血清或血浆分离材料及使用该材料的采血管的制作方法

专利名称：血清或血浆分离材料及使用该材料的采血管的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于对全血液试样进行血清或血浆与血球的分离的血清或血浆分离材料、以及使用该分离材料的采血管。
背景技术：
临床检查中的血液成分的检查需要将全血中的血清或血浆(以下有时称为“血清等”)与含血球的成分(以下称为“血球成分”)予以分离。作为分离的方法之一，已有在配备了具有血清等和血球成分的中间比重的物质的血液采取管(以下记载为“采血管”)中采取全血液试样，通过离心分离操作使该物质位于血清等和血球成分的中间位置，从而进行分离的方法。通过该方法，不会因吸液管操作、倾析等而在血清等中混入血球，就可以分取血清或血浆。至今，作为该血清或血浆分离材料，主要使用凝胶状材料，例如提出了以具有特定粘度范围的α -烯烃-马来酸二酯共聚物为主成分、且将比重调整为1. 035 1. 055的血清分离材料等(参照专利文献1)。但是，利用凝胶进行的血清和血浆的分离中，由于凝胶柔软，因此在检查部处分离了血清等后，由于试样处理时的振动、分注时的分离材料的误吸入等，会有血清等和血球成分混杂的情况，这成为检查结果出错的原因。另外，由于分离材料是凝胶状，因此在长期储存的情况下或在冷冻储存时，血球中所含的电解质成分等就会从采血管的内壁与分离材料的界面、或者分离材料的内部形成的缝隙混入血清等中，从而使测定结果出错。另外，还提出了以使具有特定分子量的聚氧亚烷基二醇与二异氰酸酯反应得到的具有特定的分子量、粘度和密度的聚醚聚氨酯为主成分，并且在其中含二氧化硅、氧化铝等非活性填充剂的血液分离剂(参照专利文献2、。专利文献2中使用的血液分离剂的比重 (密度)与本发明的分离材料的比重重叠，在通过离心分离操作而移动到血清部分和血球部分之间的方面，具有相同的作用机理。专利文献2记载了 其公开的分离剂，如上所述， 以聚醚聚氨酯为主成分，在离心分离结束时，即使倾斜容器，即使给容器弱的冲击，也不容易被破坏，成为牢固的屏障，即使长时间放置，屏障也不变化(专利文献2，第3栏13 25 行)。但是，即使是专利文献2中记载的方法，与专利文献1同样地存在，在长期储存后或者冷冻储存后，无法防止血球部分的一部分从采血管的内壁与分离材料的界面、或者分离材料的内部形成的缝隙混入血清部分的问题。为了解决上述问题，提出了在分离血清等后，通过对分离材料照射紫外线等而使其固化，进行彻底分离的方法(参照专利文献3 6)。但是，就利用紫外线照射进行的分离材料的固化而言，认为会影响因紫外线而发生变质的成分(例如胆红素(Ε >> )等)的测定。另外，通常，需要对采血管进行灭菌，利用Y射线等进行灭菌时，分离材料会固化，因此会有不能进行灭菌操作的弊端。另一方面，为了避免因紫外线导致的成分的变质，还有用少量紫外线使其固化的方法，但因为血液成分存在于分离材料的上下，所以紫外线无法到达树脂的中心部分，难以使采血管内部的树脂完全固化。结果，与使用未固化的凝胶的情况相同，会有血球成分向血清等混入的问题。进而，提出了使用由特定的聚合物纤维形成的多孔质的三维流体透过性结合纤维结构体，分离血液成分的方法(参照专利文献7的权利要求)。该结构体具有由多个弯弯曲曲的流路构成的复杂的内部网络，被流体运输的粒子无法穿过这些流路，因此成为优异的过滤设备(参照专利文献7的0031段)。另外，作为具体的材料，公开了弹性体成分多成分 (ECM)纤维，作为ECM纤维的弹性体，例示出热塑性弹性体(参照专利文献7的0050、0054 段)。但是，专利文献7公开的方法中，所用的材料并不是根据其比重移动而位于血清部分和血球部分之间的材料，而是需要预先确定好血浆和固体血液成分之间的界线，将该材料配置在该部分，所以不仅操作繁杂，而且不能直接用于现行的使用试管的检查方法，问题较
^^ ο专利文献1 日本特公昭63-48310号公报专利文献2 日本特公平1-31588号公报专利文献3 美国专利第6248844号说明书专利文献4 美国专利申请公开第2007/187341号说明书专利文献5 美国专利申请公开第2008/108493号说明书专利文献6 美国专利申请公开第2008/132874号说明书专利文献7 日本特表2008-538087号公报

发明内容
本发明的目的在于，提供一种血清或血浆分离材料，其在分离采血管中的血清或血浆成分时，以固化状态存在于离心分离后的血清等和血球成分之间，在采血管内，在血清等和血球成分分离了的状态下，长期的储存稳定性良好，且冷冻、解冻时的稳定性、试样处理时的稳定性优异，而且不需要照射紫外线就可以使其固化；本发明还提供使用了该分离材料的血清或血浆的采血管。本发明人等进行了深入研究，结果发现，通过使用具有特定比重的湿固化性成分可以解决上述问题。本发明是基于所述认识完成的。即，本发明提供(1)含有比重为1. 03 1. 09的湿固化性成分的血清或血浆分离材料、以及(2)配置上述(1)记载的血清或血浆分离材料而成的采血管。通过使用本发明的血清或血浆分离材料，从而可以形成在采血管内，在血清等和血球成分分离了的状态下，经过长时间也能够得到良好的储存稳定性，且冷冻、解冻时的稳定性、试样处理时的稳定性优异的血清或血浆分离材料。进而，由于不需要使用紫外线就可以使其固化，因此不仅可以不考虑紫外线的影响来进行血液的检查，而且对于利用Y射线照射进行的灭菌操作也没有任何妨碍。


