本发明属于花生多糖脱色技术领域，具体涉及一种保护花生多糖的脱色液及制备方法。
背景技术：
花生(arachishypogaea)又名落花生、长生果，粕是花生仁榨油后的副产品，其中花生是全球重要的油料作物之一，种植面积仅次于油菜。
花生粕是从花生仁经压榨提炼油料后的产品，通常花生粕分一次粕，二次粕。一次粕的意思是经过初次压榨剩余的花生渣，二次粕即压榨过两次的花生渣。通常花生粕的产量可以达到44%以上，也就是说花生的出油率最高可达55%，所以花生粕的产量相对是比较少的。花生粕富含植物蛋白，其口感较好，比较适合于禽畜水产饲料中使用。花生多糖是花生粕中除蛋白质外的第二大营养组成成份，总糖含量为32.5％。花生多糖具有免疫调节、保护肝脏、降血压等生物特性，同时抗氧化性较强，在医学领域具有广阔的应用前景。
脱色剂根据脱色原理大概可以分为三类，絮凝脱色剂、氧化脱色剂和吸附脱色剂。絮凝脱色剂集脱色、絮凝、降解codcr等多种功能于一身的季胺型阳离子高分子化合物。吸附脱色剂一般为活性炭、白土或吸附树脂可直接用过滤的方式滤除油品中的杂质和氧化物，集除杂、去味、脱色、分离于一体，使变黑的油品变成浅色透明的液体，加工后柴油的酸值、色度符合国家燃料标准。吸附脱色剂会大量吸附花生多糖，给花生多糖造成很大的损失。
但是，一般来说，用于提取花生多糖的花生粕是高温压榨过的花生粕，具有很深的颜色，含有大量的色素，使得花生多糖中的颜色较深，不仅影响花生多糖的应用，而且对于分光光度法测定花生多糖的特性有很大的影响。而传统的脱色剂使用后，大部分会破坏花生多糖，不仅使得花生多糖的含量下降，而且会大幅度的破坏花生多糖的抗氧化性，因此，需要一种既能够去除花生粕的深色，又不影响花生多糖的含量和活性的脱色剂。
技术实现要素：
本发明的目的是为了解决花生多糖提取物种含有很深的颜色，而传统的氧化脱色剂还是吸附脱色剂的使用均会使花生多糖造成很大的损失，为了解决上述问题，本发明提供了一种保护花生多糖活性的脱色液，所述脱色液的制备原料包括：活性炭和花生多糖保护膏，其中，所述花生多糖保护膏由花生壳粉末、固体硫酸铵粉末、胆固醇和壳聚糖制备而成。
同时，本发明还提供了一种保护花生多糖活性的脱色液的制备方法，所述脱色液的制备方法如下：
a)活性炭粉碎至40~100目，得到活性炭粉末；
b)将含水量小于6~8%的花生壳粉碎至40~100目，得到花生壳粉末；
c)将花生壳粉末置于盐酸水溶液中浸泡；
d)将盐酸水溶液处理后的混合液ⅰ一次离心，过滤得到上清液ⅰ和滤渣ⅰ；
e)硫酸铵分级沉淀：将固体硫酸铵粉末加入上清液ⅰ中，充分搅拌，二次离心，过滤得到上清液ⅱ和沉淀物ⅰ；
f)在上清液ⅱ中加入0.1~1%（m/v）的胆固醇、2~6%（m/v）壳聚糖，得到混合溶液ⅱ；
g)将混合溶液ⅱ在60~80℃，0.1~1mp的条件下去除混合溶液ⅱ中溶剂，得到花生多糖保护膏；
h)将花生多糖保护膏中加入ph7.2±0.2的磷酸盐缓冲溶液中，使花生多糖保护膏完全溶解，得到花生多糖保护液；
i)将活性炭粉末添加到花生多糖保护液中，得到本发明所述的保护花生多糖的脱色液。
进一步，所述一次离心的条件为：5000~8000r/min的条件下离心10~30min。
进一步，所述固体硫酸铵粉末与上清液ⅰ混合的料液比为1~3g/ml。
进一步，所述二次离心的条件为：6000~10000r/min的条件离心15~30min。
进一步，所述花生多糖保护膏与磷酸盐缓冲溶液的混合比例为10~20g/l。
进一步，所述活性炭粉末与磷酸盐缓冲溶液的混合比例为10~100g/l。
进一步，所述将花生壳粉末置于盐酸水溶液中浸泡具体为置于1~5mol/l的盐酸水溶液中浸泡20~180min。
有益效果
