专利名称：一种中药前列宁制剂的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂的质量检测方法，特别涉及一种中药前列宁制剂的质量 检测方法。
背景技术：
前列宁胶囊为金诃藏药股份有限公司独家产品，收载于中成药地方标准上升国家 标准部分，标准编号WS-10627(ZD-0627)-2002-2011Z。前列宁胶囊是由如下重量配比的药 材制成的薪蓂子58. 7g、石韦41. 2g、蒲公英41. 2g、刺柏29. 3g、诃子29. 3g、刀丑22. 8g、 芒果核17. 5g、蒲桃17. 5g、大托叶云实17. 5g、紫草茸11. 4g、藏茜草17. 5g、红花11. 4g、豆 蘧5.9g。以上十三味，粉碎成细粉，过筛，混匀，装入胶囊，制成1000粒。具有清热解毒，化 瘀通淋之功效。用于热毒瘀阻所引起的尿频，尿急，尿痛属中医淋证者。现有关于前列宁药物的质量标准仅采用TLC薄层鉴别一味药材紫草茸、HPLC测定 一个药效成分没食子酸的含量，现有技术中也尚未发现对于前列宁胶囊的其他质量检测方 法，因此现有质量检测方法不能全面、准确的控制本品质量，质量标准有待提高。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种中药前列宁胶囊及其制剂的质量 检测方法。发明概述本发明提供了一种检测中药前列宁胶囊及其制剂中诃子、红花、菥蓂子、藏茜草的 薄层鉴别方法；采用高效液相色谱法，通过变化紫外检测器的检测波长，从而达到在同一色 谱条件下同时对没食子酸和羟基红花黄色素A的含量进行测定，在增强了产品可控性的基 础上，节约了分析时间，提高了工作效率，同时使用梯度洗脱，保护了色谱柱，延长了色谱柱 的使用寿命，降低了成本。术语说明前列宁胶囊是国家中成药标准汇编(中成药地方标准上升国家标准部分)记载的 药品名称，标准编号 WS-10627 (ZD-0627) -2002-2011Z。前列宁制剂包括前列宁胶囊及用前列宁胶囊原料药配方制备的其他制剂。本发明的技术方案如下一种原料药组成为菥蓂子58. 7重量份、石韦41. 2重量份、蒲公英41. 2重量份、刺 柏29. 3重量份、诃子29. 3重量份、刀丑22. 8重量份、芒果核17. 5重量份、蒲桃17. 5重量 份、大托叶云实17. 5重量份、紫草茸11. 4重量份、藏茜草17. 5重量份、红花11. 4重量份、 豆蘧5. 9重量份的中药前列宁制剂的质量检测方法，该方法包括如下鉴别和/或含量测定 方法中的一种或几种鉴别A、诃子的鉴别
取中药前列宁制剂3-10g,加无水乙醇25_50ml,超声处理20_30min,加娃藻土 l_3g，混匀，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取诃子对照药材l_2g，加无水乙醇 25-50ml,超声处理20-30min,加娃藻土 l_3g,混勻，滤过，滤液浓缩至2ml,作为对照药材溶 液；另取没食子酸对照品，加甲醇制成每1ml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱 法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5-10 yl，分别 点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为3-9:2-6:0. 5-1. 5的三氯甲烷-醋酸乙酯-甲 酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以质量体积份数比为1%三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点 显色清晰，供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；B、红花的鉴别取中药前列宁制剂3-10g，加体积份数比为80%丙酮甲醇溶液25_50ml，密塞，振 摇10-20min，静置，取上清液，作为供试品溶液；另取红花对照药材lg，加体积份数比为80% 丙酮甲醇溶液25-50ml，密塞，振摇10-20min，静置，取上清液，作为对照药材溶液；照薄层 色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5-10 yl， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为5-9:1-3:2-4:0. 2-0.6的醋酸乙酯-甲 酸-水-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上， 显相同颜色的斑点；C、菥蓂子的鉴别取中药前列宁制剂3-10g，加体积份数比为80%丙酮甲醇溶液25_50ml，密塞，振摇 10-20min，静置，取上清液，作为供试品溶液；另取菥蓂子对照药材lg，加体积份数比为80% 丙酮甲醇溶液25-50ml，密塞，振摇10-20min，静置，取上清液，作为对照药材溶液；照薄层 色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5-10 yl， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为2-6:0. 5-1. 