一种头孢羟氨苄的药物组合物及其医药用图
【专利摘要】本发明公开了一种头孢羟氨苄的药物组合物及其医药用途，本发明提供的头孢羟氨苄的药物组合物中含有头孢羟氨苄和一种结构新颖的天然产物化合物(Ⅰ)，头孢羟氨苄、化合物(Ⅰ)单独应用时，均具有抗焦虑的作用，两者合用可以提高抗焦虑作用，可以开发成抗焦虑的药物，与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
【专利说明】
一种头孢羟氨苄的药物组合物及其医药用途
技术领域
[0001] 本发明属于生物医药领域，涉及头孢羟氨苄的新用途，具体涉及一种头孢羟氨苄 的药物组合物及其医药用途。
【背景技术】
[0002] 头孢羟氨苄为半合成第一代口服头孢菌素，抗菌活性与头孢唑啉相似，为广谱抗 生素，对葡萄球菌、肺炎链球菌及大肠杆菌等有效，对耐青霉素的葡萄球菌也有效。口服吸 收良好。主要用于泌尿道、胆道、及呼吸道等感染。
[0003] 焦虑通常是由预先知道但又不可避免的、即将发生的恶性事件引起的一种预期反 应，以恐惧、忧虑、紧张不安等精神障碍为主要表现，并伴有心悸、多汗、呼吸窘迫、手脚发凉 等植物神经功能紊乱的症状。随着现代社会工作、人际关系、经济压力等诸多因素作用的加 剧，本病已成为现代疾病谱的常见病和多发病。目前的一线抗焦虑药物虽能缓解部分症状， 但副作用较多，因此研究开发疗效好、副作用少的抗焦虑新药成为近些年来研究的热点。 [0004]迄今为止，尚未见头孢羟氨苄及其药物组合物与抗焦虑的相关性报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种头孢羟氨苄的药物组合物，该药物组合物中含有头孢 羟氨苄和一种结构新颖的天然产物，头孢羟氨苄和该天然产物可以协同抗焦虑。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 一种具有下述结构式的化合物（I)，
[0009] -种头孢羟氨苄的药物组合物，包括头孢羟氨苄、如权利要求1所述的化合物（I) 和药学上可以接受的载体，制备成需要的剂型。
[0010] 进一步地，药学上可以接受的载体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、 崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体或润滑剂。
[0011] 进一步地，所述剂型包括片剂、胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、 膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。
[0012] 上述化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将砂仁粉碎，用70~90%乙醇 热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取， 分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中正丁醇取物用大 孔树脂除杂，先用20 %乙醇洗脱12个柱体积，再用80 %乙醇洗脱15个柱体积，收集80 %洗脱 液，减压浓缩得80%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中80%乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离， 依次用体积比为80:1、40:1、20:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步骤 (c)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1、20:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯 度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百 分浓度为65 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集13~17个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到 化合物(I)。
[0013]进一步地，化合物（I)的制备方法中，步骤(a)用80%乙醇热回流提取，合并提取 液。
[0014]进一步地，化合物（I)的制备方法中，所述大孔树脂为D101型大孔吸附树脂。
[0015]进一步地，化合物（I)的制备方法中，步骤(a)中用二氯甲烷代替乙酸乙酯进行萃 取，得到二氯甲烷萃取物。
[0016] 上述化合物(I)在制备抗焦虑的药物中的应用。
[0017] 上述头孢羟氨苄的药物组合物在制备抗焦虑的药物中的应用。
[0018] 本发明的优点：
[0019] 本发明提供的头孢羟氨苄的药物组合物中含有头孢羟氨苄和一种结构新颖的天 然产物，头孢羟氨苄和该天然产物单独作用时，具有抗焦虑作用；二者联合作用时，抗焦虑 作用进一步提高，可以开发成抗焦虑的药物。本发明与现有技术相比具有突出的实质性特 点和显著的进步。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021 ]实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0022]分离方法：（a)将砂仁（2kg)粉碎，用80 %乙醇热回流提取（15L X 3次），合并提取 液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油醚（3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次）和水饱和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中 乙酸乙酯萃取物用D101型大孔树脂除杂，先用20 %乙醇洗脱12个柱体积，再用80 %乙醇洗 