一种药品、保健食品和食品中拉非类PDE₅型抑制剂的快速检测方法

专利名称：一种药品、保健食品和食品中拉非类PDE₅型抑制剂的快速检测方法
技术领域：
本发明涉及一种药品、保健食品或食品的分析技术领域，尤其涉及一种基于理 化M快速筛查药品、保健食品或食品中添加的拉非类PDEs型抑制剂的检测方法。
背景技术：
补肾壮阳类中成药、保健食品和食品中非法添加化学成分的行为日益猖獗，非
法添加化学成分情况比较普逸，且针对标准的高科4iit假行为越来越多，严重M 人民群众的身体《ji泉。查阅大量国内外文M现，非法添加的壮阳类化学成分主要
以PDE5型4中制剂(磷酸二酯酶5型4中制剂，phosphodiesterase type-5 inhibitor)为主。 美国食品药品管理局(FDA)先后批准了西地拉非、伐地拉非和他i^立非三种PDEs 型抑制剂。PDEs型抑制剂属于处方药，服用时有严格的适应症、禁忌症和一定的副 作用，某些病人不魁l用，患者在不知情的情况下IH^易引起严重的药物不1^ 应，甚至导致死亡。
中药本身成分复杂，各成分之间干扰严重，检验标〉^ii很不完善。单味的中药 成分已很复杂，复方中成药、保健食品和食品的化学成分更为复杂多样，加上生产 工艺的影响，使得添加化学成分的^^则方法要求更具专属性。我国的现行质量标准 尚不f树jtbii行有雌管。虽然国家每年都在药品监督抽查检验上^了大量的人 力、物力和财力，但效果却不佳，药品监管的覆盖面太小。iU艮药品的快速检测技 术是解决此问题的有效手段之一。快速^^则技术的目的是能够在现场对药品进行快
速分析和筛查，将可疑样品带回实验室后用法定检验方法确证。通过应用快速^;则
4技术，监督检验的效率将大大提高、成本大大降低、监管M面大大增加，将成为 打击非法添加的有力工具。因此建立简单、准确的快速鉴别方法具有重要的意义。
理化反应方法由于携带方便、操作简单、^!^则i4^快，适合在现场对样品进行快速
筛查，是目前基层主要应用的快速检测技术之一。例如，公开号CN 101021483A的 专利(检测他达扭非及期汙生物的一种方法)采用氯仿提取待测样品，80。C水浴蒸 干或用电^K吹干制得供试品，加入^Ui^进行显色反应后检测样品中他达拉非及 期汙生物。上述方法虽然操作简单，但需^j吏用强氧化性、强腐蚀性的浓硫酸和毒 性4交强的氯仿，需8(TC水浴蒸干或用电pM吹干，不利于现场4喿怍。
因此，需要一种才斜乍更简单、更安全、适合在现场^f乍的理化^方法，能够 准确、快速;媒别出补肾壮阳类药品、保健食品和食品中是否添加拉非类PDEs型 抑制剂，以提高监^f^睑效率、节约监督检验成本。

发明内容
为克月gji述技术缺陷，本发明的目是提供一种药品、保健食品和食品中拉非类 PDE5型^卩制剂的检测方法。
为实现上述目的，采用如下技术方案
本发明的药品、保健食品和食品中拉非类PDEs型抑制剂的检测方法包括如下 步骤
(1) 取固态或液态的药品、j呆^:食品或食品，力口4^赠剂1 ~20ml, 1^摇1 ~ 2分钟，静置1~10赠，取上清液；
(2) 显色反应使所述步骤(1)的上清液1~2滴与0.5~10ml的显色剂反应， MJ^是否产生紫色；
若2^4中内溶、般紫色，则初步判断含拉非类化学成分。
所述的拉非类PDE5型抑制剂包括他逸扭非及期汙生物，如^^他达择非等。优选的，所述步骤(i)中的提:^剂为有积溶剂，所述有才;t^剂包括曱醇、 乙醇、异丙醇、乙酸乙酯或丙酮。
更优的，所述步骤(i)中的提^:剂为乙醇。
优选的，所述步骤(2)的显色剂包^^T碌u酸、高氯酸、盐酸或硝酸。
伊C^的，所述步骤(2)的显色剂为重量百分比浓度为30%-80%的硫酸。 更优的，所述步骤(2)的显色剂为重量百分比浓度为45%的硫酸。 优选的，所述步骤(2)的显色反应为在硫酸中加入所述步骤(1)的1 2滴的 上清液。
最优的，本发明所提供的一种药品、保健食品和食品中添加的4立非类PDEs型 抑制剂的检测方法包^i。下步骤