5:3-7的正丁醇-冰醋酸-水 混合溶液的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积份数比为10%硫酸乙醇溶液， 100-105°C加热至斑点显色清晰，置紫外灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色 谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；D、藏茜草的鉴别取中药前列宁制剂3-10g,加甲醇25-50ml,超声处理20-30min,滤过，滤液浓缩至 lml，作为供试品溶液；另取藏茜草对照药材l_2g，加甲醇25-50ml，超声处理20_30min，滤 过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一 部附录VI B)试验，分别吸取上述溶液各5-lOyl，点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比 为2-6:0. 5-1. 5的石油醚-丙酮为展开剂，石油醚沸程为60 90°C，展开，取出，晾干，置紫 外灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑
含量测定照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动 相A，以体积份数比1 %冰醋酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式0min — 20min — 25m in — 50min — 55min — 60min,按照上述时间段，乙腈、体积份数比1 %冰醋酸水溶液同时进 行洗脱，其中，乙腈1% — 1% — 24% — 24% — 100% — 1% ;体积份数比1 %冰醋酸水溶液99% — 99% — 76% — 76% — 0% — 99%,在 Omin — 20min 时间内使用 275nm 的检测波长，20min改变检测波长为403nm，21min使检测器平衡，21min — 60min时间内使用403nm的检测波长。理论板数按没食子酸峰计算应不低于2000 ;对照品溶液的制备取没食子酸对照品、羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加体积份数比40-60%乙醇水溶液分别制成每Iml含没食子酸20 μ g、羟基红花黄色素A O. 2mg的溶液，即得；
供试品溶液的制备取中药前列宁制剂粉末3g，过三号筛，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比40-60%乙醇水溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比40-60%乙醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。所述的前列宁制剂是指按前列宁胶囊原料药配方菥蓂子58. 7重量份、石韦41. 2重量份、蒲公英41. 2重量份、刺柏29. 3重量份、诃子29. 3重量份、刀豆22. 8重量份、芒果核17. 5重量份、蒲桃17. 5重量份、大托叶云实17. 5重量份、紫草茸11. 4重量份、藏茜草17. 5重量份、红花11. 4重量份、豆蘧5. 9重量份，经过洗净，去除杂质，温度低于60°C干燥，混合均匀，超微粉碎机粉碎成O. 1-50 μ m超微粉，按常规工艺，加入常规辅料制备成临床可接受的任何一种剂型，包括胶囊剂、丸剂、微丸、滴丸、片剂、软胶囊、颗粒或口服液。优选的，一种原料药组成为将菥蓂子58. 7重量份、石韦41. 2重量份、蒲公英41. 2重量份、刺柏29. 3重量份、诃子29. 3重量份、刀豆22. 8重量份、芒果核17. 5重量份、蒲桃17. 5重量份、大托叶云实17. 5重量份、紫草茸11. 4重量份、藏茜草17. 5重量份、红花11. 4重量份、豆蘧5. 9重量份的中药前列宁胶囊的质量检测方法，该方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中的一种或几种鉴别A、诃子的鉴别取中药前列宁胶囊内容物5g,加无水乙醇25ml,超声处理30min,加娃藻土 2g,混勻，滤过，滤液浓缩至2ml,作为供试品溶液；另取诃子对照药材lg，加无水乙醇25ml,超声处理30min，加硅藻土 2g，混匀，滤过，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；另取没食子酸对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为6:4:1的三氯甲烷-醋酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以质量体积份数比为1%三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；B、红花的鉴别取中药前列宁胶囊内容物5g，加体积份数比为80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振摇15min，静置，取上清液，作为供试品溶液；另取红花对照药材lg，加体积比为80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振摇15min，静置，取上清液，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为7:2:3:0. 