专利名称：肾病相关的生物标记的制作方法
肾病相关的生物标记相关申请本申请要求2009年1月28日提交的美国临时申请No. 61/147785的优先权，将其内容通过提述以其整体并入本文。
背景技术：
肾病(η印hropathy)，一般已知为糖尿病、高血压、药物毒性，与发炎所引起之肾损伤(kidney damage)。肾病通常藉由测定蛋白尿(proteinuria)(例如尿白蛋白(urine albumin)的水平)的水平或藉由检查肾功能指标-肾小球过滤率(glomerular filtration rate,GFR), 来进行诊断。但目前早期肾病无法显示症状供此两种方法侦测早期肾病。虽然可根据肾组织切片来侦测肾病，但此侵入式方法并非理想的诊断方式。研发侦测早期肾病的方法非常重要。达成此目标之关键点在于鉴定出与初期肾病相关的可靠生物标记。
发明内容
本发明为根据意想不到地发现白细胞相关免疫球蛋白样受 # -2 (leukocyte-associated Ig-Iike receptor-2) > α _1 酸 f生酉唐蛋白(alpha-lacid glycoprotein)和这两种蛋白质的片段在尿液内的水平，在肾病(η印hropathy)患者中显着高于无肾病的患者。这些蛋白质分子因而为早期肾病的诊断的可靠生物标记。因此，本发明特征之一为肾病诊断的方法。此方法至少包括下列步骤(a)自被怀疑具有肾病的个体取得尿液样本，(b)测定该尿液样本中生物标记的水平，与(c)根据该生物标记的水平评估是否该个体具有肾病。于先前所叙述的方法中使用的生物标记为下列之一 (i)白细胞相关免疫球蛋白样受体-2或其具有至少十个氨基酸的片段， 如DFLELLVKGTVPGTEASGFDAP(SEQ ID NO 1), (ii)具有至少十个氨基酸的α-l酸性醣蛋白的片段，如 GQEHFAHLLILRDTKTYMLAFDVNDEKNWGL S(SEQ ID NO 2), (iii)⑴与(ii) 的组合，或(iv)(i)与α-l酸性醣蛋白的组合。当四个生物标记之一的水平高于无肾病个体，则可指出该个体具有肾病。在一实施例中，生物标记水平透过质谱分析(例如， SM fli 1 #7 I % ^ M iH (Matrix-assisted laser desorption/ionization-mass spectrometry, MALDI—MS)、液才目层析质i普(liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS),与液才匿层析串联质 ill (liquid chromatography-mass spectrometry/mass spectrometry,LC-MS/MS))来测定。在另一实施例中，透过免疫分析(例如，酶联免疫吸附分析(enzyme-link immunosorbent assay, ELISA)、Western 印迹(Westernblot)、放身寸免疫分析(radioimmunoassay, RIA)、焚光免疫分析(fluorescence immunoassay, FIA)与冷光免疫分析(luminescence immunoassay, LIA))来测定。上述肾病诊断方法可应用于人与实验动物两者，例如没有蛋白尿(proteinuria) 的那些。此使用之术语“实验动物”意指一般使用于动物测试的脊椎动物，例如，小鼠、大鼠、 兔、猫、狗、猪，与非人灵长类动物。
本发明之另一特征为一种可于个体中监测肾病的发展的方法。此方法包括(a)自罹患肾病的个体(例如，人或实验动物)取得第一尿液样本，(b)测定于该第一尿液样本中上列四个生物标记之一的水平，(c)在取得该第一尿液样本后2周至12个月自该个体取得第二尿液样本，(d)测定于该第二尿液样本中该生物标记的水平，与(e)评估该个体中肾病的发展。该第二尿液样本中该生物标记的水平较该第一尿液样本中增加，可指出该个体中的肾病恶化。当个体为患有早期肾病的人，该第二尿液样本在该第一尿液样本后6至12个月取得。对于晚期肾病的人类个体，该第二尿液样本在该第一尿液样本后3至6个月取得。 当此方法应用于实验动物时，该第二尿液样本在该第一尿液样本后2至M周取得。于又另一特征中，本发明提供一种监测肾病患者中肾病治疗的功效的方法，包括 (a)测定在治疗前于来自该肾病患者的尿液样本中上列生物标记之一的水平，(b)测定在治疗后于来自该患者的尿液样本中该生物标记的水平，与(C)根据在治疗后该生物标记的水平的变化评估该治疗的功效。与治疗前之生物标记水平相较，当生物标记于治疗后之水平维持相同或下降时，判定该治疗为有效的。