血清或血浆的分离方法

专利名称：血清或血浆的分离方法
技术领域：
本发明涉及通过离心分离操作对全血液试样进行血清或血浆与血球的分离的血清或血浆的分离方法。
背景技术：
临床检查中的血液成分的检查需要将全血中的血清或血浆(以下有时称为“血清等”)与含血球的成分(以下称为“血球成分”)予以分离。作为分离的方法之一，已有在配备了具有血清等和血球成分的中间比重的物质的血液采取管(以下记载为“采血管”)中采取全血液试样，通过离心分离操作使该物质位于血清等和血球成分的中间，从而进行分离的方法。通过该方法，不会因吸液管操作、倾析等而在血清等中混入血球，就可以分取血清或血浆。至今，作为该血清或血浆分离材料，主要使用凝胶状材料，例如提出了以具有特定粘度范围的α -烯烃-马来酸二酯共聚物为主成分、且将比重调整为1. 035 1. 055的血清分离材料等(参照专利文献1)。但是，利用凝胶进行的血清和血浆的分离中，由于凝胶柔软，因此在检查部处分离了血清等后，由于试样处理时的振动、分注时的分离材料的误吸入等，会有血清等和血球成分混杂的情况，这成为检查结果出错的原因。另外，由于分离材料是凝胶状，因此在长期储存的情况下或在冷冻储存时，血球中所含的电解质成分等就会从采血管的内壁与分离材料的界面、或者分离材料的内部形成的缝隙混入血清等中，从而使测定结果出错。另外，在采血场所与检查血液的场所不同的场合等，有时从采血到检查之间需要时间。这样的场合，作为血清和血浆分离材料，无法使用与血液中的水分等反应的材料。因而，为了解决这些问题，提出了在分离血清等后，通过对分离材料照射紫外线等而使其固化，进行彻底分离的方法(参照专利文献2 5)。该方法中，由于通过紫外线照射而完全固化，因此固化后血清等和血球成分不混合，并且，在紫外线照射前，分离材料即使与血液接触也稳定存在，即使从采血到离心分离之间需要时间也没有多大障碍。但是，就利用紫外线照射进行的分离材料的固化而言，认为会影响因紫外线而发生变质的成分(例如胆红素(Ε > eij > )等)的测定。另外，通常，需要对采血管进行灭菌，而利用Y射线等进行灭菌时，分离材料就会固化，因此会有不能进行灭菌操作的弊端。另一方面，为了避免因紫外线导致的成分的变质，还有用少量紫外线使其固化的方法，但因为血液成分存在于分离材料的上下，所以紫外线无法到达树脂的中心部分，难以使采血管内部的树脂完全固化。结果，与使用未固化的凝胶的情况相同，会有血球成分向血清等混入的问题。另外，提出了在进行离心分离操作后的、血液分离用部件的停止位置部分的内壁面上吸附固定有疏水性表面的筒状的血液分离管(参照专利文献6)。就该血液分离管而言，由于形成了分离层时的该分离层和采血管内壁的密合性提高，所以即使在离心分离操作后经过时间取出血清的场合，也可以分取纯粹的血清。另外，这里使用的血清分离剂，在其比重被调整到1.04，通过离心分离法分离血清的方面，与本发明类似。但是，专利文献6 中使用的血清分离剂存在以下问题在长期储存后或冷冻储存后，无法防止血球部分的一部分从采血管的内壁与分离材料的界面、或者分离材料的内部形成的缝隙混入血清部分。进而，提出了这样的血清或血浆分离用部件根据需要将血清或血浆分离用组合物简便地收容在容器中，在收容部件设置弱密封部，通过离心分离使其破裂，就可以使凝胶状的组合物漏出(参照专利文献7)。但是，专利文献7中公开的分离用组合物是凝胶状的组合物，存在与上述相同的问题，并且，难以调整弱密封部的密封强度，如果过弱，则处理时漏出，如果过强，则会有在离心分离时不破裂的问题。另外，专利文献8中公开了 用于对全血液进行血球成分与血清或血浆的分离的血液分离过滤装置(参照专利文献8，权利要求和0001段)，作为其材质，公开了由合成高分子形成的纤维、玻璃纤维、多孔质高分子等(专利文献8，OOM段)。但是，专利文献8中， 是以不使用离心分离为前提的方法(专利文献8，0003段)，不能解决本发明这样的问题，结构完全不同。进而，还提出了这样的血液检查器具有外筒、和卡在其内壁上且与外筒不接触的形成套筒结构的内筒，该外筒是在一底面具有开口部的有底管状容器；还包括在内筒的内壁面滑动的血清分离材料和具有气密性的栓体。