4的醋酸乙酯-甲酸-7K -甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；C、菥蓂子的鉴别取中药前列宁胶囊内容物5g，加体积份数比为80%丙酮溶液30ml，密塞，振摇15min，静置，取上清液，作为供试品溶液；另取菥蓂子对照药材lg，加体积比为80%丙酮溶液30ml，密塞，振摇15min，静置，取上清液，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4:1:5的正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积份数比为10%硫酸乙醇溶液，105°C加热至斑点显色清晰，置紫外灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； D、藏茜草的鉴别取中药前列宁胶囊内容物5g,加甲醇30ml,超声处理30min,滤过，滤液浓缩至Iml，作为供试品溶液；另取藏茜草对照药材lg，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至lml，作为供试品溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VIB)试验，分别吸取上述溶液各10 μ 1，点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为4:1的石油醚-丙酮为展开剂，石油醚沸程为60 90°C，展开，取出，晾干，置紫外灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以体积份数比I %冰醋酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式0min — 20min — 25min — 50min — 55min — 60min,按照上述时间段，乙腈、体积份数比I %冰醋酸水溶液同时进行洗脱，其中，乙腈1% — 1% — 24% — 24% — 100% — 1% ;体积份数比I %冰醋酸水溶液99% — 99% — 76% — 76% — 0% — 99%,在 Omin — 20min 时间内使用 275nm 的检测波长，20min改变检测波长为403nm，21min使检测器平衡，21min — 60min时间内使用403nm的检测波长。理论板数按没食子酸峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取没食子酸对照品、羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加体积份数比50%乙醇水溶液分别制成每Iml中含没食子酸20 μ g、羟基红花黄色素AO. 2mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取中药前列宁胶囊内容物粉末3g，过三号筛，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比50 %乙醇水溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比50 %乙醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明中药前列宁胶囊中诃子的含量以没食子酸(C7H6O5)计，不得少于2. Omg/g ；红花含量以羟基红花黄色素A (C27H30O15)计，不得少于O. 26mg/g。本说明书中所述的重量份与体积份的单位对应关系为g/ml或kg/1。与现有技术相比，本发明的优点如下现有关于前列宁药物的质量标准仅采用TLC薄层鉴别一味药材紫草茸、HPLC测定ー个药效成分没食子酸的含量，造成前列宁制剂产品质量检测不精准，质量标准有待提高。本发明对现有的中药前列宁制剂质量标准进行了相应提高，在原标准的基础上增加了诃子、红花、菥蓂子、藏茜草的鉴别；本发明采用同一条件，多个成分的分离测定，如采用高效液相色谱法，通过变化紫外检测器的检测波长，从而达到在同一色谱条件下同时对没食子酸和羟基红花黄色素A的含量測定。结果表明方法简便可行，具有较好的准确性和精密度，可有效地保证本品质量。下述实验例和实施例用于进ー步说明但不限于本发明。实验例I :鉴别实验中药前列宁胶囊由青海金诃藏药药业股份有限公司提供。A、诃子的鉴别
取中药前列宁胶囊内容物5g,加无水こ醇25ml,超声处理30min,加娃藻土 2g,混勻，滤过，滤液浓缩至2ml,作为供试品溶液；另取诃子对照药材lg，加无水こ醇25ml,超声处理30min，加硅藻土 2g，混匀，滤过，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；另取没食子酸对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液作为对照溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸こ酷-甲酸为展开剂，展开剂体积份数比为3-9:2-6:0. 5-1.5的范围内分别取(6:4:1)、(5:5:0. 8)、(7:5:0. 6)的三氯甲烷-醋酸こ酷-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以质量体积份数比为1%三氯化铁こ醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点。结果分析在体积份数比为3-9:2-6:0. 5-1. 5的三氯甲烷-醋酸こ酷-甲酸展开剂条件下，有较好的展开效果。其中，体积份数比6:4:1的三氯甲烷-醋酸こ酷-甲酸的展开剂展开效果最好。B、红花的鉴别取中药前列宁胶囊内容物5g，加体积份数比为80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振摇15min，静置，取上清液，作为供试品溶液；另取红花对照药材lg，加体积比为80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振摇15min，静置，取上清液，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸こ酷-甲酸-水-甲醇为展开剂，展开剂体积份数比为5-9:ト3:2-4:0. 