本发明也提供评估试剂的肾毒性的方法，包括(a)自以试剂治疗的个体于治疗中的不同时间点取得多个尿液样本，(b)测定各尿液样本中上述生物标记之一的水平，与(C) 根据该生物标记在治疗中的水平变化评估该试剂的肾毒性。在该治疗过程中该生物标记水平的增加指出该试剂具肾毒性。试剂可为化合物(例如，药物或药物候选物)、草药产品，与食物产品。本发明更进一步提供对于任何上述方法有用的试剂盒。该试剂盒包含特异性结合白细胞相关免疫球蛋白样受体-2的第一抗体与特异性结合α-l酸性醣蛋白的第二抗体。 两个抗体皆可为完整的免疫球蛋白分子。在一个实施例中，该试剂盒仅含有对于欲被侦测的抗原(如肾病的生物标记)特异性的抗体以供实施此处公开的方法之一。即，其实质上由此类抗体所组成。在本发明范围中也有一种分离的抗体，其特异性结合至 DFLELLVKGTVPGTEASGFDAP(SEQ ID NO 1)，或GQEHFAHLLILRDTKTYMLAFDVNDEKNWGLS(SEQ ID NO :2)。此处使用的术语“分离的抗体”意指基本上无天然结合之分子的抗体。可更具体地说，当制备物中天然结合之分子占至多20%干重时，含此抗体的制备物被视为“分离的抗体”。纯度测量可藉由任何适合的方法，例如柱层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis)，与高效液才目层析(high-performance liquid chromatography, HPLC)。上述之任何抗体可用于制造对于实施本发明的任何方法有用的试剂盒。本发明之一或多个实施例于下面叙述中列出。本发明的其它特征或优点显示于下列数个实施例的详细叙述与所附的权利要求中。附图简述
图1为一显示于健康对照与具有不同类型之肾病的患者中，白细胞相关免疫球蛋白样受体-2的片段与α-1酸性醣蛋白的片段的水平的经结合的箱线图(boxplots)。DN、 IgAN, CHN与MGN指糖尿病肾病、IgA肾病、中草药肾病，与膜状肾小球肾炎(membranous glomerulonephritis)肾病。箱型(boxes)的上限、下限及该箱型中的横线分别标示为 25%数值、75%数值及中位数值。上方虚线标示上围篱值(upper fence)以下的最大值，其为75%数值加1.5四分位距(interquartile range)，而下方虚线标示下围篱值(Iawer fence)以上的最小值，其为25%数值减1. 5四分位距。图2为一显示于健康对照与具有中草药肾病(CHN)的患者中，白细胞相关免疫球蛋白样受体-2的片段与a-1酸性醣蛋白的片段的水平经结合的箱线图。箱型的上限、下限及该箱型中的横线分别标示为25%数值、75%数值及中位数值。上方虚线标示上围篱值以下的最大值，其为75%数值加1.5四分位距，而下方虚线标示下围篱值以上的最小值，其为25%数值减1.5四分位距。发明详述在一个方面，本发明涉及一种根据尿液生物标记的水平诊断肾病(η印hropathy) 的方法，尿液生物标记可为白细胞相关免疫球蛋白样受体-2 (leukocyte-associated Ig-Iike receptor-2) (GenBank 登录号 CAQ08962 ；2010 年 1 月 10 日)、α -1 酸性醣蛋白 (alpha-1 acid glycoprotein) (GenBank 登录号 EAW87416 ；2010 年 1 月 10 日)、两蛋白质任一的片段，或其组合。两蛋白质任一的片段具有十个氨基酸的最小长度且优选为120至 200个氨基酸的最大长度。例如，白细胞相关免疫球蛋白样受体-2与α -1酸性醣蛋白的片段可分别包含多至125与191个氨基酸。在一实施例中，白细胞相关免疫球蛋白样受体-2 的片段为 DFLELLVKGTVPGTEASGFDAP(SEQ ID NO :1)而 α-1 酸性醣蛋白的片段为 GQEHFAHL LILRDTKTYMLAFDVNDEKNWGLS(SEQ ID NO :2)。上述各尿液生物标记可被用来诊断任何类型的肾病，包括与糖尿病有关的(即， 糖尿病肾病(diabetic nephropathy))、起因于IgA在肾脏组织中的沉淀的肾小球肾炎(glomerulon印hritis)(即，IgA肾病)、发炎(inflammation)(例如，膜状肾小球肾炎(membranous glomerulonephritis))、中草药诱发的肾纤维化(renal fibrosis) (艮P，中草药肾病(Chinese herbal η印hropathy))、导致肾衰竭(renal failure)的慢性肾小管间质性损伤(chronic tubulointerstitial damage)(即，慢性间质性肾炎(chronic interstitial η印hritis)),与局部性肾小球硬化症(focal segmental glomerulosclerosis)的那些。