作为血清分离材料，公开了比重1.03以上、优选比重1.05以上的分离材料(参照专利文献9，权利要求，0020和0021段)。专利文献9中公开的容器的特征在于不需要更换血清，可以冷冻干燥(参照专利文献9，0010 0012段)。但是，专利文献9公开的方法中，通过内筒的弹性来维持储存状态，但长期保存的话，由于潜伸现象，内筒的弹性降低，因此仍然存在长期储存后或冷冻储存后，无法防止血球部分的一部分从采血管的内壁与分离材料的界面、或者分离材料的内部形成的缝隙混入血清部分的问题。专利文献1 日本特公昭63-48310号公报专利文献2 美国专利第6248844号说明书专利文献3 美国专利申请公开第2007/187341号说明书专利文献4 美国专利申请公开第2008/108493号说明书专利文献5 美国专利申请公开第2008/132874号说明书专利文献6 日本特公平6-77014号公报专利文献7 日本特开2001-318091号公报专利文献8 日本特开2006-3340号公报专利文献9 日本特开平9-22M27号公报

发明内容
本发明的目的在于，提供在分离采血管中的血清或血浆成分时，在离心分离前即使与血液接触也稳定存在，而在离心分离后，以固化状态存在于血清等和血球成分之间，并且在采血管内，在血清等和血球成分分离了的状态下，长期的储存稳定性良好，且冷冻、解冻时的稳定性、试样处理时的稳定性优异，而且不需要照射紫外线等就可以使其固化的血清或血浆的分离方法。
本发明人等进行了深入研究，结果发现，通过在分离材料中含固化成分，通过离心分离操作，该固化成分的固化开始，从而可以解决上述问题。本发明是基于所述认识完成的。即，本发明提供一种在采血管中配有血清或血浆分离材料，将血液采入其中，进行离心分离的血清或血浆的分离方法，其特征在于，该分离材料含固化成分，通过离心分离，该固化成分的固化开始。通过使用本发明的方法，在采血管内，由于在离心分离前即使与血液接触也稳定存在，因此即使从采血到检查之间需要时间也不会有妨碍，另外，离心分离后，处于血清等和血球成分分离了的状态，经过长时间也能够得到良好的储存稳定性，冷冻、解冻时的稳定性、试样处理时的稳定性也优异。进而，由于不需要使用紫外线就可以使其固化，因此不仅可以不考虑紫外线的影响来进行血液的检查，而且对于利用Y射线照射进行的灭菌操作也没有任何妨碍。


图1是表示本发明的方法的一个实施方式的示意图。
图2是表示本发明的方法的另--实施方式的示意图。
图3是表示本发明的方法的另--实施方式的示意图。
图4是表示本发明的方法的另--实施方式的示意图。
图5是表示本发明的方法的另--实施方式的示意图。
图6是表示本发明的方法的另--实施方式的示意图。
图7是表示本发明的方法的另--实施方式的示意图。
图8是表示本发明的方法的另--实施方式的示意图。
图9是表示本发明的方法的另--实施方式的示意图。
图10是表示本发明的方法的另-一实施方式的示意图
符号说明
1采血管
2管腔
3至 ΓΤΠ
4湿固化性成分
4'二液固化型成分
5血液隔离材料
6全血
7血清或血浆(血清等)
8血球成分
9胶囊
10高比重固体
11容器
12至 ΓΤΠ
21A液(二液固化型成分的一方成分)
22B液(二液固化型成分的另一方成分)
23膜
31槽或孑L
41表面处理过的微珠
42水溶性树脂
51成型体
具体实施例方式本发明的血清或血浆的分离方法是在采血管中配有血清或血浆分离材料(以下有时简称为“分离材料”)，将血液采入其中，进行离心分离，其特征在于，该分离材料中的固化成分的固化是通过离心分离来开始的。作为通过离心分离而开始固化的具体方法，可以是通过控制分离材料中的固化成分的固化速度和从采取血液到离心分离的时间，从而通过离心分离而使固化开始的方法; 更优选的是先使该固化成分处于与固化反应开始的要因隔离的状态，再通过离心分离操作解除该隔离状态的方法。本发明的方法中，为了通过离心分离来分离血清等和血球成分，分离材料所含的固化成分的比重优选在血清等和血球成分的中间。具体而言，比重优选为1. 03 1. 