专利名称：：西替利嗪尿药浓度的测定方法
技术领域：
：本发明属于医学检验领域，涉及排泄物中药物浓度的分析测定方法，具体涉及一种西替利嗪尿药浓度的测定方法。
背景技术：
：西替利嗪(Cetirizine)是一种选择性高的第二代组胺&受体阻滞剂，无明显的中枢抑制作用，临床主要用于防治过敏性鼻炎(季节性和非季节性)、慢性特发性荨麻疹、过敏性哮喘、特异性皮炎等疾病。通过测定尿液中西替利嗪原形药物的浓度，可以有效地研究其排泄途径，目前国内外尿液中西替利嗪原形药物的浓度测定方法主要采用高效液相色谱法，现有技术中存在操作繁琐、费时费力，效率低、测定周期长、所需仪器或试剂价格昂贵等种种缺陷，不是和常规治疗药物排泄途径的监测。
发明内容为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种西替利嗪尿药浓度的测定方法，能准确测定尿液中西替利嗪原形药物的浓度，从而了解其排泄途径。本发明是通过以下技术方案来实现的西替利嗪尿药浓度的测定方法，其特征在于将待测样品预处理后，用高效液相色谱法检测，包括以下步骤(1)样品预处理精密量取尿样品1.0ml，置5ml具塞离心管中，精密加入去氯羟嗪(2.5iig'm")6ia，混匀，待用;(2)高效液相色谱仪检测，记录色谱图、内标峰高(Hi)与西替利嗪峰高(Hs)，用标准曲线方程换算浓度。前述的西替利嗪尿药浓度的测定方法，其特征在于该方法是以WatersNova-PakC18为色谱柱，以乙月青-0.02molL-1磷酸二氢钠-三乙胺(50:50:0.15)，pH3.07，内含SDS0.0105molL—1为流动相的RP_高效液相色谱法，流速为1.0mL/min;n柱温为室温；检测波长为229nm。本发明的有益效果是本发明应用RP-HPLC法测定西替利嗪的尿药浓度，准确度、精密度高，操作简便，结果表明西替利嗪主要从肾脏排泄。因此一些影响肾小管分泌作用的药物可能会影响西替利嗪从肾脏的排泄，合并用药时，应注意药物的相互作用。图1为西替利嗪的HPLC色谱图；图2为8名健康志愿者口服10mgZyrtec后的尿药累积平均百分率曲线。具体实施例方式下面将详细说明本发明的具体实施例方式1、仪器与试剂仪器Waters高效液相色谱仪510泵，Waters486紫外检测器，Maxima820色谱工作站。试剂盐酸西替利嗪标准品，由江苏连云港制药厂提供；仙特敏(Zyrtec)包衣片(每片盐酸西替利嗪10mg，批号96A26/A)由比利时UCB公司生产；盐酸去氯羟嗪(DecloxizineHydrochloride),由第二军医大学附属长海医院药学部提供；乙腈为色谱一级，磷酸二氢钠、氢氧化钠、盐酸、三乙胺、SDS等均为分析纯，水为重蒸馏水。2、方法与结果色谱条件与系统适应性试验色谱条件WatersNova-PakC18(150X3.9mm，4iim)色谱柱；流动相:乙月青-0.02molL-1磷酸二氢钠-三乙胺(50:50:15)，pH3.07，内含SDS0.0105molL-1;流速1.0mlmin—1;柱温为室温；检测波长229nm，内标为去氯羟嗪。尿样品的处理与测定精密量取尿样品1.0ml，置5ml具塞离心管中，精密加入去氯羟嗪(2.5iig.m")6iil，混匀，进样10iil，记录色谱图、内标峰高(Hi)与西替利嗪峰高(Hs)。测得的空白尿、尿标准品及尿样色谱图见图1(A:空白尿；B:尿标准品；C:尿样；a:去氯羟嗪；b:西替利嗪)。由图l可见尿中的物质几乎不影响西替利嗪与内标分离测定，尿中西替利嗪与去氯羟嗪的保留时间分别为9.05min和7.04min。西替利嗪的检测限为0.5ng(S/N=3)，最低检测浓度为50ngm1—1。尿药标准曲线制备方法精密量取空白尿l.Oml共6份，置6支5ml具塞离心试管中，依次加入不同浓度盐酸西替利嗪标准品溶液适量，配制成0.2，1.0，2.0，5.0，10.0，20.OPg，ml—1系列浓度，按尿样的处理与测定方法操作。