为了实施本发明之诊断方法，自被怀疑具有肾病的个体取得尿液样本且上述任何生物标记的水平可藉由一般方法来测定，例如酶联免疫吸附分析(enzyme-link immunosorbent assay, ELISA)与 Western 印迹(Westernblot)。当生物标记为肽或肽的组合时，其水平可藉由质谱分析(mass spectrometry)来测定。尿液生物标记的水平可与代表参考点(reference point)的无肾衰竭个体中相同的尿液生物标记的水平进行比较。参考点可经由例行操作基于比较肾病患者群组与无肾病个体群组中尿液生物标记的代表性水平来测定。例如，其可介于这两个群组的平均水平间的中间点。当于个体中尿液生物标记的水平大于参考点时，其指出个体具有肾病。当需要时，具有微小变化性肾病(minimal change η印hropathy，MCN)或微小变化症(minimal change disease,MCD)的患者可被做为对照组以测定上述参考点。一般而言， 微小变化性肾病或微小变化症患者展现显着的蛋白尿但肾功能正常。本发明使用白细胞相关免疫球蛋白样受体-2的片段或α-1酸性醣蛋白的片段之诊断方法，可被应用在侦测初期肾病当无法侦测尿液中蛋白质(例如，白蛋白(albumin)) 的存在时，即无蛋白尿时。
另一方面，本发明叙述可根据任何上述尿液生物标记监测个体中肾病的发展的方法。为实施此方法，可在适合的时间间隔(例如2周至12个月)中取得来自个体的两个尿液样本并检查以测定上述尿液生物标记之一的水平。若较晚取得的尿液样本中尿液生物标记的水平高于较早取得的尿液样本中尿液生物标记的水平，则其指出此个体中有肾病的发展。此监测方法可被应用于罹患或具有肾病风险的人类个体。当人类个体具有肾病风险或于早期肾病时，可每6至12个月测定尿液生物标记水平一次以监测肾病的发展。当人类个体已在肾病晚期时，优选每3至6个月测定尿液生物标记水平一次。早期肾病的患者尽管带有肾损伤但一般无症状且表现正常的肾功能。这些患者具有肾病发展的风险。晚期肾病的特征为肾小球过滤率(glomerular filtration rate, GFR)的逐步下降(例如， < 15mL/ 分钟 /1. 73m2)。上述监测方法亦可根据例行步骤，应用至实验动物以研究肾病。优选每2至M周检查一次实验动物所以测定上述尿液生物标记之一的水平。生物标记水平随着时间增加可指出动物内的疾病发展。在另一方面，本发明提供一种评估于有需要的个体(即，人类肾病患者或带有肾损伤的实验动物)中肾病治疗的功效的方法。在此方法中，上述尿液生物标记之一的水平于治疗前、中及/或后期被测定。若尿液生物标记水平随着治疗过程维持相同或下降，则可指出治疗有效。任何尿液生物标记可用于监测目标试剂的肾毒性，即，试剂是否会诱发肾损伤。目标试剂可为任何用于人施用的化合物或组合物。例子包括，但不限于化学化合物，其可为药物(例如，非类固醇抗炎药物)或药物候选物、食物产品或补充品，与中草药补充品。目标试剂的肾毒性透过其随着时间增加尿液生物标记的水平的能力来判断。本发明也揭露有助于实施任何上述方法的试剂盒。此试剂盒包含至少两种抗体，一种对免疫球蛋白样受体-2为特异性的，例如可结合至其片段 DFLELLVKGTVPGTEASGFDAP (SEQ ID NO 1)或任何包含于其中的表位，与另一种对α-1酸性醣蛋白为特异性的,例如可结合至其片段GQEHFAHLLILRDTKTYMLAFDVNDEKNWGLS (SEQ ID NO 2)或任何包含于其中的表位。在一实施例中，试剂盒包含与相同生物标记结合的两种不同的抗体(艮口，涂覆抗体(coating antibody)与侦测抗体(detecting antibody))。通常，侦测抗体与可藉由其本身或是经由与其它试剂结合而发出可侦测讯号的分子结合。此处使用的术语“抗体”意指完整的免疫球蛋白或其片段，例如维持抗原结合活性的Fab或 F(ab’)2。其可为自然发生或经基因工程改造的(例如单链抗体(single-chain antibody)、 嵌合抗体(chimeric antibody)，或人源化抗体(humanized antibody))。本发明试剂盒中包含的抗体可获得自商业制造供货商。或可藉由一般方法来制备。参见，例如，Harlow and Lane, (1988) Antibodies :A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New York。