专利名称：卡式肺炎支原体抗体检测试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种试剂盒，具体的说，涉及一种卡式肺炎支原体抗体检测试剂盒。
背景技术：
肺炎支原体属于一种特殊的微生物，可寄生在人的口腔、腮腺等处。肺炎支原体既不是病毒，也不是细菌，而是介于病毒与细菌两者之间的一种微生物，它主要引起学龄儿童和青少年下呼吸道感染，可以通过呼吸道飞沫传播。大约每隔4～5年支原体肺炎就会发生一次流行，以冬春季发病为主，肺炎支原体感染的临床症状具备多样性并且与其它原因引起的呼吸道感染很难区别，肺炎支原体可使气管、支气管以及细支气管上皮细胞增生。感染后10～20天后才出现一些非特异症状，如发烧、头疼、无痰干咳等，在感染期间还可能发展成间质性肺炎。
肺炎支原体是人类急性呼吸道感染的重要病因之一，可引起非典型肺炎、气管炎、支气管炎等，有大约10％的成人肺炎和20％～25％的儿童肺炎由肺炎支原体引起，还可以引起其他系统的肺外并发症，如脑膜炎、脑干炎、心肌炎、心包炎、肾炎等。由于肺炎支原体对一般药物耐药，所以及时确诊可特效治疗，缩短疗程，减少并发症和不良预后发生。目前常用的诊断方法有代谢抑制试验、补体结合试验和酶联免疫法等，代谢抑制试验、补体结合试验和酶联免疫法操作繁琐，需要一些大型的仪器设备，需专门人员操作实验，使用不方便。
发明内容
本发明的目的是提供一种特异性强、灵敏度高、快捷方便、安全、结果准确、适应临床需要的卡式肺炎支原体抗体检测试剂盒。
为达到上述目的，本发明采用的技术方案是卡式肺炎支原体抗体检测试剂盒，其特征是所述试剂盒包括检测板，所述检测板为包括板体、板盖的盒状体，所述板盖与板体固定连接，所述板盖上设有检测孔，所述板体内与检测孔位置对应处设有反应膜，所述反应膜的一端设有包被MP抗原的检测区，另一端设有包被抗鼠抗体的对照区，所述反应膜的下部设有吸水垫；一金标液瓶，所述金标液瓶内盛有胶体金纳米粒子与单克隆抗体的标记结合物；和一洗涤液瓶，盛有洗涤液，用以浸润膜片、洗涤本底和去非特异性反应。
作为上述技术方案的优化方案，所述反应膜为硝酸纤维素膜。
作为上述技术方案的另一种优化方案，所述板盖的底面上设有若干个用来固定板盖和板体的定位销，所述板体上设有与定位销配合的定位槽。
作为上述技术方案的再一种优化方案，所述板盖上对应检测区的位置标注有字母“T”，对应对照区的位置标注有字母“C”。
作为上述技术方案进一步的优化方案，所述试剂盒包括一外包装盒，所述外包装盒内盛有40片用铝箔袋包装的检测板、一个金标液瓶、一个洗涤液瓶。
所述试剂盒的使用方法包括以下步骤(1)样本收集采取静脉血于干净未加抗凝剂的容器内，静置使血凝固，分离血清准备检测；(2)检测a、取出检测板，室温平衡20～30分钟；b、滴加洗涤液1滴于检测孔中，待液体将硝酸纤维素膜完全湿润；c、加待测血清150ul于检测孔中，待液体充分吸入；d、滴加金标液3滴于检测孔中，待液体充分吸入；e、滴加洗涤液3滴于检测孔中，待液体充分吸入后于3分钟内观察结果。
(3)结果判断检测板的检测孔内滴入液体后，吸水材料使液体缓慢下渗滤过，在渗滤的同时完成特异性的抗原抗体反应。
a、阴性若被检样品中没有肺炎支原体抗体，反应体系中的金标单克隆抗体与包被的MP抗原无法形成间接抗原抗体反应，即在标注有字母“T”的检测区内无红色反应标记出现。同时，反应体系中的金标单克隆抗体与对照区包被的抗鼠IgG多抗反应结合，在标注有字母“C”的对照区处形成一个红色沉积反应标记，这表明被测样品中无肺炎支原体抗体，为阴性结果；同时说明试剂整体反应系统工作正常。
b、阳性若被检样品中存在肺炎支原体抗体，则其先与硝酸纤维素膜上包被的MP抗原发生抗原抗体反应，形成抗原—抗体复合物而滞留在膜上，其它无关抗体和物质则被滤过，当再加入金标抗人单克隆抗体时，便与之发生反应，形成金标抗人单克隆抗体-MP抗体-MP抗原的免疫复合物，即在标注有字母“T”的检测区内有红色反应标记出现。同时，反应体系中的金标单克隆抗体与对照区包被的抗鼠IgG多抗反应结合，在标注有字母“C”的对照区处形成一个红色沉积反应标记。检测区有检测标记出现，这表明被测样品中有肺炎支原体抗体，为阳性结果。
c、无效反应后，在标注有字母“C”的对照区处不显色，表明本次检测无效。
(4)注意事项a、必须使用新鲜血清测定。少数标本如高脂血、溶血等可使背景偏深，一般不影响结果判断。
b、加液体的各步操作之间不得有时间间隔；同一步骤中所加液体应迅速一次加入后等其渗入。
c、超过规定时间出现的结果无效。
d、对照区标记的强弱并不代表试剂质量的优劣，只要其显色清楚可见，即表明试剂有效。
e、不同产品、同产品不同批次之间的金标液严禁混用。
(5)贮存与运输
a、试剂盒置2～8℃冷藏，有效期为10个月。
b、试剂盒可短期常温运输。寒冬或炎夏季节应采取相应防护措施，避免冻融或长期高温。