脱15个柱体积，收集80%洗脱液，减压浓缩得80%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中80%乙醇 洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1 (10个柱体积）、40:1 (8个柱体积）、20:1 (8个柱体积)和10:1(9个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步骤(c)中组 分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1(7个柱体积）、20:1(8个柱体积)和15:1(7 个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键 合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为65 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集13~17个柱体积 洗脱液，洗脱液减压浓缩得到化合物（I) (HPLC归一化纯度大于98% )。
[0023] 结构确证：HR-ESI-MS显示[M+H]+为m/z249.1443,结合核磁特征可得分子式为 C15H2Q〇6，不饱和度为5。核磁共振氢谱数据SH(ppm，CDC1 3，500MHz): H-3 (3 ? 13，m)，H-4a (2.21，m)，H-4b(2.14，m)，H-5a(1.76，m)，H-5b(1.67，m)，H-6(2.10，m)，H-7(2.79，d，J= 8.3Hz)，H-10a(2.45,d，J=15.7Hz)，H-10b(l.98，d，J=15.7Hz)，H-11(9.85,s)，H-12 (9.75，d，J = 4.6Hz)，H-13(0.89，d，J = 7.2Hz)，H-14(0.99，s)，H-15(1.15，s);核磁共振碳 谱数据Sc(ppm，CDCl3,125MHz): 182.3(C，1-C)，136.8(C，2-C)43.7(CH，3-C)，20.3(CH2,4-C)，36.3(CH2,5-C)，26.1(CH，6-C)，59.3(CH，7-C)，213.5(C，8-C)，48.2(C，9-C)，29.9(CH 2， 10-C)，191.4(CH，11-C)，202.2(CH，12-C)，10.9(CH3，13-C)，19.8(CH 3，14-C)，25.4(CH3，15-C)。红外波谱表明该化合物含有羰基（1735cnf1)，醛基（1640cnf 1)。h-NMR谱结合HSQC谱显示 三个甲基质子信号知0.89(311，(1，1 = 7.2他）、0.99(311，8)、1.15(311，8)，三组亚甲基质子信 号 SH2.21(lH，m)与2.14(111，111)、1.76(111，111)与1.67(111，111)、2.45(111，(1，了=15.71^)与1.98 (111，(1，1=15.7泡），两个醛基质子信号9.85(111，8)与9.75(9111，(1，1 = 4.6抱），三个次甲基 质子信号知3.13(111，111)，2.10(111，111)与2.79(111，(1，了 = 8.3抱）。13(：-匪1?、0￡?1'和1^〇(：谱中显 示有15个碳信号，包括三个甲基，三个亚甲基，五个次甲基(两个醛基），以及四个季碳(一个 羰基碳和两个烯烃碳），以上功能结构再结合不饱和数表明该化合物为双环结构。 1H-hCOSY 谱中存在H-3/H-12、H-3/H2-4/H2-5/H-6/H-7相关信号，同时HMBC谱中显示有H 2-4与C-2和C-3，出-5与〇3，11-6与(：-8，11-7与(：-1，112-10与(：-1、(：-2、(：-7、(：-8和(：-14，11-11与(：-1、(：-2和(：-3， H-12 与 C-2，H3-13 与 C-5 和 C-7，H3-14 与 C-8、C-9 和 C-10，H3-15 与 C-9 和 C-10 相关信号，通过上 述匪R谱中的相关信息可以构建该化合物的连接方式，并且上述波谱数据表明该化合物为 tremulane型倍半砲。在tremulane型倍半砲中，H-6与H-7位一般为0构型，出 -14构型通常处 是M立，H3-15构型为a位。在该化合物的N0E试验中体现的H-6与H-7以及H-7/U-14相关信号 符合tremulane型倍半萜的构型关系。此外，N0ESY谱中的H-12与H-7相关信号暗示C-12位的 醛基为0构型。综合氢谱、碳谱、HMBC谱和N0ESY谱，以及文献关于相关类型核磁数据，可基本 确定该化合物如下所示，立体构型进一步通过EO)试验确定，理论值与实验值基本一致。该 化合物化学式及碳原子编号如下：
〇
[0025] 实施例2:药理作用 [0026] 1、材料与方法
[0027] 1.1动物
[0028] SPF级大鼠，初始体质量150~170g，购自军事医学科学院实验动物中心。大鼠 饲养于中国科学院心理研究所SPF级动物房。光照节律12L: 12D(7:00~19:00 )，室温(22 土 2) °C，湿度50%左右，动物可以自行摄取标准饲料和清洁饮用水。
[0029] 1.2药物与试剂
[0030] 头孢羟氨苄购自中国药品生物制品检定所。化合物（I)自制，制备方法见实施例1。 空白组用生理盐水和吐温80作为对照。氯化钠注射液，山东金洋药业有限公司。地西泮 (DZP)，北京益民药业有限公司。用生理盐水配成所需浓度的溶液，给药容量lml/100g，新鲜 配制。
[0031] 1.3仪器
[0032] 大鼠高架十字迷宫，BeckmanAllegra64R高速冷冻离心机。
[0033] 1.4动物分组及给药
[0034] SEt^大鼠随机分为头孢羟氨苄组、化合物（I)组、头孢羟氨苄与化合物（I)组合物 组、DZP组和空白组共5组。其中头孢羟氨苄组、化合物（I)组按40mg ? kg^T1灌胃给药，头孢 轻氨节与化合物（I)组合物组按20mg ? kg^cT1头孢轻氨节+20mg ? kg^cT1化合物（I)灌胃给 药，DZP按10mg ? kg^cf1给药，空白组灌服等容积的生理盐水，lml/100g，每天1次，连续10d， 于dlO各给药组和盐水对照组末次给药lh后，地西泮组给药0.5h后，于8:00~14:00pm进行 行为测试。