为产生针对如上所列的特定生物标记的抗体， 任选地可以将标记与携带蛋白质(carrier protein)(例如，KLH)结合并与佐剂混合后注入宿主动物。产生于动物中的抗体可藉由亲和层析(affnity chromatography)进一步纯化。一般使用的宿主动物包括兔、小鼠、豚鼠，与大鼠。可使用来增加免疫反应的各种佐剂视宿主种类而定，包括弗氏佐剂(Freimd' s adjuvant)(完全与不完全)、矿物凝胶(mineral gel)，例如氢氧化铝，CpG、表面活性物质(surface-active substance)，例如溶血卵磷脂(Iysolecithin)、多聚醇(pluronic polyol)、聚阴离子(polyanion)、肽 (peptides)、油乳齐[J (oil emulsion)、匙孑L血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin),与二硝基酚(dinitrophenol)。有用的人用佐剂包括BCG(卡介苗(bacille Calmette-Guerin)) 与短小棒状杆菌(Corynebacterium parvum)。多克隆抗体，即抗体分子的异种群体 (heterogeneous population)，存在于经免疫动物的血清中。单克隆抗体，即抗体分子的同种群体(homogeneous populations)可使用标准杂交瘤技术制备(参见，例如 Kohler 等(1975)Nature 256，495 ;Kohler 等(1976)Eur. J. Immunol.6，511 ;Kohler 等(1976)Eur J Immunol 6,292 ；禾Π Hammerling 等(1981) Monoclonal Antibodies and T Cell Hybridomas, Elsevier, N. Y.)。具体而言，单克隆抗体可藉由任何可生产抗体的技术获得，如叙述于Kohler等(197QNature 256,495和美国专利No. 4，376，110的持续性细胞系(continuous cell line)；人B细胞杂交瘤(B-cell hybridoma)技术(Kosbor 等(1983) Immunol Today 4，72 ；Cole 等(1983) Proc. Natl. Acad. Sci.USA 80,2026),与 EBV-杂交瘤(EBV-hybridoma)技术(Cole 等(1983)Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, Inc. ， pp. 77-96)。 禾中￠"[#^1^13^ !禾中类的免疫球蛋白，包括IgG、IgM、IgE、IgA、IgD与其任何亚类。可在体内(in vivo)或在体外(invitro)培养本发明用来生产单克隆抗体是杂交瘤。体内产生高效价单克隆抗体的能力使其成为特别有效的制造方法。此外，可藉由已知技术产生抗体片段。例如，此种片段包括，但不限于F(ab’)2片段，其可藉由胃蛋白酶(pepsin)分解抗体分子产生，与Fab片段，其可藉由减少？(油’)2片段的二硫键(disulfide bridge)产生。无更进一步详细阐述，可以相信的是，本领域技术人员可根据上述内容，利用本发明至其最大范围。因此，下述特定实施例仅被建构来说明，且不论于任何形式中并非为所揭露的限制。所有此处提及之出版物被引用作为本说明书的揭示内容。实施例1 使用尿液白细胞相关免疫球蛋白样受体-2或α -1酸性醣蛋白为生物标记来诊断肾病材料与方法(i)个体下列人类个体群组参与于本研究中(a)健康受试者无糖尿病(diabetic mellitus)具正常肾功能，(b)DM患者具有第2型糖尿病，但无肾病，(C)DN患者具有糖尿病肾病，(d) DN尿毒症(uremia)患者具有糖尿病肾病伴有尿毒症，(e) I gAN患者具有I gA肾病(f)MGN 患者具有膜状肾小球肾炎(membranous glomerulonephritis)(g)CHN患者具有由中草药诱发的肾病，与(h) CIN 患者具有慢性间质性肾炎(chronic interstitial η印hritis)。健康受试者与患者的临床特征总整于下方表1中
权利要求
1.一种于个体中诊断肾病的方法，包括 自被怀疑具有肾病之个体取得尿液样本；测定于该尿液样本中生物标记的水平，该生物标记选自下组(i)第一蛋白质分子，其为白细胞相关免疫球蛋白样受体-2或其具有至少十个氨基酸的片段，(ii)第二蛋白质分子，其为具有至少十个氨基酸的α-l酸性醣蛋白的片段，(iii)所述第一与第二蛋白质分子的组合，与(iv)所述第一蛋白质分子与α-l酸性醣蛋白的组合；以及根据该生物标记的水平评估该个体是否具有肾病，当与无肾病个体中该生物标记的水平相比较，该生物标记水平的增加可指出该个体具有肾病。