09的范围，更优选为1.03 1.07，进一步优选为1.035 1.055的范围。为了使比重在上述范围内，可以通过选择用作固化成分的树脂或化合物所使用的材料种类、构成树脂的单体种类等来进行调整，从分离材料的稳定性的观点考虑，优选通过这些构成要件进行调整。另一方面，作为其他方法，配合比重调整材料，也可以使比重在上述范围内，该方法在能够比较容易地控制比重的方面有优势。作为比重调整材料，具体可以举出日本aerosil株式会社制造的“AER0SIL 130”、 "AEROSIL 972，，、“AER0SIL 0X50” 等二氧化硅，沸石、Elementis Specialities 公司制造的 "ΒΕΝΤ0ΝΕ 38”、“ΒΕΝΤ0ΝΕ SD-I ”等膨润土、蒙脱石粘土、高岭土粘土、叶蛇纹石粘土等矿物， 含碳酸钙或二氧化钛等的无机微粉、或者聚苯乙烯、聚氨酯、聚(甲基)丙烯酸甲酯、丙烯腈-苯乙烯共聚物、橡胶等聚合物微粒等。该比重调整材料，可以作为粘度调整材料使用， 无机微粉也可以作为触变性赋予剂来使用。使用后述的湿固化性树脂作为固化成分的场合，在湿固化性树脂中仅添加比重调整材料时的该湿固化性树脂组合物的粘度，优选为0. 1 1000 · S，更优选为0. 5 500Pa · s，进一步优选为1 IOOPa · s,。如果粘度为0. IPa · s以上，则在离心分离时，比重调整材料与树脂不会分离，因而是优选的。另一方面，如果粘度为1000 · s以下，则树脂的粘度不会变得过高，是适度的，因此在离心分离时与壁面的粘接性不会降低，具有充分的粘接性。本发明的方法中，所谓分离材料所含的固化成分，只要是通过某种原因而发生固化的物质即可，没有特别限定，包括单体或低聚物聚合而固化的情况、聚合物交联而固化的情况、通过表面处理过的粒子接触来制作交联体而进行固化的情况等。以下，详细说明分离材料所含的固化成分的每种。(1)使用湿固化性成分的情况使用湿固化性成分的情况下，本发明的血清或血浆分离材料由于因血液中的水分
6而开始固化，因此在通过离心分离来分离血清等和血球成分之前使其不与水接触。作为使分离材料与血液不接触的方式，优选配置血液隔离材料，使湿固化性成分与血液不接触，例如可以举出使湿固化性成分内包于胶囊中的方法、收纳在容器中的方法、设置过滤器等隔离壁的方法等。图1是表示本发明的方法的一个实施方式的示意图，是设置隔离壁的方法。(1-1) 是表示采血管1的图，在采血管1的底部配有湿固化性成分4。图1所示的例子中，在湿固化性成分的表面，为了防止与血液的接触而配置有血液隔离材料5。根据湿固化性成分4 的固化速度和从采取血液到离心分离的时间，血液隔离材料5不一定是必要的，但通过血液隔离材料5，湿固化性成分4和血液中的水分被完全隔离，通过离心分离可以开始固化反应，因而是优选的方式。(1-2)是全血6刚刚被采到采血管1中后的状态图，由于血液隔离材料5，湿固化性成分与血液不接触，因此固化并不开始。通过离心分离使湿固化性成分与血液接触的方法有按照使血液隔离材料与采血管内壁的结合因离心的重力而被解除的方式配置血液隔离材料的方法、在血液隔离材料的附近配置比重大的固体(以下称为“高比重固体”)的方法等。前一方法中，只要选择使血液隔离材料结合于采血管内壁的物质(血液隔离材料本身、粘接剂、密合材料、粘着剂等) 的结合力因离心分离的重力而被解除的物质即可。另外，后一方法中，离心分离之前，由于血液隔离材料因而湿固化性成分与血液不会接触，使得固化不会进行；但通过离心分离，该高比重固体就会破坏该血液隔离材料，使得湿固化性成分与血液接触而固化开始。作为高比重固体的存在位置的方式，有各种各样的方式，如后详述那样，有在血液隔离材料的上部配置高比重固体的方法。另外，使高比重固体与湿固化性成分一起内包在胶囊中的情况，也属于配置在该胶囊附近的概念。关于血液隔离材料和高比重固体的材质、大小、厚度、质量等，选择的关键是要满足如下条件在离心分离操作前，由于血液隔离材料因而湿固化性成分与血液并不接触； 而在离心分离操作后，由于高比重固体，血液隔离材料的至少一部分容易破裂，湿固化性成分与血液就会接触。