雷公藤内醋酬的提取纯化方法，其包括W下步骤： 1) 将雷公藤植株的根屯、、根皮、茎和叶10kg粉碎，过20目筛，加其重量5倍体积的乙 醇浸泡24h后，用雷公藤重量32倍体积的乙醇进行渗漉，渗漉液每500mL收集一次，浓缩至 干，加ImLS氯甲烧溶解后采用TLC对其进行定性检测，然后将渗漉液合并、浓缩，得乙醇浓 缩液； 2) 按体积比1:1. 5将所得乙醇浓缩液加乙酸乙醋进行萃取，每次萃取的过程中需振摇 20次，每次萃取后将收集的乙酸乙醋溶液浓缩，采用TLC对其进行定性检测，萃取5次后将 萃取得到的乙酸乙醋溶液合并、浓缩，经微波干燥制得干粉，微波干燥的功率为500W，频率 为2450MHz，溫度为40°C，干燥时间为30min; 3) 将所得干粉加等体积乙酸乙醋溶解后，按干粉与硅胶的重量比为1:80称取硅胶， 经湿法上柱后采用硅胶柱层析进行分离，将乙酸乙醋与石油酸按体积比2:3混合作为洗脱 剂进行洗脱，每500mL洗脱液收集一份，经浓缩后采用TLC对浓缩液进行定性检测，合并含 有相同成分的浓缩液，回收溶剂后微波干燥得粗提干粉，其微波干燥的功率为500W，频率为 2450MHz，溫度为40°C，干燥时间为lOmin; 4) 将所得粗提干粉加等体积=氯甲烧溶解后，按干粉与硅胶的重量比为1:120称取娃 胶，经湿法上柱后采用硅胶柱层析进行分离，按=氯甲烧与甲醇的混合比例为1〇〇:〇、99:1、 98:2、97:3、96:4配制洗脱剂进行梯度洗脱，每200mL洗脱液收集一份，经浓缩后采用化C对 浓缩液进行定性检测，合并含有相同成分的浓缩液，回收溶剂至干，得精提物； 5)将从=氯甲烧与甲醇混合比例为98:2的部分得到的精提物加二氯甲烧溶解，在二 氯甲烧和乙酸的混合液中重结晶4次，得无色针状结晶1. 03g，即为所述2a-径基雷公藤内 醋酬，纯度为99. 6%。
[0019] 实施例3 一种2a-径基雷公藤内醋酬的提取纯化方法，其包括W下步骤： 1) 将雷公藤植株的根屯、、根皮、茎和叶10kg粉碎，过20目筛，加其重量5倍体积的乙 醇浸泡24h后，用雷公藤重量35倍体积的乙醇进行渗漉，渗漉液每500mL收集一次，浓缩至 干，加ImLS氯甲烧溶解后采用TLC对其进行定性检测，然后将渗漉液合并、浓缩，得乙醇浓 缩液； 2) 按体积比1:1. 5将所得乙醇浓缩液加乙酸乙醋进行萃取，每次萃取的过程中需振摇 20次，每次萃取后将收集的乙酸乙醋溶液浓缩，采用TLC对其进行定性检测，萃取6次后将 萃取得到的乙酸乙醋溶液合并、浓缩，经微波干燥制得干粉，微波干燥的功率为500W，频率 为2450MHz，溫度为40°C，干燥时间为30min; 3) 将所得干粉加等体积乙酸乙醋溶解后，按干粉与硅胶的重量比为1:80称取硅胶， 经湿法上柱后采用硅胶柱层析进行分离，将乙酸乙醋与石油酸按体积比2:3混合作为洗脱 剂进行洗脱，每500mL洗脱液收集一份，经浓缩后采用TLC对浓缩液进行定性检测，合并含 有相同成分的浓缩液，回收溶剂后微波干燥得粗提干粉，其微波干燥的功率为500W，频率为 2450MHz，溫度为40°C，干燥时间为lOmin; 4) 将所得粗提干粉加等体积=氯甲烧溶解后，按干粉与硅胶的重量比为1:120称取娃 胶，经湿法上柱后采用硅胶柱层析进行分离，按=氯甲烧与甲醇的混合比例为1〇〇:〇、99:1、 98:2、97:3、96:4配制洗脱剂进行梯度洗脱，每200mL洗脱液收集一份，经浓缩后采用化C对 浓缩液进行定性检测，合并含有相同成分的浓缩液，回收溶剂至干，得精提物； 5) 将从=氯甲烧与甲醇混合比例为98:2的部分得到的精提物加二氯甲烧溶解，在二 氯甲烧和乙酸的混合液中重结晶5次，得无色针状结晶1. 07g，即为所述2a-径基雷公藤内 醋酬，纯度为99. 2%。
[0020] 按本发明加工方法制得的2a-径基雷公藤内醋酬，其纯度可达99%W上，且其得 率为万分之一，比现有文献报道的提取工艺提高近100倍，可为雷公藤内醋酬的化学结构、 药理作用等研究提供物质基础。
[0021] W上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与 修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
【主权项】
