一种螺旋藻多糖及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然药物提取制备领域，更具体设及一种螺旋藻多糖及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 螺旋藻是蓝藻纲，颤藻科的一类低等生物，原核生物，由单细胞或多细胞组成的丝 状体，体长200-500ym，宽5-10ym，圆柱形，呈疏松或紧密的有规则的螺旋旋形弯曲，形如 钟表发条，故而得名。螺旋藻具有降低胆固醇、调节血糖、增强免疫力、保护肠胃功能、抗肿 瘤、抗氧化、抗衰老、抗疲劳、抗福射等多种功能。
[0003] 螺旋藻营养成分的特点是蛋白质含量高达60% -70%，而脂肪、纤维素含量低，并 且还含有种类繁多的维生素，它是维生素B12和0-胡萝h素含量最高的食品.此外，它 还是所有食物中可吸收性铁质含量最高的，同时还发现它含有具有防癌、治癌作用的藻类 蛋白，W及其他大量矿质元素和提高机体免疫力的生物活性物质。
[0004] 多糖是由糖巧键结合的糖链，至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水 化合物，凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均称为多糖。多糖在自然界分 布极广，亦很重要。有的是构成动植物细胞壁的组成成分，如肤聚糖和纤维素；有的是作为 动植物储藏的养分，如糖原和淀粉；有的具有特殊的生物活性，像人体中的肝素有抗凝血作 用，肺炎球菌细胞壁中的多糖有抗原作用。由同一种类型的单糖组成的多糖称为同多糖，如 淀粉、纤维素和糖原；W不同的单糖组成的多糖称为杂多糖，如阿拉伯胶是由戊糖和半乳糖 等组成，在化学结构上实属多种多样。就分子量而论，有从0. 5万个分子组成的到超过106 个的多糖。
[0005] 螺旋藻多糖是螺旋藻藻体中碳水化合物的主要存在形式，含量高达干重的 14%~16%。螺旋藻多糖具有抗福射损伤和改善放、化疗引起的副反应作用、抗肿瘤、抗病 毒、抗衰老、增强免疫力等多种功能。有关螺旋藻多糖的报道已有很多文献，但大多局限于 粗多糖，目前，并没有文献就螺旋藻中单一多糖的提取和应用进行研究。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供一种具有抗肿瘤活性的螺旋藻单一多糖及其制备方法，该螺 旋藻多糖具有很好的抗肿瘤活性，具有重要的临床治疗和预防肿瘤疾病的应用价值。
[0007]为实现上述发明目的，本发明提供一种螺旋藻多糖，由D-葡萄糖醒酸值-GlcUA)、 D-乙酷氨基半乳糖（GalN)a-岩藻糖化-Fuc)和半乳糖（Gal)四种单糖组成，W摩尔比计， 四种组成单糖比例为：3. 5~4. 5:3. 5~4. 5:1. 7~2. 3:1，优选4:4:2:1 ;所述的螺旋藻多 糖的重均分子量范围为：5000~ISOOODa;该螺旋藻多糖W其碱金属、碱±金属盐的形式存 在，优选钢盐、钟盐或巧盐。
[0008] 进一步的，所述的螺旋藻多糖由1个硫酸软骨素E和7个其它非硫酸化软骨素及 单硫酸化软骨素组成的主链，和Wa-1，3-糖巧键连接4个k岩藻糖硫酸醋形成侧链，末 端Wa-1，3-糖巧键连接2个半乳糖；
[0009]具体的，主链是WD-葡萄糖醒酸和D-乙酷氨基半乳糖硫酸醋We-I，3-糖巧键 和0 -1,4-糖巧键链接形成[-4G1CAM- 3GalNAc4S/6SM-]硫酸软骨素二糖结构单元， 所述螺旋藻多糖结构如下：
[0010]
[0011] 本发明还提供了一种上螺旋藻多糖的制备方法，按W下步骤进行：
[0012] 1)取螺旋藻适量，加入10~30倍重量体积比的0. 5mol/L的化OH溶液，于60°C 的溶液溫度下揽拌提取2小时；冷却后，加6mol/L肥1溶液调抑值为2~3;离屯、处理得 上清液；将上清液浓缩到约螺旋藻原料重量2倍体积后，加入=倍体积的95%食用乙醇，静 置8-12小时，离屯、收集沉淀，得螺旋藻粗多糖；
[0013] 2)向螺旋藻粗多糖中加20~40倍重量体积比的水溶解；在35°C水浴下，分别加 入0. 5mol/L化C1、0. 5mol/LNaAc(乙酸钢）；4.Ommol/L乙酸后；匀速滴加1~化10% 肥02;待反应终止后，进行超滤处理，得到螺旋藻纯多糖。
[0014] 本发明中的螺旋藻多糖具有抑制人肝癌细胞增殖的作用，显示该螺旋藻多糖具有 治疗和预防肿瘤的潜在应用价值，可W用于抗肿瘤的治疗。
[0015]另外，本发明的螺旋藻多糖或其盐可W与药学上可接受的辅料形成药用组合物用 于抗肿瘤治疗。
[0016]W下将结合附图和实施例，对本发明进行较为详细的说明。
【附图说明】
[0017] 图1本发明中螺旋藻多糖HPGPC色谱图 [001引图2本发明中螺旋藻多糖红外吸收图谱
[0019] 图3本发明中螺旋藻多糖IH-NMR图
[0020] 图4本发明中螺旋藻多糖13C-NMR图
【具体实施方式】
[0021] 为更好地理解本发明的本质，下面通过对本发明较佳实施方式的进行描述，详细 说明本发明但不限制本发明。
[0022] W下实施例中使用的材料和试剂，除特殊说明，均为普通市售。
[0023] 实施例1: 一种螺旋藻多糖的制备方法，具体为：
[0024] 取螺旋藻2Kg，加入40L0. 5mol/L的化OH溶液，于60°C的溶液溫度下揽拌提取2 小时；冷却后，加6mol/L肥I溶液调节抑值为2. 5 ;离屯、处理得上清液。上清液浓缩到约SL加入15L的95%食用乙醇，静置10小时，离屯、收集沉淀，得螺旋藻粗多糖300g。 阳0巧]取上述螺旋藻粗多糖200g，加水化溶解；在35°C水浴下，加入0. 5mol/LNaCl、 0. 5mol/LNaAc;4.Ommol/L乙酸后；匀速滴加化10%肥02;待反应4小时，反应完成后，通 过超滤处理，得到螺旋藻均一多糖150g。经高效凝胶色谱法（HPGPC)检测为均一多糖，其重 均分子量为13500Da。
[00%] 实施例2 :-种螺旋藻多糖的制备方法，具体为：
[0027] 取螺旋藻2Kg，加入20L0.5mol/L的化OH溶液，于60°C的溶液溫度下揽拌提取2 小时；冷却后，加6mol/L肥1溶液调节抑值至2 ;离屯、处理得上清液。将上清液浓缩到约 SL加入15L的95%食用乙醇，静置11小时，离屯、收集沉淀，得螺旋藻粗多糖270g。
[0028] 取上述螺旋藻粗多糖200g，加水化溶解；在35°C水浴下，加入0.5mol/L化Cl、 0. 5mol/LNaAc;4.Ommol/L乙酸后；匀速滴加IL10%肥02 ;反应4小时，待反应结束后，进 行超滤处理，得到螺旋藻均一