专利名称：一种辣椒红色素脱辣的方法
技术领域：
本发明涉及的是一种用高速逆流色谱法(HSCCC)从辣椒红色素中脱辣椒碱的方 法。
背景技术：
辣椒红色素是一种天然类胡萝卜素，它不仅色泽鲜艳，色价高，着色力强，保色效 果好，可以有效地延长仿真食品的货架期，而且安全性高，对人体无任何毒副作用，已被 FDA、EEC、FA0/WH0和中国的GB等组织审定为无限制性使用的天然食品添加剂。除此以外， 辣椒红色素还具有营养保健作用，并被现代科学证明有抗癌功能，被广泛应用于医药、食品 及高级化妆品中，具有很高的生产价值。 传统辣椒红色素的生产通常采用溶剂法，该工艺产品收率低、纯度较低，且具有辣 味和杂质，质量较差。产品中辣椒碱的存在严重制约了辣椒红色素的使用。对于辣椒红色 素的脱辣，目前主要采用柱色谱。该方法得到的产品纯度较高，但是工艺复杂，回收率较低， 目前还不适用于工业化生产。 高速逆流色谱是一种新型的液_液分配色谱，其原理是基于样品在旋转螺旋管内 的互不混溶的两相溶剂间分配不同而获得分离，因而无须任何固体载体或支撑体，能达到 在短时间内实现高效分离和制备，并且可以达到几千个理论塔板数。与柱色谱相比较，它克 服了固定相载体带来的样品吸附、损失、污染和峰形拖尾等缺点。目前此项技术已被应用于 生化、生物工程、医药、天然产物化学、有机合成、环境分析、食品、地质、材料等领域。
因此，本发明采用高速逆流色谱法从辣椒红色素中脱除辣椒碱，达到纯化辣椒红 色素，提高产品品质，扩大产品使用范围的目的。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服传统分离技术的缺陷，采用高速逆流色谱法 (HSCCC)，提供一种从辣椒红色素粗提物中脱除辣椒碱的方法。该方法适用于不同工艺条件 制备的辣椒红色素粗提物， 一次脱辣率达到75%以上，二次脱辣率达到90%以上，具有工 艺简单、脱辣率高、回收率高的特点。
本发明的技术方案包括如下步骤 采用高速逆流色谱法进行脱辣，它包括制备构成固定相、流动相的溶剂体系；先用
固定相充满高速逆流色谱仪柱子，调节主机转速，将流动相泵入柱内；待体系动态平衡后，
由进样阀进样；样品为辣椒红色素粗提物；根据紫外图谱监测器接收各组分。首先选择一
个溶剂体系的两相组合，溶剂体系由正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水等四个组分构成。 根据溶解度常数，在不破坏体系平衡的情况下，调节四个组分的体积比依次为
3-6 : 3-7 : 3-7 : 4-8，例如5 : 7 : 4 : 6 ;6 : 4 : 3.5 : 6.5 ;上述体系上相为固定
相，下相为流动相。经分离可从辣椒红色素粗提物中脱除辣椒碱，一次脱辣率达到75%以 上，二次脱辣率达到90%以上。
实验条件适合温度20-3(TC，在上述温度范围内，脱辣率变化不大，对峰形基本没 有影响。 样品为不同工艺条件制备的辣椒红色素粗提物，不需要任何预处理操作，可以直 接进样。 采用北京天宝物华生物技术有限公司生产的GS10A3型高速逆流色谱仪，该机型 柱体积为240mL，进样圈有20mL，并配有AKTA蛋白质纯化仪。进样前，先用固定相充满高 速逆流色谱仪柱子，调整主机转速为600-1000rpm，以0. 5-2mL/min的流速将流动相泵入柱 内。 根据紫外图谱监测器接收各个组分，并在分离结束后收集固定相，分别浓縮蒸干， 即可实现从辣椒红色素粗提物中脱除辣椒碱，一次脱辣率达到75%以上，同时得到辣椒碱 含量30mg/g以上的组分。整个分离过程不超过4h。辣椒红色素进行二次分离，脱辣率可达 到90%以上。
具体实施方式
实施例1 选取正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水体系在高速逆流色谱仪上脱辣。先按
5:7:4: 6体积比将上述溶剂组分配置于分液漏斗中，摇匀后静止分层。待平衡一段