2-0. 6 的范围内分别取(7:2:3:0. 4)、(6:2:4:0. 5)、(9:1:4:0. 2)的醋酸こ酷-甲酸-水-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点。结果分析在体积份数比为3-9:2-6:0. 5-1. 5的醋酸こ酷-甲酸-7K _甲醇展开剂条件下，有较好的展开效果。其中，体积份数比7:2:3:0. 4的醋酸こ酷-甲酸-水-甲醇的展开剂展开效果最好。C、菥蓂子的鉴别取中药前列宁胶囊内容物5g，加体积份数比为80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振摇15min，静置，取上清液，作为供试品溶液；另取菥蓂子对照药材lg，加体积份数比为80%水丙酮溶液30ml，密塞，振摇15min，静置，取上清液，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上层溶液为展开剂，展开剂体积份数比为2-6:0. 5-1. 5:3-7 的范围内分别取(4:1:5)、(5:1. 2:3)、(2:0. 6:6)的正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以质量体积份数比为10%硫酸こ醇溶液，105°C加热至斑点显色清晰，置紫外灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的荧光斑点。结果分析在体积份数比为2-6:0. 5-1. 5:3-7的正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上层溶液展开剂条件下，有较好的展开效果。其中，体积份数比4:1:5的正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上层溶液的展开剂展开效果最好。D、藏茜草的鉴别取中药前列宁胶囊内容物5g,加甲醇30ml,超声处理30min,滤过，滤液浓缩至lml，作为供试品溶液；另取藏茜草对照药材lg，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，分别吸取上述溶液各10 μ 1，点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-丙酮为展开剂，石油醚沸程为60 90°C，展开剂体积份数比为2-6:0. 5-1. 5的范围内分别取(4:1)、(5:0. 5)、(2:1. 5)的石油醚-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯365nm下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜的荧光斑点。结果分析在体积份数比为2-6:0. 5-1. 5的石油醚-丙酮展开剂条件下，有较好的展开效果。其中，体积份数比4:1的石油醚-丙酮的展开剂展开效果最好。实验例2 :含量测定实验I、仪器、试药和供试样品仪器日立L-2100泵，日立L-2400紫外检测器，岛津AUW-220D型电子天平。对照品没食子酸对照品(中国药品生物制品检定所)批号110831-200803，羟基红花黄色素A对照品(中国药品生物制品检定所)批号111637-200905。样品前列宁胶囊(青海金诃藏药药业股份有限公司提供)，批号20110216，20110217,20110218。2、检测波长的选择分别取没食子酸、羟基红花黄色素A对照品溶液，于200 500nm波长范围内进行紫外扫描。根据紫外吸收图谱，选定275nm为没食子酸的检测波长，选定403nm为羟基红花黄色素A的检测波长。检测波长变化见表I。表I检测波长变化表
权利要求
1.ー种原料药组成为菥蓂子58. 7重量份、石韦41. 2重量份、蒲公英41. 2重量份、刺柏29. 3重量份、诃子29. 3重量份、刀丑22. 8重量份、芒果核17. 5重量份、蒲桃17. 5重量份、大托叶云实17. 5重量份、紫草茸11. 4重量份、藏茜草17. 5重量份、红花11. 4重量份、豆蓮5.9重量份的中药前列宁制剂的质量检测方法，其特征在于，该方法包括如下鉴别和/或含量測定方法中的ー种或几种 鉴别 A、诃子的鉴别 取中药前列宁制剂3-10g,加无水こ醇25-50ml,超声处理20_30min,加娃藻土 l_3g,混勻，滤过，滤液浓缩至2ml,作为供试品溶液；另取诃子对照药材l_2g,加无水こ醇25-50ml,超声处理20-30min,加娃藻土 l_3g,混勻，滤过,滤液浓缩至2ml,作为对照药材溶液；另取没食子酸对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5-10 u 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为3-9:2-6:0. 5-1. 5的三氯甲烷-醋酸こ酷-甲酸为展开齐U，展开，取出，晾干，喷以质量体积份数比为1%三氯化铁こ醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点； B、红花的鉴别 取中药前列宁制剂3-10g，加体积份数比为80%丙酮甲醇溶液25-50ml，密塞，振摇10-20min，静置，取上清液，作为供试品溶液；另取红花对照药材lg，加体积份数比为80%丙酮甲醇溶液25-50ml，密塞，振摇10-20min，静置，取上清液，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5-10 u 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为5-9:1-3:2-4:0. 