酵母菌株的活化培养基粉及活化、脱囊衣培养基粉及应用
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及脐橙脱囊衣领域，特别地，涉及一种酵母菌株的活化培养基粉。此外，本发明还涉及上述酵母菌株的活化方法、上述酵母菌株的脱囊衣培养基粉及上述酵母菌株的应用。
【背景技术】
[0002]脐橙为芸香科柑橘属的柑橘良种，在我国南方种植广泛，湖南位于国家柑橘产业带中段中心位置，脐橙资源丰富，加工业规模较大。含脐橙果肉的饮料是近十年来形成的新兴消费热点，其中悬浮的脐橙果肉为脐橙囊胞(也称为橙汁胞)，在脐橙果球中被脐橙外果皮和囊衣包裹。为获得脐橙囊胞，产业化加工中采取机械削皮方法，效率较高，此领域本团队已获发明专利授权(一种自动果蔬削皮机ZL201310020528.0)。
[0003]虽与蜜橘同属柑橘属，但去除外果皮之后，脐橙的囊衣与果肉连接十分紧密，无论机械法与手工法都易损伤果肉，若采用酸碱法，则造成环境污染，与发展资源节约型、环境友好型产业相抵触。所以需要研发高效、安全、环保的脱囊衣方法。
[0004]部分微生物由于生存需要，可产生多种酶分解植物成分，转化成微生物所需的营养物质。有针对性的筛选适合脱脐橙囊衣的微生物，以发酵法生产脐橙囊胞，可降低成本，提高效率，兼顾安全环保。
【发明内容】
[0005]本发明提供了一种酵母菌株的活化培养基粉及活化、脱囊衣培养基粉及应用，以解决脐橙囊衣脱取方法的技术问题。
[0006]本发明采用的技术方案如下:
[0007]本发明一方面提供了一种酵母菌株的活化培养基粉，酵母菌株为酵母菌株SYU-F201-04，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCN0.10760ο
[0008]酵母菌株的活化培养基粉以重量份计包括:橙皮粉21.7份，橘籽粉18.8份、秀丽锥囊藻7.7?8.6份、第一助剂3.3份，第一助剂包括质量比为33:16的羟甲基壳聚糖和微晶纤维素。
[0009]本发明另一方面提供了一种酵母菌株的活化方法，包括以下步骤:
[0010]将上述的活化培养基粉混匀后经机械化学处理，过筛，溶于水后，灭菌得到活化培养基。
[0011 ]将酵母菌株接种在活化培养基中，在37°C培养24h，得到活化的酵母菌株。
[0012]进一步地，活化培养基粉混匀后进行机械化学处理的操作具体为:
[0013]将活化培养基粉混匀使用振动磨进行处理，在冷却循环水温19?21°C、频率16Hz、钢棒加速度8?9g下处理时间17?18min，然后停机2.5min，再以钢棒加速度7.5g处理时间12?13min0
[0014]本发明另一方面提供了一种活化的酵母菌株在脱脐橙囊衣中的应用，包括以下步骤:
[0015]将上述的脱囊衣培养基粉混匀后，经机械化学处理，过筛，溶于水后，灭菌得到脱囊衣培养基。
[0016]将活化的酵母菌株接种到脱囊衣培养基中培养24h，得到脱囊衣工作液。
[0017]将脱囊衣工作液升温至40°C，加入去皮的脐橙，在pH值4.5、45?50°C的条件下，搅拌并保持恒温90?12min，脱去脐橙囊衣。
[0018]进一步地，脱囊衣培养基粉混匀后进行机械化学处理的操作具体为:
[0019]将脱囊衣培养基粉混匀使用振动磨进行处理，在冷却循环水温19?21°C、频率16Hz、钢棒加速度8?9g下处理时间14min，然后停机2.5min，再以钢棒加速度4.4g处理时间7min。
[0020]本发明具有以下有益效果:上述的活化培养基粉，制备得到的活化培养基，可复苏活化酵母菌株。活化的酵母菌株采用脱囊衣培养基增菌后，脱囊衣效果好，可有效满足脱脐橙囊衣的需求。
[0021]除了上面所描述的目的、特征和优点之外，本发明还有其它的目的、特征和优点。下面将参照图，对本发明作进一步详细的说明。
【附图说明】
[0022]构成本申请的一部分的附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中:
[0023]图1是本发明优选实施例的酵母菌株的活化方法流程图；
[0024]图2是本发明优选实施例的活化的酵母菌株在脱脐橙囊衣中的应用流程图。
【具体实施方式】
[0025]以下结合附图对本发明的实施例进行详细说明，但是本发明可以由权利要求限定和覆盖的多种不同方式实施。
[0026]参照图1，本发明一方面提供了一种酵母菌株的活化培养基粉，酵母菌株的活化培养基粉以重量份计包括:橙皮粉21.7份，橘籽粉18.8份、秀丽锥囊藻7.7?8.6份、第一助剂