图1是表示使用采血管分离血清等和血球成分的过程的示意图。图2是表示使用采血管分离血清等和血球成分的过程的示意图。图3是表示使用采血管分离血清等和血球成分的过程的示意图。
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图4是表示使用采血管分离血清等和血球成分的过程的示意图。图5是表示使用采血管分离血清等和血球成分的过程的示意图。符号说明1.采血管2.管腔3.盖4.湿固化性成分5.血液隔离材料6.全血7.血清或血浆(血清等)8.血球成分9.胶囊10.高比重固体11.容器12.盖51.成型体
具体实施例方式本发明的血清或血浆分离材料(以下有时简称为“分离材料”)的特征在于，含有比重为1. 03 1. 09的湿固化性成分。本发明的血清或血浆分离材料只要是含比重为1. 03 1. 09的湿固化性成分即可，没有特别限定，可以仅由比重为1. 03 1. 09的湿固化性成分构成，也可以含其他成分。 另外，除这些成分之外，也可以含胶囊或膜等部件。所谓湿固化性成分，是由于水分的存在而发生固化反应的成分，例如包括分子内具有一个以上的水解性反应基团或通过水引发反应的官能团、通过空气中的水分等而引发固化的树脂或化合物。本发明的场合，只要是通过与血液中的水分接触而引发固化的物质， 则没有特别限定，具体可以举出例如反应性有机硅系化合物、α-氰基丙烯酸酯系化合物、 一液湿固化性聚氨酯树脂、湿固化性环氧树脂、湿固化性聚硫醚树脂等。这些之中，从固化速度快、对血液检查的影响小的观点考虑，优选使用反应性有机硅系化合物、α-氰基丙烯酸酯系化合物和一液湿固化性聚氨酯树脂；从对润湿面的粘接强、有弹性而由温度变化引起的与壁面的剥离少的观点考虑，特别优选反应性有机硅系化合物。作为反应性有机硅系化合物有以聚硅氧烷结构为主链、末端具有通过与水反应而引发固化反应的反应性基团的湿固化性有机硅树脂，或者，不仅具有聚硅氧烷结构而且主链中具有聚醚、聚酯或聚(甲基)丙烯酸酯等结构的聚合物，可以适当地举出相对于聚合物每1分子具有至少一个反应性固化基团的改性有机硅系树脂。反应性固化基团是具有通过与水反应而生成硅醇基的结构的官能团，根据离去基团的种类，可以举出脱醇型有机硅树脂、脱乙酸等羧酸型有机硅树脂、脱肟型有机硅树脂、脱酰胺型有机硅树脂、脱胺型有机硅树脂、脱酮型有机硅树脂等。其中，优选株式会社KANEKA制造的“Kaneka Silyl SAX220” 或“Kaneka Silyl SAT400”等脱醇型改性有机硅树脂。
接着，作为α-氰基丙烯酸酯系化合物，代表性地，可以举出下述通式(I)表示的化合物。作为式中的R，可以举出甲基、乙基、正丙基、正丁基、异丁基、正戊基等烷基，链烯
基？环己基 芳基 焼氧基焼基等。通常，α-氰基丙烯酸酯系化合物，以水作为固化催化剂，迅速开始阴离子聚合，固化速度非常快，因此用于本发明的血清或血浆分离材料时，优选缩短到离心分离为止的时间。另外，如后详述那样，使用用于避免与血液的接触的材料(以下称为“血液隔离材料”)， 直至进行离心分离的时刻之前，避免α-氰基丙烯酸酯系化合物与血液的接触的方法也是有效的。另外，R为甲基或乙基等低分子量烷基的情况下，是低粘度的液态，如果直接作为分离材料，则难以处理。为了提高作为分离材料的处理性，优选调整固化速度或粘度。作为使用α -氰基丙烯酸酯系化合物时的固化速度或粘度的调整方法而言，可以如下进行调整通过较多的配合不参与湿固化的其他树脂或化合物，或者使用通式(I)中的R是碳原子数8以上的长链的直链烷基或支链烷基的化合物，从而提高粘度、减慢固化速度等。作为其他树脂，具体可以举出聚(甲基)丙烯酸酯、聚酯、聚丙烯腈等。另外，作为长链烷基的例子，可以举出正辛基、十二烷基、硬脂基或异硬脂基等。作为一液湿固化性聚氨酯树脂，可以例示出使聚异氰酸酯类与多元醇、聚醚多元醇、多元酚等反应而得到的末端具有多个异氰酸酯基的聚异氰酸酯聚氨酯预聚物等，是异氰酸酯基与水反应，而边产生二氧化碳气体边进行交联反应的物质。具体地，作为聚异氰酸酯类，例如可以举出六亚甲基二异氰酸酯等脂肪族多异氰酸酯，二环己基甲烷二异氰酸酯、 异佛尔酮二异氰酸酯等脂环式多异氰酸酯，甲苯二异氰酸酯、二苯甲烷二异氰酸酯、对亚苯基二异氰酸酯、萘二异氰酸酯、亚二甲苯基二异氰酸酯等芳香族多异氰酸酯。