分光测定装置、分光测定用具及分光测定方法

专利名称：：分光测定装置、分光测定用具及分光测定方法
技术领域：
：本发明涉及通过吸光光度法对被检查物质的分析对象物质的浓度进行分析的分光测定装置、分光测定用具及分光测定方法。
背景技术：
：物质吸收的光的波长因物质而不同。其吸光度根据溶液中的物质的浓度和光路长度而变化。已知当试料的浓度小时，在溶液中通过了相同距离的光的吸光度与试料的浓度成比例(朗伯一比尔定律)。利用该朗伯一比尔定律，进行基于吸光光度法的试料的定量分析。吸光光度法是向试料溶液照射光，测定该光通过试料溶液时的成为对象的物质对光吸收的程度即吸光度，由此定量地分析该物质的浓度的方法。通常，将在吸光光度法中保持试料溶液的容器称为试料池，在利用透过光来测定吸光度时，将光通过试料的长度也称为试料池长度。为了利用吸光光度法准确地测定物质的浓度，而需要准确地了解光通过试料的长度(试料池长度)。例如,在日本国特开平05-18823号公报中公开了一种在分光计测的定量分析中，通过进行试料池长度校正，利用试料池长度不同的多个试料池进行定量分析的技术。在该日本国特开平05-18823号公报的分光测定法中，在使用了以规定的多个波长进行分光测光的装置的分光分析中，预先按照各波长来测定各种输出变动，考虑测定波长数的量纲的空间中的矢量，预先求出与全部的矢量正交的部分空间。并且对于作为基准的试料池和测定所使用的试料池，进行多个测定对象试料的测定并向上述的部分空间投影，预先除去各种误差变动。使用该投影后的数据，求出使用了基准试料池的测定值与使用了测定试料池的测定值之间的相互关系，对基于试料池长度的变化进行校正。使用该校正值和检量线式来求出输出值。由此，能够使用试料池长度不同的多个试料池。在该日本国特开平05-18823号公报的技术中，在进行试料池长度的校正时，除了使用较多的波长(在实施例中为6个)之外，还使用复杂的运算进行试料池长度的校正。然而，在通过比色法进行检体成分的分析时，需要捕捉因反应而信号发生了变化的波长。另外，该信号变化的波长区域并不宽。例如，当同时测定6个波长时，要是在光源使用了卤素灯或D2灯(重氢灯)的分光光度计那样的大型装置还可以，在光源使用了LED的小型分析设备时，需要搭载6种以上的波长特性不同的LED。其结果是，由于控制装置增加而难以小型化，作为系统也变得复杂。
发明内容本发明鉴于上述的情况而作出，其目的在于提供一种在按照分光测定用具进行计测时能够以光通过被检查物质的光路长度来校正吸光度的分光测定装置、分光测定用具、分光测定方法及程序。本发明的第一观点的分光测定装置的特征在于，具备将多个波长的光向由分光测定用具保持的被检查物质照射的单元；接受通过了由上述分光测定用具保持的被检查物质的多个波长的光的受光单元;从由上述受光单元接受到的上述多个波长的光检测波长成分吸光度的分光单元;光路长度计算单元，将由上述分光单元检测到的上述波长成分吸光度中的色素所吸收的光的波长成分吸光度与该波长成分吸光度的确定了的值进行比较，算出上述多个波长的光通过由上述分光测定用具保持的上述被检查物质的光路长度，其中，所述色素对上述被检查物质所包含的分析对象物质吸收的光的波长以外的波长的光进行吸收；及校正单元，以由上述光路长度计算单元算出的光路长度来校正上述色素吸收的光的波长以外的由上述分光单元检测到的波长成分吸光度，算出基准的光路长度的校正波长成分吸光度。优选的是，其特征在于，上述校正单元从上述检测到的波长成分吸光度减去上述色素吸收的光的波长成分吸光度，来算出上述校正波长成分吸光度。优选的是，其特征在于，上述分析对象物质和上述色素是以下的组合(a)至(f)中的任一个。(a)上述分析对象物质包括烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸、对硝基苯酚、5-氨基-2-硝基苯甲酸或磷钥酸，上述色素包括孔雀石绿或食用蓝色I号(BrilliantBlueFCF)。(b)上述分析对象物质包括胆绿素，上述色素包括吲哚菁绿、孔雀石绿或食用蓝色I号。(c)上述分析对象物质包括蛋白-铜离子络合物，上述色素包括吲哚菁绿。(d)上述分析对象物质包括邻甲酚酞络合剂-Ca离子络合物或邻甲酚酞络合剂-Mg离子络合物，上述色素包括食用蓝色I号或吲哚菁绿。Ce)上述分析对象物质包括4-氨基安替比林-Trinder缩合反应体(acondensationreactionproductof4-aminoantipyrinewithTrinderjsagent),上述色素包括酸性媒染蓝29、酸性红B及酸性红BP、或红色2号(FoodRedNo.2)。(f)上述分析对象物质包括白蛋白-溴甲酚绿，上述色素包括吲哚菁绿或酸性红B。本发明的第二观点的分光测定用具保持被检查物质，其特征在于，形成有色素保持部、在内部由2个平面夹持的空腔、及从上述分光测定用具的外部与上述空腔的内部连通的通路，形成夹持上述空腔的2个平面中的至少I个平面的物质是透明的，在上述色素保持部配置有规定量的色素，该规定量的色素能够溶解于上述被检查物质，且对上述被检查物质所包含的分析对象物质吸收的光的波长以外的波长的光进行吸收。优选的是，其特征在于，上述分析对象物质和上述色素是以下的组合(a)至(f)中的任一个。(a)上述分析对象物质包括烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸、对硝基苯酚、5-氨基-2-硝基苯甲酸或磷钥酸，上述色素包括孔雀石绿或食用蓝色I号。