专利名称：固定生物大分子的稳定剂及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种稳定剂，尤其涉及一种固定生物大分子的稳定剂及其制备方法， 本发明还涉及该稳定剂在提高ELISA酶标板包被抗体或抗原在基板表面干燥过程中的稳定性的用途，属于固定生物分子的稳定剂领域。
背景技术：
在一些免疫学实验程序中，生物分子需要首先固定到基板表面，例如微孔板，管， 乳胶颗粒，硝酸纤维素膜，陶瓷，硅等，然后经过干燥后，固定的分子生物活性将减弱甚至丧失。ELISA试剂盒进行商品生产的技术关键之一就是试剂盒在保存期内保证包被在酶标板上的抗体或抗原免疫活性不发生变化，目前国内外不乏有各种商用诊断试剂盒生产和应用，但对稳定剂的报道却很少。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种固定生物分子的稳定剂，可用于提高ELI SA酶标板包被抗体或抗原在基板表面干燥过程中的稳定性，改善测试试剂盒的货架寿命，提高其商业价值。本发明目的之二是提供一种制备上述固定生物分子的稳定剂的方法。本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的一种固定生物分子的稳定剂，包括以下组分甘油、氨基酸类、糖类物质、蛋白胨、 离子螯合剂和防腐剂；优选的，各组分的用量为甘油0% 10%作/力，氨基酸0(% 5.0(% (m/v)，糖类物质 0% 10.0% (m/v)，蛋白胨 1.0% 8.0% (m/v)，离子螯合剂 0. 01 % 5. 0% (m/v), 防腐剂0.001% 2.0% (m/v)，余量为水。更优选的，各组分的用量为甘油0.5% 10% (V/V)，氨基酸0.05% 5.0% (m/ ν)，糖类物质5.0% 10. 0% (m/v)，蛋白胨1.0% 5.0% (m/v)，离子螯合剂0. 01 % 3. 0% (m/v)，防腐剂 0.001% 1.0% (m/v)，余量为水。特别优选的，各组分的用量为甘油0.5% (ν/ν)，氨基酸0.05% (m/v)，蛋白胨 1.0% (m/v)，离子螯合剂0.01% (m/v)，防腐剂0.001% (m/v)，余量为水。本发明的稳定剂中之所以选用氨基酸是因为其具有一定的抗氧化作用，所述氨基酸类包括但不限于甘氨酸、丙氨酸、精氨酸、赖氨酸或谷氨酰胺等氨基酸。所述糖类物质包括但不限于海藻糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、或乳糖等糖类物质。所述离子螯合剂包括但不限于EDTA、EDTA-Na2, EDTA-Na4等物质。所述防腐剂包括但不限于叠氮钠、硫柳汞等物质。本发明另一个目的是提供一种制备上述固定生物分子的稳定剂的方法，该方法包括以下步骤(1)按所述用量取各组分；
(2)将各组分混合溶解，过滤除菌，即得。本发明稳定剂生产成本低、保护效果明显、效期长，可用于制备质优价廉的酶标板稳定剂，提高ELISA包被活性，具有较高的商业价值。
具体实施例方式下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。实施例1稳定剂的制备(1)按以下用量取各组分甘油1.0% (ν/ν)，甘氨酸1.0% (m/v)，海藻糖5.0% (m/v)，蛋白胨2.0% (m/v)，离子螯合剂EDTA1.0% (m/v)，防腐剂叠氮钠0. 5% (m/v)，余量为水；(2)将上述各组分混合溶解，过滤除菌，即得。实施例2稳定剂的制备(1)按以下用量取各组分甘油0.5% (ν/ν)，丙氨酸0.05% (m/v)，蛋白胨1. 0% (m/v)，离子螯合剂EDTA-Na2O. 01% (m/v)，防腐剂叠氮钠0. 001 % (m/v)，余量为水；(2)将上述各组分混合溶解，过滤除菌，即得。