2.如权利要求1所述的于个体中诊断肾病的方法，其中，该白细胞相关免疫球蛋白样受体-2的片段为DFLELLVKGTVPGTEASGFDAP (SEQ ID NO 1)而该α-1酸性醣蛋白的片段Sgqehfahllilrdtktymlafdvnde knwgls (seq id no :2)。
3.如权利要求1所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该生物标记的水平透过质谱分析或免疫分析来测定。
4.如权利要求3所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该质谱分析选自下组基 M fli1 # 7 I % ^ M iH (Matrix-assisted laser desorption/ionization-mass spectrometry，MALDI—MS)、液才目层析质"1普(liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS),与液才匿层析串联质 ill (liquid chromatography-mass spectrometry/mass spectrometry, LC-MS/MS)。
5.如权利要求3所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该免疫分析选自下组酶联免疫吸附分析(enzyme-link immunosorbent assay, ELISA)、Western ￡口迹(Westernblot)、 放身寸免疫分析(radioimmunoassay,RIA)、焚光免疫分析(fluorescence immunoassay,FIA) 与冷光免疫分析(luminescence immunoassay, LIA)。
6.如权利要求1所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该个体为人。
7.如权利要求1所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该个体为实验动物。
8.如权利要求1所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该生物标记为该第一蛋白质分子。
9.如权利要求8所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该第一蛋白质分子为白细胞相关免疫球蛋白样受体-2。
10.如权利要求8所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该第一蛋白质分子为 DFLELLVKGTVPGTEASGFDAP (SEQ ID NO :1)。
11.如权利要求10所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该个体无蛋白尿。
12.如权利要求1所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该生物标记为该第二蛋白质分子。
13.如权利要求12所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该第二蛋白质分子为GQEHFA HLLILRDTKTYMLAFDVNDEKNWGLS(SEQ ID NO :2)。
14.如权利要求13所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该个体无蛋白尿。
15.如权利要求1所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该生物标记为该第一与第二蛋白质分子的组合或该第一蛋白质分子与α-l酸性醣蛋白的组合。
16.如权利要求15所述的于个体中诊断肾病的方法，其中该第一蛋白质分子为白细胞相关免疫球蛋白样受体-2或其片段DFLELLVKGTVPGTEASGFDAP(SEQ ID NO :1)，而该第二蛋白质分子为 GQEHFAHLLILRDTKTYMLAFDVNDEKNWGLS(SEQ ID NO :2)。