另外，血液隔离材料和高比重固体优选使用具有比湿固化性成分的比重大的比重以便在离心分离后存在于血球成分中的物质。这是因为由于血球成分通常不是检查对象，因此即使含有血液隔离材料和高比重固体也没有问题。图1所示的方式中，进行离心分离的话，血液隔离材料5就会移动或破裂，湿固化性成分与血液接触而固化开始。S卩，通过离心分离，湿固化性成分与血球成分交替，湿固化性成分接触血液，固化开始，与此同时如(1-3)所示，分离成血清或血浆7与血球成分8，在湿固化性成分4位于血清等7和血球成分8之间后或者在湿固化性成分4位于血清等7和血球成分8之间的同时发生固化，防止上下的成分混合。作为血液隔离材料5，只要是能进行湿固化性成分和血液的隔离的物质即可，没有特别限定，液状、固体状均可，从运输时的稳定性、采血时的隔离性的方面考虑，更优选膜状。作为液状血液隔离材料的原材料，有矿物油、植物油、硅油等。另外，作为固体状血液隔离材料的原材料，可以是与湿固化性成分的固化物相同的原材料，也可以不同。另外，可以是弹性体，也可以是非弹性体，具体而言，可以适当地使用聚乙烯、聚丙烯等聚烯烃类，聚苯乙烯类，聚甲基丙烯酸甲酯等丙烯酸酯类，聚对苯二甲酸乙二醇酯等聚酯类，聚乙二醇等聚醚类，聚四氟乙烯等氟树脂，聚二甲基硅氧烷等有机硅树脂，普鲁兰多糖、卡拉胶、胶原蛋白、明胶、淀粉等多糖类，蛋白质、聚乙烯醇等水溶性高分子，天然橡胶、聚氨酯橡胶等橡胶， 由铝等金属等构成的膜或凝胶等。进而，血液隔离材料5可以由1种原材料构成，也可以由多种原材料构成。血液隔离材料5为膜状的场合，其膜厚优选为1 ΙΟΟΟΟμπι的范围，更优选5 500 μ m的范围。作为使血液隔离材料5移动或破裂从而使湿固化性成分与血液接触的方法有，例如用高比重固体制作血液隔离材料5，利用离心时的重力使其移动的方法。另外还有在血液隔离材料5的上部配置高比重固体，利用离心时的重力使血液隔离材料移动或破裂的方法。接着，图2所示的方式是使湿固化性成分内包于作为血液隔离材料的胶囊9中的方式(参照2-1)。该方法中，如(2-2)所示，即使采全血6，由于湿固化性成分不与水分接触，因此固化不开始。通过之后的离心分离，胶囊破裂，该湿固化性成分与血液接触而开始固化，如(2-3)所示，离心分离后，分离血清等7和血球成分8，并且配置在其间之后或者在配置的同时发生固化，因此可以防止上下的成分混合。作为破坏作为血液隔离材料的胶囊9的方法，例如有使高比重固体10内包在该胶囊内的方法。如果在该状态下进行离心分离操作，则由于离心时的重力，高比重固体10在胶囊9中开孔，可以将内包的湿固化性成分4放出到胶囊夕卜。另外，通过使胶囊的膜厚变薄， 则可以不使用高比重固体，而仅通过离心分离操作来破坏胶囊。作为高比重固体10，可以使用塑料、二氧化硅、玻璃等陶瓷、金属等，作为该高比重固体的比重，优选为1. 1 15. 0的范围，进一步优选为1. 2 10. 0的范围，特别优选为 1. 3 8. 0的范围。另外，虽然这里说明的是内包高比重固体的情况，但高比重固体也不一定非要内包在胶囊中，也可以存在于胶囊外部附近、从外侧破坏该胶囊，使湿固化性成分流出胶囊外。进而，也可以与血液隔离材料5成为一体型。例如，也可以在血液隔离材料5的膜表面配置高比重固体。该血液隔离材料优选为延展性小、具有适度的强度的材料。作为高比重固体的形状，可以采用球体、多边体、圆柱形、长方体、板状等各种形状。为了在运输时不易被物理破坏，优选倒角体，更优选球体。高比重固体可以是一个，也可以使用多个。作为高比重固体的大小，只要是能够进入采血管内的直径即可使用，没有特别限定。具体而言，如果是具有比采血管直径小Imm以上的直径的高比重固体，则在离心分离时不会妨碍血液的移动，因而优选。另一方面，作为其下限值，只要对放出湿固化性成分有足够重量即可，没有特别限定，通常，具有0. 5mm以上的直径的高比重固体，对放出湿固化性成分是足够的重量，因而优选。胶囊9可以适当地使用与上述血液隔离材料5中所用的固体状血液隔离材料相同的原材料，另外，膜厚也与血液隔离材料5为膜状的情况相同。另外，作为胶囊的形状，可以采用球体、圆柱形、多边体、长方体等各种形状。另外，如果是内包在图2所示的胶囊中的方式，则也可以并用使用图1所示的血液隔离材料5的方法。