(b)上述分析对象物质包括胆绿素，上述色素包括吲哚菁绿、孔雀石绿或食用蓝色I号。(c)上述分析对象物质包括蛋白-铜离子络合物，上述色素包括吲哚菁绿。(d)上述分析对象物质包括邻甲酚酞络合剂-Ca离子络合物或邻甲酚酞络合剂-Mg离子络合物，上述色素包括食用蓝色I号或吲哚菁绿。Ce)上述分析对象物质包括4-氨基安替比林-Trinder缩合反应体，上述色素包括酸性媒染蓝29、酸性红B及酸性红BP、或红色2号。(f)上述分析对象物质包括白蛋白-溴甲酚绿，上述色素包括吲哚菁绿或酸性红B。本发明的第三观点的分光测定方法的特征在于，具备如下步骤在被检查物质中，将对上述被检查物质所包含的分析对象物质吸收的光的波长以外的波长的光进行吸收的色素溶解成规定浓度的色素添加步骤；将溶解了上述色素的上述被检查物质保持于分光测定用具的步骤；向上述分光测定用具所保持的上述被检查物质照射多个波长的光，接受通过了由上述分光测定用具保持的上述被检查物质的多个波长的光的受光步骤；从在上述受光步骤中接受到的上述多个波长的光检测波长成分吸光度的分光步骤；将在上述分光步骤中检测到的上述波长成分吸光度中的上述色素吸收的光的波长成分吸光度与该波长成分吸光度的确定了的值进行比较，算出上述多个波长的光通过由上述分光测定用具保持的上述被检查物质的光路长度的光路长度计算步骤；及以由上述光路长度计算步骤算出的光路长度来校正上述色素吸收的光的波长以外的由上述分光步骤检测到的波长成分吸光度，算出基准的光路长度的校正波长成分吸光度的校正步骤。优选的是，其特征在于，在上述校正步骤中，从由上述分光步骤检测到的波长成分吸光度减去上述色素吸收的光的波长成分吸光度，来算出上述校正波长成分吸光度。优选的是，其特征在于，上述分析对象物质和上述色素是以下的组合(a)至(f)中的任一个。(a)上述分析对象物质包括烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸、对硝基苯酚、5-氨基-2-硝基苯甲酸或磷钥酸，上述色素包括孔雀石绿或食用蓝色I号。(b)上述分析对象物质包括胆绿素，上述色素包括吲哚菁绿、孔雀石绿或食用蓝色I号。(c)上述分析对象物质包括蛋白-铜离子络合物，上述色素包括吲哚菁绿。(d)上述分析对象物质包括邻甲酚酞络合剂-Ca离子络合物或邻甲酚酞络合剂-Mg离子络合物，上述色素包括食用蓝色I号或吲哚菁绿。Ce)上述分析对象物质包括4-氨基安替比林-Trinder缩合反应体，上述色素包括酸性媒染蓝29、酸性红B及酸性红BP、或红色2号。(f)上述分析对象物质包括白蛋白-溴甲酚绿，上述色素包括吲哚菁绿或酸性红B。本发明的第四观点的程序的特征在于，使控制进行被检查物质的分光测定的分光测定装置的计算机执行如下步骤向分光测定用具保持的上述被检查物质照射多个波长的光，接受通过了由上述分光测定用具保持的上述被检查物质的多个波长的光的光计测步骤；从在上述光计测步骤中接受到的上述多个波长的光检测波长成分吸光度的分光步骤；将上述分光步骤中检测到的上述波长成分吸光度中的对上述被检查物质所包含的分析对象物质吸收的光的波长以外的波长的光进行吸收的色素所吸收的光的波长成分吸光度与该波长成分吸光度的确定了的值进行比较，算出上述多个波长的光通过由上述分光测定用具保持的上述被检查物质的光路长度的光路长度计算步骤；及以由上述光路长度计算步骤算出的光路长度来校正上述色素吸收的光的波长以外的由上述分光步骤检测到的波长成分吸光度，算出基准的光路长度的校正波长成分吸光度的校正步骤。根据本发明，在按照分析用具进行计测时，能够以光通过被检查物质的光路长度来校正吸光度。图I是表示本发明的实施方式的分光测定装置的构成例的框图。图2是表示实施方式的分光测定用具的例子的立体图。图3A是说明使用透过光的分光测定中的光路长度的图。图3B是说明使用反射光的分光测定中的光路长度的图。图4A是表示实施方式的分析对象与添加的色素的吸光度之间的关系的图。图4B是表示实施方式的添加的色素的吸光度与分光测定用具的光路长度之间的关系的图。图5是表示实施方式的分光测定用具的例子的分解立体图。图6是表示实施方式的分光测定用具的例子的剖视图。图7是表示实施方式的分光测定用具的不同例子的分解立体图。图8是表示实施方式的分光测定用具的不同例子的剖视图。图9是表示实施方式的分光测定用具的变形例的分解立体图。图10是表示实施方式的分光测定用具的变形例的剖视图。图IlA是表示实施方式的分光测定的动作的一例的流程图。图IlB是表示实施方式的分光测定的动作的不同例子的流程图。图12是表示实施方式的分析对象物质与添加的色素的组合的例子的图。图13是表示孔雀石绿的吸光度的图。图14是表示添加孔雀石绿时的试料池长度与吸光度变化量之间的关系的图。图15是表示食用蓝色I号的吸光度的图。图16是表示添加食用蓝色I号时的试料池长度与吸光度变化量之间的关系的图。图17是表示色素的浓度与吸光度之间的关系的例子的图。图18是表示被检查物质的分析对象物质的吸光度与色素的吸光度之间的关系的例子的图。图19是表示本发明的实施方式的分光测定装置的物理的构成的例子的框图。·具体实施例方式以下，参照附图，详细说明用于实施本发明的方式。需要说明的是，图中，对同一或同等的部分标注同一标号。图I是表示本发明的实施方式的分光测定装置的构成例的框图。分光测定装置I具备发光部11、试料室12、受光部13、检测部14、运算部15、输出部18及控制部19。运算部15包括光路长度计算部16和校正部17。试料室12对分光测定用具2进行支承。