专利名称：一种大青根注射剂制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药的注射用制剂，特别涉及中药大青根的注射用制剂。
背景技术：
大青根，又名南板蓝根，为双子叶植物药马鞭草科植物路边青的根。具有清热解毒、祛风，除湿作用。大青根注射液是用大青根制备成的中药注射剂，在临床上已使用多年，是一种疗效确切的中药注射液。但由于提取工艺和制剂配方的原因，临床上也曾引起一些副作用，包括疼痛刺激反应，给应用造成了不方便。而且研究发现，现有大青根注射液制剂有稳定性差，不良反应多的缺陷，因此需要对以上缺陷进行改进，本发明经过提取工艺的改造，选择了合适的配方，将现有大青根的注射液剂型扩大到包括冻干粉针剂，经临床验证，发现其不良反应明显减少，稳定性大大提高，而且显著延长了药物的有效期。
发明内容
本发明在现有技术的基础上采用新的工艺技术，对大青根进行加工提取，得到大青根提取物，以该提取物为原料，经过进一步的加工，得到本发明的大青根注射剂。
因此，本发明提供一种大青根的提取方法。
本发明还提供用本发明的提取方法得到的大青根提取物。
本发明还提供用本发明的提取物制备的注射用大青根药物制剂。
本发明的大青根的提取方法使用中药大青根为原料，提取过程包括水煮，醇沉等步骤，所述步骤如下步骤1、以大青根为原料；加水煎煮；步骤2、煮提液过滤浓缩，得浓缩液；步骤3、浓缩液加乙醇，静置后过滤得滤液；步骤4、滤液回收乙醇后冷藏，滤过，滤液用氨碱液调节pH值，冷藏，加热除去氨；步骤5、加水，冷藏，滤过得滤液，该滤液即本发明的大青根提取物步骤1所述加水煎煮可以是1-3次，每次0.5-3小时，优选煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时；步骤3所述加乙醇是使醇含量达到60-90％，优选70％-80％；步骤4所述用氨碱液调节pH值是调节到弱碱性，优选PH值为8.0～8.5，所述氨碱液是5-20％的氨水。
以上方法得到的本发明的大青根提取物是浸膏形式，可以是流浸膏，也可以是干浸膏，根据制剂的不同需要，制成不同的形式。
本发明的提取物，经过制剂学的配制技术，即可得到本发明的注射用制剂，本发明的注射用制剂，可以是溶液剂，也可以是干粉剂，溶液剂包括小水针，大水针和大输液剂，干粉剂包括冷冻干燥粉针剂和不经过冷冻干燥的干粉注射剂。
以上注射用制剂，必要时可以加入药物可接受的载体，载体可以起到助溶、稳定、防腐、增容、缓冲等作用。
本发明的注射剂，其给药途径可以是皮下注射、肌肉注射、静脉注射或静脉滴注。
本发明的液体注射剂，以单位剂量的制剂形式存在，如注射剂的每支，输液剂的每瓶，它是将配制好的注射液分装到注射容器中制备的，其中每支或每瓶注射剂中，注射液的量在1-500ml之间，优选的是2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml。如果制成干粉注射剂，冷冻干燥注射剂，则需要将配制好的注射液进行干燥，可采用真空干燥，冷冻真空干燥，喷雾干燥等方式，本发明优选的是冷冻干燥注射剂和中小水针剂。
本发明所述适合配制注射剂的药物可接受的载体选自，注射溶媒、等渗调节剂、PH调节剂、助溶剂、抗氧剂、金属络合剂、抑菌剂或杀菌剂、止痛剂。
所述的注射溶媒选自注射用水、注射用油、乙醇、甘油、丙二醇及混合物；所述的等渗调节剂选自氯化钠、氯化钾、葡萄糖、碳酸氢钠、乳酸钠；所述的PH调节剂选自酸和碱，如盐酸，氢氧化钠，也可以是弱酸或弱碱如乳酸、草酸、柠檬酸、碳酸、磷酸及其缓冲液或碳酸氢钠；所述的助溶剂选自有机酸或其钠盐如草酸、乳酸、苯甲酸、水杨酸、氯化钠、对氨基苯甲酸及钠盐、甘露醇、葡萄糖、乳糖；酰胺化合物如乌拉坦、尿素、乙酰胺；
所述的抗氧剂选自亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、维生素C、二丁甲苯酚、生育酚；所用金属络合剂是选自EDTA2Na；所述抑菌剂或杀菌剂是选自苯甲醇、羟苯丁酯、苯酚、三氯叔丁醇；所述止痛剂是选自盐酸普鲁卡因、利多卡因。
本发明的注射剂，制备过程中可以使用吸附剂，如活性炭，以上药物可接受的载体，根据需要可以选择性的加入。
本发明的注射剂，其中本发明的大青根提取物在注射剂中的重量百分比为0.05-85％，因注射剂容量不同而有差异。
本发明最优选的载体是甘露醇，本发明的最优选的配比组成为大青根∶甘露醇＝50∶0.5-2，投料量可以为500g大青根加入甘露醇5-20g，优选10g。所述500g大青根是生药量，即制备提取物时的投料量。投料量可以增大或减少，但其比例不变，如以上配比可以制备药物制剂1000ml的溶液制剂。
本发明由于变更了工艺方法，需要找到新的质量控制方法对成品进行质量控制，对于本发明的冷冻干燥注射剂，即冻干粉针，可以采用以下方法进行质量控制，其步骤包括性状的观察，内容物的鉴别，内容物的检查，对含有的有效成分进行含量测定，因此，本发明的冻干粉针质量控制方法主要的步骤是其中性状的观察，步骤是性状本品为棕黄色至棕色疏松块状物。