1. 供i式液的制备
嚢剂1粒(片剂1片；丸剂、颗粒剂、散剂等固体制剂约每;iJ良用量的.1/2 量)，置具塞试管中(片剂、丸剂需预先研细或剪碎)，加乙醇2ml，振摇约1~2 ^4中，静置约1 ^4中，取上清液，即得。
2. 显色絲
在试管中力口入重量百分比浓度为45。/o的稀疏酸lm1,滴加供试品溶液2滴，观 察是否产生紫色。
3. 结果判断
若2 ^4中内供试品溶、M紫色，则初步判断含他#非类化学成分。 本发明的一种药品、保健食品和食品中添加的拉非类PDEs型抑制剂的^r测方
法的注意事项如下
(1) 有些样品溶^l贞色较深，影响观察，可改用乙酸乙酯作为溶剂或通it^口 入錄化氲溶液消針扰。
(2) 拉非类化合物在强酸条件下产生紫色。随着硫酸浓度的降低，紫色的产生渐次变慢和变浅，浓度低于30。/W克酸溶^L乎不能不产生颜色；加高氯酸，显深 紫色，但颜色较易褪去；用盐酸显色时，所显紫色不明显；用冰醋酸则不显紫色。 考虑到现场实验操作的m生和适用性，优先釆用45。/。的稀碌L^进行显色反应。
(3)显色方式可以采用上#稀硫酸中加入供试品溶液的方式，也可以采用 在供i式品溶液中加7v^t碌u酸的方式，如取供试品溶液3滴，置白變:^Ji，滴加稀硫 酸溶液3滴，观察是否产生紫色。通过实验发现，选择在稀硫酸中加入供试品溶液 的方式，^JD较低浓度的稀硫酸就能够显色，使得该方法的辦更妙，更适合在 现场实验。
本发明的分析方法适用于胶嚢剂、片剂、丸剂、合剂等各种剂型的中成药、保 健食品和食品，已验证能够检测的拉非类PDE5型抑制剂包括他iii立非(Tadalafil， ^"式为<:221119]^304)和^J^也逸扭非(Aminotadalafil，分予式为C21H18N404 )。
同现有技斜目比，本发明具有如下有益效果
(1) 操作简单、专属性强、灵歉复高、准确度高，不需要专门的i殳备。
(2) 避免了使用毒性较大或强腐蚀性的试剂，适合于在现场操作。
(3) 适用范围广，可用于中成药、保健食品和食品的各种剂型。 才艮据本发明的药品、保健食品和食品中添加的拉非类PDE5型抑制剂的枱^则试
剂盒，将能够满a基层、广大^N"及检验技术^f牛相对落后的中小城市开展相关 的药品、保健食品和食品的J!i^H^^要。
M实施方式
为使本发明更加容易理解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解， 这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，下列实施例中未提及的 M实-睑方法，通常按照常规实验方法进行。
实施例一
本发明的药品、保健食品和食品中添加的拉非类PDEs型抑制剂的检测方法的一个优选实施例，包胁下步骤
(1)取固态或液态的药品、保健食品或食品，加提^i^剂乙酸乙酉旨lml，振摇 2赠，静置10射中，取上清液；
(2 )显色反应:在0.5ml的重量百分比浓度为30%的稀硫酸中加入所述步骤(1) 的1滴上清液，观蕃是否产生紫色。
若10^^中内溶' 紫色，则初步判断含拉非类化学成分。
实施例二
本发明的一种药品、保健食品和食品中添加的拉非类PDEs型抑制剂的检测方 法的另一个伊逸实施例，包^^r下步骤
1. 供试液的制备
^!交嚢剂1粒(片剂1片；丸剂、颗粒剂、散剂等固体制剂约每;W良用量的1/2 量)，置具塞试管中(片剂、丸剂需预先研细或剪碎)，加乙醇2ml，振摇约1~2 ^4中，静置约1 ^4中，取上清液，即得。
2. 显色雄
在试管中加入重量百分比浓度为45。/。的稀辟u酸lml，滴加供试品溶液2滴，观 察是否产生紫色。
3. 结果判断
若2分钟内供试品溶液显紫色，则初步判断含他逸拄非类化学成分。 实施例三
本发明的药品、保健食品和食品中添加的拉非类PDEs型抑制剂的检测方法的 一个伊逸实施例，包^^(口下步骤
(1)取固态或液态的药品、保健食品或食品，加4dC^剂丙酮20ml，振摇1赠，静置5转，取上清液.'