作为多元醇，可以举出乙二醇、丙二醇、1，3_ 丁二醇、1，4_ 丁二醇、新戊二醇、氢化双酚Α、氢化双酚F、聚四亚甲基二醇、聚酯二醇、三羟甲基丙烷、1，2，4- 丁烷三醇、1，2，6-己烷三醇、丙三醇、季戊四醇等。另外，作为多元酚，可以举出双酚Α、双酚F等，作为聚醚多元醇，可以举出前述的多元醇、多元酚与环氧乙烷或环氧丙烷等环氧烷的加成物等。可以在本发明中使用的一液湿固化性聚氨酯树脂，可以通过将上述聚异氰酸酯类和多元醇等在以NCO基/OH基比计通常为1.5 5.0的范围、优选1.7 3.0的范围配合， 用通常的合成方法而得到。一液湿固化性聚氨酯树脂的异氰酸酯基含量通常为0. 5-20质量％，优选为1-10质量％，更优选为2-8质量％。如果为0. 5质量％以上，则固化速度提高效果充分，可以充分实现血清或血浆与血球成分的分离。另一方面，如果为20质量％以下， 则固化速度不会变得过快，是适当的速度，因而优选。本发明的分离材料中，根据需要，也可以含有通常的固化催化剂作为湿固化性成分的固化催化剂。固化催化剂的含量，可以以相对于湿固化性成分100质量份，通常为 0. 01 20质量份的范围来使用。如果为0. 01质量份以上，则可以获得充分的固化速度，可
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6以充分实现血清或血浆与血球成分的分离。另一方面，如果为20质量份以下，则固化速度不会变得过快，是适当的速度，因而优选。例如，使用反应性有机硅系化合物作为湿固化性成分时，本发明的分离材料中，根据需要，可以含有有机锡、金属络合物或有机磷氧化物等固化催化剂。具体而言，可以举出二丁基锡二月桂酸酯、二丁基锡酞酸酯、辛酸亚锡等锡化合物，四丁基钛酸酯、四异丙基钛酸酯等钛醇盐，松本精细化工株式会社(Matsumoto Fine Chemical Co. Ltd.)制造的 "ORGATIX TC-750”、"ORGATIX TC-2970”等钛螯合物，钛酰化物，三乙醇胺钛酸酯等钛酸酯化合物，锆醇盐、锆酰化物、锆螯合物等有机锆化合物，辛酸铅、环烷酸铅、环烷酸镍、环烷酸钴等羧酸金属盐，乙酰乙酸铝络合物、乙酰乙酸钒络合物等金属乙酰乙酸盐络合物，二丁基胺-2-乙基己酸酯等胺盐等。这些之中，优选锡化合物、钛酸酯化合物，更优选钛酸酯化合物。进而，钛酸酯化合物中，特别优选钛螯合物。这些固化催化剂，根据检查项目，也可能会影响血液检查结果，因此在那样的情况下最好不用。另外，使用钛酸酯化合物的情况下，湿固化性成分会被着色成黄色，通过固化，树脂变成白色或淡黄色。利用该颜色变化，可以从采血管的外侧确认树脂的固化状态，是很合适的。作为固化催化剂的含量，为了获得充分的固化速度，相对于反应性有机硅系化合物100质量份，优选为0. 01 10质量份，更优选为0. 1 5质量份，进一步优选为0. 2 3质量份。如果为0.01质量份以上，则可以确认固化速度提高效果充分；如果为10质量份以下，则固化速度不会变得过快，并且可以得到充分的储存稳定性。另外，使用一液湿固化性聚氨酯树脂作为湿固化性成分时，本发明的分离材料中， 根据需要，可以配合二丁基锡二月桂酸酯等锡化合物和钛化合物等有机金属催化剂、以及三乙胺和三乙二胺等叔胺化合物等固化催化剂。这些固化催化剂，根据检查项目，也可能会影响血液检查结果，因此在那样的情况下最好不用。作为上述固化催化剂的配合量，为了获得充分的固化速度，相对于一液湿固化性聚氨酯树脂100质量份，优选为0. 01 10质量份。如果为0. 01质量份以上，则可以确认固化速度提高效果充分；如果为10质量份以下，则固化速度不会变得过快，并且可以得到充分的储存稳定性。就本发明的分离材料而言，除了如上所述的湿固化性树脂、化合物等湿固化性成分之外，根据需要，还可以配合自身不具有反应性的其他树脂或化合物、和/或具有热固化性或电子射线固化性等其他固化性的树脂或化合物等。本发明的血清或血浆分离材料必须含有比重为1. 03 1. 09的湿固化性成分。如果比重在该范围之外，则无法通过离心分离操作使血清或血浆分离材料位于血清等与血球成分的中间，不能实现本发明的效果。从以上观点考虑，比重优选为1. 03 1. 07的范围， 更优选为1. 035 1. 055的范围。为了使本发明的血清或血浆分离材料中所用的湿固化性成分的比重在上述范围内，可以通过选择用于主要成分的树脂或化合物的材料种类、构成树脂的单体种类等来进行调整，从分离材料的稳定性的观点考虑，优选通过这些构成要件进行调整。另一方面，作为其他方法，在湿固化性成分中配合比重调整材料，也可以使比重在上述范围内，该方法在能够比较容易地控制比重的方面有优势。