在分光测定用具2中保持有包含分析对象的物质在内的溶液即被检查物质3。分光测定用具2的保持被检查物质3的部分为透明，从外部照射的光通过被检查物质3而向外部射出。在图I中，为了避免变得烦杂，而省略了从控制部19向各部的线。控制部19对各部进行控制，以便于使发光部11、受光部13、检测部14、运算部15及输出部18协调动作。分光测定装置I将多个波长的光向被检查物质3照射，根据通过了被检查物质3的光的各波长成分的吸光度，来测定被检查物质3中含有的分析对象的物质的浓度。发光部11将多个波长的光向分光测定用具2所保持的被检查物质3照射。对于生成多个波长的光，例如，对具有连续光谱的光源的光进行分光而依次照射。在分光中，例如可以使用干涉滤光器或棱镜。或者也可以通过依次切换波长特性不同的多个光源来照射多个波长的光。受光部13由光电转换元件等构成，接受从发光部11照射且通过了被检查物质3的多个波长的光，转换成与光的强度对应的电信号。在依次照射多个波长的光时，根据该照射的时间，可知各波长成分的光的强度。也可以为如下构成由发光部11同时照射多个波长的光，对通过了被检查物质3的光进行分光，而利用多个受光元件同时受光。图2是表示实施方式的分光测定用具的例子的立体图。分光测定用具2在单面上形成有作为色素保持部的凹部21，且在内部形成有空腔23。凹部21和空腔23由通路22连通。从分光测定用具2的外部经由通路22与空腔23的内部连通。形成有从空腔23进一步到达分光测定用具2的端面的气道24。空腔23由与分光测定用具2的主面平行的平面夹持。分光测定用具2的夹持空腔23的面透明且使光透过。当向凹部21注入被检查物质3的溶液时，经由通路22而由空腔23保持。气道24进而为了使空腔23内的空气释放而设置以便于使注入到凹部21的被检查物质3向空腔23导入。在空腔23保持有被检查物质3的状态下，分光测定用具2由试料室12支承，以便于使空腔23放置在来自发光部11的光所照射的位置上。从发光部11照射的光自分光测定用具2的一个面入射，通过由空腔23保持的被检查物质3，从另一个面射出。图3A是说明使用透过光的分光测定中的光路长度的图。图3A相当于分光测定用具2的空腔23的部分的截面。在图3A中，被检查物质3由2个透明的平板夹持。由虚线箭头所示的光在点A向被检查物质3入射，并从点B射出。光通过被检查物质3的光路长度是点A与点B之间的距离I。将2个透明的平板的间隔(点A与点B之间的距离)称为试料池长度。在分光测定用具2的内部未发生反射而光正交透过时，光通过被检查物质3的光路长度等于试料池长度。以下，将光通过被检查物质3的光路长度仅称为光路长度。另夕卜，在透过光的情况下，将光路长度也称为试料池长度。图3B是说明使用反射光的分光测定中的光路长度的图。在图3B中也是，被检查物质3由2个透明的平板夹持。虚线箭头所示的光从点I向被检查物质3入射，在点R反射，在点O射出。点I与点O有时也一致。从点I经由点R到达点O的路径的长度为光路长度。分光测定装置I既可以是图3A那样的透过型，也可以如图3B那样为反射型。在图3A、图3B的哪一个情况下，为了利用吸光度来测定被检查物质3中含有的分析对象物质的浓度，都需要了解准确的光路长度。在本实施方式中，使色素在被检查物质3中溶解至规定浓度，该色素对被检查物质3所包含的分析对象物质吸收的光的波长以外的波长的光进行吸收。并且，根据通过了溶解有色素的被检查物质3的多个波长的光的波长成分中的添加了的色素吸收的光的波长成分的吸光度，算出光路长度。因此，在预先以多个光路长度测定添加的色素的规定浓度的溶液的吸光度中，预先确定基准的光路长度的规定浓度的该色素的吸收波长的吸光度。并且，将通过了溶解有色素的被检查物质3的多个波长的光中的色素的吸收波长的波长成分吸光度与该波长成分吸光度的确定了的值进行比较，算出光路长度。关于本实施方式的分光测定装置1，更详细而言，图I的发光部11以多个波长的光通过被检查物质3中的(除去基于波长的折射率的不同的影响)同一光路的方式进行照射。即，发光部11在图3A或图3B中，以多个波长的光在相同点且以相同入射角度向被检查物质3入射的方式照射。另外，受光部13接受通过了被检查物质3中的(除去基于波长的折射率的不同的影响)同一光路的多个波长的光。在图3B所示的反射型的情况下(或者在图3A中，光未向被检查物质3的表面垂直入射的情况下)，通常被检查物质3的折射率根据波长而变化，因此严格来说，即便在相同点以相同入射角度入射，由于波长而光路长度会稍有不同。然而，这种情况下，若夹持被检查物质3的2个面所成的角度的变动小，则任意的2个波长的光路长度之比被看作一定，因此可以与分光测定用具2的个体差异无关地预先确定校正系数。另外，在图3B中光垂直地向被检查物质3的表面入射且入射的点I与出射的点O—致的情况下(或者在图3A中入射的点A与出射的点B未因波长变化时)，由于没有光路的差，因此无需进行校正。图4A是表示实施方式的分析对象与添加的色素的吸收波长之间的关系的图。图4A的左侧的吸光度M的线作为分析对象物质的吸收波长。若添加的色素的吸收波长由右侧的吸光度P的线表示，则与分析对象物质的吸收波长独立且色素的吸光度不会对分析对象物质的浓度造成影响。反之若选择这种关系的色素而准确地以规定浓度向被检查物质3添加，则吸光度与光路长度成比例，因此根据该色素的吸收波长的吸光度，能够算出光路长度。图4B是表示实施方式的添加的色素的吸光度与分光测定用具的光路长度之间的关系的图。