[0035] 1.5大鼠高架十字迷宫实验
[0036] 高架十字迷宫包括两个开臂（长50.8cm，宽10.2cm)与两个闭臂（长50.8cm，宽 10.2cm，高40.6cm)，距地面72.4cm。迷宫测试前将每只大鼠放入1个45cmX 30cmX 15cm塑料 盒中，任其自由探究5min后迅速置于EPM的中央平台处，使其头部正对其中1个开放臂，采用 红外线技术记录5min内动物进入开臂次数(openarmentry，0E)、闭臂次数(closearmentry， CE)及迷宫中央区内的次数及在开臂与闭臂内的运动时间。以进入开臂次数与总入臂次数 的百分率（他6。61'〇611丨386〇€6111：1^681：〇1：116(^6仙1'1118,0￡%)及在开臂内运动时间与开臂闭 臂内的总时间的百分率（thepercentageof timespentintheopenarms，0T% )代表抗焦虑指 标。
[0037] 1.6开场实验
[0038] 圆形开场半径90cm，高60cm，开场测试前将每只大鼠放入1个45cm X 30cm X 15cm塑 料盒中，任其自由探究5min后迅速放入开场的边缘区，采用视频跟踪分析系统自动记录大 鼠10min的活动情况。观察指标如下：进入开场中央(半径52cm圆形区域）的次数及停留时 间。
[0039] 1.7统计学分析
[0040]各组数据均以x±s表示，实验结果两组比较采用双侧t检验，多组间比较先用单因 素方差分析，差异有显著性时再用Dunnettst-test进行统计分析。运用软件SAS8.2(0ne-WayANOVA)进行处理。
[0041 ] 2、实验结果
[0042] 2.1大鼠高架十字迷宫实验结果
[0043]结果表明：与空白组比较，头孢羟氨苄、化合物（I)单独使用时可以明显增加0T% 和0E%值(P<0.05);与空白组比较，头孢羟氨苄和化合物（I)联合使用可以进一步增加 0T%和0E%值(P<0.01);说明头孢羟氨苄、化合物（I)及其组合物具有抗焦虑作用。见表1。 [0044]表1大鼠高架十字迷宫实验结果
[0046] 2.2大鼠开场实验结果
[0047]结果表明：与空白组比较，头孢羟氨苄、化合物（I)单独使用时可以明显增加进入 中央区的次数和在中央区的停留时间（P < 0.05);与空白组比较，头孢羟氨苄和化合物（I) 联合使用可以进一步增加进入中央区的次数和在中央区的停留时间（P<〇.01);说明头孢 羟氨苄、化合物(I)及其组合物具有抗焦虑作用。见表2。
[0048] 表2大鼠开场实验结果
[0050] 以上结果表明，头孢羟氨苄、化合物（I)单独应用时，均具有抗焦虑的作用，并且两 者合用可以提高抗焦虑作用，可以开发成抗焦虑的药物。
[0051] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种具有下述结构式的化合物α)，2. -种头孢羟氨苄的药物组合物，其特征在于:包括头孢羟氨苄、如权利要求1所述的 化合物(I)和药学上可以接受的载体，制备成需要的剂型。3. 根据权利要求2所述的头孢羟氨苄的药物组合物，其特征在于:药学上可以接受的载 体包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载 体或润滑剂。4. 根据权利要求2所述的头孢羟氨苄的药物组合物，其特征在于:所述剂型包括片剂、 胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射 剂、栓剂、喷雾剂、滴剂或贴剂。5. 权利要求1所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于，包含以下操作步骤：（a)将砂 仁粉碎，用70~90%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯 和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步 骤(a)中正丁醇取物用大孔树脂除杂，先用20%乙醇洗脱12个柱体积，再用80%乙醇洗脱15 个柱体积，收集80%洗脱液，减压浓缩得80%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中80%乙醇洗脱 浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为80:1、40:1、20:1和10:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脱得到4个组分；（d)步骤(c)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1、20:1和 15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的 反相硅胶分离，用体积百分浓度为65 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集13~17个柱体积洗脱 液，洗脱液减压浓缩得到化合物(I)。6. 根据权利要求5所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:步骤(a)用80%乙醇热回 流提取，合并提取液。7. 根据权利要求5所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:所述大孔树脂为D101型 大孔吸附树脂。8. 根据权利要求5所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:步骤(a)中用二氯甲烷代 替乙酸乙酯进行萃取，得到二氯甲烷萃取物。9. 权利要求1所述的化合物（I)在制备抗焦虑的药物中的应用。 1 〇.权利要求2~4任一所述的头孢羟氨苄的药物组合物在制备抗焦虑的药物中的应 用。
【文档编号】A61P25/22GK105820045SQ201610256308
【公开日】2016年8月3日
【申请日】2016年4月23日
【发明人】黄亦琼
【申请人】黄亦琼