作为比重调整材料，具体可以举出日本aerosil株式会社制造的“AER0SIL 130”、 "AEROSIL 972，，、“AER0SIL 0X50” 等二氧化硅，沸石、Elementis Specialities 公司制造的 "ΒΕΝΤ0ΝΕ 38”、“ΒΕΝΤ0ΝΕ SD-I ”等膨润土、蒙脱石粘土、高岭土粘土、叶蛇纹石粘土等矿物， 含碳酸钙或二氧化钛等的无机微粉、或者聚苯乙烯、聚氨酯、聚(甲基)丙烯酸甲酯、丙烯腈-苯乙烯共聚物、橡胶等聚合物微粒等。该比重调整材料，可以作为粘度调整材料使用， 无机微粉也可以作为触变性赋予剂来使用。向用作湿固化性成分的树脂中仅添加比重调整材料时的树脂的粘度，优选为 0. 1 IOOOPa · s，更优选为0. 5 500Pa · s，进一步优选为1 IOOPa · S。如果粘度为 0. IPa-S以上，则在离心分离时，比重调整材料与树脂不会分离，因而是优选的。另一方面， 如果粘度为1000 · S以下，则树脂的粘度不会变得过高，是适度的，因此在离心分离时与壁面的粘接性不会降低，具有成分的粘接性。关于本发明中使用的湿固化性成分的固化后的硬度，优选具有用吸液管等进行分注时即使吸液管的尖端接触也不会破损的强度，另外，优选具有在运输时或处理时的振动下也不会破损的强度，在采血管内使用时与采血管的内壁面不剥离的程度的强度和粘接性。本发明的分离材料中，根据需要，可以加入微珠、粉末、成型体等作为增强材料。即使分离材料的固化度低的情况下，通过加入增强材料，分离材料的强度也可以增加，例如， 用自动分析装置进行临床检查中的血液成分的检查时，可以防止该自动分析装置的探针误吸入分离材料。进而，通过增强分离材料的强度，从而可以增强分离材料与壁面的粘接强度，可以防止血球成分从分离材料与壁面的界面漏出到血清或血浆成分中。作为增强材料，可以使用聚苯乙烯、聚氨酯、丙烯酸树脂、聚烯烃、有机硅树脂等， 更优选聚苯乙烯。另外，作为增强材料，也可以使用作为分离材料中所含的湿固化性成分的固化物的成型体。对于增强材料而言，为了使其位于血球成分和血浆或血清成分的中间，其比重优选为1. 03 1. 09，更优选为1. 03 1. 07，进一步优选为1. 035 1. 055，特别优选为与分离材料的比重相同的比重。另外，加入增强材料的场合，其添加量，相对于湿固化性成分100 质量份，优选为2 900质量份。增强材料的添加量如果相对于湿固化性成分100质量份为2质量份以上，则分离材料的强度增加，可以确保分离材料与壁面的粘接；如果为900质量份以下，则分离材料的流动性不会降低，可以充分进行血球成分与血清等的分离，并且可以确保与管壁的粘接力。从以上观点考虑，增强材料的添加量，相对于湿固化性成分100质量份，更优选为5 250质量份，进一步优选为10 100质量份。作为增强材料的添加方法，可以与湿固化性成分混合来使用，也可以与湿固化性成分分开来添加。更具体来说，如果是粉末状态的增强材料，则优选作为填料混合在湿固化性成分中，使其内包在后述的胶囊或容器等中；微珠的场合，可以混合在湿固化性成分中， 也可以与湿固化性成分一起内包在胶囊或容器等中，也可以配置在胶囊或容器等的血液隔离材料的外侧。另外，使用成型体作为增强材料时，可以与湿固化性成分一起内包在胶囊或容器等中，也可以配置在胶囊或容器等的血液隔离材料的外侧(参照图4和图5)。任何状态下该增强材料都是一种，在湿固化性成分固化时，以其至少一部分进入该固化体的内部的形态，提高分离材料强度的物质。
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另外，本发明的分离材料中，可以加入用于提高与试管壁的粘接力的粘性赋予剂， 例如可以使用硅烷偶联剂等。作为硅烷偶联剂，可以举出氨基丙基三甲氧基硅烷、缩水甘油
基三乙氧基硅烷等。本发明的血清或血浆分离材料，由于因血液中的水分而开始固化，因此优选在通过离心分离来分离血清等和血球成分之前，不与水接触。作为使分离材料与血液不接触的方式，优选配置血液隔离材料，使湿固化性成分与血液不接触，例如可以举出使湿固化性成分内包于胶囊中的方法、收纳在容器中的方法、设置过滤器等隔离壁的方法等。作为血液隔离材料的材料，只要是使湿固化性成分与血液不接触、通过离心分离操作可以被破坏的物质即可，没有特别限定。对于具体材料和方式，在后面会详细说明。通过离心分离使湿固化性成分与血液接触的方法有按照使血液隔离材料与采血管内壁的结合因离心的重力而解除的方式配置血液隔离材料的方法、在血液隔离材料的附近配置比重大的固体(以下称为“高比重固体”)的方法等(参照图2和图幻。前一方法中，只要选择使血液隔离材料结合于采血管内壁的物质(血液隔离材料本身、粘接剂、密合材料、粘着剂等)的结合力可因离心分离的重力而解除的物质即可。另外，后一方法中，在离心分离之前，由于血液隔离材料，湿固化性成分与血液不会接触，所以固化不会进行，而通过离心分离，该高比重固体破坏该血液隔离材料，导致湿固化性成分与血液接触，固化就会开始。作为高比重固体的存在位置的方式，有各种各样的方式，如后详述那样，有在血液隔离材料的上部配置高比重固体的方法。另外，使高比重固体与湿固化性成分一起内包在胶囊中的场合，也属于配置在该胶囊附近的概念。