另外还有如图3所示，将湿固化性成分装入容器11中后，盖上作为血液隔离材料的膜状的盖12来密封(参照3-1)。该方法中，如(3-2)所示，即使采全血6，由于湿固化性成分不与水分接触，因此固化不开始。之后，通过离心分离，膜状的盖12被破坏，该湿固化性成分与血液接触，从而固化开始，如(3-3)所示，离心分离后，血清等7和血球成分8分离，并且湿固化性成分4在配置在它们之间后或者配置的同时发生固化，因此可以防止上下的成分的混合。容器11是由成型品或膜构成的血液隔离材料，盖12可以使用膜等。该容器中可以配置一处以上的开口部。开口部为一处时，例如可以如I^ress-Through-Package (PTP)包装等那样，用塑料成型容器作为血液隔离材料，在其中填充湿固化性成分，用镀铝膜、铝箔膜等血液隔离材料形成盖。另外，配置两处开口部时，在筒状容器的下部贴膜，填充湿固化性成分后，在上部形成盖。此时，因为高比重固体可以在容器上下开孔，所以更容易将湿固化性成分放出到胶囊外。在该容器11的外部配置高比重固体10，通过离心，高比重固体破坏盖的膜，从而可以将湿固化性成分从容器11放出到容器外。此时，也可以粘接在膜上面， 以使得高比重固体容易破坏膜(3-2)。这里，作为盖12来使用的膜，优选在通常状态下能够充分密封湿固化性成分4，并且在离心分离操作时容易由高比重固体10破裂的膜。具体而言，破裂强度(JIS P8112)优选为1 IOOOOkPa,断裂伸长率优选为1 40%。如果破裂强度为IkPa以上，则膜不会变脆，能够得到充分的密封性。另一方面，如果破裂强度为IOOOOkPa以下，则离心分离时膜可以容易地被高比重固体10破裂，因而优选。从以上观点考虑，从密封性更充分并且确实破裂的观点考虑，破裂强度优选为5 IOOOkPa,特别优选为10 500kPa。另外，如果断裂伸长率(JIS P8113)为1 %以上，则膜不会变脆，能够得到充分的密封性。另一方面，如果断裂伸长率为40%以下，则离心分离时膜可以容易地被高比重固体 10破裂，因而优选。从以上观点考虑，从密封性更充分并且确实破裂的观点考虑，断裂伸长率优选为5 35%，特别优选为10 30%。上述膜由单独或多个聚合物和填料等构成，通过将它们组合、限定含量等，从而控制上述破裂强度和断裂伸长率。关于使用湿固化性成分的场合的分离材料的固化程度，固化至在离心操作结束时湿固化性成分的表面不会因处理时的振动、横置、吸液管的接触等而被破坏的程度即可，可以设定任意的固化时间。进而，最好是湿固化性成分的固化在离心分离操作结束时结束。进一步优选在离心分离操作中用湿固化性成分将全血分成血清或血浆和血球成分后，湿固化性成分的固化结束。另外，上述高比重固体10，如(2-3)和(3-3)所示，离心分离后存在于血球成分8 中，或者，容器11也如(3-3)所示，离心分离后存在于血球成分8中，但血球成分通常不是检查对象，因此没有问题。(2)使用二液固化型的情况接着对使用二液固化型作为分离材料中所含的固化成分的情况(以下称为二液固化型成分)进行说明。二液固化型成分的场合，关键是使二液(这里称为A液和B液) 不接触，通过离心分离，该A液和B液接触。具体地，有图4所示的方式。即，将二液固化型成分的二液各自内包在胶囊内，以使两者彼此不接触的方法。例如，如(4-1)所示，通过将A液21和B液22各自内包在胶囊 9中，两者不接触，因此固化不开始。该状态下，即使采全血6，胶囊9也不被破坏，因此A液 21和B液22不会接触(参照4-2)。接着，如果进行离心分离操作，则配置在胶囊9内的高比重固体10由于离心时的重力，破坏A液的胶囊和B液的胶囊，使两者混合。S卩，通过离心分离，A液和B液接触，该二液固化型成分的固化开始。然后，如(4-3)所示，离心分离后， 将血清等7和血球成分8分离，并且在其之间，二液固化型成分4'固化，可以防止上下的成分混合。这里，也可以采用将高比重固体配置在胶囊外，离心时弄破胶囊的方法；进而，也可以通过使胶囊的膜厚变薄，不使用高比重固体而仅通过离心分离操作来破坏胶囊。