其中内容物的鉴别，步骤是鉴别1.取本品1mg，加水4ml，加稀盐酸2～3滴，水浴上浓缩至1ml，置试管中滴加苦味试液5～6滴，生成黄色沉淀。
2.取本品1mg，加水4ml，加3％碳酸钠溶液2ml，置水浴中加热3分钟后，置并水中冷却，新的重氮对硝基苯胺试液2滴，显红色。
3.取本品1mg，加水4ml。另取板蓝根对照药材1g，加乙醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至约0.5ml，作为对照药材溶液。再取L-脯氨酸对照品，加80％乙醇制成每1ml中含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-水-冰醋酸(4∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，以0.2％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，分别在与对照药材？对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
其中内容物的检查，步骤是检查pH值应为5.0～6.0。
炽灼残渣取本品1mg，加水5ml，置已炽灼至恒重的坩埚中，置水浴上蒸干后，依法检查(附录IX J)，遗留残渣重量不得过1.0％。
重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查(附录IX E第一法)，含重金属不得过10ppm。
水份不超过4.0％其他应符合注射剂项下各项规定(附录IV)对含有的有效成分进行含量测定，步骤是含量测定取本品，用适宜的氨基酸分析仪进行分离测定，另取L-脯氨酸、L-精氨酸、L-缬氨酸、L-γ-氨基丁酸、L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-苯丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-酪氨酸对照品，制成相应浓度的对照品溶液，同法测定，按外标法的峰面积计算各种氨基酸的含量，并计算出总氨基酸的含量。
本品每1ml含总氨基酸不得少于1.2g。
本发明的中小水针质量控制方法主要的步骤是性状的观察，步骤是性状本品为棕黄色至棕色澄明溶液。
内容物的鉴别，步骤是鉴别1.取本品4ml，加稀盐酸2～3滴，水浴上浓缩至1ml，置试管中滴加苦味试液5～6滴，生成黄色沉淀。
2.取本品4ml，加3％碳酸钠溶液2ml，置水浴中加热3分钟后，置并水中冷却，新的重氮对硝基苯胺试液2滴，显红色。
3.取本品2ml。另取板蓝根对照药材1g，加乙醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至约0.5ml，作为对照药材溶液。再取L-脯氨酸对照品，加80％乙醇制成每1ml中含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-水-冰醋酸(4∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，以0.2％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，分别在与对照药材？对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
内容物的检查，步骤是检查pH值应为5.0～6.0。
炽灼残渣取本品5ml，置已炽灼至恒重的坩埚中，置水浴上蒸干后，依法检查(附录IX J)，遗留残渣重量不得过1.0％。
重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查(附录IX E第一法)，含重金属不得过10ppm。
其他应符合注射剂项下各项规定(附录IV)对含有的有效成分进行含量测定，步骤是含量测定取本品，用适宜的氨基酸分析仪进行分离测定，另取L-脯氨酸、L-精氨酸、L-缬氨酸、L-γ-氨基丁酸、L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-苯丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-酪氨酸对照品，制成相应浓度的对照品溶液，同法测定，按外标法的峰面积计算各种氨基酸的含量，并计算出总氨基酸的含量。
本品每1ml含总氨基酸不得少于1.2g。
对本发明的注射用制剂进行了稳定性实验，表明本发明适合工业化生产。以下为稳定性实验数据本发明实施例1中的样品放置12个月各项检测指标与“0月”比较，未见明显变化，说明本品质量稳定。具体数据如下
本发明实施例2中的样品放置12个月各项检测指标与“0月”比较，未见明显变化，说明本品质量稳定。具体数据如下
