技术特征：
1.一种基于功能核酸的检测水体中汞离子的荧光探针，其特征在于，包括hg
2+
特异识别探针tro（thymidine rich oligonucleotide）和荧光指示探针gelred；所述hg
2+
特异识别探针tro由25个碱基组成，其中引入了五个t-t错配碱基对和三个自互补碱基对，其核酸序列为：5
’‑
tttctttccgggggggcgtttgtta
ꢀ‑3’
；当存在hg
2+
时，t-hg
2+-t错配能诱导tro折叠形成具有稳定发卡结构的tro-hg
2+
复合物；所述荧光指示探针为高灵敏核酸荧光染料gelred，其在游离状态下发出微弱的荧光，一旦与tro-hg
2+
复合物结合后，gelred荧光强度显著增强，荧光信号强度与tro-hg
2+
复合物的数量相关；通过建立荧光强度与hg
2+
浓度之间对应的线性关系，实现对汞离子的定量检测。2.一种使用权利要求1所述的基于功能核酸的检测水体中汞离子的荧光探针的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：将tro与hg
2+
在tris缓冲液中反应，形成tro-hg
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复合物；所述tro浓度为0.01~5μmol/l；hg
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浓度为0.1nmol/l~5μmol/l；tris缓冲液浓度为0.01~0.1mol/l，其中含20~100mmol/l nano3，ph值为6.4~8.6；tro与hg
2+
的反应时间为3~15min；将gelred加入上述tro-hg
2+
复合物中，室温下避光孵育，使用荧光分光光度计以290nm的激发波长进行荧光光谱测定，并获得hg
2+
浓度-荧光强度值标准曲线；所述gelred为0.01~2
×
gelred溶液；孵育时间时间为2～15分钟。3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，步骤1）中：所述tro浓度为0.05~2μmol/l；hg
2+
浓度为5nmol/l~2μmol/l；tris缓冲液浓度为0.02~0.05mol/l，其中含30~50mmol/l nano3，ph值为7.0~7.6；tro与hg
2+
的反应时间为为5~8min；步骤2）中：所述gelred为0.05~1
×
gelred溶液，孵育时间为5～10min。4.根据权利要求2或3所述的检测方法，其特征在于：hg
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浓度与荧光强度变化f/f0呈线性关系，且线性方程为y=-0.0004468x+0.8815，r2=0.99103。5.根据权利要求2或3所述的检测方法，其特征在于：对水体中hg
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检测线性范围为10nmol/l～800nmol/l，检出限为0.14 nmol/l。
技术总结
本发明涉及生物传感技术领域，提供一种基于功能核酸的检测水体中汞离子的荧光探针及检测方法，以富T的功能核酸（Thymidine Rich Oligonucleotide，TRO）作为Hg
技术研发人员：马莉萍 李云霞 马生龙 聂莹莹 宋玉哲
受保护的技术使用者：甘肃省科学院传感技术研究所
技术研发日：2022.12.13
技术公布日：2023/3/28