以尿药标准曲线制备项下测得的不同浓度西替利嗪标准品的Hs、Hi，计算Y(Hs/Hi)，以Y为纵坐标，浓度(C)为横坐标，进行线性回归，其回归方程为Y=6.374X10—3+5.731X10—2Cr=0.9999回收率试验配制1.0，5.0，20iig'ml—1的西替利嗪尿样，按尿样的处理和测定方法操作，测定回收率，取回收率项下测得的Hs、Hi，计算Y值，将Y值代入标准曲线方程，计算出尿中西替利嗪浓度，以测得值与加入值之比计算回收率。高、中、低三种浓度尿中西替利嗪的回收率(n=5)分别为99.9%±0.7%，96.6%±2.4%和94.1%±0.9%。精密度试验配制1.0，5.0，20.0iig^ml—1的西替利嗪尿标准品，按尿样的处理与测定方法操作，测定日内与日间精密度。以精密度项下每种浓度ld内连续测定5次及连续5d每天测定1次，测得的西替利嗪浓度，分别计算日内RSD与日间RSD，结果见附表1。附表1:精密度检测结果(n=5，？±S))<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>正常人西替利嗪的尿药浓度测定8名健康男性，年龄2224周岁，体重在标准体重±10%以内。经体检，肝、肾功能、血常规及心电图均正常，精神良好。受试前一日内未服用任何药物。空白尿样于服药前10min留取。受试者禁食12h后口服ZyrteclOmg，服药后收集尿样，于服药后4，10，16，24，36h量取尿样，分别取尿样约3ml置5ml具塞离心管中，_201:冰柜中放置供测定。服药后3h禁食，受试期间统一饮食，受试者禁烟、酒、茶，并由医务人员观察记录服药后的反应情况。尿药浓度测定按尿样的处理与测定方法操作。平均尿药累积百分率-时间曲线见图2。由图2可见，单剂量口服西替利嗪10mg后，24h原型药物的尿中排泄量约为给药剂量的60%，表明西替利嗪主要从肾脏排泄。因此一些影响肾小管分泌作用的药物可能会影响西替利嗪从肾脏的排泄，合并用药时，应注意药物的相互作用。以上已以较佳实施例公开了本发明，然其并非用以限制本发明，凡采用等同替换或者等效变换方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。权利要求西替利嗪尿药浓度的测定方法，其特征在于将待测样品预处理后，用高效液相色谱法检测，包括以下步骤(1)样品预处理精密量取尿样品1.0ml，置5ml具塞离心管中，精密加入去氯羟嗪(2.5μgml-1)6μl，混匀，备用；(2)高效液相色谱仪检测，记录色谱图、内标峰高(Hi)与西替利嗪峰高(Hs)，用标准曲线方程换算浓度。(3)本发明应用RP-HPLC法测定西替利嗪的尿药浓度，准确度、精密度高，操作简便，结果表明西替利嗪主要从肾脏排泄。2.根据权利要求l所述的西替利嗪尿药浓度的测定方法，其特征在于该方法是以WatersNova-PakC18为色谱柱，以乙腈_0.02molL—1磷酸二氢钠-三乙胺(50:50:0.15)，pH3.07，内含SDS0.0105mol*L—1为流动相的RP-HPLC，流速为1.OmL/min;柱温为室温；检测波长为229nm。全文摘要本发明属于医学检验领域，涉及排泄物中药物浓度的分析测定方法。具体涉及西替利嗪尿药浓度的测定方法，该方法中，将样品进行预处理后，应用高效液相色谱仪检测，色谱柱为WatersNova-PakC18，流动相为乙腈-0.02mol·L-1磷酸二氢钠-三乙胺(50∶50∶0.15)，pH3.07，内含十二烷基硫酸钠(SDS)0.0105mol·L-1，流速1.0mL/min；柱温为室温；内标为去氯羟嗪，检测波长为229nm，该方法准确度、精密度高，操作简便、迅速。结果表明西替利嗪主要从肾脏排泄，因此一些影响肾小管分泌作用的药物可能会影响西替利嗪从肾脏的排泄，合并用药时，应注意药物的相互作用。文档编号G01N30/00GK101762645SQ200810154880公开日2010年6月30日申请日期2008年10月27日优先权日2008年10月27日发明者曹翠珍申请人:曹翠珍