2-0. 6的醋酸こ酷-甲酸-水-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点； C、菥蓂子的鉴别 取中药前列宁制剂3-10g，加体积份数比为80%丙酮甲醇溶液25-50ml，密塞，振摇10-20min，静置，取上清液，作为供试品溶液；另取菥蓂子对照药材lg，加体积份数比为80%丙酮甲醇溶液25-50ml，密塞，振摇10-20min，静置，取上清液，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5-10 yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为2-6:0. 5-1. 5:3-7的正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积份数比为10%硫酸こ醇溶液，100-105°C加热至斑点显色清晰，置紫外灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的荧光斑点； D、藏茜草的鉴别 取中药前列宁制剂3-10g,加甲醇25-50ml,超声处理20-30min,滤过,滤液浓缩至Iml,作为供试品溶液；另取藏茜草对照药材l_2g，加甲醇25-50ml，超声处理20_30min，滤过，滤液浓缩至lml，作为供试品溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，分别吸取上述溶液各5-10 u 1，点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为2-6:0. 5-1. 5的石油醚-丙酮为展开剂，石油醚沸程为60 90°C，展开，取出，晾干，置紫外灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的荧光斑点； 含量測定 照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D) 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以こ腈为流动相A，以体积份数比I %冰醋酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式0min — 20min — 25min—50min — 55min — 60min,按照上述时间段，こ腈、体积份数比I %冰醋酸水溶液同时进行洗脱，其中，こ腈1% — 1% — 24% — 24% — 100% — 1% ;体积份数比I %冰醋酸水溶液.99% — 99% — 76% — 76% — 0% — 99%,在 Omin — 20min 时间内使用 275nm 的检测波长，20min改变检测波长为403nm，21min使检测器平衡，21min — 60min时间内使用403nm的检测波长；理论板数按没食子酸峰计算应不低于2000 ； 对照品溶液的制备取没食子酸对照品、羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，加体积份数比40-60%こ醇水溶液分别制成每Iml含没食子酸20 y g、羟基红花黄色素A.0.2mg的溶液，即得； 供试品溶液的制备取中药前列宁制剂粉末3g，过三号筛，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比40-60%こ醇水溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比40-60 %こ醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 測定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-10 iil，注入液相色谱仪，測定，即得。
2.如权利要求I所述的ー种中药前列宁制剂的质量检测方法，其特征在于所述的前列宁制剂是指按前列宁胶囊原料药配方菥蓂子58. 7重量份、石韦41. 2重量份、蒲公英41. 2重量份、刺柏29. 3重量份、诃子29. 3重量份、刀豆22. 8重量份、芒果核17. 5重量份、蒲桃.17. 5重量份、大托叶云实17. 5重量份、紫草茸11. 4重量份、藏茜草17. 5重量份、红花11. 4重量份、豆蓮5. 9重量份，经过洗浄，去除杂质，温度低于60°C干燥，混合均匀，超微粉碎机粉碎成0. 1-50 u m超微粉，按常规エ艺，加入常规辅料制备成临床可接受的任何ー种剂型，包括胶囊剂、丸剂、微丸、滴丸、片剂、软胶囊、颗粒或ロ服液。