将具有不会对分析对象物质的浓度造成影响的吸收波长的色素，换言之，将对被检查物质3所包含的分析对象物质吸收的光的波长以外的波长的光进行吸收的色素以准确的浓度向被检查物质3添加。如此，通过被检查物质3的光中的添加了的色素吸收的(至少其一部分的)波长成分的吸光度如图4B所示与光路长度成比例。因此，根据该波长成分的吸光度，能够算出光路长度。图I的检测部14根据由受光部13接受到的多个波长的光，检测波长成分吸光度。本实施方式中，波长成分吸光度是指每个波长的吸光度。波长成分吸光度如下所示地检测。首先，在没有被检查物质3(或仅有溶剂的)的状态下，从发光部11发出而透过了分光测定用具2的光由受光部13接受，预先计测该接受到的光的波长成分(的强度)(基准光谱)。该基准光谱是发光部11与受光部13的特性，且是吸光度为O时的光谱。基准光谱的计测例如只要定期地在校正分光测定装置I时进行即可。基准光谱的计测也可以先于被检查物质3的计测而每次进行。接下来，将被检查物质3保持于分光测定用具2，计测透过了被检查物质3的光的波长成分(强度)。对于每个波长，从基准光谱的波长成分减去透过了被检查物质3的光的波长成分(强度)而得到的差分是波长成分吸光度。运算部15的光路长度计算部16将由检测部14检测到的波长成分吸光度中的对被检查物质3所包含的分析对象物质吸收的光的波长以外的波长的光进行吸收的色素吸收的光的波长成分吸光度和该波长成分吸光度的确定了的值进行比较，算出光路长度。若添加了的色素的浓度一定，则色素的吸光度与光路长度成比例，因此能够根据色素的吸光度算出光路长度。因此，能够以添加的色素的浓度的精度知道光路长度。校正部17以由光路长度计算部16算出的光路长度来校正由检测部14检测到的波长成分吸光度中的添加了的色素吸收的光的波长以外的波长成分吸光度，算出基准的光路长度的校正波长成分吸光度。在光吸收物质的浓度一定时，该吸光度与光路长度成比例。被检查物质3的实际的光路长度是由光路长度计算部16算出的光路长度。因此，根据实际的光路长度(由光路长度计算部16算出的光路长度)和由检测部14检测到的波长成分吸光度，利用比例计算，能够算出基准的光路长度的校正波长成分吸光度。校正部17也可以从检测到的波长成分减去添加了的色素吸收的光的波长成分吸光度，算出校正波长成分吸光度。这种情况下，即便添加的色素的吸收波长的一部分作用在分析对象物质的吸收波长的带域，也可以算出分析对象物质的校正波长成分吸光度。图I所示的控制部19以发光部11与受光部13协调而进行多个光的发光和受光的方式进行控制。控制部19中，另外，以根据色素的吸光度进行光路长度的计算和波长成分的校正的方式控制检测部14和运算部15。输出部18为了分析对象物质的分析，而将校正后的波长成分吸光度向分析部(未图示)等输出。在分析部中，例如，使用预先计测的、分析对象物质吸收的光的波长的基准的光路长度的吸光度与分析对象物质的浓度之间的关系，根据校正波长成分吸光度，判定分析对象物质的浓度。在本实施方式中，用于计算光路长度的色素吸收的波长的光由于与测定分析对象物质的吸光度的光通过的情况相比通过相同的试料池且通过相同路径，因此能够知道通过被检查物质3的光路长度本身。另外，在被检查物质3的测定时，由于计测光路长度，因此对每一个分光测定用具进行计测时，能够以光通过被检查物质3的光路长度来校正吸光度。本实施方式的方法只要在分光测定之前将色素向被检查物质3溶解为规定浓度即可，因此也可以适用于图2的形状以外的各种分光测定用具2。在本实施方式中，还使用以溶解于被检查物质3的色素成为规定浓度的方式涂敷了色素的分光测定用具2。图5是表示实施方式的分光测定用具的例子的分解立体图。图6是表示实施方式的分光测定用具的例子的剖视图。图6表示图2的X-X线剖面。分光测定用具2成为在透明的基板25与透明的罩盖26之间夹有形成凹部21、通路22、空腔23及气道24的间隔件27的结构。在罩盖26上的与凹部21重合的部分形成有孔21A。分光测定用具2在作为色素保持部的凹部21的内表面形成有色素层28。色素层28涂敷有能够溶解于被检查物质3且对被检查物质3所包含的分析对象物质吸收的光的波长以外的波长的光进行吸收的规定量的色素。涂敷的色素根据分析对象物质来选择。色素保持部的形态只要能够使色素向被检查物质3溶解为规定浓度即可，并未限定为凹部21。色素保持部例如也可以是将使规定量的色素包含于透过被检查物质3的多孔质的材料并干燥而成的物质配置在与空腔23连通的通路22上的方式。这种情况下，可以不形成凹部21，而利用分注喷嘴向配置有色素保持部的通路22注入被检查物质3，或从气道24吸引，从而使色素向被检查物质3溶解为规定浓度，然后向空腔23导入。空腔23为了将被检查物质3的表面保持为一定的水平，而利用透明的罩盖26覆盖。空腔23成为由2个平面夹持的结构。在使用透过光的分光测定的情况下，罩盖26和基板25中的至少面向空腔23的部分为透明。在使用反射光的分光测定的情况下，夹持空腔23的平面的一方例如上方的罩盖26透明，另一方面，例如基板25使光反射。在使用反射光的情况下，也可以构成为从下方的基板25侧照射光，而在上方的罩盖26反射。分光测定用具2作为整体而呈板状的形态，且具有经由间隔件27将长矩形的基板25及罩盖26接合的形态。基板25例如由透明的PET、PMMA、PS、玻璃或维尼纶等形成。罩盖26例如由透明的PET、PMMA、PS、玻璃或维尼纶等形成。色素层28通过在将色素含有液在凹部21的内表面上点涂之后使色素含有液干燥从而形成。色素含有液中使色素向溶剂溶解为规定浓度。