关于血液隔离材料和高比重固体的材质、大小、厚度、质量等，选择的关键是要满足如下条件在离心分离操作前，由于血液隔离材料而湿固化性成分与血液不接触；而在离心分离操作后，由于高比重固体，血液隔离材料的至少一部分容易破裂，使得湿固化性成分与血液接触。另外，血液隔离材料和高比重固体优选使用具有比湿固化性成分的比重大的比重以便在离心分离后存在于血球成分中的物质。这是因为由于血球成分通常不是检查对象，因此即使含有血液隔离材料和高比重固体也没有问题。作为这里所用的高比重固体，可以使用塑料、二氧化硅、玻璃等陶瓷、金属等，作为该高比重固体的比重，优选为1. 1 15. 0的范围，进一步优选为1. 2 10. 0的范围，特别优选为1.3 8.0的范围。作为高比重固体的形状，可以采用球体、多边体、圆柱形、长方体等各种形状。为了在运输时不易被物理破坏，优选倒角体，更优选球体。高比重固体可以是一个，也可以使用多个。作为高比重固体的大小，只要是能够进入采血管内的直径即可使用，没有特别限定。具体而言，如果是具有比采血管直径小Imm以上的直径的高比重固体，则在离心分离时不会妨碍血液的移动，因而优选。另一方面，作为其下限值，只要对放出湿固化性成分有足够重量即可，没有特别限定，通常，具有0. 5mm以上的直径的高比重固体，对放出湿固化性成分是足够的重量，因而优选。另外，关于使用高比重固体的具体方式，使用图2和图3在后面详述。作为内包湿固化性成分的胶囊的原材料，可以是与湿固化性成分的固化物相同的材料，也可以是不同的材料。另外，可以是弹性体，也可以是非弹性体，具体而言，可以适当地举出聚乙烯、聚丙烯等聚烯烃类，聚对苯二甲酸乙二醇酯等聚酯类，聚四氟乙烯等氟树脂，普鲁兰多糖、卡拉胶、胶原蛋白、明胶、淀粉等多糖类，蛋白质、聚乙烯醇、聚乙二醇等水溶性高分子，由铝等金属等构成的膜。进而，胶囊可以仅由一种原材料构成，也可以由多种原材料构成。胶囊的膜厚，优选为能够进行湿固化性成分的内包、并且能够通过离心分离而被破坏的程度的膜厚。具体而言，优选1 10000 μ m左右，更优选为5 500 μ m的范围。接着，对在容器中收纳湿固化性成分的方法进行说明。是将本发明中所用的湿固化性成分收纳在盖有能够通过离心分离而被破坏的程度的强度的膜等的容器中的方法。该带盖容器，例如也可以形成先收纳湿固化性成分和高比重固体，通过离心分离时的重力，高比重固体撞破盖的结构。接着，利用图1，对使用血液隔离材料使分离材料和血液不接触的方法进行说明。图1是表示使用采血管分离血清等和血球成分的过程的示意图。(1-1)是表示采血管1的图，在采血管1的底部配有湿固化性成分4。为了防止与血液的接触，在湿固化性成分的表面，配置有血液隔离材料5。(1-2)是全血6刚刚被采到采血管1中后的状态图， 由于血液隔离材料5，湿固化性成分与血液不接触，因此固化不会开始。与此相对，如果进行离心分离，则血液隔离材料5移动或破裂，湿固化性成分与血液接触，固化被引发。S卩，通过离心分离，湿固化性成分与血球成分交替，湿固化性成分接触血液，固化开始，与此同时如(1-3)所示，血清或血浆7与血球成分8分离，湿固化性成分位于血清等 7和血球成分8之间后或者在湿固化性成分位于血清等7和血球成分8之间的同时发生固化，防止上下的成分混合。作为血液隔离材料，液状、固体状均可，从运输时的稳定性、采血时的隔离性的方面考虑，更优选膜状。作为液状血液隔离材料的原材料，有矿物油、植物油、硅油等。另外， 作为固体状血液隔离材料的原材料，可以是与湿固化性成分的固化物相同的原材料，也可以不同。另外，可以是弹性体，也可以是非弹性体，具体而言，可以适当地使用由上述的高比重固体构成的物质，或者聚乙烯、聚丙烯等聚烯烃类，聚苯乙烯类，聚甲基丙烯酸甲酯等丙烯酸酯类，聚对苯二甲酸乙二醇酯等聚酯类，聚乙二醇等聚醚类，聚四氟乙烯等氟树脂，聚二甲基硅氧烷等有机硅树脂，普鲁兰多糖、卡拉胶、胶原蛋白、明胶、淀粉等多糖类，蛋白质、 聚乙烯醇等水溶性高分子，由铝等金属等构成的膜或凝胶等。进而，血液隔离材料可以由1种原材料构成，也可以由多种原材料构成。血液隔离材料为膜状的场合，其膜厚优选为1 10000 μ m的范围，更优选5 500 μ m的范围。另外，为了使血液隔离材料5移动从而使湿固化性成分与血液接触，例如可以用高比重固体制作血液隔离材料5，利用离心时的重力使其移动。或者，在血液隔离材料5的上部配置高比重固体，在离心时的重力作用下，由高比重固体使血液隔离材料5移动或破裂，从而可以使分离材料与血液接触。作为本发明的血清或血浆分离材料的使用方法，预先配置在采血管时，因处理容易而优选。作为所用的采血管，没有特别限定，可以直接使用以往使用的采血管。关于材质， 可以使用以往使用的材质，例如可以使用玻璃、聚酯、聚乙烯、聚丙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等塑料等。作为市售品，有泰尔茂株式会社制作的“VEN0JECT II”(注册商标)等。另外，采血管的内壁可以进行表面处理，以使湿固化性成分在固化时容易进行粘