作为使用二液固化型的情况下的分离材料的固化程度，优选为在离心分离操作中二液被混合而由二液固化型成分将全血分成血清或血浆与血球成分时，固化成不会被吸液管操作等弄破的程度，进而希望二液固化型成分的固化在离心分离操作结束时结束。另外，如图5所示，也可以在一方的胶囊内配置另一方的胶囊。S卩，如(5-1)所示的例子中，在内包A液21的胶囊内存在内包B液22的胶囊而成为2层，并且在内包B液22 的胶囊内内包高比重固体10。通过离心分离操作，由于高比重固体10，胶囊被破坏，A液和 B液混合，固化开始。另外，通过使胶囊的膜厚变薄，则可以不使用高比重固体，而仅通过离心操作来破坏胶囊。另外，作为胶囊的原材料，可以使用与前述相同的原材料。另外，作为使用二液固化型成分的情况的其他实施方式，还有如图6所示，使二液固化型成分的A液21和B液22夹着膜23层叠在管腔内的方法。离心分离前，膜被配置在二液之间，因此二液不接触，固化不开始(参照6-1)。在该状态下，即使采全血6，也可以维持二液不接触的状态(参照6-2)。接着，如果进行离心分离操作，通过离心时的重力，膜23 被破坏，A液和B液彼此混合，固化开始。那么，如(6-3)所示，离心分离后，将血清等7和血球成分8分离，并且在其之间，二液固化型成分4'以固化了的状态存在，可以防止上下的成分的混合。作为这里使用的膜，只要是A液21和B液22不混合，并且可由离心分离操作破坏或移动的膜即可，没有特别限制，可以使用与前述的血液隔离材料相同的原材料。该膜优选为延展性小、具有适度的强度的材料。另外也可以采用以下实施方式如图7所示，将A液21配置在采血管1的盖内，将 B液22配置在管内，离心时，A液从盖被导入，与B液混合。更具体而言，在盖3中设置能够配置二液固化型成分的一方的液体(A液)的槽或孔31，在其中加入A液21，密封。这里， 作为向盖内设置A液的方法，只要是采血时不与血液接触而流出的形状，则没有特别限定， 例如可以举出圆筒形、长方体等的孔等。另一方面，在采血管1的底部配置B液22，离心分离前，二液不接触，因此固化不开始(7-1)。在该状态下，即使采全血6，也可以维持二液不接触的状态(参照7-2)。如果在该状态下进行离心分离操作，由于离心时的重力，A液21流出到全血6，并且，B液也混合在全血6中，因此A液和B液接触，固化开始。这里，优选使A液具有触变性， 在通常的处理中不会从盖内流出，借助离心时的应力，从盖内导入管内。然后，如(7-3)所示，离心分离后，将血清等7和血球成分8分离，并且在其之间， 二液固化型成分4'以固化了的状态存在，由此可以防止上下的成分的混合。
(3)使用表面处理过的微珠的情况接着，对使用表面处理过的微珠作为分离材料中的固化成分的情况进行说明。这里所用的表面处理过的微珠是，若彼此接触则在表面间发生交联反应等而固化的微珠。该表面处理过的微珠，如图8的(8-1)所示，在离心分离前，表面处理过的微珠41与水溶性树脂42混合，被导入采血管1，因此是表面处理过的微珠彼此不接触的状态。这里如果进行采血(8- ，则水溶性树脂溶解在血液内，表面处理过的微珠扩散到血液内。接着，如果进行离心分离，则具有血清等和血球成分之间的比重的微珠，如(8-3)所示，聚集在血清等和血球成分之间的部分而接触。该时刻，表面的官能团的交联被引发，结果形成高强度的分离层。作为微珠的表面处理，有各种方法，例如有将含大量的高浓度的羧基、缩水甘油基等官能团的树脂溶解在溶剂中而得到溶液，使用该溶液、用具有流动层的喷涂装置等处理微珠的表面的湿式法；将含大量的同样高浓度的羧基、缩水甘油基等官能团的树脂固体粉碎而得到粒子，通过高速气流中撞击法等使该粒子直接附着固定在作为母粒子的微珠上的方法等。另外，作为微珠的表面处理方法的一个例子，还可以举出通过悬浮聚合而合成核粒子，接着接续悬浮聚合官能团浓度高的壳层而得到核壳型粒子。作为表面处理过的微珠的粒径，只要在能够实现本发明效果的范围内，则没有特别限定，可以使用Iym IOmm程度的微珠。