专利名称：：一种高效液相色谱检测油脂中氯丙醇酯的方法
技术领域：
：本发明涉及一种氯丙醇酯检测方法，尤其涉及一种高效液相色谱检测油脂中氯丙醇酯的方法。
背景技术：
：本发明涉及的氯丙醇酯的检测方法是用于油脂中氯丙醇酯的检测。氯丙醇酯是油脂及含油脂食品在热加工过程中形成的副产物，目前被认为是潜在的食品安全危害因子之一。目前文献报道的检测油脂中氯丙醇酯的方法主要有GC-MS、LC-MS,LC-MS/MS等。这些方法的检测灵敏度都比较高，但是其所需仪器价格昂贵，要求专业人员操作，维护和使用成本高，因此仅适合大型实验室应用。Moravcova报道了一种检测油脂中氯丙醇酯的方法(Moravcova,E.andL.Vaclavik,etal.Novelapproachestoanalysisof3-chloropropane-l,2-diolestersinvegetableoils.AnalyticalandBioanalyticalChemistry.2012.),其具体操作是将添加了氘代内标物的油脂样品上样到硅胶柱(填充所需硅胶用正己烷/二乙醚(964，v/v)混合物溶胀)，用30毫升正己烷/二乙醚(964，v/v)混合物等度洗脱，洗脱速度为O.8毫升/分钟，弃去O5毫升的部分，收集525毫升的部分，旋转蒸发除去溶剂后，残余物用甲醇溶解，准备进行U-HPLC-MS分析。不足之处是整个硅胶柱层析的操作周期在I小时以上，这对于进行批量的油脂样品处理是不适宜的；同时，U-HPLC-MS系统对流动相的要求较高，据了解，目前国产的色谱纯试剂除了甲醇、乙腈外，其余不适用于该套系统，油脂样品检测的成本较高。本发明方法以有机溶剂除去油脂中的甘油三酯和极性组分，然后采用高效液相色谱检测，其中，色谱条件为使用正相硅胶色谱柱，分别以正己烷和异丙醇为流动相A和流动相B，以流速O.5mL/min等度洗脱，蒸发光散射检测器进行检测，流动相A和流动相B的体积比为9:1。
发明内容本发明克服现有技术中的缺点，提供了一种油脂样品前处理简单、检测灵敏度高和方法应用性好的氯丙醇酯检测方法，在食品、医药、环境等许多分析领域有着较高的应用价值。为了解决上述技术的问题，本发明是通过以下技术方案实现的一种高效液相色谱检测油脂中氯丙醇酯的方法，其特征在于，具体步骤为第一步将油脂加热到液体状态，预处理去除甘油三酯；第二步将第一步所得的去除甘油三酯的样品进行处理，去除极性组分，用乙腈溶解，得到样品溶液；第三步测定当日用乙腈稀释配制氯丙醇酯标准溶液，其浓度为Cs，用O.2μm孔径过滤膜过滤得到标准溶液，高效液相色谱检测得到氯丙醇酯的流出时间及其峰面积As，色谱条件为使用正相硅胶色谱柱，分别以正己烷和异丙醇为流动相A和流动相B，以流速0.5mL/min等度洗脱，蒸发光散射检测器进行检测，流动相A和流动相B的体积比为9:1;第四步将第二步所得的样品溶液用0.2孔径过滤膜过滤得到样品溶液，采用与第三步相同的色谱条件检测样品溶液，得到与氯丙醇酯的流出时间对应的峰面积Ai，按下式计算油脂中氯丙醇酯的浓度CiCi=Cs(AiAs)。所述第一步中将油脂预处理除去甘三酯的具体步骤为在油脂样本中加入2倍体积的乙腈，镟润振荡30s,以转速10000r/min离心IOmin,取上清，于50°C旋转蒸干。所述第二步中将第一步所得的去除甘油三酯的样品进行处理除去极性组分的具体步骤为在第一步所得的去除甘油三酯的样品中加入2倍体积的正己烷，漩涡振荡30s，以转速10000r/min离心IOmin,取上清,于室温旋转蒸干，所得干残洛用乙腈溶解，得到样品溶液。与现有技术相比，本发明的优点在于能够通过简单的方法检测出油脂中氯丙醇酯的含量。具体实施例方式下面结合实施例来具体说明本发明。实施例I一种高效液相色谱检测油脂中氯丙醇酯的方法第一步将煎炸30h后的28度棕榈油样本加热，使呈液体状态，加入2倍体积的乙腈，镟润振荡30s,以转速10000r/min离心IOmin,取上清，于50°C旋转蒸干；第二步往干残渣中加入2倍体积的正己烷，漩涡振荡30s，以转速10000r/min离心lOmin，取上清，于室温旋转蒸干，所得干残渣用乙腈溶解，得到样品溶液；第三步用乙腈稀释配制氯丙醇酯标准溶液，其浓度Cs为0.156mg/mL，用0.2pm孔径过滤膜过滤得到标准溶液，高效液相色谱检测得到氯丙醇酯的流出时间为5.26min和峰面积As为1962690mVs,色谱条件为使用HederaSi色谱柱，(C>4.6X200mm,3um,HanbonSci.