酵母细胞壁中β-葡聚糖和β-甘露聚糖的联合提取的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及从酵母细胞壁中提取i3-(l，3)-D-葡聚糖和β-甘露聚糖的方法。其特征在于用于以酵母细胞壁为原料，通过破壁、高温提取、离心分离、醇沉、干燥、脱脂、酶解六个步骤制备i3-(l，3)-D-葡聚糖和β-甘露聚糖。
【背景技术】
[0002]酿酒酵母多糖是多糖的重要来源之一，其中的i3-(l，3)_D-葡聚糖、甘露聚糖等细胞多糖参与细胞的多种生命调节，具有激活免疫细胞、调节机体免疫力、具抗菌消炎、抗病毒、抗肿瘤等生物学功能。酿酒酵母多糖可从酿酒发酵液中提取，但更多的是从酵母细胞壁获得。酵母细胞壁约占细胞干重的30%，由35%?45%的β-葡聚糖、40%?45%的甘露聚糖、5%?10%的蛋白质、3%?8%%的脂类和I %?2%几丁质组成，I %?3%无机盐组成。细胞壁从内向外分3层，分别为葡聚糖、蛋白质、甘露聚糖。
[0003]i3-(l，3)_D-葡聚糖对肿瘤、肝炎、糖尿病、心血管、高血脂等病症都有治疗效果；是一种良好生物效应调节剂，它能通过刺激免疫系统而提高机体免疫能力，在人相互依赖机体系统中，对维持体内平衡非常关键。酵母甘露聚糖具有免疫，和抗肿瘤等作用。由于人体自身无法合成β - (I，3) -D-葡聚糖和甘露聚糖，将它们成功分离提取，以用于相关的疾病治疗具有重要意义。
[0004]目前，国内外对酵母细胞壁i3-(l，3)_D-葡聚糖和甘露聚糖的提取方法较多，主要有酸法提取、喊法提取、酸喊一体法、有机溶剂提取、超声波提取、酶法等。各种方法各有利弊，优缺点明显。
[0005]日本、美国等国对i3-(l，3)_D-葡聚糖和甘露聚糖进行大量深入研究，已将提取出β_(1，3)_葡聚糖广泛应用于医药、食品、水产品养殖、化妆品等领域。我国是酿酒大国，酵母细胞壁来源充足。富含酵母细胞壁的酵母泥大多被作为廉价粗饲料处理或直接排放，造成很大资源浪费和环境污染。因此，寻求和优化一种高效提取方法，对于进一步提高
0-(l，3)-D-葡聚糖、甘露聚糖产量和品质，减少资源浪费和环境污染具有非常重要意义。
[0006]针对i3-(l，3)_D-葡聚糖、甘露聚糖的市场需求，本发明提供一种以酵母细胞壁为原料，提取β _(1，3)-D-葡聚糖和甘露聚糖的方法。
【发明内容】
[0007]本发明涉及以酵母细胞壁为原料，提取i3-(l，3)_D-葡聚糖和甘露聚糖的方法。本发明包括:(I)破壁(2)高温提取(3)离心分离(4)醇沉、干燥(5)脱脂(6)酶解六个步骤。
[0008](I)破壁
[0009]将酵母细胞壁分散调浆成菌体浓度约10 %的悬浊液，用胶体磨研磨后，加入均质机进行破壁处理。
[0010]⑵高温提取
[0011]将破壁处理后的酵母细胞壁在120°C抽提3?4h。
[0012]⑶离心分离
[0013]将高温提取得到的均质液体冷却后放入离心机，离心分离，得到上清液和沉淀。
[0014](4)浓缩、醇沉
[0015]将离心得到的上清液抽滤，除去悬浮杂质，真空浓缩后，加入乙醇进行分步醇沉。过滤、真空干燥得甘露聚糖。离心得到的下层沉淀通过冷冻干燥得到葡聚糖。
[0016](5)脱脂
[0017]将(4)得到的甘露聚糖和β -葡聚糖分别与不同的有机溶剂配成悬浮液，加热回流，进行脱脂处理，得到脱脂甘露聚糖和脱脂β -葡聚糖。
[0018](6)酶解
[0019]将得到的脱脂甘露聚糖和脱脂β -葡聚糖分别与蛋白酶溶液混合，控制反应温度进行酶解处理。反应结束后，得到的残渣用水洗涤，离心，再加水复溶后加热灭酶，离心，真空干燥，得到甘露聚糖和β-葡聚糖产品。
【主权项】
1.一种从酵母细胞壁中提取β _(I，3)-D-匍聚糖和甘露聚糖的方法。β-(I，3)-D-匍聚糖和甘露聚糖具有激活免疫细胞、调节机体免疫力、具抗菌消炎、抗病毒、抗肿瘤等生物学功能。2.权利要求1所述的β- (I，3)-D-葡聚糖和甘露聚糖的提取方法包括破壁、高温提取、离心分离、醇沉、干燥、脱脂、酶解六个步骤。3.权利要求2所述的破壁技术，其特征在于将酵母细胞壁制成悬浊液，用胶体磨研磨后，加入均质机进行处理。4.权利要求2中的高温提取，是指在反应釜中，将反应体系温度控制在115?125°C，抽提3?4h。5.权利要求2所述的离心分离步骤特征在于将高温提取得到的均质液体冷却后用离心机进行离心分离，得到上清液和沉淀。6.权利要求2所述的醇沉的特征在于将离心得到的上清液抽滤，除去悬浮杂质，真空浓缩后，加入乙醇进行分步醇沉、过滤。7.权利要求2所述的干燥特征在于将(5)与(6)得到的固体(5得到的固体是β-D-葡聚糖粗品，6得到的固体是甘露聚糖粗品)分别用冷冻干燥和真空干燥进行处理。8.权利要求2所述的脱脂特征在于将(7)得到的甘露聚糖和葡聚糖分别与不同的有机溶剂配成悬浮液，加热回流，进行脱脂处理，得到脱脂甘露聚糖和脱脂β -葡聚糖。9.权利要求2所述的酶解特征在于将得到的脱脂甘露聚糖和脱脂β-葡聚糖分别与蛋白酶溶液混合，控制反应温度进行酶解，得到甘露聚糖和β -葡聚糖产品。
【专利摘要】酵母细胞壁中的β-(1，3)-D-葡聚糖和甘露聚糖具有激活免疫细胞、调节机体免疫力、具抗菌消炎、抗病毒、抗肿瘤等生物学功能，具有广泛的应用前景。本发明涉及一种从酿酒酵母细胞壁中提取β-(1，3)-D-葡聚糖和甘露聚糖的方法。酵母细胞壁通过破壁、高温提取、离心分离、醇沉、干燥、脱脂、酶解六个步骤制备β-(1，3)-D-葡聚糖和β-甘露聚糖。
【IPC分类】C12P19/08, C08B37/02, C08B37/00, C12P19/04
【公开号】CN105131146
【申请号】CN201510515576
【发明人】陈莉, 胡祥正
【申请人】陈莉, 胡祥正
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年8月18日