3.如权利要求I所述的ー种中药前列宁制剂的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别和/或含量測定方法中的ー种或几种 鉴别 A、诃子的鉴别 取中药前列宁胶囊内容物5g,加无水こ醇25ml,超声处理30min,加娃藻土 2g,混勻，滤过，滤液浓缩至2ml,作为供试品溶液；另取诃子对照药材lg，加无水こ醇25ml,超声处理30min，加硅藻土 2g，混匀，滤过，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液；另取没食子酸对照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 u 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为6:4:1的三氯甲烷-醋酸こ酷-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以质量体积份数比为1%三氯化铁こ醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点； B、红花的鉴别取中药前列宁胶囊内容物5g，加体积份数比为80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振摇15min，静置，取上清液，作为供试品溶液；另取红花对照药材lg，加体积比为80%丙酮甲醇溶液30ml，密塞，振摇15min，静置，取上清液，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 u 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为7:2:3:0. 4的醋酸こ酷-甲酸-水-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的斑点； C、菥蓂子的鉴别 取中药前列宁胶囊内容物5g，加体积份数比为80%丙酮溶液30ml，密塞，振摇15min，静置，取上清液，作为供试品溶液；另取菥蓂子对照药材lg，加体积比为80%丙酮溶液30ml，密塞，振摇15min，静置，取上清液，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各5 u 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4:1:5的正丁醇-冰醋酸-水混合溶液的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积份数比为10%硫酸こ醇溶液，105°C加热至斑点显色清晰，置紫外灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的荧光斑点； D、藏茜草的鉴别 取中药前列宁胶囊内容物5g,加甲醇30ml,超声处理30min,滤过，滤液浓缩至Iml,作为供试品溶液；另取藏茜草对照药材lg，加甲醇30ml，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B)试验，分别吸取上述溶液各10 yl，点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为4:1的石油醚-丙酮为展开剂，石油醚沸程为60 90°C，展开，取出，晾干，置紫外灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同顔色的荧光斑点； 含量測定 照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D) 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以こ腈为流动相A，以体积份数比I %冰醋酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式0min — 20min — 25min—50min — 55min — 60min,按照上述时间段，こ腈、体积份数比I %冰醋酸水溶液同时进行洗脱，其中，こ腈1% — 1% — 24% — 24% — 100% — 1% ;体积份数比I %冰醋酸水溶液99% — 99% — 76% — 76% — 0% — 99%,在 Omin — 20min 时间内使用 275nm 的检测波长，20min改变检测波长为403nm，21min使检测器平衡，21min — 60min时间内使用403nm的检测波长；理论板数按没食子酸峰计算应不低于2000 ； 对照品溶液的制备取没食子酸对照品、羟基红花黄色素A对照品适量，精密称定，カロ体积份数比50%こ醇水溶液分别制成每Iml含没食子酸20 u g、羟基红花黄色素AO. 2mg的溶液，即得； 供试品溶液的制备取中药前列宁胶囊内容物粉末3g，过三号筛，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比50%こ醇水溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用 体积份数比50 %こ醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得; 測定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 yl，注入液相色谱仪，測定，即得;本发明中药前列宁胶囊中诃子的含量以没食子酸(C7H6O5)计，不得少于2. Omg/g ;红花 含量以羟基红花黄色素A (C27H30O15)计，不得少于0. 26mg/g。
全文摘要
本发明公开了一种中药前列宁制剂的质量检测方法。本发明对现有的中药前列宁制剂质量标准进行了改进，增加了诃子、红花、菥蓂子、藏茜草的薄层鉴别；采用高效液相色谱法，通过变化紫外检测器的检测波长，从而达到在同一色谱条件下同时对没食子酸和羟基红花黄色素A的含量测定。薄层鉴别方法，特征斑点明显，专属性强。高效液相色谱法，简便可行，具有较好的准确性和精密度，可有效地保证本品质量。
文档编号G01N30/02GK102662026SQ201210173578
公开日2012年9月12日 申请日期2012年5月30日 优先权日2012年5月30日
发明者任松鹏, 刘玉芹, 周忠山, 孙绪丁, 江玉娟 申请人:山东阿如拉药物研究开发有限公司