3.3份，第一助剂包括质量比为33:16的羟甲基壳聚糖和微晶纤维素。其中橙皮粉为脐橙果皮晒干或烘干后粉碎所得粉末，橘籽粉为柑橘果籽晒干或烘干后粉碎所得粉末。
[0027]酵母菌株SYU-F201-04，分离自脐橙叶片组织，已于2015年4月28日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号为CGMCC勵.10760。本发明采用5￥1^201-04菌，分类命名为1676102711^ sp.。该菌功能特殊，脱囊衣效果好，但对培养基需求也较特殊，不论干粉还是甘油保存，处于休眠状态后必须采用活化培养基进行复苏和活化，否则性能无法满足脱囊衣需求。
[0028]以重量份计，活化培养基粉中:橙皮粉21.7份，橘籽粉18.8份、秀丽锥囊藻7.7?8.6份、第一助剂3.3份。橙皮粉、橘籽粉、秀丽锥囊藻的含水量在3?5%。
[0029]在活化培养基配方中，橙皮粉与橘籽粉比例为橙皮粉21.7份，橘籽粉18.8份，该比例是经多次试验得到，若橙皮粉比例高则果胶多，不利于菌体活化、复苏;若橘籽粉比例高则油脂含量高，微生物代谢缓慢，降低活化速率。这一条件是控制复苏的关键之一。
[0030]与锥囊藻科其他藻种不同，秀丽锥囊藻针对SYU-F201-04菌具有明显的促生长作用。其具体表现为秀丽锥囊藻添加量在7.7?8.6份时，可将菌种复苏时间缩短140 %以上，但因该藻中含特殊比例的果胶和硅质，在复苏阶段菌少活性低时，添加量超过8.6份时，活化效果反而大大降低。而低于7.7份，秀丽锥囊藻的细圆锥形、中部略膨胀具细微波形边缘的结构效应又显现非常不明显，难以保证目标菌体充分利用。所以，秀丽锥囊藻添加量在7.7?8.6份，这一条件是控制复苏的另一关键之一。
[0031]本发明具有以下有益效果:上述的活化培养基粉，制备得到的活化培养基，可复苏活化酵母菌株。活化的酵母菌株采用脱囊衣培养基增菌后，脱囊衣效果好，可有效满足脱脐橙囊衣的需求。
[0032]本发明一方面提供一种酵母菌株的活化方法，参照图1，包括以下步骤:
[0033]S110:将活化培养基粉混匀后经机械化学处理，过筛，溶于水后，灭菌得到活化培养基。
[0034]S120:将酵母菌株接种在活化培养基中，在37°C培养24h，得到活化的酵母菌株。
[0035]将橙皮粉、橘籽粉、秀丽锥囊藻可先分别粉碎至60?80目的粗粉，也可直接购买该粒径大小的原料，或使用较大粒径的橙皮粉、橘籽粉、秀丽锥囊藻在机械化学处理时适当延长处理时间。橙皮粉、橘籽粉和秀丽锥囊藻经机械化学处理，即橙皮粉、橘籽粉、秀丽锥囊藻之间通过粉碎、挤压、撞击和剪切手段时，发生化学反应。
[0036]活化培养基粉混匀后进行机械化学处理，可在振动磨中进行，活化培养基粉在振动磨中，活化培养基粉同时发生粉碎、撞击和剪切的作用，各活化培养基粉发生固态机械化学反应。显然活化培养基粉也可在其他装置中进行该步骤，只要可使各活化培养基粉间发生粉碎、撞击和剪切的作用即可。过筛时可过400目筛。过筛之后的粉体溶于水后可在121°C，20min灭菌得到适用于SYU-F201-04的活化培养基。
[0037]酵母菌株在活化培养基中，在37°C培养24h。每100g溶于900ml去离子水中，121°C，20min灭菌得到SYU-F201-04活化培养基。将上述1000ml活化培养基中接入105个SYU-F201-04菌后，37°C，摇瓶培养24h，得活化培养液，酵母菌株活化完成。
[0038]可选地，活化培养基粉混匀后经粉碎、撞击和剪切处理的操作具体为:
[0039 ]将活化培养基粉混匀使用振动磨进行处理，在冷却循环水温19?21°C、频率16Hz、钢棒加速度8?9g下处理时间17?18min，然后停机2.5min，再以钢棒加速度7.5g处理时间12?13min。在该条件下，活化培养基粉在振动磨中同时经历粉碎、撞击和剪切作用，各原料发生两次不同的固态机械化学反应，处理效果好。振动磨可以为高能振动磨。在经振动磨处理后过筛得到活化基粉。
[0040]本发明另一方面提供了一种酵母菌株的脱囊衣培养基粉，其特征在于，以重量份计包括:橙皮粉77.2份，囊衣粉32.5?33.9份、淡红金粒藻4.8份、第二助剂6.0份。第二助剂包括质量比为12:5的碳酸氢钾碳酸氢钾和羟丙基-β-环糊精。
[0041 ]酵母菌株SYU-F201-04活化之后，必须采用脱囊衣培养基进行增菌，否则性能无法满足脱囊衣需求。
[0042]橙皮粉、囊衣粉、淡红金粒藻的含水量可在3?5%。在脱囊衣培养基配方中，橙皮粉与囊衣粉比例为橙皮粉77.2份，囊衣粉32.5?33.9份，该比例是经多次试验得到。若橙皮粉比