一种减压内部沸腾法提取黑松松针水溶性多糖的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属植物活性成分提取的技术领域，具体涉及一种减压内部沸腾提取黑松松针水溶性多糖的制备方法。
【背景技术】
[0002]松针为松科松属植物的叶，松树采伐后所残留的无用的主要副产物之一，是一种再生速度快、可一年四季采收、分布广泛、天然蓄积量大，可持续利用的天然再生资源。"据《本草纲目》记载:"松柏为百木之长"，服之"令人不老，轻身益气，不饥延年"。现代研究表明松针具有镇静、镇痛、抗炎、延缓衰老、降血脂、降胆固醇等作用。
[0003]目前关于松针中多糖提取研究中，研究树种国内多为东北红松、马尾松、华山松，而国外(主要是日本、韩国)多为白松和五叶松，对北方广大地区最主要的造林树种——油松多糖的研究未见报道；提取的方法多集中水溶液提取法、微波辅助、超声波辅助等方法，水溶液提取存在时间长和多糖得率低的问题，超声波辅助法、微波辅助法等能在外场的辅助下促进多糖的扩散速度，但同时也会造成多糖分解，严重的影响产品质量的问题。
【发明内容】
[0004]为了克服松针多糖提取现有提取技术中提取时间长和多糖的得率低的问题，超声、微波辅助法提取法多糖分解严重，影响产品质量的问题，本发明提供了生产成本低廉、工艺简单，可以实现松针多糖有效成分的快速、绿色提取温度的增加得率又开始降低，当超过90°C时，可能温度过高破坏多糖结构从而多糖降低得率，因此选用温度为90°C。
[0005](3)在确定30倍用水量，90%乙醇，温度在90°C条件下，提取时间为2、3、4、5、6min，计算多糖得率的变化，当提取时间为5min时多糖得率达到最为4.37%,6min时多糖得率达到最为4.39%。随着提取时间的增加，能增加多糖的溶出量，在5min已使提取达到相对稳定，因此选定提取时间5min。
[0006](4)在确定30倍用水量，90°C乙醇，提取时间为5min，研究乙醇浓度为20%、40%、60%,80%,90%,100%时得率的变化，当乙醇浓度为40%，多糖得率达到最大为12.72%。由此，通过此条件可以得出多糖得率的选定40%乙醇浓度为最佳乙醇比例数值结果。
[0007](5)根据以上单因数实验的结果，以多糖得率为响应值进行响应面分析，对于松针多糖得率模型，回归方程方差分析结果表明方程中的4个因素均为极显著，且其线性和平方项的影响也为极显著。同时，在所选择的试验范围内，4个因素对松针多糖得率影响的排序为乙醇浓度>提取温度>料液比>提取时间，黑松松针多糖的得率实测值13.74%。
[0008]作为本发明进一步限制的，所述减压内部沸腾法提取松针水溶性多糖提取工艺条件选取提取温度85°C，提取时间5min，料液比为30倍，乙醇体积分数40%，松针多糖的得率为10.72%。由此，得出最佳的提取工艺条件的具体数值。
[0009]本发明的有益技术效果:本发明中的黑松松针多糖作为具有多种生理功能和开发价值的活性多糖，具有对机体毒副作用小、无残留、不产生耐药性等优点，应用前景广阔；减压内部沸腾法能以实现渗入物料内部溶剂产生汽化的方式，改变传统提取过程的普通分子扩散方式为对流扩散的方法，有效解决了多糖分子量巨大，提取过程中分子扩散速率较慢，且易堵塞物料的内部孔道的不分离的减压内部沸腾法提取黑松松针水溶性多糖的方法。
[0010]本发明为了解决现有技术的问题，提供了减压内部沸腾提取黑松松针水溶性多糖的制备方法，包括如下步骤，
[0011 ] (1)将黑松松针放在恒温干燥箱，干燥箱温度控制在40 V，干燥时间为24h，经过粉碎机粉碎，再进行80目筛选；
