胺组分、憐脂酷肌醇组分、憐脂酷丝氨酸组分、横基哇诺二酷甘油 组分、双半乳糖基二酷甘油组分、二酷甘油=甲基高丝氨酸组分或单半乳糖基二酷甘油组 分，包含至少1 %、至少2 %、至少约3 %、至少约4%、至少约5 %、至少约6 %、至少约7 %、至 少约8%、至少约9%、至少约10%、至少约11 %、至少约12%、至少约13%、至少约14%、至 少约15%、至少约16%、至少约17%、至少约18%、至少约19%、至少约20%、至少约21%、 至少约22%、至少约23 %、至少约24%、至少约25 %、至少约26 %、至少约27%、至少约 28%、至少约29%、至少约30%、至少约31 %、至少约32%、至少约33%、至少约34%、至少 约35 %、至少约36 %、至少约37 %、至少约38 %、至少约39 %、至少约40 %的天然藻油中的 EPA。
[0057] 在一些实施方案中，天然藻油的一种或多种极性脂质组分，例如卵憐脂组分、憐 脂酷甘油组分、憐脂酷乙醇胺组分、憐脂酷肌醇组分、憐脂酷丝氨酸组分、横基哇诺二酷甘 油组分、双半乳糖基二酷甘油组分、二酷甘油=甲基高丝氨酸组分或单半乳糖基二酷甘油 组分，包含约1 %至约40%、约1 %至约35%、约1 %至约30%、约1 %至约20%、约1 %至 约10%、约5%至约40%、约5%至约35%、约5%至约30%、约5%至约25%、约5%至约 20%、约5%至约15%、约10%至约40%、约10%至约35%、约10%至约25%、约10%至约 20%、约15%至约40%、约15%至约35%、约15%至约30%、约15%至约25%、约15%至 约20%、约20%至约40%的天然藻油中的EPA。在一些实施方案中，至少35%或更多的天 然藻油中的EPA在单半乳糖基二酷甘油脂质中。
[0058] 在另一些实施方案中，天然藻油的一种或多种极性脂质组分，例如卵憐脂组分、憐 脂酷甘油组分、憐脂酷乙醇胺组分、憐脂酷肌醇组分、憐脂酷丝氨酸组分、横基哇诺二酷甘 油组分、双半乳糖基二酷甘油组分、二酷甘油=甲基高丝氨酸组分或单半乳糖基二酷甘油 组分，不含有EPA。例如，天然藻油中的EPA不存在于酱醇醋、憐脂酷肌醇和/或憐脂酷丝氨 酸脂质中。
[0059] 在一些实施方案中，天然藻油的一种或多种中性脂质成分，例如单酷甘油组分、二 酷甘油组分、S酷甘油组分或者游离脂肪酸组分，包含至少约3%、至少约4%、至少约5%、 至少约6 %、至少约7 %、至少约8 %、至少约9 %、至少约10 %、至少约11 %、至少约12 %、至 少约13 %、至少约14 %、至少约15 %、至少约16 %、至少约17 %、至少约18 %、至少约19% 或至少约20%的天然油中的总ARA。在一些实施方案中，游离脂肪酸组分含有至少约16% 的天然油中的ARA。在一些实施方案中，单酷甘油组分含有至少约4%的天然油中的ARA。 在一些实施方案中，二酷甘油组分含有至少约2%的天然油中的ARA。在一些实施方案中， S酷甘油组分含有至少约10%的天然油中的ARA。
[0060] 在一些实施方案中，天然藻油的一种或多种中性脂质成分，例如单酷甘油组分、二 酷甘油组分、S酷甘油组分或者游离脂肪酸组分，包含天然油中总ARA的约1%至约20%、 约1 %至约15%、约1 %至约10%、约1 %至约5%、约5%至约20%、约5%至约15%、约 5%至约10%或约10%至约20%。
[0061] 在一些实施方案中，天然油中的酱醇酬醋组分例如胆固醇醋不含ARA。
[0062] 在一些实施方案中，天然藻油的一种或多种极性脂质组分，例如卵憐脂组分、憐脂 酷甘油组分、憐脂酷乙醇胺组分、憐脂酷肌醇组分、憐脂酷丝氨酸组分、横基哇诺二酷甘油 组分、双半乳糖基二酷甘油组分、二酷甘油=甲基高丝氨酸组分或单半乳糖基二酷甘油组 分，包含至少1 %、至少2 %、至少约3 %、至少约4%、至少约5 %、至少约6 %、至少约7 %、至 少约8%、至少约9%、至少约10%、至少约11 %、至少约12%、至少约13%、至少约14%、至 少约15%、至少约16%、至少约17%、至少约18%、至少约19%或至少约20%的天然藻油 中的ARA。在一些实施方案中，天然藻油的一种或多种极性脂质组分，例如卵憐脂组分、憐脂 酷甘油组分、憐脂酷乙醇胺组分、憐脂酷肌醇组分、憐脂酷丝氨酸组分、横基哇诺二酷甘油 组分、双半乳糖基二酷甘油组分、二酷甘油=甲基高丝氨酸组分或单半乳糖基二酷甘油组 分不含ARA。
[0063] 在一些实施方案中，天然藻油的一种或多种极性脂质组分，例如卵憐脂组分、憐脂 酷甘油组分、憐脂酷乙醇胺组分、憐脂酷肌醇组分、憐脂酷丝氨酸组分、横基哇诺二酷甘油 组分、双半乳糖基二酷甘油组分、二酷甘油=甲基高丝氨酸组分或单半乳糖基二酷甘油组 分，包含天然油中的总ARA的约1 %至约20 %、约1 %至约15 %、约1 %至约10 %、约％至 约5%、约5%至约20%、约5%至约15%、约5%至约10%、约10%至约20%、约10%至约 15%或约15%至约20%。