时间后，将上相和下相分开。采用GS10A3型高速逆流色谱仪，配有聚四氟乙烯柱，柱体积为 240mL， 20mL进样圈，并配有AKTA蛋白质纯化仪。称取辣椒红色素粗提物500mg，溶于10mL 的两相溶剂(等体积的上、下相)中待用。进样前，先用固定相充满高速逆流色谱仪柱子，调 节主机转速为850rpm，以2mL/min的流速将流动相泵入柱内；待整个体系建立动态平衡后， 由进样阀进样；根据紫外图谱监测器接收各个组分，并在分离结束后收集固定相，分别浓縮 蒸干。采用分光光度法进行分析，辣椒红色素粗提物的一次脱辣率达到75. 17%，同时得到 辣椒碱含量为30. 61mg/g的组分。辣椒红色素进行再次分离，二次脱辣率可达到91. 30% 。
实施例2 选取正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水体系在高速逆流色谱仪上脱辣。先按
6 : 4 : 3.5 : 6.5体积比将上述溶剂组分配置于分液漏斗中，摇匀后静止分层。待平衡
一段时间后，将上相和下相分开。采用GS10A3型高速逆流色谱仪，配有聚四氟乙烯柱，柱体 积为240mL， 20mL进样圈，并配有AKTA蛋白质纯化仪。称取辣椒红色素粗提物500mg，溶于 10mL的两相溶剂(等体积的上、下相)中待用。进样前，先用固定相充满高速逆流色谱仪柱 子，调节主机转速为800rpm，以1. 5mL/min的流速将流动相泵入柱内；待整个体系建立动态 平衡后，由进样阀进样；根据紫外图谱监测器接收各个组分，并在分离结束后收集固定相， 分别浓縮蒸干。采用分光光度法进行分析，辣椒红色素粗提物的一次脱辣率达到76. 03%， 同时得到辣椒碱含量为33. 70mg/g的组分。辣椒红色素进行再次分离，二次脱辣率可达到 93. 68%。
权利要求
一种从辣椒红色素中脱辣椒碱的方法，它包括制备上相固定相、下相流动相的溶剂体系；先用固定相充满高速逆流色谱仪柱子，调节主机转速，将流动相泵入柱内；待体系动态平衡后，由进样阀进样；样品为辣椒红色素粗提物；根据紫外图谱监测器接收各个组分，并在分离结束后收集固定相。其特征在于所述的溶剂体系由正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水等四个组分组成，四组分的体积比依次为3-6∶3-7∶3-7∶4-8，上相为固定相，下相为流动相。
2. 根据权利要求1所述的一种从辣椒红色素中脱辣椒碱的方法，其特征在于所述的主机转速为600-1000rpm，所述的流动相泵入柱内的流速为0. 5-2mL/min。
3. 根据权利要求1或2所述的一种从辣椒红色素中脱辣椒碱的方法，其特征在于所述的溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，四组分的体积比依次为5 : 7 : 4 : 6，主机转速为850rpm，流动相泵入柱内的流速为2mL/min。
4. 根据权利要求1或2所述的一种从辣椒红色素中脱辣椒碱的方法，其特征在于所述的溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，四组分的体积比依次为6 : 4 : 3.5 : 6.5，主机转速为800rpm，流动相泵入柱内的流速为1. 5mL/min。
全文摘要
本发明涉及的是一种用高速逆流色谱法(HSCCC)从辣椒红色素中脱辣椒碱的方法。它包括制备上相固定相、下相流动相的溶剂体系正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水等四个组分，四组分的体积比依次为3-6∶3-7∶3-7∶4-8；条件温度20-30℃，用固定相充满柱子，主机转速600-1000rpm，以0.5-2mL/min的流速将流动相泵入柱内；待体系动态平衡后，进样阀进样；样品为辣椒红色素粗提物；根据紫外图谱监测器接收各个组分，并在分离结束后收集固定相，分别浓缩蒸干，即可实现从辣椒红色素粗提物中脱除辣椒碱，一次脱辣率达到75％以上，同时得到辣椒碱含量30mg/g以上的组分。辣椒红色素进行二次分离，脱辣率可达到90％以上。该方法适用于不同工艺条件制备的辣椒红色素粗提物，具有工艺简单、脱辣率高、回收率高的特点。
文档编号C09B61/00GK101735645SQ20091025923
公开日2010年6月16日 申请日期2009年12月17日 优先权日2009年12月17日
发明者冯阳阳, 孙爱东, 张德权, 李博生, 洪荒, 王建中, 胡晓丹 申请人:胡晓丹