另外，水溶性树脂42必须由即使溶解在血液中也不影响血液检查的材料构成，可以适当地举出聚乙烯醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、水溶性有机硅、葡聚糖、纤维素衍生物 (例如羧甲基纤维素、羟甲基纤维素、甲基纤维素等)。本发明的分离材料中，根据需要，可以加入微珠、粉末、成型体等作为增强材料。即使分离材料的固化度低的情况下，通过加入增强材料，分离材料的强度也可以增加，例如， 用自动分析装置进行临床检查中的血液成分的检查时，可以防止该自动分析装置的探针误吸入分离材料。进而，通过增强分离材料的强度，从而可以增强分离材料与壁面的粘接强度，可以防止血球成分从分离材料与壁面的界面漏出到血清或血浆成分中。作为增强材料，可以使用聚苯乙烯、聚氨酯、丙烯酸树脂、聚烯烃、有机硅树脂等， 更优选聚苯乙烯。另外，作为增强材料，也可以使用作为分离材料中所含的湿固化性成分的固化物的成型体。对于增强材料而言，为了使其位于血球成分和血浆或血清成分的中间，其比重优选为1. 03 1. 09，更优选为1. 03 1. 07，进一步优选为1. 035 1. 055，特别优选为与分离材料的比重相同的比重。另外，加入增强材料的场合，相对于固化成分100质量份，其添加量优选为2 900质量份。增强材料的添加量如果相对于固化成分100质量份为2质量份以上，则分离材料的强度增加，可以确保分离材料与壁面的粘接；如果为900质量份以下，则分离材料的流动性不会降低，可以充分进行血球成分与血清等的分离，并且可以确保与管壁的粘接力。从以上观点考虑，增强材料的添加量，相对于固化成分100质量份，更优选为5 250质量份，进一步优选为10 100质量份。作为增强材料的添加方法，可以与固化成分混合来使用，也可以与固化成分分开来添加。更具体来说，如果是粉末状态的增强材料，则优选作为填料混合在固化成分中，使其内包在后述的胶囊或容器等中的方式；微珠的场合，可以混合在固化成分中，也可以与固化成分一起内包在胶囊或容器等中，也可以配置在胶囊或容器等的血液隔离材料的外侧。另外，使用成型体作为增强材料时，可以与固化成分一起内包在胶囊或容器等中，也可以配置在胶囊或容器等的血液隔离材料的外侧(参照图9和图10)。任何方式下该增强材料都是，在固化成分固化时，以其至少一部分进入该固化体内部的形态，提高分离材料强度的物质。接着，对在采血管中配置成型体作为增强材料的情况进行说明。例如，如图9的 (9-1)所示，将湿固化性成分4和成型体51配置在采血管内的血液隔离材料5内。这里，即使进行采血，由于血液隔离材料5，湿固化性成分也不会固化(9-2)。通过离心，成型体51 破坏血液隔离材料5或使血液隔离材料5移动，湿固化性成分4与血液接触，引发固化。成型体，可以如图9所示，与湿固化性成分4 一起位于血液隔离材料5的中侧，也可以如图10 所示，位于血液隔离材料5的外侧，例如血液隔离材料5的上部。关于成型体的数量，1个以上即可，也可以是多个。另外，就成型体的形状而言，可以采用圆柱状、圆盘状、球状、长方体状等各种形状，没有特别限定。成型体的原材料可以与分离材料或与分离材料所含的固化成分相同，也可以不同，另外，可以使用与固体状的血液隔离材料相同的原材料。另外，也可以配置高比重固体等，破坏血液隔离材料或使血液隔离材料移动。作为成型体的比重，优选与分离材料所含的固化成分的比重为相同程度，具体优选1. 03 1. 09，更优选1. 03 1. 07，进一步优选1. 035 1. 055。如(9-3)和(10-3)所示，离心后位于血清等7和血球成分8之间以后或位于的同时，湿固化性成分4固化，与成型体51 —起，防止上下的成分的混合。另外，图1 8的采血管中也可以配置成型体作为增强材料。如上所述，通过含有与分离材料所含的固化成分的比重相同程度的比重的成型体，可以减少固化成分的使用量。另外，即使是未固化状态，也可以防止吸液管操作的误吸入等，因此能够将可以使用的固化成分固化为止的时间设定得长。进而，采血后进行离心操作的场合，有把血液卷入固化成分的情况，可以减少这种情况。另外，本发明的分离材料中，可以加入用于提高与试管壁的粘接力的粘性赋予剂， 例如可以使用硅烷偶联剂等。作为硅烷偶联剂，可以举出氨基丙基三甲氧基硅烷、缩水甘油