[0064] 在一些实施方案中，天然藻油的一种或多种极性脂质组分，例如卵憐脂组分、憐脂 酷甘油组分、憐脂酷乙醇胺组分、憐脂酷肌醇组分、憐脂酷丝氨酸组分、横基哇诺二酷甘油 组分、双半乳糖基二酷甘油组分、二酷甘油=甲基高丝氨酸组分或单半乳糖基二酷甘油组 分，不含有ARA。在一些实例中，双半乳糖基二酷甘油、憐脂酷肌醇和/或憐脂酷丝氨酸脂类 的脂肪酸成分不含ARA。
[0065] 天然藻油可W从新鲜收获的藻类生物质中提取，也可W从在防止酸败的条件下胆 存的W前收获的生物质中提取。可W使用已知的方法培养藻类，从培养基中分离藻类生物 质，从生物质中提取天然藻油，并分析从生物质中提取的油的脂肪酸分布情况。详细的说 明可W在例如Handayaniaetal. ,2012，ScientificRepo;rts，l(2) :180(doi:10.4172/ scientificreports. 180)和Adarme-Vegaetal.,MicrobialCellFactories，2012,11 : 96中找到，上述文献通过引用W全文形式结合。
[0066] 天然藻油可W得自藻类，包含金藻纲K虹yso地yceae)、隐藻纲（化ypto地yceae)、真绿藻纲（Prasino地yceae)、红藻纲（Miodophyceae)、黄藻纲狂anthophyceae)、灰胞藻纲 (Glauco地yceae)和真眼点藻纲巧usti即atophyceae)。在一些实施方案中，藻类是微拟球 藻属。在优选实施方案中，微拟球藻是海洋富油微拟球藻、颗粒微拟球藻、湖微拟球藻、大洋 微拟球藻、眼点微拟球藻或盐微拟球藻。 阳067] 在一些实施方案中，天然藻油提取自微拟球藻属中叶绿素缺乏的微藻类。叶绿素 缺乏的藻细胞与野生型藻细胞相比能够具有灰绿表型。在一些实施方案中，在相同的光照 条件下，与野生型藻细胞相比，叶绿素缺乏的藻细胞展示了增加的产率和/或生长至更高 的细胞密度。特别地，在标准培养条件下，叶绿素缺乏的藻细胞可W展示旺盛的生长。叶绿 素缺乏的表型可W被稳定通过多代不需要选择。
[0068] 用于得到天然藻油的藻细胞可W是野生型藻细胞或突变细胞。在一些实施方案 中，与野生型藻细胞相比，叶绿素缺乏的藻细胞有一个或多个突变。在一些例子中，叶绿素 缺乏的藻细胞是T661株的细胞或T661培养的分离体（isolate)。代表性藻株的详细说明可 W在例如2013年3月15日提交的美国临时申请61/800029和律师备案编号95844-902546 的美国专利申请（2014年3月18日提交，标题为"具有提高的发育和生产的叶绿素缺乏的 藻细胞"）中找到，上述每一个文献通过引用W全部内容形式结合在此。 W例B.培养藻类
[0070] 可W在一定条件下培养藻类W促进高EPA、低ARA和基本上不含DHA的藻油的 累积。例如，脂质的含量和组成可W通过改变例如光强度、光暗循环次数、溫度、营养成 分含量、营养成分有效性、盐度、pH、培养密度、培养溫度和其他环境条件等生长条件来 调整。微拟球藻生长条件的描述可W在例如Sukenik，A."化apter3:P;ro化ctionof eicosapentaenoicacidbythemarineEustigmatophyteNannochloropsis，"Chemicals fromMicroalgae.，ZviCohen编辑，CRCPress, 1999,和F*aletal.，ApplMicrobiol Biotechnol，2011，90 :1429-1441中找到。开放池等标准培养系统，例如开放跑道池W及光 生物反应器，可用于生长藻类。
[0071] 为制造藻类生物质，可W使用标准方法，例如絮凝、离屯、和过滤（全量过滤、微滤、 超滤、压滤和正切流动过滤）用于藻类除水。例如，阳离子化学絮凝剂如Al2(S〇4)3、化CI3和 Fez (S〇4)3可W被用于将收获的藻类絮凝为生物质。
[0072] 干燥（除水）的藻类生物质可W包含至少约10%的脂质，例如约1〇%、20%、 30%、40%、50%、60%、70%或更多的脂质；至少约15%的碳水化合物，例如约15%、16%、 17%、185、19%、20%、21%、22%、23%、24%、25%、26%、27%、28%、29%、30% 或更多的 碳水化合物；至少约25%的蛋白质，例如约25%、26%、27%、28%、29%、20%、21%、32%、 33%、34%、35%、36%、37%、38%、39%、40%或更多的蛋白质；至少约3%的水分，例如 约 3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、 19%、20%或更多的水；^及至少约5%的灰分，约5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、 12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20% 或更多的灰分。
[0073] 可W将藻细胞或生物质在被用于得到组合物之前干燥。标准的干燥藻类生物质的 方法包括冻干、空气干燥、喷雾干燥、隧道干燥、真空干燥（冻干）W及类似的工艺。可选 地，收获和清洗后的生物质可直接被用于制备组合物而不经过干燥。在一些例子中，将生物 质收获并且在进行本文描述的提取方法之前未经清洗。参见，例如美国专利号5130242和 6812009