[0012](2)称取lg预处理的松针粉末，将其放置在自制简易玻璃装置，2ml乙醇均匀润湿30min,使乙醇充分渗透物料；
[0013](3)将负压吸引表压减至-0.0SOMPa，减压吸引至表面产生轻微沸腾气泡，过滤；
[0014](4)用20倍体积85°C热水提取黑松松针多糖溶液，时间控制在6min，然后取少量提取液进行适当稀释后，用苯酚-硫酸法测多糖含量；
[0015](5)用4°C乙醇沉淀提取的黑松松针多糖溶液，并放置过夜，离心后取沉淀于干燥箱中进行干燥；
[0016](6)将干燥的黑松松针多糖溶液制成多糖制品。
[0017]作为本发明进一步限制的，所述减压内部沸腾法提取松针水溶性多糖包括内部沸腾法产生的结果及得出的最佳工艺条件。由此可以确定最终结果和最佳工艺条件。
[0018]作为本发明进一步限制的，所述减压内部沸腾法产生数值结果包括如下:
[0019](1)在2ml的90%乙醇，温度在90°C，提取时间5min，20，30，40，50倍的水提取松针多糖，计算多糖得率；当用水量为30倍时，多糖得率最大为3.86%达到最大值，因此选用30倍体积水量。
[0020](2)在2ml的90%乙醇，30倍用水量的条件，提取温度为80，85，90，95，100°C条件下，通过多糖得率的变化得出在90°C时多糖的得率最大为4.37%，随着足，从而大大提高了提取时多糖的浸出问题，而且内部沸腾法生产成本低廉、工艺简单，科学，是可以实现多糖有效成分的快速、绿色提取分离的方法。
【具体实施方式】
[0021 ] 下面对本发明做进一步说明。
[0022]本发明实例中的减压内部沸腾提取黑松松针水溶性多糖的制备方法，包括如下步骤:
[0023](1)将黑松松针放在恒温干燥箱，干燥箱温度控制在40°C，干燥时间为24h，经过粉碎机粉碎，再进行80目筛选；
[0024](2)称取lg预处理的松针粉末，将其放置在自制简易玻璃装置，2ml乙醇均匀润湿30min,使乙醇充分渗透物料；
[0025](3)将负压吸引表压减至-0.0SOMPa，减压吸引至表面产生轻微沸腾气泡，过滤；
[0026](4)用20倍体积85°C热水提取黑松松针多糖溶液，时间控制在6min，然后取少量提取液进行适当稀释后，用苯酚-硫酸法测多糖含量；
[0027](5)用4°C乙醇沉淀提取的黑松松针多糖溶液，并放置过夜，离心后取沉淀于干燥箱中进行干燥；
[0028](6)将干燥的黑松松针多糖溶液制成多糖制品。
[0029]其中，所述减压内部沸腾法提取黑松松针水溶性多糖包括内部沸腾法配制条件产生数值结果及提取工艺条件。
[0030]所述减压内部沸腾法进行了多个提取条件的数值进行对比，得出如下黑松松针多糖制作的最佳数值结果，以此来作为本发明的选择条件的依据。
[0031]具体提取黑松松针多糖制作的配制数值结果，产生最佳数值如下；乙醇体积分数50%，黑松松针多糖的得率实测值13.74%,预测值13.42%。
[0032]进一步地，如果选用与减压内部沸腾法的不同内部沸腾法，水提取黑松松针多糖的得率为2.26%，提取温度100°C，提取时间为3h。
[0033]由此，减压内部沸腾法提取黑松松针水溶性多糖，用浸提时间，浸提温度、料液比及乙醇浓度为自变量，对减压内部沸腾法提取黑松松针多糖的提取条件进行优化，提取条件对多糖得率的影响，确定最佳提取工艺。
[0034]通过上述产用的结果:该提取工艺条件配制选取提取温度85°C，提取时间6min，料液比为20倍，乙醇体积分数50%，黑松松针多糖的得率实测值13.74%,