为了使色素层28的色素的量成为规定的量，而准确地计算色素含有液的量，并在凹部21的内表面点涂而进行干燥。色素层28也可以包括向被检查物质添加的试剂。若在如上所述构成的分光测定用具2的凹部21上注入(或点涂)规定量的被检查物质3，则涂敷在凹部21上的色素溶解于被检查物质3，成为规定浓度。色素溶解的被检查物质3通过通路22被导入到空腔23。之后，使分光测定用具2由图I所示的试料室12支承，能够以上述的方法进行分光测定。图7是表示实施方式的分光测定用具的不同例子的分解立体图。图8是表示实施方式的分光测定用具的不同例子的剖视图。图8相当于图7所示的分光测定用具的剖视图。在图7及图8所示的分光测定用具2中，在形成了凹部21的面上形成有气道24的开口部24A。在图7及图8的分光测定用具2中，使用方法和作用也与图5的分光测定用具相同。在图7及图8的情况下，在水平地支承了分光测定用具2的状态下，不用担心被检查物质从气道漏出。图9是表示实施方式的分光测定用具的变形例的分解立体图。图10是表示实施方式的分光测定用具的变形例的剖视图。图10相当于图9所示的分光测定用具的剖视图。在图9及图10所示的分光测定用具2中，凹部21和空腔23未由通路22连接。取代这种情况，在罩盖26形成有注入口29A。注入口29A和空腔23由通路29连接。从分光测定用具2的外部经由通路29而与空腔23的内部连通。在变形例的分光测定用具2中，与图7同样地，气道24的开口24A形成在罩盖26上。在变形例的分光测定用具2中，在凹部21的内表面也形成有色素层28。在图9及图10所示的变形例中，将规定量的被检查物质3向凹部21注入，而使色素层28的色素溶解于被检查物质3。并且，使色素溶解成一定浓度的被检查物质3从凹部21向注入口29移动。从凹部21向注入口29A移动的被检查物质3的量只要满足空腔3即可，无需准确地计测。从注入口29A注入的被检查物质3通过通路22而被导向至空腔23。之后，分光测定用具2由图I所示的试料室12支承，能够以上述的方法进行分光测定。若使用上述的分光测定用具2，则仅通过准确地计测被检查物质3的量并向分光测定用具2注入，就能够容易地以本实施方式的方法进行分光测定。通过准备涂敷了与分析对象物质对应的色素的分光测定用具2，能够容易地进行各种分析对象物质的基于吸光光度法的分析。以下，说明本实施方式的分光测定装置I的动作。图IlA是表示实施方式的分光测定的动作的一例的流程图。在分光测定之前，预先使与分析对象物质对应的色素以规定浓度溶解于被检查物质3。使对溶解了色素后的被检查物质3进行保持的分光测定用具2由试料室12支承，开始分光测定。控制部19利用传感器(未图示)的信号来确认在试料室12正确地支承分光测定用具2且关闭以免光从外部进入，使多个波长的光从发光部11向分光测定用具2照射，同时由受光部13接受光(步骤S11)。检测部14根据由受光部13接受到的光，从多个波长的光检测波长成分吸光度(步骤S12)。运算部15的光路长度计算部16取出色素吸收的规定的波长的吸光度(波长成分吸光度)(步骤S13)，与该波长成分吸光度的确定了的值进行比较，算出光路长度(步骤S14)。校正部17以由光路长度计算部16算出的光路长度来校正由检测部14检测到的波长成分吸光度中的色素吸收的光的波长以外的波长成分吸光度，算出基准的光路长度的校正波长成分吸光度(步骤S15)。输出部18为了进行分析对象物质的分析，而将校正后的波长成分吸光度向外部输出(步骤S16)。在接受到校正波长成分吸光度的分析部中，例如，使用分析对象物质吸收的光的波长的基准的光路长度的吸光度与分析对象物质的浓度之间的关系，根据校正波长成分吸光度来判定分析对象物质的浓度。图IlB是表示实施方式的分光测定的动作的不同例子的流程图。图IlB表示从检测到的波长成分减去添加了的色素吸收的光的波长成分而算出校正波长成分时的动作。图IlB的步骤S2f步骤S24的动作与图IlA的步骤Slf步骤S14相同。校正部17在由光路长度计算部16算出了光路长度(步骤S24)之后，从检测到的波长成分吸光度减去添加了的色素吸收的光的波长成分吸光度(步骤S25)。然后，以由光路长度计算部16算出的光路长度来校正该差分，算出基准的光路长度的校正波长成分吸光度(步骤S26)。输出部18与图IlA同样地输出校正后的波长成分吸光度(步骤S27)。如以上说明所述，根据本实施方式的分光测定装置1，通过使色素以规定浓度溶解于被检查物质3，在按照分析用具进行计测时，能够以光通过被检查物质3的光路长度来校正吸光度。此外，若使用本实施方式的分光测定用具2，则通过准确地计测被检查物质3的量而注入，能够使色素向被检查物质3溶解为规定浓度。以下，关于分析对象物质与添加的色素的组合，说明具体的例子。(具体例)图12是表示实施方式的分析对象物质与添加的色素的组合的例子的图。图12的项目主要以临床检查中的生物化学检查为对象。主波长为检测的分析对象物质吸收的光的波长的主要的成分的波长。在光路长度监视器中能够使用的色素是具有不会对分析对象物质的浓度造成影响的吸收波长的色素，是能够向被检查物质3添加而算出光路长度的色素的例子。可校正波长范围表示能够使用在该范围具有吸收波长的色素来测定算出光路长度的吸光度。具体例校正波长是能够在光路长度监视器中使用的色素的栏中列举的色素的吸收波长。根据项目的不同，在计测反应中分析对象物质的生成的变化量时，有时计测反应结束而生成的总量,但哪一个均可以适用本实施方式。