性表面活性剂、阴离子表面活性剂及阳离子表面活性剂中的至少一种表面活性剂。
8、 根据权利要求1 7中任一项所述的制造方法，其中， R是可以具有取代基的苄基。
9、 根据权利要求1~8中任一项所述的制造方法，其中， R1是可以具有取代基的甲基或乙基。
10、 根据权利要求9所述的制造方法，其中， R1中的取代基是氯原子或垸氧基。
11、 根据权利要求1 10中任一项所述的制造方法，其中， 有机溶剂使用选自醚类、酮类、酯类、脂肪族烃类及芳香族烃类中的至少一种。
12、 根据权利要求1~10中任一项所述的制造方法，其中， 有机溶剂是叔丁基甲基醚。
13、 根据权利要求1所述的制造方法，其中，将通过权利要求1所述的反应生成的通式(II)表示的光学活性(S 或R) -a-氨基酸和通式(III)表示的光学活性(R或S) -a-氨基酸酯从它 们的混合物中分别分离出来； (n)式中，R与上述同义，*表示不对称碳原子;o(迈)3式中，R及R'与上述同义，*表示不对称碳原子，但是具有与通式(II) 的化合物相反的立体绝对构型。
14、 一种光学活性(R或S) -ct-氨基酸酯的酸盐的制造方法，其特征 在于，将通式(II)<formula>formula see original document page 4</formula>表示的光学活性(S或R) -a-氨基酸和通式(III)<formula>formula see original document page 4</formula>表示 的光学活性(R或S) -a-氨基酸酯从它们的混合物中分别分离出来，然后 使得到的光学活性(R或S) -a-氨基酸酯与酸进行反应；式中，R表示可以具有取代基的垸基、烯基、炔基、环烷基、芳烷基、杂 芳烷基、芳基或杂芳基，*表示不对称碳原子；式中，R与上述同义，W表示可以具有取代基的烷基，*表示不对称碳原 子，但是具有与通式(II)的化合物相反的立体绝对构型。
15、 根据权利要求14所述的制造方法，其中，酸为选自盐酸、硫酸、醋酸、对甲苯磺酸、草酸、甲酸及碳酸中的至 少一种。
16、 根据权利要求15所述的制造方法，其中， 酸为盐酸。
17、 根据权利要求14所述的制造方法，其中， 反应在有机溶剂中进行。
18、 根据权利要求17所述的制造方法，其中，有机溶剂为选自醚类、酮类、酯类、脂肪族烃类及芳香族烃类中的至少一种。
全文摘要
本发明涉及通式(II)表示的光学活性(S或R)-α-氨基酸及通式(III)表示的光学活性(R或S)-α-氨基酸酯的制造方法，其特征在于，在脂肪酶或蛋白酶的存在下，在有机溶剂中使水和通式(I)表示的作为外消旋体混合物的α-氨基酸酯的对映体中的仅一种进行反应；式(Ⅰ)中，R表示可以具有取代基的烷基、烯基、炔基、环烷基、芳烷基、杂芳烷基、芳基或杂芳基，R¹表示可以具有取代基的烷基；式(Ⅱ)中，R与上述同义，*表示不对称碳原子；式(Ⅲ)中，R及R¹与上述同义，*表示不对称碳原子，但是具有与通式(II)的化合物相反的立体绝对构型。
文档编号C12P13/00GK101248184SQ20068003086
公开日2008年8月20日 申请日期2006年8月25日 优先权日2005年8月25日
发明者古根川唯泰, 宫田博之, 山本康仁 申请人:宇部兴产株式会社