(2)显色反应在10ml的高氯酸中加入所述步骤(1)的1~2滴的上清液观 察是否产生紫色。
若10分钟内溶液显紫色，则初步判断含拉非类化学成分。
在另几个优选实施例中，提^l剂分别选用异丙醇和曱醇，显色剂选用80%稀 碌應、盐酸和;肖酸。
实施例四
用本发明的药品、保健食品和食品中添加的拉非类PDEs型抑制剂的检测方法 糊供试品1#。
供试品1#:标示为鹿强神旭东美灵^l交嚢，批号为07111928，每;^^JU2粒。 ^l交嚢剂1粒，置具塞试管中，加乙醇2ml，振摇约1分钟，静置约1分钟。
在试管中加入重量百分比浓度为45%的稀硫酸lml，滴力口供试品溶液2滴，
内显紫色，由此判断样品中含有拉非类PDEs型抑制剂。
用高效液相色谦和録联用方法抬3则，发i^羊品中含有他达拉非。
实施例五
用本发明的药品、保健食品和食品中添加拉非类PDEs型抑制剂的检测方法检 测供试品2#。
供试品2#:标示为邦威龙宝牌双力胶嚢，批号070801,每;iH良用2粒。 m嚢剂l粒，置具塞试管中，加乙醇2ml， 4^摇约1^4中，静置约1分钟，
取上清液3滴，置白t tUi，滴加稀硫酸溶液3滴，2^4中内显紫色，由此判断样
品中含有拉非类PDEs型抑制剂。
用高效斜目色谱和:^t联用方法抬溯，发l i羊品中含有^J^他达扭非。
9实施例六
从市场收集156个各种补肾壮阳类样品，采用高效液相色谱法和 糊法检 测发现其中17个添加拉非类PDEs型抑制剂，涉及他ii4i非和^J^他达拉非两种 PDEs型抑制剂，准确率为100%。
絲所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明 保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的"fit技术 人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明 才支术方案的实质和范围。
权利要求
1、一种药品、保健食品和食品中拉非类PDE5型抑制剂的快速检测方法，其特征在于，包括如下步骤(1)取固态或液态的药品、保健食品或食品，加提取溶剂1～20ml，振摇1～2分钟，静置1～10分钟，取上清液；(2)显色反应使所述步骤(1)的上清液1～2滴与0.5～10ml的显色剂反应，观察是否产生紫色；若2分钟内溶液显紫色，则初步判断含拉非类化学成分。
2、 根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述的拉非类PDE5 型抑制剂包括他达拉非及其衍生物。
3、 根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中 的提取溶剂为有机溶剂。
4、 根据权利要求3所述的快速检测方法，其特征在于，所述有机溶剂包括 甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯或丙酮。
5、 根据权利要求3所述的快速检测方法，其特征在于，所述有机溶剂为乙醇。
6、 根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述步骤(2)的 显色剂包括好u酸、高氯酸、盐酸或硝酸。
7、 根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述步骤(2)的 显色剂为重量百分比浓度为30%~80%的辟1<酸。
8、 根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述步骤(2)的 显色剂为重量百分比浓度为45%的硫酸。
9、 根据权利要求1所述的快速检测方法，其特征在于，所述步骤(2)为 在碌b酸中加入所述步骤(1)的1~2滴的上清液。
全文摘要
本发明公开了一种药品、保健食品和食品中拉非类PDE₅型抑制剂的快速检测方法，取固态或液态的药品、保健食品或食品，加提取溶剂1～20ml，振摇1～2分钟，静置1～10分钟，取上清液；使上清液1～2滴与0.5～10ml的显色剂反应，若2分钟内溶液显紫色，则初步判断含拉非类化学成分。本发明的检测方法操作简单、专属性强、灵敏度高、准确度高，不需要专门的设备，避免了使用毒性较大或强腐蚀性的试剂，适合于在现场操作，能够满足基层、广大农村及检验技术条件相对落后的中小城市的监督检验需要。
文档编号G01N31/22GK101598715SQ20091004085
公开日2009年12月9日 申请日期2009年7月6日 优先权日2009年7月6日
发明者李延志, 林生文, 罗卓雅, 赖宇红, 毅 雷, 魏嘉陵 申请人:广东省药品检验所