发明人在使用花生粕提取花生多糖的时候发现，花生粕的颜色较深，提取出的花生多糖会溶解有花生粕的深色，这些花生粕深色色素大多数和花生多糖的溶解性类似，可以溶解于乙醇和水，因此在提取多糖的同时会溶解花生粕的深色色素。为了解决此问题，申请人提出了一种保护花生多糖的脱水液，脱色液中含有花生壳粉末，并对花生壳粉末进行了预处理，采用磷酸、胆固醇和壳聚糖对花生壳粉末进行包埋，使其可以缓慢吸附花生多糖中的深色色素，同时不影响花生多糖的抗氧化活性。最后，将粉碎的活性炭粉末放入磷酸缓冲液中，可以使剩余的不能被包埋花生壳粉末吸附结合的少量深色色素吸附，经过含壳聚糖的磷酸缓冲液浸泡过的活性炭对花生多糖抗氧化性的影响很小，实验证明，本发明制备的脱色液可以给花生多糖脱色的同时，不影响其的花生多糖提取率，对其抗氧化性的影响也很小。单独使用活性炭脱色后，花生多糖的提取率从未经脱色的9.57%下降到2.31%，可见大部分的花生多糖都被活性炭吸附，而本发明的脱色液的提取率为7.40%，可以显著提升花生多糖的含量，同理，dpph半数抑制浓度从活性炭的347mg/ml降低到实施例2的98mg/ml非常接近于未经过滤的58mg/ml，可见本发明制备的脱色液可以保持花生多糖的抗氧化活性。
本发明制备的保护花生多糖的脱色液成本低，制备方法简单，使用方法更简单，仅需将含有深色色素的花生多糖溶解于本发明制备的保护花生多糖的脱色液中，充分搅拌后过滤，随后旋转蒸发去除溶剂即可得到本发明的无色的花生多糖。具有很高的应用价值。
具体实施方式
下面结合具体实施例子进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明，而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域的技术人员对本发明各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所规定的范围。
本发明实施例中，所述ds-305糖用活性炭来自溧阳市德胜活性炭厂。
所涉及到的其他试剂均为食品级。
实施例1
本实施例提供了一种保护花生多糖的脱色液及制备方法，所述脱色液的制备方法如下：
1、活性炭粉碎：选用ds-305糖用活性炭，置于中药粉碎机中粉碎，粉碎后过40目筛，得到糖用活性炭粉末；
2、花生壳粉碎：将花生壳置于鼓风干燥箱中烘干至含水量小于6%，烘干后置于中药粉碎机中粉碎，粉碎后过40目筛，得到花生壳粉末；
3、盐酸水溶液浸泡：将花生壳粉末置于3mol/l的盐酸水溶液中浸泡100min，得到混合液ⅰ；
4、离心：将盐酸水溶液处理后的混合液ⅰ置于在6000r/min的条件下离心20min，过滤得到上清液ⅰ和滤渣ⅰ；
5、硫酸铵分级沉淀：将固体硫酸铵粉末加入上清液ⅰ中，其中，固体硫酸铵粉末与上清液ⅰ的料液比为2g/ml充分搅拌，后以8000r/min的条件离心20min，得到上清液ⅱ和沉淀物ⅰ；
6、上清液ⅱ中加入胆固醇：在上清液ⅱ中加入0.5%（m/v）的胆固醇、3%（m/v）壳聚糖，得到混合溶液ⅱ；
7、旋转蒸发：将混合溶液ⅱ在70℃，0.1~1mp的条件下旋转蒸发去除混合溶液ⅱ中溶剂，得到花生多糖保护膏；
8、磷酸盐缓冲溶液溶解：将花生多糖保护膏中加入ph7.2±0.2的磷酸盐缓冲溶液中，使花生多糖保护膏完全溶解，花生多糖保护膏与磷酸盐缓冲溶液的混合比例为16g/l，得到花生多糖保护液；
9、将活性炭粉末按照60g/l的添加量添加到花生多糖保护液，得到本发明所述的保护花生多糖的脱色液。
实施例2
本实施例提供了一种保护花生多糖的脱色液及制备方法，所述脱色液的制备方法如下：
1、活性炭粉碎：选用ds-305糖用活性炭，置于中药粉碎机中粉碎，粉碎后过100目筛，得到糖用活性炭粉末；