10接。例如有利用酸或碱进行的处理、利用硅烷偶联剂进行的处理、光照处理、臭氧处理等。通过这些表面处理，在内壁导入官能团，具有容易与湿固化性成分反应的效果。另外，在采血管中，可以加入与检查项目相应的添加剂，可以加入用于使血液凝固的血液凝固促进剂、用于抑制血液凝固的抗凝血剂等。作为血液凝固促进剂，例如可以举出硫酸鱼精蛋白、凝血酶、硅砂、结晶二氧化硅粉末、硅藻土、玻璃粉末、高岭土、膨润土等，另外，作为抗凝血剂，可以举出肝素、EDTA(乙二胺四乙酸)等。另外，在采血管中采取血液后，作为通过离心分离而得到的上清，想要获得血清时，将上述凝固促进剂用于血液，想要获得血浆时，加入抗凝剂即可。这里所用的添加剂的量，根据添加剂的种类而有所不同，通常为相对于所采血液每IOmL为0. 3 10. Omg的范围。如果为0. 3mg以上，则可以发挥各添加剂的效果，如果为 10. Omg以下，则不会有溶血的问题。本发明的血清或血浆的采血管是预先在采血管内配置上述血清或血浆分离材料， 将血液采入其中，进行离心分离的采血管。作为离心分离的方法，可以采用与以往相同的方法，例如通过以1200G左右的离心力离心分离10分钟左右，从而可以将血清或血浆与血球成分分离。S卩，本发明的血清或血浆分离材料中所含的湿固化性成分，因为其比重介于血清等和血球成分的中间，所以，在采血管内，在血清等与血球成分分离了的状态下，上述湿固化性成分未固化就位于其中间或在进行固化反应的同时位于其中间，借助血液中的水分而被固化。本发明中所用的湿固化性成分，在血清等与血球成分的中间位置，固化至在离心操作结束时湿固化性成分的表面不会因处理时的振动、横置、吸液管的接触等而被破坏的程度即可，可以设定任意的固化时间，但最好是湿固化性成分的固化在离心操作结束时结束。如果使用本发明的血清或血浆分离材料，则只进行离心分离操作，就能进行血清等与血球成分的分离，并且不会发生血清等与血球成分的混合。所以，即使是分离后，血液检验样品被从医院运输到检查中心等的场合，血清等与血球成分也不会彼此混合。就本发明的采血管而言，如前所述，优选形成如下的结构为了避免由于采血使分离材料中的湿固化性成分与水分接触而固化的情况，使该分离材料中的固化性成分成为与水分隔离的状态，而在离心分离操作的阶段，使固化性成分与血液接接触。特别优选为，作为本发明的血清或血浆分离材料，除了湿固化性成分之外还配有上述血液隔离材料的采血管。具体而言，可以举出如前所述，使用将湿固化性成分内包在胶囊或带盖容器中的湿固化性成分，通过离心分离使胶囊等被破坏，使该湿固化性成分与水分接触的方法。接着，利用图2和图3，对通过上述高比重固体破坏血液隔离材料的至少一部分， 使湿固化性成分与血液接触，引发固化的方式进行说明。图2是使湿固化性成分4内包于作为血液隔离材料的胶囊9中，使高比重固体10 内包于该胶囊内的方法(参照2-1)。该方法中，如(2-2)所示，即使采全血6，由于湿固化性成分不与水分接触，因此固化并不开始。如果在该状态下进行离心分离操作，则由于离心时的重力，高比重固体10在胶囊9上开孔，可以将内包的湿固化性成分4放出到胶囊外。另外，图3所示的方式中，将湿固化性成分4装入容器11中后，盖上作为血液隔离材料的膜状的盖12来密封，在该容器11外部配置高比重固体10 (参照3-1)。该方法中，如(3-2)所示，即使采全血6，由于湿固化性成分不与水分接触，因此固化并不开始。之后，通过离心分离操作，高比重固体10破坏盖的膜，从而可以将湿固化性成分4从容器11中放出到容器外。此时，为了使高比重固体10容易破坏膜，也可以将其粘接在膜的上面(3-2)。通过离心分离，膜状的盖12被破坏，该湿固化性成分与血液接触，从而固化开始，如(3-3)所示，离心分离后，血清等7和血球成分8分离，并且湿固化性成分4在配置在它们之间后或者配置的同时发生固化，因此可以防止上下的成分的混合。这里，容器11是由成型品或膜构成的血液隔离材料，盖12可以使用膜等。该容器中可以配置一处以上的开口部。开口部为一处时，例如可以如 Press-Through-Package (PTP)包装等那样，用塑料成型容器作为血液隔离材料，在其中填充湿固化性成分，用镀铝膜、铝箔膜等血液隔离材料形成盖。另外，配置两处开口部时，在筒状容器的下部贴膜，填充湿固化性成分后，在上部形成盖。此时，因为高比重固体可以在容器上下开孔，所以更容易将湿固化性成分放出到胶囊外。这里，作为盖12来使用的膜，优选在通常状态下能够充分密封湿固化性成分4，并且在离心分离操作时容易由高比重固体10破裂的膜。具体而言，破裂强度(JIS P8112)优选为1 IOOOOkPa,断裂伸长率优选为1 40%。如果破裂强度为IkPa以上，则膜不会变脆，能够得到充分的密封性。另一方面，如果破裂强度为IOOOOkPa以下，则离心分离时膜可以容易地由高比重固体10破裂，因而优选。