1. 一种2a-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法，其特征在于：包括以下步骤： 1) 将雷公藤粉碎，过20目筛，加其重量5倍体积的乙醇浸泡24h后进行渗漉，然后将渗 漉液合并、浓缩，得乙醇浓缩液； 2) 按体积比1:1. 5将所得乙醇浓缩液加乙酸乙酯萃取3-6次，然后将萃取得到的乙酸 乙酯溶液合并、浓缩，经微波干燥制得干粉； 3) 将所得干粉加等体积乙酸乙酯溶解后，采用硅胶柱层析进行分离，将乙酸乙酯与石 油醚按体积比2:3混合作为洗脱剂进行洗脱，每500mL洗脱液收集一份，经浓缩后采用TLC 对浓缩液进行定性检测，合并含有相同成分的浓缩液，回收溶剂后微波干燥，得粗提干粉； 4) 将所得粗提干粉加等体积三氯甲烷溶解后，采用硅胶柱层析进行分离，将三氯甲烷 与甲醇混合作为洗脱剂进行梯度洗脱，每200mL洗脱液收集一份，经浓缩后采用TLC对浓缩 液进行定性检测，合并含有相同成分的浓缩液，回收溶剂至干，得精提物； 5) 将所得精提物加二氯甲烷溶解后，在二氯甲烷和乙醚的混合液中重结晶3-5次，得 无色针状结晶，即为所述2a-羟基雷公藤内酯酮。2. 根据权利要求1所述2a-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法，其特征在于：步骤1) 所述雷公藤为雷公藤植株的根心、根皮、茎和叶。3. 根据权利要求1所述2a-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法，其特征在于：步骤1) 中用雷公藤重量30-35倍体积的乙醇进行渗漉，渗漉液每500mL收集一次，浓缩至干，加ImL 三氯甲烷溶解后采用TLC对其进行定性检测，直至检测为阴性时停止渗漉。4. 根据权利要求1所述2a-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法，其特征在于：步骤2) 每次萃取的过程中需振摇20次，每次萃取后将收集的乙酸乙酯溶液浓缩，采用TLC对其进 行定性检测，直至检测为阴性时停止萃取。5. 根据权利要求1所述2a-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法，其特征在于：步骤2) 所述微波干燥的功率为500W，频率为2450MHz，温度为40°C，干燥时间为30min。6. 根据权利要求1所述2a-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法，其特征在于：步骤3) 中干粉与硅胶柱层析所用硅胶的重量比为1:80 ;采用湿法上柱。7. 根据权利要求1所述2a-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法，其特征在于：步骤3) 所述微波干燥的功率为500W，频率为2450MHz，温度为40°C，干燥时间为lOmin。8. 根据权利要求1所述2a-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法，其特征在于：步骤4) 中粗提干粉与硅胶柱层析所用硅胶的重量比为1:120 ;采用湿法上柱。9. 根据权利要求1所述2a-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法，其特征在于：步骤4) 梯度洗脱中三氯甲烷与甲醇的混合比例依次为100: 〇、99:1、98:2、97:3、96:4。
【专利摘要】本发明公开了一种2<i>α</i>-羟基雷公藤内酯酮的提取纯化方法，其以雷公藤的根心、根皮、茎和叶为原料，经粉碎、浸泡、渗漉、萃取、硅胶柱层析分离纯化、重结晶等多个步骤，可制得纯度达99%以上的2<i>α</i>-羟基雷公藤内酯酮，且其得率为万分之一，比现有文献报道的提取工艺提高近100倍，可为雷公藤内酯酮的化学结构、药理作用等研究提供物质基础。
【IPC分类】C07J73/00
【公开号】CN105198955
【申请号】CN201510699383
【发明人】林绥, 阙慧卿, 彭华毅, 黄郑隽, 郭舜民, 钱丽萍
【申请人】福建省医学科学研究院
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2015年10月26日