在编号I的、ALT(Alaninetransaminase:丙氨酸氨基转移酶)、AST(AspartateAminoTransferase:天冬氨酸转氨酶)、及UN(Ureanitrogen:尿素氮)的项目中，主要通过血清与试剂的反应，分析根据项目的物质的浓度而变化的NAD(nicotinamideadeninedinucleotide:烟酸胺腺嘌呤二核苷酸)或NADP(nicotinamideadeninedinucleotidephosphate:烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸)的还原型(NADH/NADPH)的浓度。在编号I的分析对象物质中，将NADH或NADPH汇总表现为NAD(P)H。NADH/NADPH的主波长为340nm。在编号2的CK(CreatineKinase:肌酸激酶)，CRE(肌酸酐)、LD(LactateDehydrogenase:乳酸脱氢酶)、GLU(葡萄糖)、TG(中性脂肪)、T-CH0(总胆固醇)、及HDL-C(HDL胆固醇)的项目中，也分析NAD/NADP的还原型(NADH/NADPH)(主波长为340nm)的浓度。在编号I和编号2的项目中，可校正波长范围是400-800nm。在编号I和编号2的项目中，添加的色素中，可以使用具有630nm的吸收波长的孔雀石绿或食用蓝色I号(亮蓝FCF(BrilliantBlueFCF))。在编号3的AMY(amylase:淀粉酶)、ALP(AlkalinePhosphatase:碱性磷酸酯酶)的项目中，测定对硝基苯酚(PNP)的吸光度变化量。pNP的主波长为405nm。在pNP的吸光度测定中，可以使用孔雀石绿或食用蓝色I号。编号4的GGT(Y-glutamyltransferaseY-谷氨酰转氨酶)测定5_氨基_2_硝基苯甲酸的浓度。在GGT中，主波长也为405nm，可以使用孔雀石绿或食用蓝色I号。编号5的T-BIL(胆绿素(Biliverdin))是血红蛋白等中含有的血红素的生物分解产物的中间体，是绿色的四吡咯化合物。胆绿素的主波长为450nm，在添加的色素中可以使用吲哚菁绿、孔雀石绿或食用蓝色I号。编号6的TP(血清总蛋白质)测定蛋白-铜离子络合物的浓度。蛋白-铜离子络合物的主波长为550nm，作为添加的色素，可以使用吲哚菁绿。编号7的Ca(钙)或编号8的Mg(镁)通过螯合法来生成与OCPC(邻甲酚酞络合齐U)的络合物，测定色调变化的情况。在编号7及8中，主波长为570nm，作为添加的色素，可以使用食用蓝色I号或吲哚菁绿。编号9的UA(尿酸)测定通过Trinder试剂而生成的4_AATrinder缩合反应体(4-氨基安替比林-Trinder缩合反应体)的浓度。4-AATrinder缩合反应体的主波长为630nm。可校正波长范围为400_570nm。因此，在分析中添加的色素可以使用酸性媒染蓝、酸性红B或酸性红BP、或红色2号。编号10的ALB(白蛋白)测定Alb-BCG(Albumen-BromocresolGreen白蛋白-溴甲酚绿)结合体的浓度。Alb-BCG的主波长为630nm，可校正波长范围为400_570nm及700-800nm。在Alb-BCG的分析中，作为添加的色素，可以使用吲哚菁绿或酸性红B。编号11的IP(无机磷)测定磷钥酸的浓度。磷钥酸的主波长为730nm，可校正波长范围为400-660nm。作为添加的色素,可以使用孔雀石绿或食用蓝色I号。图13是表示孔雀石绿的吸光度的图。在图13的例子中，向包含NADH(还原型NAD)14mM的被检查物质3以一定浓度添加孔雀石绿，利用不同的试料池长度的分光测定用具2测定了吸光度。图13的例子对应于图12的编号2的项目。NADH的吸收波长为340nm，可看出不会影响孔雀石绿的吸收波长630nm。随着试料池长度增大而吸光度增大。图14是表示添加孔雀石绿时的试料池长度与吸光度变化量之间的关系的图。图14是根据图13的结果，相对于试料池长度而标绘了孔雀石绿的吸光度的图。这里，将孔雀石绿的吸光度取为630nm和这以后(63(T700nm)的范围。考虑到被检查物质3中包含的胆红素、溶血及浊度等的吸收时，优选利用630nm和这以后的波长的2波长校正运算来求出光路长度。根据图14，可以说即使被检查物质3中包含NADH，孔雀石绿的吸光度也与试料池长度成比例。图15是表示食用蓝色I号的吸光度的图。在图15的例子中，向包含NADH7mM的被检查物质3—定浓度地添加食用蓝色I号，并利用不同的试料池长度的分光测定用具2测定了吸光度。图15的例子也对应于图12的编号2的项目。在食用蓝色I号的情况下，也能看出在630nm以后的波长区域中不会对NADH的吸收波长造成影响。图16是表示添加食用蓝色I号时的试料池长度与吸光度变化量之间的关系的图。图16根据图15的结果，相对于试料池长度而标绘了食用蓝色I号的吸光度。这里，也将食用蓝色I号的吸光度取为630nm和这以后(63(T700nm)的范围。可以说，在食用蓝色I号的情况下也是，即便被检查物质3中包含NADH，食用蓝色I号的吸光度也与试料池长度成比例。图17是表示色素的浓度与吸光度之间的关系的例子的图。图17表示向血清+缓冲剂的被检查物质3添加了O.00%,O.01%,O.04%及O.10%的吲哚菁绿时的吸光度的变化。在图17的例子中，在缓冲剂中使用N-甲基-D-葡糖胺(MEG)和N-环己基_3_氨基丙磺酸(CAPS)，调整成pHIO。如图17所示，随着吲哚菁绿的浓度变大，而吸光度变大。图18是表示被检查物质的分析对象物质的吸光度与色素的吸光度之间的关系的例子的图。