本发明的制剂，安全，有效，稳定，比现有技术在许多方面优良，克服了现有技术的副作用和稳定性差等缺陷，取得了良好的效果。
具体实施例方式以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制实施例1，冻干注射剂取大青根500g，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎夜，滤过，滤液浓缩至约750ml，冷却，加乙醇使醇含量达70％，搅匀，静置48小时，滤过，滤液回收乙醇400～500ml，冷藏，滤过，滤液用氨碱液调节pH值为8.0～8.5，搅匀，冷藏约10小时，加热除去氨，加注射用水至900ml，冷藏，滤过，滤液加甘露醇10g，加0.5％活性炭，加热至80℃并维持15分钟，过滤除炭，加注射用水至近全量，用10％的氢氧化钠溶液调节pH值为5.0，用0.45μm的微孔滤膜精滤，并用0.22μm的微孔滤膜进行除菌过滤，滤液灌装于20ml的西林瓶中，每瓶装5-7ml。而后置于冷冻干燥箱中预冻3-5小时后抽真空。冷凝温度保持不变，28小时后，开箱，制成冻干品，压盖，蜡封，贴签，即得。
实施例2，注射液制剂取大青根500g，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时，合并煎夜，滤过，滤液浓缩至约750ml，冷却，加乙醇使醇含量达70％，搅匀，静置48小时，滤过，滤液回收乙醇400～500ml，冷藏，滤过，滤液用氨碱液调节pH值为8.0～8.5，搅匀，冷藏约10小时，加热除去氨，加注射用水至900ml，冷藏，滤过，滤液加甘露醇10g，加0.5％活性炭，加热至80℃并维持15分钟，过滤除炭，加注射用水至近全量，用10％的氢氧化钠溶液调节pH值为5.0，加入0.5％的活性碳，煮沸，用0.45μm的微孔滤膜精滤，并用0.22μm的微孔滤膜进行除菌过滤，罐装，灭菌，贴签，即得。
权利要求
1.一种大青根注射剂，所述注射剂是用中药大青根为原料，经过加工提取，得到大青根提取物，以该提取物为原料，经过制成注射剂的步骤，得到本发明的大青根注射剂。
2.权利要求1的注射剂，其特征在于，所述加工提取包括水煮，醇沉步骤。
3.权利要求1的注射剂，其特征在于，所述加工提取步骤如下步骤1、以大青根为原料；加水煎煮；步骤2、煮提液过滤浓缩，得浓缩液；步骤3、浓缩液加乙醇，静置后过滤得滤液；步骤4、滤液回收乙醇后冷藏，滤过，滤液用氨碱液调节pH值，冷藏，加热除去氨；步骤5、加水，冷藏，滤过得滤液，该滤液即本发明的大青根提取物。
4.权利要求3的注射剂，其特征在于，步骤1所述加水煎煮可以是1-3次，每次0.5-3小时，步骤3所述加乙醇是使醇含量达到60-90％，步骤4所述用氨碱液调节pH值是调节到弱碱性，所述氨碱液是5-20％的氨水。
5.权利要求4的注射剂，其特征在于，步骤1所述加水煎煮是煎煮二次，第一次2小时，第二次1小时；步骤3所述加乙醇是使醇含量达到70％-80％；步骤4所述用氨碱液调节pH值是调节到8.0～8.5。
6.权利要求1的注射剂，其特征在于，是溶液剂，或干粉剂，溶液剂包括小水针，大水针和大输液剂，干粉剂包括冷冻干燥粉针剂和不经过冷冻干燥的干粉注射剂。
7.权利要求6的注射剂，其特征在于，必要时可以加入药物可接受的载体，载体可以起到助溶、稳定、防腐、增容或缓冲作用；所述药物可接受的载体选自，注射溶媒、等渗调节剂、PH调节剂、助溶剂、抗氧剂、金属络合剂、抑菌剂或杀菌剂、止痛剂；其中所述的注射溶媒选自注射用水、注射用油、乙醇、甘油、丙二醇及混合物；所述的等渗调节剂选自氯化钠、氯化钾、葡萄糖、碳酸氢钠、乳酸钠；所述的PH调节剂选自酸和碱，如盐酸，氢氧化钠，也可以是弱酸或弱碱如乳酸、草酸、柠檬酸、碳酸、磷酸及其缓冲液或碳酸氢钠；所述的助溶剂选自有机酸或其钠盐如草酸、乳酸、苯甲酸、水杨酸、氯化钠、对氨基苯甲酸及钠盐、甘露醇、葡萄糖、乳糖；酰胺化合物如乌拉坦、尿素、乙酰胺；所述的抗氧剂选自亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、维生素C、二丁甲苯酚、生育酚；所用金属络合剂是选自EDTA2Na；所述抑菌剂或杀菌剂是选自苯甲醇、羟苯丁酯、苯酚、三氯叔丁醇；所述止痛剂是选自盐酸普鲁卡因、利多卡因。
8.权利要求7的注射剂，其特征在于，所述载体是甘露醇，大青根∶甘露醇的重量比例为50∶0.5-2。
9.权利要求1的注射剂的质量控制方法，其特征在于，步骤包括性状的观察，内容物的鉴别，内容物的检查，对含有的有效成分进行含量测定。