下表是本发明试剂盒的临床测定实验数据 有益效果本发明采用以上技术方案，具有特异性强、灵敏度高、快捷、简便、直观，不需要特殊的仪器设备，适应临床需要的优点，因此，本发明具有较高的社会价值和经济价值。
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
附图1为本发明实施例1的结构示意图；附图2为附图1中A-A向的结构示意图；附图3为本发明实施例2的结构示意图；附图4为附图3中B-B向的结构示意图。
具体实施例方式
实施例1，如图1、图2所示，卡式肺炎支原体抗体检测试剂盒，包括一外包装盒，外包装盒内盛放有40片用铝箔袋包装的检测板1、一个金标液瓶、一个洗涤液瓶，一个铝箔袋内装有一片检测板1，金标液瓶内盛有胶体金纳米粒子与单克隆抗体的标记结合物，洗涤液瓶内盛有用以浸润膜片、洗涤本底和去非特异性反应的洗涤液，检测板1为包括板体12、板盖11的盒状体，板盖11的底面上设有若干个用来固定板盖11和板体12的定位销7，板体12上设有与定位销7配合的定位槽8，板盖11上开有方形的检测孔2，板体12内与检测孔2位置对应处设有反应膜3，反应膜3为硝酸纤维素膜，反应膜3的左侧为包被有MP抗原的线形检测区5，板盖11上标注有字母“T”，右侧为包被有抗鼠抗体的线形对照区6，板盖11上标注有字母“C”，反应膜3的下部设置有吸水垫4。
本发明试剂盒的使用方法包括以下步骤(1)样本收集采取静脉血于干净未加抗凝剂的容器内，静置使血凝固，分离血清准备检测；(2)检测a、取出检测板1，室温平衡20～30分钟；b、滴加洗涤液1滴于方形检测孔2中，待液体将硝酸纤维素膜完全湿润；c、加待测血清150ul于方形检测孔2中，待液体充分吸入；d、滴加金标液3滴于方形检测孔2中，待液体充分吸入；e、滴加洗涤液3滴于方形检测孔2中，待液体充分吸入后于3分钟内观祭结果。
(3)结果判断检测板的检测孔2内滴入液体后，吸水材料使液体缓慢下渗滤过，在渗滤的同时完成特异性的抗原抗体反应。
a、阴性反应后，在标注有字母“C”的对照区6处形成一个红色沉积反应线，在标注有字母“T”的检测区5处无反应线出现，表明被测样品中无肺炎支原体抗体，为阴性结果；b、阳性反应后，在标注有字母“C”的对照区6处形成一个红色沉积反应线，同时在标注有字母“T”的检测区5处形成一个红色沉积反应线，表明被测样品中有肺炎支原体抗体，为阳性结果；c、无效反应后，在标注有字母“C”的对照区6处不显色，表明本次检测无效。
实施例2，如图3、图4所示的卡式肺炎支原体抗体检测试剂盒，检测孔为圆形检测孔，检测区为圆形检测区，对照区为圆形对照区，形成的红色反应标记为圆点，其余与实施例1相同。
权利要求
1.卡式肺炎支原体抗体检测试剂盒，其特征是所述试剂盒包括检测板(1)，所述检测板(1)为包括板体(12)、板盖(11)的盒状体，所述板盖(11)与板体(12)固定连接，所述板盖(11)上设有检测孔(2)，所述板体(12)内与检测孔(2)位置对应处设有反应膜(3)，所述反应膜(3)的一端设有包被MP抗原的检测区(5)，另一端设有包被抗鼠抗体的对照区(6)，所述反应膜(3)的下部设有吸水垫(4)；一金标液瓶，所述金标液瓶内盛有胶体金纳米粒子与单克隆抗体的标记结合物；和一洗涤液瓶，盛有洗涤液，用以浸润膜片、洗涤本底和去非特异性反应。
2.如权利要求1所述的卡式肺炎支原体抗体检测试剂盒，其特征是所述反应膜(3)为硝酸纤维素膜。
3.如权利要求2所述的卡式肺炎支原体抗体检测试剂盒，其特征是所述板盖(11)的底面上设有若干个用来固定板盖(11)和板体(12)的定位销(7)，所述板体(12)上设有与定位销(7)配合的定位槽(8)。
4.如权利要求3所述的卡式肺炎支原体抗体检测试剂盒，其特征是所述板盖(11)上对应检测区(5)的位置标注有字母“T”，对应对照区(6)的位置标注有字母“C”。
5.如权利要求1、2、3、4其中之一所述的卡式肺炎支原体抗体检测试剂盒，其特征是所述试剂盒包括一外包装盒，所述外包装盒内盛有40片用铝箔袋包装的检测板(1)、一个金标液瓶、一个洗涤液瓶。
全文摘要
本发明公开了一种卡式肺炎支原体抗体检测试剂盒，包括检测板，检测板为包括板体、板盖的盒状体，板盖与板体固定连接，板盖上设有检测孔，所述板体内与检测孔位置对应处设有反应膜，反应膜的一端包被有MP抗原，另一端包被有抗鼠抗体，反应膜的下部设有吸水垫，一金标液瓶，金标液瓶内盛有胶体金纳米粒子与单克隆抗体的标记结合物，洗涤液瓶，盛有洗涤液，用以浸润膜片、洗涤本底和去非特异性反应，具有特异性强、灵敏度高、快捷、简便、直观，不需要特殊的仪器设备，适应临床需要的优点。因此，本发明具有较高的社会价值和经济价值。
文档编号G01N33/544GK101051049SQ20071001548
公开日2007年10月10日 申请日期2007年5月11日 优先权日2007年5月11日
发明者杨致亭, 王爱香, 刘玉华, 王好玉, 王力 申请人:杨致亭