从以上观点考虑，从密封性更充分并且确实破裂的观点考虑，破裂强度优选为5 IOOOkPa,特别优选为10 500kPa。另外，如果断裂伸长率(JIS P8113)为以上，则膜不会变脆，能够得到充分的密封性。另一方面，如果断裂伸长率为40%以下，则离心分离时膜可以容易地由高比重固体 10破裂，因而优选。从以上观点考虑，从密封性更充分并且确实破裂的观点考虑，断裂伸长率优选为5 35%，特别优选为10 30%。上述膜由单独或多个聚合物和填料等构成，通过将它们组合、限定含量等，从而来控制上述破裂强度和断裂伸长率。接着，利用图4和图5，对使用成型体作为增强材料的场合的方式进行说明。如图 4的(4-1)所示，将湿固化性成分4和成型体51配置在采血管内。这里，即使进行采血，由于血液隔离材料5，湿固化性成分4也不会固化(4-2)。通过离心分离操作，成型体51破坏血液隔离材料5或使血液隔离材料5移动，湿固化性成分4与血液接触，引发固化。成型体 51，可以如图4所示，与湿固化性成分4 一起位于血液隔离材料5的中侧，也可以如图5所示，位于血液隔离材料5的外侧，例如血液隔离材料5的上部。作为成型体的数量，是1个以上即可，可以是多个。另外，就成型体的形状而言，可以采用圆柱状、圆盘状、球状、长方体状等各种形状，没有特别限定，但优选能够跟随采血管内壁来配置的形状。成型体的原材料可以与湿固化性成分的固化物相同，也可以不同。另外，可以使用与固体状的血液隔离材料相同的原材料。另外，也可以配置高比重固体等，破坏血液隔离材料或使血液隔离材料移动。实施例以下，对本发明的实施例进行更具体的说明，但本发明不限于这些实施例。实施例1作为血液，准备马的保存血液(kohjin-bio株式会社制造，在马的血液中以1 1 的比例混合有阿氏液(alsever' s solution)而成)。作为湿固化性成分，使用的是作为湿固化性有机硅树脂的迈图高新材料日本合同会社制造的“TSE397”(1成分缩合型(脱醇型)有机硅树脂、比重1. 04、粘度50Pa · s)。打开采血管(泰尔茂株式会社制造的装有固化促进剂的真空采血管)的盖子，向其中加入ImL的该湿固化性有机硅树脂。接着，加入上述马的保存血液8mL，用再栓用盖(泰尔茂株式会社制造的VENOJECT II再栓帽)盖住开口部，进行离心分离。离心分离条件是， 在3000rpm(1200G)下进行10分钟。血浆的分离充分进行，但发现稍微溶血。另外，通过倾析除去血浆部分后，用长10cm、直径2mm的木棒对固化了的湿固化性成分进行按压的结果，可确认已充分固化。实施例2作为湿固化性有机硅树脂，使用迈图高新材料日本合同会社制造的“TSE392” (1 成分缩合型(脱醇型)有机硅树脂、比重1. 04)，除此之外，按照与实施例1相同的方式进行分离操作。结果，血浆的分离充分进行，但发现稍微溶血。另外，通过倾析除去血浆部分后，用长10cm、直径2mm的木棒对固化了的湿固化性成分进行按压的结果，可确认已充分固化。实施例3作为湿固化性有机硅树脂，使用迈图高新材料日本合同会社制造的“TSE389” (1 成分缩合型(脱肟型)有机硅树脂、比重1. 04、粘度5. 6Pa · s)，除此之外，按照与实施例1 相同的方式进行分离操作。结果，血浆的分离充分进行，但发现稍微溶血。另外，通过倾析除去血浆部分后，用长10cm、直径2mm的木棒对固化了的湿固化性成分进行按压的结果，可确认已充分固化。比较例1作为采血管，使用装有血清分离材料的真空采血管(泰尔茂株式会社制造)，没有使用湿固化性有机硅树脂，除此之外，按照与实施例1相同的方式进行分离操作。进行了血浆的分离，但通过倾析除去血浆部分后，竖着放上长10cm、直径2mm的木棒时，木棒因自重而下沉，潜入血球成分中。实施例4作为血液，准备马的保存血液(kohjin-bio株式会社制造，在马的血液中以1 1 的比例混合有阿氏液而成)。作为湿固化性成分，使用的是使2mL的作为湿固化性有机硅树脂的迈图高新材料日本合同会社制造的“TSE397”(1成分缩合型(脱醇型)有机硅树脂、比重1.04、粘度50 · s)内包在胶囊中而成的物质，所述胶囊是用parafilm封口膜(Pechiney Plastic Packaging制造的ParafiIm PM-992)上下盖住低密度聚乙烯软管 (LDPE软管，外径11mm，厚0. 4mm，长20mm)的两端而制成的。打开采血管(泰尔茂株式会社制造的装有固化促进剂的真空采血管)的盖子，向其中加入上述内包有湿固化性有机硅树脂的胶囊，在该胶囊的上面加入高比重固体(形状球状，直径6mm，材质玻璃，比重2. 5)。接着，加入上述马的保存血液8mL，用再栓用盖 (泰尔茂株式会社制造的VENOJECT II再栓帽)盖住开口部，静置3小时。之后进行离心分离，进行血浆和血球成分的分离。离心分离条件是，在3000rpm(1200G)下进行10分钟。之后，静置3小时，通过倾析除去血浆部分后，用长10cm、直径2mm的木棒对固化了的湿固化性成分进行按压的结果，可确认已充分固化。血浆的分离充分进行，但发现稍微溶血。