10.权利要求9的质量控制方法，其特征在于，对于冻干粉针剂步骤是其中性状的观察，步骤是性状本品为棕黄色至棕色疏松块状物；其中内容物的鉴别，步骤是鉴别1.取本品1mg，加水4ml，加稀盐酸2～3滴，水浴上浓缩至1ml，置试管中滴加苦味试液5～6滴，生成黄色沉淀；2.取本品1mg，加水4ml，加3％碳酸钠溶液2ml，置水浴中加热3分钟后，置并水中冷却，新的重氮对硝基苯胺试液2滴，显红色；3.取本品1mg，加水4ml；另取板蓝根对照药材1g，加乙醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至约0.5ml，作为对照药材溶液；再取L-脯氨酸对照品，加80％乙醇制成每1ml中含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-水-冰醋酸(4∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，以0.2％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，分别在与对照药材？对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；其中内容物的检查，步骤是检查pH值应为5.0～6.0；炽灼残渣取本品1mg，加水5ml，置已炽灼至恒重的坩埚中，置水浴上蒸干后，依法检查(附录IX J)，遗留残渣重量不得过1.0％；重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查(附录IX E第一法)，含重金属不得过10ppm；水份不超过4.0％其他应符合注射剂项下各项规定(附录IV)对含有的有效成分进行含量测定，步骤是含量测定取本品，用适宜的氨基酸分析仪进行分离测定，另取L-脯氨酸、L-精氨酸、L-缬氨酸、L-γ-氨基丁酸、L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-苯丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-酪氨酸对照品，制成相应浓度的对照品溶液，同法测定，按外标法的峰面积计算各种氨基酸的含量，并计算出总氨基酸的含量；本品每1ml含总氨基酸不得少于1.2g；对于中小水针，步骤是性状的观察，步骤是性状本品为棕黄色至棕色澄明溶液；内容物的鉴别，步骤是鉴别1.取本品4ml，加稀盐酸2～3滴，水浴上浓缩至1ml，置试管中滴加苦味试液5～6滴，生成黄色沉淀；2.取本品4ml，加3％碳酸钠溶液2ml，置水浴中加热3分钟后，置并水中冷却，新的重氮对硝基苯胺试液2滴，显红色；3.取本品2ml；另取板蓝根对照药材1g，加乙醇30ml，超声处理15分钟，滤过，滤液浓缩至约0.5ml，作为对照药材溶液；再取L-脯氨酸对照品，加80％乙醇制成每1ml中含2mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各2μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-水-冰醋酸(4∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，以0.2％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，分别在与对照药材？对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；内容物的检查，步骤是检查pH值应为5.0～6.0；炽灼残渣取本品5ml，置已炽灼至恒重的坩埚中，置水浴上蒸干后，依法检查(附录IX J)，遗留残渣重量不得过1.0％；重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查(附录IX E第一法)，含重金属不得过10ppm；其他应符合注射剂项下各项规定(附录IV)对含有的有效成分进行含量测定，步骤是含量测定取本品，用适宜的氨基酸分析仪进行分离测定，另取L-脯氨酸、L-精氨酸、L-缬氨酸、L-γ-氨基丁酸、L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-苯丙氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-酪氨酸对照品，制成相应浓度的对照品溶液，同法测定，按外标法的峰面积计算各种氨基酸的含量，并计算出总氨基酸的含量；本品每1ml含总氨基酸不得少于1.2g。
全文摘要
本发明涉及一种大青根注射剂制备工艺，该工艺以中药大青根为原料，提取过程包括水煮，醇沉等步骤，所述步骤如下步骤1.以大青根为原料；加水煎煮；步骤2.煮提液过滤浓缩，得浓缩液；步骤3.浓缩液加乙醇，静置后过滤得滤液；步骤4.滤液回收乙醇后冷藏，滤过，滤液用氨碱液调节pH值，冷藏，加热除去氨；步骤5.加水，冷藏，滤过得滤液，该滤液即本发明的大青根提取物。
文档编号G01N33/15GK1895461SQ20061009072
公开日2007年1月17日 申请日期2006年6月28日 优先权日2006年6月28日
发明者蔡剑秋 申请人:海南晨菲药业有限公司