实施例3稳定剂的制备(1)按以下用量取各组分甘油10.0% (ν/ν)，赖氨酸5.0% (m/v)，海藻糖10. 0% (m/v)，蛋白胨5.0% (m/v)，离子螯合剂3.0% (m/v)，防腐剂叠氮钠1. 0 % (m/v)，余量为水；(2)将上述各组分混合溶解，过滤除菌，即得。实施例4稳定剂的制备(1)按以下用量取各组分甘油10% (ν/ν)，谷氨酰胺0.05% (m/v)，蛋白胨5. 0% (m/v)，离子螯合剂EDTA-Na23. 0% (m/v)，防腐剂叠氮钠0. 001% (m/v)，余量为水；(2)将上述各组分混合溶解，过滤除菌，即得。实施例5稳定剂的制备(1)按以下用量取各组分甘氨酸5.0% (m/v)，海藻糖5.0% (m/v)，蛋白胨5. 0% (m/v)，离子螯合剂EDTA-Na43. 0% (m/v)，防腐剂硫柳汞1. 0% (m/v)，余量为水；(2)将上述各组分混合溶解，过滤除菌，即得。试验例1本发明稳定剂在提高生物分子稳定性的应用效果试验供试样品实施例1-5所制备的稳定剂，分别编号为1-5 ；试验方法用配制的5种稳定剂分别处理包被上抗体或抗原的酶标板，设不经稳定剂处理的为对照组置于37°C恒温箱内放置3d、6d、12d，室温下平衡30min，以双抗夹心 ELISA法检测OD值，试验结果见表1。表1不同稳定剂处理和未经稳定剂处理的包被板37°C下放置后的OD值
权利要求
1.一种固定生物大分子的稳定剂，包括以下组分甘油、氨基酸类、糖类物质、蛋白胨、 离子螯合剂和防腐剂。
2.按照权利要求1所述的稳定剂，其特征在于，各组分的用量为按V/V计，甘油0% 10% ；按m/v计氨基酸0% 5.0%，糖类物质0% 10.0%，蛋白胨1.0% 8.0%，离子螯合剂0. 01% 5. 0%，防腐剂0. 001% 2. 0% ；余量为水。
3.按照权利要求2所述的稳定剂，其特征在于，各组分的用量为按V/V计，甘油 0. 5% 10%;按m/v计氨基酸0. 05% 5. 0%、糖类物质5. 0% 10. 0%、蛋白胨1. 0% 5.0%、离子螯合剂0.01% 3. 0%、防腐剂0. 001% 1.0% ；余量为水。
4.按照权利要求2所述的稳定剂，其特征在于，各组分的用量为按VA^+，甘油 0.5% (ν/ν)；按m/v计氨基酸0.05%，蛋白胨1.0%，离子螯合剂0.01%，防腐剂0.001%; 余量为水。
5.按照权利要求1所述的稳定剂，其特征在于所述氨基酸类包括但不限于甘氨酸、 丙氨酸、精氨酸、赖氨酸或谷氨酰胺。
6.按照权利要求1所述的稳定剂，其特征在于所述糖类物质包括但不限于海藻糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇或乳糖。
7.按照权利要求1所述的稳定剂，其特征在于所述离子螯合剂包括但不限于EDTA、 EDTA-Nii2或EDTA-Na4 ；所述防腐剂包括但不限于叠氮钠或硫柳汞。
8.一种制备权利要求1-7任何一项所述稳定剂的方法，包括以下步骤(1)按所述用量取各组分；(2)将各组分混合溶解，过滤除菌，即得。
9.权利要求1-7任何一项所述稳定剂在提高固定于基板表面的生物大分子的稳定性中的用途。
10.按照权利要求权利要求9所述的用途，其特征在于所述的生物大分子包括蛋白质、蛋白质衍生物或DNA。
全文摘要
本发明公开了一种固定生物大分子的稳定剂及其制备方法和应用，所述稳定剂包括以下组分甘油、氨基酸类、糖类物质、蛋白胨、离子螯合剂和防腐剂。将上述各组分混合溶解，过滤除菌，即得本发明稳定剂。本发明稳定剂生产成本低、保护生物大分子活性的效果明显、效期长，可用于制备质优价廉的酶标板稳定剂，提高ELISA包被活性。
文档编号G01N33/543GK102375056SQ201010264668
公开日2012年3月14日 申请日期2010年8月27日 优先权日2010年8月27日
发明者刘宏伟, 盛国军, 赵烽, 陈立平 申请人:烟台赛尔斯生物技术有限公司