17.一种于个体中监测肾病发展的方法，包括 自患有肾病的个体取得第一尿液样本；测定该第一尿液样本中生物标记的水平，该生物标记选自下组(i)第一蛋白质分子， 其为白细胞相关免疫球蛋白样受体-2或其具有至少十个氨基酸的片段，(ii)第二蛋白质分子，其为具有至少十个氨基酸的α-1酸性醣蛋白的片段，(iii)该第一与第二蛋白质分子的组合，与(iv)该第一蛋白质分子与α-l酸性醣蛋白的组合；在取得该第一尿液样本后2周至12个月自该个体取得第二尿液样本； 测定于该第二尿液样本中该生物标记的水平；以及评估于该个体中的肾病发展，其中与该第一尿液样本中该生物标记的水平相比较，该第二尿液样本中该生物标记的水平的增加指出该个体中的肾病恶化。
18.如权利要求17所述的于个体中监测肾病发展的方法，其中该白细胞相关免疫球蛋白样受体-2的片段为DFLELLVKGTVPGTEASGFDAP(SEQ ID NO 1)而该α -1酸性醣蛋白的片段为 GQEHFAHLLILRDTKTYMLAFDVN DEKNWGLS (SEQ ID NO :2)。
19.如权利要求18所述的于个体中监测肾病发展的方法，其中该个体为处于早期肾病的人，该第二尿液样本在取得该第一尿液样本后6至12个月取得。
20.如权利要求18所述的于个体中监测肾病发展的方法，其中该个体为处于晚期肾病的人，该第二尿液样本在取得该第一尿液样本后3至6个月取得。
21.如权利要求18所述的于个体中监测肾病发展的方法，其中该个体为实验动物，该第二尿液样本在取得该第一尿液样本后2至M周取得。
22.一种于患有肾病的个体中监测肾病治疗功效的方法，包括测定于在治疗前该个体尿液样本中生物标记的水平，该生物标记选自下组(i)第一蛋白质分子，其为白细胞相关免疫球蛋白样受体-2或其具有至少十个氨基酸的片段，(ii) 第二蛋白质分子，其为具有至少其中十个氨基酸的α-1酸性醣蛋白的片段，(iii)该第一与第二蛋白质分子的组合，与(iv)该第一蛋白质分子与α-1酸性醣蛋白的组合； 测定在治疗后该个体尿液样本中该生物标记的水平；以及根据治疗后该生物标记水平的变化评估该治疗的功效，其中与治疗前该生物标记的水平相比较，若该生物标记水平维持不变或下降则治疗为有效。
23.如权利要求22所述的于患有肾病的个体中监测肾病治疗功效的方法，其中该白细胞相关免疫球蛋白样受体-2的片段为DFLELLVKGTVPGTEASGFDAP (SEQ ID Ν0:1)而该α-1 酸性醣蛋白的片段为 GQEHFAHLLILRDTKTYMLAFDVNDEKNWGLS(SEQ ID NO :2)。
24.一种评估试剂的肾毒性的方法，包括自以该试剂治疗的个体在治疗中在不同时间点取得多个尿液样本； 测定各尿液样本中生物标记的水平，该生物标记选自下组(i)第一蛋白质分子，其为白细胞相关免疫球蛋白样受体-2或其具有至少十个氨基酸的片段，(ii)第二蛋白质分子， 其为具有至少其中十个氨基酸的α-1酸性醣蛋白的片段，(iii)该第一与第二蛋白质分子的组合，与(iv)该第一蛋白质分子与α-l酸性醣蛋白的组合；以及根据在治疗中该生物标记水平的变化评估该试剂的肾毒性， 其中在该治疗过程中该生物标记水平的增加指出该试剂具肾毒性。
25.如权利要求m所述的评估试剂的肾毒性的方法，其中该试剂选自下组化合物、草药产品，与食物产品。
26.如权利要求M所述的评估试剂的肾毒性的方法，其中该白细胞相关免疫球蛋白样受体-2的片段为dflellvkgtvpgteasgfdap (seq id no 1)而该α -1酸性醣蛋白的片段Sgqehfahllilrdtktymlafdvndek nwgls (seq id no :2)。
27.一种分离的抗体，其特异性结合 dflellvkgtvpgteasgfdap,或 gqehfahllilrdtktymlafdvndeknwgls。
28.—种诊断肾病的试剂盒，包括特异性结合白细胞相关免疫球蛋白样受体-2的第一抗体与特异性结合α -1酸性醣蛋白的第二抗体。
29.如权利要求17所述的诊断肾病的试剂盒，其中该第一与第二抗体为完整的免疫球蛋白分子。
30.一种诊断肾病的试剂盒，实质上由特异性结合白细胞相关免疫球蛋白样受体-2的第一抗体与特异性结合α "i酸性醣蛋白的第二抗体组成。
全文摘要
使用尿液生物标记诊断肾病(nephropathy)、监测肾病发展，与评估肾病治疗之功效。这些尿液生物标记包括白细胞相关免疫球蛋白样受体-2(leukocyte-associated Ig-like receptor-2)、α-1酸性醣蛋白(alpha-1acid glycoprotein)、其片段与其组合。
文档编号G01N33/493GK102300875SQ201080005754
公开日2011年12月28日 申请日期2010年1月27日 优先权日2009年1月28日
发明者叶亚平, 吕静芳, 徐采薇, 曾锱翎, 杨垂勋, 林微雅, 陈怡婷 申请人:财团法人工业技术研究院