实施例5作为血液，准备马的保存血液(kohjin-bio株式会社制造)。作为湿固化性成分， 将改性有机硅(株式会社KANEKA制造的SAX220，粘度461 -s) 93. 75质量％和作为比重调整材料的碳酸钙(和光纯药工业株式会社制造)6. 25质量％混合，将比重调整为1.05。相对于该混合物(湿固化性成分)100质量份，加入1质量份的钛系固化催化剂(松本精细化工株式会社制造的TC-750)作为分离材料。打开采血管(泰尔茂株式会社制造的装有固化促进剂的真空采血管)的盖子， 向其中加入上述分离材料1.7mL。接着，加入上述马的保存血液8mL，用再栓用盖(泰尔茂株式会社制造的VENOJECT II再栓帽)盖住，进行离心分离。离心分离条件是，在 3000rpm(1200G)下进行10分钟。血浆的分离充分进行，血球成分没有混入血浆中。接着， 将该采血管放入冰箱)，保存2天。对于通过离心分离得到的血浆部分，用自动生化分析装置(日立化成工业株式会社制造，日立临床分析器S40 (Hitachi Clinical Analyzer S40))，在分离后即刻和分离2 天后(冰箱保存后)，测定血浆的生化项目。结果示于第1表。即使长期保存，成分的变化也很少，得到了与通过倾析进行分离的场合(后述参考例1)几乎相同的结果。另外，此处进行了测定的生化项目是ALP、AST、CK、LD、LDL和HDL。参考例1在装有血清分离材料的采血管(泰尔茂株式会社制造)中，加入与实施例5中所用相同的马的保存血液8mL，同样地进行离心分离处理后，通过倾析除去血浆部分，转移到别的试管中。将该试管放入冰箱G°C)，保存2天。对于该血浆，与实施例5相同地，在分离后即刻和分离2天后(冰箱保存后)，测定血浆的生化项目。结果示于第1表。比较例2打开采血管(泰尔茂株式会社制造的装有血清分离材料的真空采血管)的盖子， 向其中加入马的保存血液8mL，用再栓用盖(泰尔茂株式会社制造的VENOJECT II再栓帽) 盖住，进行离心分离。离心分离条件是，在3000rpm(1200G)下进行10分钟。血浆的分离充分进行，血球成分没有混入血浆中。将该采血管放入冰箱G°C)，保存2天。对于该血浆，与实施例5相同地，在分离后即刻和分离2天后(冰箱保存后)，测定血浆的生化项目。结果示于第1表。与参考例1(倾析)比较时，发现2天后的测定结果中，ALP、AST、LD 值上升了。[表1]第1表
权利要求
1.一种血清或血浆分离材料，其含有比重为1. 03 1. 09的湿固化性成分。
2.根据权利要求1所述的血清或血浆分离材料，其中，所述湿固化性成分是包括选自反应性有机硅系化合物、α-氰基丙烯酸酯系化合物和一液湿固化性聚氨酯树脂中的至少一种的成分。
3.根据权利要求1或2所述的血清或血浆分离材料，其中，进一步含有增强材料。
4.根据权利要求3所述的血清或血浆分离材料，其中，所述增强材料是选自聚苯乙烯、 聚氨酯、丙烯酸树脂、聚烯烃和有机硅树脂中的至少1种。
5.根据权利要求3或4所述的血清或血浆分离材料，其中，相对于所述湿固化性成分 100质量份，所述增强材料的含量为2 900质量份。
6.根据权利要求1 5中任一项所述的血清或血浆分离材料，其中，进一步含有血液隔离材料。
7.根据权利要求6所述的血清或血浆分离材料，其中，所述血液隔离材料是胶囊，在该胶囊中至少内包有所述湿固化性成分。
8.根据权利要求7所述的血清或血浆分离材料，其中，所述胶囊由膜构成。
9.根据权利要求6 8中任一项所述的血清或血浆分离材料，其中，进一步含有高比重固体。
10.根据权利要求9所述的血清或血浆分离材料，其中，所述高比重固体被配置在所述血液隔离材料的附近。
11.根据权利要求9或10所述的血清或血浆分离材料，其中，所述高比重固体的比重为 1. 1 15. 0。
12.根据权利要求9 11中任一项所述的血清或血浆分离材料，其中，所述高比重固体由塑料、陶瓷或金属构成。
13.—种采血管，其配有权利要求1 12中任一项所述的血清或血浆分离材料而成。
全文摘要
本发明为含有比重为1.03～1.09的湿固化性成分的血清或血浆分离材料、以及收纳该血清或血浆分离材料而成的采血管。本发明可以提供在分离采血管中的血清或血浆成分时，以固化状态存在于离心分离后的血清等和血球成分之间，在采血管内，在血清等和血球成分分离了的状态下，长期的储存稳定性良好，且冷冻、解冻时的稳定性、试样处理时的稳定性优异，而且不需要照射紫外线就可以使其固化的血清或血浆分离材料；还提供使用了该分离材料的血清或血浆的分离方法。
文档编号G01N33/48GK102209895SQ20098014472
公开日2011年10月5日 申请日期2009年11月9日 优先权日2008年11月7日
发明者小岛靖, 须藤邦宏 申请人:日立化成工业株式会社