图18的例子是测定了仅为血清的情况、向血清添加了吲哚菁绿的情况、及在血清发生Mg反应而添加了吲哚菁绿的情况的各被检查物质3的吸光度的结果。图18的例子对应于图12的编号8的Mg项目。从图18可看出，血清不会对吲哚菁绿的吸光度造成影响、及Mg反应的吸光度与吲哚菁绿的吸光度不会相互干涉。因此，若以规定浓度添加吲哚菁绿，则能够根据吲哚菁绿的吸光度来算出试料池长度。另外，能够不会受到吲哚菁绿的影响地测定Mg反应(OCPC-MG离子络合物)的吸光度。然后，以根据吲哚菁绿的吸光度算出的试料池长度，将Mg反应的吸光度校正成基准的试料池长度，而能够准确地分析Mg反应的浓度。图19是表示实施方式的分光测定装置的物理性的构成例的框图。如图19所示，分光测定装置I具备控制部31、主存储部32、外部存储部33、操作部34、显示部35及输入输出部36。主存储部32、外部存储部33、操作部34、显示部35及输入输出部36均经由内部总线30而与控制部31连接。控制部31由CPU(CentralProcessingUnit)等构成,按照存储在外部存储部33中的控制程序39，执行前述的分光测定用的处理。主存储部32由RAM(Random-AccessMemory)等构成,载入存储在外部存储部33中的控制程序39，作为控制部31的作业区域使用。外部存储部33由闪存、硬盘、DVD-RAM(DigitalVersatileDiscRandom-AccessMemory)、DVD-RW(DigitalVersatileDiscReWritable:可重写式DVD)等的非易失性存储器构成，预先存储用于使控制部31进行上述的处理的控制程序39，另外，按照控制部31的指示，将该控制程序39存储的数据向控制部31供给，存储从控制部31供给的数据。操作部34由键盘及鼠标或触摸面板等指示设备等和将键盘及指示设备等与内部总线30连接的接口装置构成。经由操作部34，接受与分析对象物质及添加的色素相关的输入操作。显示部35由IXD(LiquidCrystalDisplay:液晶显示器)或有机EL显示器及扬声器等构成，显示与分光测定相关而算出的试料池长度、校正后的分析对象物质的吸光度、分析对象物质的浓度等的数据。输入输出部36由串行接口或并行接口构成。在输入输出部36连接有发光部11及受光部13。另外，检测试料室12的分光测定用具2的传感器、检测关闭试料室12的情况的传感器等与输入输出部36连接。控制部31经由输入输出部36向发光部11及受光部13发送指令，接受来自受光部13的信号。分光测定装置I的检测部14、运算部15、输出部18及控制部19等的处理如下所述来执行控制程序39将控制部31、主存储部32、外部存储部33、操作部34、显示部35、输入输出部36及发送接收部37等作为资源使用而进行处理。此外，上述的硬件结构、流程图是一例，能够任意变更及修正。作为进行由控制部31、主存储部32、外部存储部33、操作部34、内部总线30等构成的控制处理的中心的部分，能够与专用的系统无关地使用通常的计算机系统来实现。例如，也可以将用于执行上述的动作的计算机程序存储而分布在计算机能够读取的记录介质(软盘、CD-ROM、DVD-ROM等)中，将该计算机程序安装在计算机中，从而构成执行上述的处理的分光测定装置I。另外，还可以预先在因特网等的通信网络上的服务器装置具有的存储装置中存储该计算机程序，通过通常的计算机系统下载等来构成分光测定装置I。另外，也可以在通过OS(操作系统)和应用程序的分担、或OS与应用程序的协作而实现分光测定装置I的功能时等，在记录介质、存储装置中仅存储应用程序部分。另外，也可以使计算机程序与载波重叠，经由通信网络进行配信。例如，可以在通信网络上的公告板(BBS:BulletinBoardSystem:公告牌系统)上公告上述计算机程序，并经由网络发送上述计算机程序。并且，也可以构成为，使该计算机程序起动，在OS的控制下，通过与其他的应用程序同样地执行，从而能够执行上述的处理。本发明并未限定为上述发明的实施方式及具体例的说明。在不脱离权利要求书的记载而本领域技术人员能够容易想到的范围内进行各种变形的方式也包含于本发明。本说明书中公开的公开专利公报的内容通过援引其全部的内容来进行引用。本申请基于2011年7月6日提出申请的日本国专利申请2011-150436号。将日本国专利申请2011-150436号的说明书、权利要求书、附图整体作为参照而引入到本说明书中。权利要求1.一种分光测定装置，其特征在于，具备将多个波长的光向由分光测定用具保持的被检查物质照射的单元；接受通过了由上述分光测定用具保持的被检查物质的多个波长的光的受光单元；从由上述受光单元接受到的上述多个波长的光检测波长成分吸光度的分光单元；光路长度计算单元，将由上述分光单元检测到的上述波长成分吸光度中的色素所吸收的光的波长成分吸光度与该波长成分吸光度的确定了的值进行比较，算出上述多个波长的光通过由上述分光测定用具保持的上述被检查物质的光路长度，其中，所述色素对上述被检查物质所包含的分析对象物质吸收的光的波长以外的波长的光进行吸收；及校正单元，以由上述光路长度计算单元算出的光路长度来校正上述色素吸收的光的波长以外的由上述分光单元检测到的波长成分吸光度，算出基准的光路长度的校正波长成分吸光度。2.根据权利要求I所述的分光测定装置，其特征在于，上述校正单元从上述检测到的波长成分吸光度减去上述色素吸收的光的波长成分吸光度，来算出上述校正波长成分吸光度。3.