&Tech.)，进样量5uL，分别以正己烷和异丙醇为流动相A和流动相B，以流速0.5mL/min等度洗脱，蒸发光散射检测器进行检测，流动相A和流动相B的体积比为9:1;第四步将第二步所得的样品溶液用0.2孔径过滤膜过滤得到样品溶液，采用与第三步相同的色谱条件检测样品溶液，得到与氯丙醇酯的流出时间对应的峰面积AiS10749041mVs，按下式计算油脂中氯丙醇酯的浓度CiCi=Cs(AiAs)=0.85mg/mL。实施例2另一种高效液相色谱检测油脂中氯丙醇酯的方法第一步于添加3%氯化钠、5%水于240°C加热3h后的玉米油样本中加入2倍体积的乙腈，镟润振荡30s,以转速10000r/min离心IOmin,取上清，于50°C旋转蒸干；第二步往干残渣中加入2倍体积的正己烷，漩涡振荡30s，以转速10000r/min离心lOmin，取上清，于室温旋转蒸干，所得干残渣用乙腈溶解，得到样品溶液；第三步用乙腈稀释配制氯丙醇酯标准溶液，其浓度Cs为0.208mg/mL,用0.2ym孔径过滤膜过滤得到标准溶液，高效液相色谱检测得到氯丙醇酯的流出时间为5.26min和峰面积As为3504038mVs,色谱条件为使用HederaSi色谱柱，(C>4.6X200mm,3um,HanbonSci.&Tech.)，进样量5uL，分别以正己烷和异丙醇为流动相A和流动相B，以流速0.5mL/min等度洗脱，蒸发光散射检测器进行检测，流动相A和流动相B的体积比为9:1;第四步将第二步所得的样品溶液用0.2孔径过滤膜过滤得到样品溶液，采用与第三步相同的色谱条件检测样品溶液，得到与氯丙醇酯的流出时间对应的峰面积AiS1008579mVs，按下式计算油脂中氯丙醇酯的浓度CiCi=Cs(AiAs)=0.06mg/mL。权利要求1.一种高效液相色谱检测油脂中氯丙醇酯的方法，其特征在于，具体步骤为第一步将油脂加热到液体状态，预处理去除甘油三酯；第二步将第一步所得的去除甘油三酯的样品进行处理，去除极性组分，用乙腈溶解，得到样品溶液；第三步测定当日用乙腈稀释配制氯丙醇酯标准溶液，其浓度为Cs，用O.2μm孔径过滤膜过滤得到标准溶液，高效液相色谱检测得到氯丙醇酯的流出时间及其峰面积As，色谱条件为使用正相硅胶色谱柱，分别以正己烷和异丙醇为流动相A和流动相B，以流速O.5mL/min等度洗脱，蒸发光散射检测器进行检测，流动相A和流动相B的体积比为9:1;第四步将第二步所得的样品溶液用O.2μπι孔径过滤膜过滤得到样品溶液，采用与第三步相同的色谱条件检测样品溶液，得到与氯丙醇酯的流出时间对应的峰面积Ai,按下式计算油脂中氯丙醇酯的浓度CiCi=Cs·(AiAs)。2.如权利要求I所述的检测油脂中氯丙醇酯的方法，其特征在于，所述第一步中将油脂预处理除去甘三酯的具体步骤为在油脂样本中加入2倍体积的乙腈，漩涡振荡30s，以转速10000r/min离心IOmin,取上清，于50°C旋转蒸干。3.如权利要求I所述的检测油脂中氯丙醇酯的方法，其特征在于，所述第二步中将第一步所得的去除甘油三酯的样品进行处理除去极性组分的具体步骤为在第一步所得的去除甘油三酯的样品中加入2倍体积的正己烷，漩涡振荡30s，以转速10000r/min离心lOmin，取上清，于室温旋转蒸干，所得干残渣用乙腈溶解，得到样品溶液。全文摘要本发明提供了一种高效液相色谱检测油脂中氯丙醇酯的方法，其特征在于，具体步骤为取油脂除去甘油三酯和极性组分后采用高效液相色谱检测，其中，色谱条件为使用正相硅胶色谱柱，分别以正己烷和异丙醇为流动相A和流动相B，以流速0.5mL/min等度洗脱，蒸发光散射检测器进行检测，流动相A和流动相B的体积比为9∶1。本发明的优点在于能够通过简单的方法检测出油脂中氯丙醇酯的含量。文档编号G01N30/14GK102721763SQ20121022220公开日2012年10月10日申请日期2012年7月2日优先权日2012年7月2日发明者周克茹,周红茹,孙雪梅,杨娇,王兴国,金青哲申请人:江南大学