真空干燥得化合物 3/HNMR(400MHz，DMS0) :6. 51化巧，6. 42 (3H)，3. 20 (細)， 2. 83 化H)，2. 55 (4H)，2. 5U6H)，1. 81 (2H)，1. 67 (2H)，1. 55 (2H)，1. 41 (2H)。 阳124] 实施例4、化合物4的制备 阳1巧]
[01%] 在产品的制备中存在3, 4-二节氧基苯丙酷氯遇水水解，带入下一步反应氨化后 得到化合物4。 阳127] 实施例5、化合物1、化合物2、化合物3和化合物4作为对照品在检测苦柯胺B药 物中的应用。
[0128] 供试品溶液的制备：精密称取苦柯胺B适量（约为0. 15g)，置100ml量瓶中，加强 酸溶液70ml，超声10分钟并不断振摇使苦柯胺B溶解，放冷，用溶剂稀释至刻度，摇匀，用 0. 45μm的滤膜滤过，续滤液作为供试品溶液；
[0129] 对照品储备溶液：精密称取化合物1、化合物2、化合物3和化合物4对照品各适 量，用甲醇溶解并稀释制成每1ml中含45μg的溶液，作为杂质对照品储备溶液；
[0130] 苦柯胺B对照品溶液：精密称取苦柯胺B对照品适量，加溶剂溶解并稀释制成每 1ml中含45μg的溶液，作为对照品储备溶液；分别精密量取杂质对照品储备溶液和对照品 储备溶液各5ml，置50ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。 阳131]色谱条件：
[0132] 照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部附录VD)测定。
[0133] 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；W0.02mol/L 憐酸二氨锭溶液-乙腊化00 :470,混匀后用憐酸调节抑值为2.4~3. 5)为流动相，柱 溫：40°C，流速为1.Oml/min;检测波长为252皿。苦柯胺B峰与化合物1、化合物2、化合 物3和化合物4峰之间的分离度均应大于6。 阳 134]流速：1.2ml/min。
[0135] 精密量取对照品溶液与供试品溶液各15μ1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图 至主峰保留时间的12倍。苦柯胺Β峰与化合物1、化合物2和化合物3峰之间的分离度均 应大于6。 阳136] 实施例6、化合物1的合成路线 阳 137]
[0138]实施例7、化合物2的合成路线阳 139]
[0140] 实施例8、化合物3的合成路线
[0141]
【主权项】
1. 用于苦柯胺B质量控制中的参比化合物，其特征在于，化合物1具备如下结构，2. 用于苦柯胺B质量控制中的参比化合物，其特征在于，化合物2具备如下结构，3. 用于苦柯胺B质量控制中的参比化合物，其特征在于，化合物3具备如下结构，4. 如权利要求1所述用于苦柯胺B质量控制中的参比化合物，其特征在于，化合物1的 合成过程，包括以下步骤：O5. 如权利要求1所述用于苦柯胺B质量控制中的参比化合物，其特征在于，化合物1的 合成过程，包括以下步骤： 将化合物A5和三乙胺溶于干燥的二氯甲烷中，将CBZCl用干燥二氯甲烷溶解，于冰 浴搅拌下缓慢滴入，滴加结束后，冰浴反应，直至反应完全，浓缩二氯甲烷，加入稀盐酸、乙 酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得粗品，柱层析，得纯品化合物 A6 ； 将化合物A6溶于四氢呋喃中，加入饱和的氨甲醇溶液和Raney Ni，排尽空气后，于高 压釜中搅拌反应，直至反应完全，抽滤，浓缩得粗品，柱层析，得纯品化合物A7 ; 将化合物A7溶于四氢呋喃中，加入甲醇，钯/碳后，排尽空气，常压室温下反应，直至反 应完全，过滤，真空干燥得终产物。6. 如权利要求2所述用于苦柯胺B质量控制中的参比化合物，其特征在于，化合物2的 合成过程，包括以下步骤：：?7.