根据权利要求I或2所述的分光测定装置，其特征在于，上述分析对象物质和上述色素是以下的组合(a)至(f)中的任一个，(a)上述分析对象物质包括烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸、对硝基苯酚、5-氨基-2-硝基苯甲酸或磷钥酸，上述色素包括孔雀石绿或食用蓝色I号，(b)上述分析对象物质包括胆绿素，上述色素包括吲哚菁绿、孔雀石绿或食用蓝色I号，(c)上述分析对象物质包括蛋白-铜离子络合物，上述色素包括吲哚菁绿，Cd)上述分析对象物质包括邻甲酚酞络合剂-Ca离子络合物或邻甲酚酞络合剂-Mg离子络合物，上述色素包括食用蓝色I号或吲哚菁绿，Ce)上述分析对象物质包括4-氨基安替比林-Trinder缩合反应体，上述色素包括酸性媒染蓝29、酸性红B及酸性红BP、或红色2号，Cf)上述分析对象物质包括白蛋白-溴甲酚绿，上述色素包括吲哚菁绿或酸性红B。4.一种分光测定用具，保持被检查物质，其特征在于，形成有色素保持部、在内部由2个平面夹持的空腔、及从上述分光测定用具的外部与上述空腔的内部连通的通路，形成夹持上述空腔的2个平面中的至少I个平面的物质是透明的，在上述色素保持部配置有规定量的色素，该规定量的色素能够溶解于上述被检查物质，且对上述被检查物质所包含的分析对象物质吸收的光的波长以外的波长的光进行吸收。5.根据权利要求4所述的分光测定用具，其特征在于，上述分析对象物质和上述色素是以下的组合(a)至(f)中的任一个，(a)上述分析对象物质包括烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸、对硝基苯酚、5-氨基-2-硝基苯甲酸或磷钥酸，上述色素包括孔雀石绿或食用蓝色I号，(b)上述分析对象物质包括胆绿素，上述色素包括吲哚菁绿、孔雀石绿或食用蓝色I号，(c)上述分析对象物质包括蛋白-铜离子络合物，上述色素包括吲哚菁绿，Cd)上述分析对象物质包括邻甲酚酞络合剂-Ca离子络合物或邻甲酚酞络合剂-Mg离子络合物，上述色素包括食用蓝色I号或吲哚菁绿，Ce)上述分析对象物质包括4-氨基安替比林-Trinder缩合反应体，上述色素包括酸性媒染蓝29、酸性红B及酸性红BP、或红色2号，Cf)上述分析对象物质包括白蛋白-溴甲酚绿，上述色素包括吲哚菁绿或酸性红B。6.一种分光测定方法，其特征在于，具备如下步骤在被检查物质中，将对上述被检查物质所包含的分析对象物质吸收的光的波长以外的波长的光进行吸收的色素溶解成规定浓度的色素添加步骤；将溶解了上述色素的上述被检查物质保持于分光测定用具的步骤；向上述分光测定用具所保持的上述被检查物质照射多个波长的光，接受通过了由上述分光测定用具保持的上述被检查物质的多个波长的光的受光步骤；从在上述受光步骤中接受到的上述多个波长的光检测波长成分吸光度的分光步骤；将在上述分光步骤中检测到的上述波长成分吸光度中的上述色素吸收的光的波长成分吸光度与该波长成分吸光度的确定了的值进行比较，算出上述多个波长的光通过由上述分光测定用具保持的上述被检查物质的光路长度的光路长度计算步骤；及以由上述光路长度计算步骤算出的光路长度来校正上述色素吸收的光的波长以外的由上述分光步骤检测到的波长成分吸光度，算出基准的光路长度的校正波长成分吸光度的校正步骤。7根据权利要求6所述的分光测定方法，其特征在于，在上述校正步骤中，从由上述分光步骤检测到的波长成分吸光度减去上述色素吸收的光的波长成分吸光度，来算出上述校正波长成分吸光度。8.根据权利要求6或7所述的分光测定方法，其特征在于，上述分析对象物质和上述色素是以下的组合(a)至(f)中的任一个，(a)上述分析对象物质包括烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸、对硝基苯酚、5-氨基-2-硝基苯甲酸或磷钥酸，上述色素包括孔雀石绿或食用蓝色I号，(b)上述分析对象物质包括胆绿素，上述色素包括吲哚菁绿、孔雀石绿或食用蓝色I号，(c)上述分析对象物质包括蛋白-铜离子络合物，上述色素包括吲哚菁绿，(d)上述分析对象物质包括邻甲酚酞络合剂-Ca离子络合物或邻甲酚酞络合剂-Mg离子络合物，上述色素包括食用蓝色I号或吲哚菁绿，Ce)上述分析对象物质包括4-氨基安替比林-Trinder缩合反应体，上述色素包括酸性媒染蓝29、酸性红B及酸性红BP、或红色2号，Cf)上述分析对象物质包括白蛋白-溴甲酚绿，上述色素包括吲哚菁绿或酸性红B。全文摘要按照分光测定用具进行计测时，以光通过被检查物质的光路长度来校正吸光度。发光部(11)将多个波长的光向由分光测定用具(2)保持的被检查物质(3)照射。受光部(13)接受通过了被检查物质(3)的多个波长的光。检测部(14)根据由受光部(13)接受到的光来检测波长成分吸光度。光路长度计算部(16)将由检测部(14)检测到的波长成分吸光度中的对被检查物质(3)所包含的分析对象物质吸收的光的波长以外的波长的光进行吸收的色素所吸收的光的波长成分吸光度与该波长成分吸光度的确定了的值进行比较，算出通过被检查物质(3)的光路长度。校正部(17)以由光路长度计算部(16)算出的光路长度来校正色素吸收的光的波长以外的由检测部(14)检测到的波长成分吸光度，算出基准的光路长度的校正波长成分吸光度。文档编号G01N21/01GK102866120SQ20121023629公开日2013年1月9日申请日期2012年7月6日优先权日2011年7月6日发明者大久保章男,中村勤申请人:爱科来株式会社