基三乙氧基硅烷等。接着，关于上述各方法所用的材料，在以下详细说明。首先，上述(1)中使用的湿固化性成分，是由于水分的存在而发生固化反应的成分，例如包括分子内具有一个以上的水解性反应基团或通过水引发反应的官能团，通过空气中的水分等而引发固化的树脂或化合物。本发明的场合，只要是通过与血液中的水分接触而引发固化的物质，则没有特别限定，具体可以举出反应性有机硅系化合物、α-氰基丙烯酸酯系化合物、一液湿固化性聚氨酯树脂、湿固化性环氧树脂组合物、湿固化性聚硫醚树脂组合物等。这些之中，从固化速度快、对血液检查的影响小的观点考虑，优选使用反应性有机硅系化合物、α -氰基丙烯酸酯系化合物和一液湿固化性聚氨酯树脂，从对润湿面的粘接强、有弹性因而温度变化引起的与壁面的剥离少的观点考虑，特别优选反应性有机硅系化合物。作为反应性有机硅系化合物有以聚硅氧烷结构为主链、末端具有通过与水反应而引发固化反应的反应性基团的湿固化性有机硅树脂，或者，不仅具有聚硅氧烷结构而且主链中具有聚醚、聚酯或聚(甲基)丙烯酸酯等结构的聚合物，可以适当地举出相对于聚合物每1分子具有至少一个反应性固化基团的改性有机硅系树脂。反应性固化基团是具有通过与水反应而生成硅醇基的结构的官能团，根据离去基团的种类，可以举出脱醇型有机硅树脂、脱乙酸等羧酸型有机硅树脂、脱肟型有机硅树脂、脱酰胺型有机硅树脂、脱胺型有机硅树脂、脱酮型有机硅树脂等。其中，优选株式会社KANEKA制造的“Kaneka Silyl SAX220” 或“Kaneka Silyl SAT400”等脱醇型改性有机硅树脂。接着，作为α-氰基丙烯酸酯系化合物，代表性地，可以举出下述通式(I)表示的化合物。
权利要求
1.一种血清或血浆的分离方法，其为在采血管中配置血清或血浆分离材料，将血液采入其中，进行离心分离的血清或血浆的分离方法，其特征在于，该分离材料含有固化成分， 通过离心分离，该固化成分的固化开始。
2.根据权利要求1所述的血清或血浆的分离方法，其中，所述血清或血浆分离材料中具有血液隔离材料。
3.根据权利要求2所述的血清或血浆的分离方法，其中，所述血液隔离材料是胶囊，所述固化成分内包在该胶囊中。
4.根据权利要求1 3中任一项所述的血清或血浆的分离方法，其中，所述血清或血浆分离材料中进一步配有增强材料。
5.根据权利要求4所述的血清或血浆的分离方法，其中，所述增强材料是成型体。
6.根据权利要求1 5中任一项所述的血清或血浆的分离方法，其中，所述固化成分的比重是1. 03 1. 09。
7.根据权利要求1 6中任一项所述的血清或血浆的分离方法，其中，所述固化成分是湿固化性成分，该湿固化性成分通过离心分离而与血液接触，从而固化开始。
8.根据权利要求1 6中任一项所述的血清或血浆的分离方法，其中，所述固化成分是二液固化型，通过离心分离，该二液接触，固化开始。
9.根据权利要求1 6中任一项所述的血清或血浆的分离方法，其中，所述固化成分是表面处理过的树脂微珠，通过离心分离，该表面处理过的树脂微珠相互接触，固化开始。
10.根据权利要求7所述的血清或血浆的分离方法，其中，所述湿固化性成分是选自反应性有机硅系化合物、α-氰基丙烯酸酯系化合物和一液湿固化性聚氨酯树脂中的至少一种。
全文摘要
本发明为在采血管中配置血清或血浆分离材料，将血液采入其中，进行离心分离的血清或血浆的分离方法，其特征在于，该分离材料含固化成分，通过离心分离，该固化成分的固化开始。本发明可以提供在分离采血管中的血清或血浆成分时，在离心分离前即使与血液接触也稳定存在，在离心分离后，以固化状态存在于离心分离后的血清等和血球成分之间，在采血管内，在血清等和血球成分分离了的状态下，长期的储存稳定性良好，且冷冻、解冻时的稳定性、试样处理时的稳定性优异，而且不需要照射紫外线等就可以使其固化的血清或血浆分离方法。
文档编号G01N33/48GK102209896SQ20098014472
公开日2011年10月5日 申请日期2009年11月9日 优先权日2008年11月7日
发明者前川麦, 小岛靖, 须藤邦宏 申请人:日立化成工业株式会社