如权利要求2所述用于苦柯胺B质量控制中的参比化合物，其特征在于，化合物2的 合成过程，包括以下步骤： 将化合物〇和三乙胺溶于干燥的二氯甲烷中，将3, 4-二苄氧基苯丙酰氯用干燥二氯甲 烷溶解，于冰浴搅拌下缓慢滴入，滴加结束后，冰浴反应，直至反应完全，浓缩二氯甲烷，加 入稀盐酸、乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得粗品，柱层析，得 纯品化合物Bl ; 将化合物Bl溶于四氢呋喃中，加入饱和的氨甲醇溶液和Raney Ni，排尽空气后，于高 压釜中下搅拌反应，直至反应完全，抽滤，浓缩得粗品，柱层析得纯品化合物B2 ; 将化合物B2和三乙胺溶于干燥的二氯甲烷中，将3, 4-二苄氧基苯丙酰氯用干燥二氯 甲烷溶解，于冰浴搅拌下缓慢滴入，滴加结束后，冰浴反应，直至反应完全，浓缩二氯甲烷， 加入稀盐酸、乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得粗品，柱层析， 得纯品化合物B3 ; 将化合物B3溶于二氯甲烷中，室温搅拌下缓慢加入饱和的盐酸乙醚溶液，冰浴下反 应，直至反应完全，浓缩，抽滤，得产物化合物M ; 将化合物M溶于甲醇中，室温搅拌下滴入含有丙烯腈的甲醇溶液，滴加结束后，室温 反应，直至反应完全，浓缩得化合物B5 ; 将化合物B5和三乙胺溶于干燥的二氯甲烷中，将CBZCl用干燥二氯甲烷溶解，于冰浴 搅拌下缓慢滴入，滴加结束后，冰浴反应约，直至反应完全，浓缩二氯甲烷，乙酸乙酯萃取， 无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得粗品，柱层析，得纯品化合物B6 ; 将化合物B6溶于四氢呋喃中，加入饱和的氨甲醇溶液和Raney Ni，排尽空气后，于高 压釜中搅拌反应，直至反应完全，抽滤，浓缩得粗品，柱层析，得纯品化合物B7， 将化合物B7溶于四氢呋喃中，加入甲醇，钯/碳后，排尽空气，氢气常压下室温反应，直 至反应完全，过滤，真空干燥得终产物。8. 如权利要求3所述用于苦柯胺B质量控制中的参比化合物，其特征在于，化合物3的 合成过程，包括以下步骤： 将化合物B7和三乙胺溶于干燥的二氯甲烷中，将3, 4-二苄氧基苯丙酰氯用干燥二氯 甲烷溶解，于冰浴搅拌下缓慢滴入，滴加结束后，冰浴反应，直至反应完全，浓缩二氯甲烷， 加入稀盐酸、乙酸乙酯萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得粗品，柱层析， 得纯品化合物Cl ; 将化合物C 1溶于四氢呋喃中，加入甲醇，钯/碳后，排尽空气，氢气常压下室温反应， 直至反应完全，过滤，真空干燥得终产物。9. 权利要求1-3所述的任一化合物，在苦柯胺B质量检测中的应用。10. -种苦柯胺B的质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤： 供试品溶液的制备：精密称取苦柯胺B适量，置100mL量瓶中，加溶剂70ml，超声10分 钟并不断振摇使苦柯胺B溶解，放冷，用溶剂稀释至刻度，摇匀，用0. 45 μ m的滤膜滤过，续 滤液作为供试品溶液； 对照品储备溶液：精密称取化合物1、化合物2和化合物3对照品各适量，用甲醇溶解 并稀释制成每1ml中含45 μ g的溶液，作为杂质对照品储备溶液； 苦柯胺B对照品溶液：精密称取苦柯胺B对照品适量，加溶剂溶解并稀释制成每1ml中 含45 μ g的溶液，作为对照品储备溶液；分别精密量取杂质对照品储备溶液和对照品储备 溶液各5ml，置50ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液； 色谱条件： 照中国药典2005年版二部附录V D高效液相色谱法测定： 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0. 02mol/L磷酸二 氢铵溶液-乙腈（600 :470,混匀后用磷酸调节pH值为2. 4~3. 5)为流动相，柱温：40°C， 流速为1.0 ml/min ;检测波长为252nm，苦柯胺B峰与化合物1、化合物2和化合物3峰之间 的分离度均应大于6 ; 流速：I. 2ml/min ; 精密量取对照品溶液与供试品溶液各15 μ 1，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主 峰保留时间的12倍，苦柯胺B峰与化合物1、化合物2和化合物3峰之间的分离度均应大于 6〇
【专利摘要】本发明涉及用于苦柯胺B质量控制中的三种参比化合物，及其制备方法，以及用此三种参比化合物控制苦柯胺B质量的质量控制方法。
【IPC分类】C07C231/12, G01N30/02, C07C235/34
【公开号】CN105348136
【申请号】CN201510504827
【发明人】董凯, 王琳琳, 韩冬, 张存彦, 孙长海, 姚小青
【申请人】天津红日药业股份有限公司
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年8月17日