2、花生壳粉碎：将花生壳置于鼓风干燥箱中烘干至含水量小于7%，烘干后置于中药粉碎机中粉碎，粉碎后过100目筛，得到花生壳粉末；
3、盐酸水溶液浸泡：将花生壳粉末置于1mol/l的盐酸水溶液中浸泡20min，得到混合液ⅰ；
4、离心：将盐酸水溶液处理后的混合液ⅰ置于在5000r/min的条件下离心10min，过滤得到上清液ⅰ和滤渣ⅰ；
5、硫酸铵分级沉淀：将固体硫酸铵粉末加入上清液ⅰ中，其中，固体硫酸铵粉末与上清液ⅰ的料液比为1g/ml充分搅拌，后以6000r/min的条件离心30min，得到上清液ⅱ和沉淀物ⅰ；
6、上清液ⅱ中加入胆固醇：在上清液ⅱ中加入0.1%（m/v）的胆固醇、2%（m/v）壳聚糖，得到混合溶液ⅱ；
7、旋转蒸发：将混合溶液ⅱ在60℃，0.1mp的条件下旋转蒸发去除混合溶液ⅱ中溶剂，得到花生多糖保护膏；
8、磷酸盐缓冲溶液溶解：将花生多糖保护膏中加入ph7.2±0.2的磷酸盐缓冲溶液中，使花生多糖保护膏完全溶解，花生多糖保护膏与磷酸盐缓冲溶液的混合比例为10g/l，得到花生多糖保护液；
9、将活性炭粉末按照20g/l的添加量添加到花生多糖保护液，得到本发明所述的保护花生多糖的脱色液。
实施例3
本实施例提供了一种保护花生多糖的脱色液及制备方法，所述脱色液的制备方法如下：
1、活性炭粉碎：选用ds-305糖用活性炭，置于中药粉碎机中粉碎，粉碎后过60目筛，得到糖用活性炭粉末；
2、花生壳粉碎：将花生壳置于鼓风干燥箱中烘干至含水量小于8%，烘干后置于中药粉碎机中粉碎，粉碎后过60目筛，得到花生壳粉末；
3、盐酸水溶液浸泡：将花生壳粉末置于5mol/l的盐酸水溶液中浸泡180min，得到混合液ⅰ；
4、离心：将盐酸水溶液处理后的混合液ⅰ置于在8000r/min的条件下离心30min，过滤得到上清液ⅰ和滤渣ⅰ；
5、硫酸铵分级沉淀：将固体硫酸铵粉末加入上清液ⅰ中，其中，固体硫酸铵粉末与上清液ⅰ的料液比为3g/ml充分搅拌，后以10000r/min的条件离心15min，得到上清液ⅱ和沉淀物ⅰ；
6、上清液ⅱ中加入胆固醇：在上清液ⅱ中加入1%（m/v）的胆固醇、6%（m/v）壳聚糖，得到混合溶液ⅱ；
7、旋转蒸发：将混合溶液ⅱ在80℃，1mp的条件下旋转蒸发去除混合溶液ⅱ中溶剂，得到花生多糖保护膏；
8、磷酸盐缓冲溶液溶解：将花生多糖保护膏中加入ph7.2±0.2的磷酸盐缓冲溶液中，使花生多糖保护膏完全溶解，花生多糖保护膏与磷酸盐缓冲溶液的混合比例为20g/l，得到花生多糖保护液；
9、将活性炭粉末按照100g/l的添加量添加到花生多糖保护液，得到本发明所述的保护花生多糖的脱色液。
验证实验
为了验证本发明保护花生多糖的脱色液对花生多糖的保护效果，发明人做了如下的验证试验：
花生多糖含量的测定方法采用苯酚-硫酸法测定花生多糖含量，以葡萄糖为标准绘制标准曲线，得到的标准曲线回归方程为：a=0.0081x+0.0072（r2=0.9994）
花生多糖得率（%）=花生多糖的质量/花生粕的重量×100%
花生多糖抗氧化能力测定方法：
将提取的花生多糖配制成3g/ml的乙醇溶液（95%的乙醇溶解），取5.0ml花生多糖与10.0ml0.1mmol/ldpph溶液（95%乙醇现用现配）振荡摇匀，对照为5.0ml95%乙醇和10.0ml0.1mmdpph混合，反应10min后在517nm的波长下测定吸光度，dpph自由基抑制率的计算公式为：
式中：y为抑制率（%）；
od517对照为517nm下对照样品的吸光度值；
od517样品为517nm下不同浓度样品的吸光度值
抗氧化能力采用对dpph自由基抑制率为50%时的浓度，ic50值表示。
同时，申请人分别测定传统提取未经花生多糖、活性炭脱色、硅藻土脱色、本实施例脱色，其多糖和dpph的ic50值测定数据如下表所示：