专利名称：一种新型人c-反应蛋白胶体金检测试纸条的制作方法
技术领域：
本实用新型属于临床医学诊断领域，具体涉及一种新型人C-反应蛋白胶体金检测试纸条。
背景技术：
C-反应蛋白(C-reactive protein)是一种能和肺炎链球菌的荚膜C多糖结合,机体受到微生物入侵或组织损伤等刺激时肝细胞合成的Y球蛋白，分子量约为105KD，痕量存在于健康人血清中(约580ng/ml)。当发生炎症疾病或组织损伤6 8小时内，血清或血
浆C-反应蛋白量迅速升高，并在48 72小时达高峰，但随着病情改善或组织结构功能恢复其含量也恢复正常。因此血清或血浆中C-反应蛋白的水平，可以作为判断有无感染、疾病是否处于活动期的指标。目前血液中的C-反应蛋白检测方法很多，主要有放射免疫分析(RIA)、生化免疫分析、酶联免疫分析(ELISA)、胶体金免疫层析等方法。近年来胶体金免疫层析法因为快速、简便，结果直观而得到广泛应用，在现代POCT (Point-Of-Care Testing)技术中具有重要地位。中国专利申请CNlO 1887063 A提供了一种人C-反应蛋白胶体金免疫层析法定量检测试纸条，包括依次在带有粘合剂的地板上相互搭接的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，结合垫上涂有胶体金标记的C-反应蛋白抗体复合物，硝酸纤维素膜上结合有检测线和质控线。该方法虽然解决了胶体金定量检测C反应蛋白的问题，但是它只能用于血清检测，不能用于全血检测。中国实用新型专利CN201096787涉及一种C-反应蛋白颜色颗粒诊断试纸，利用快速免疫层析法，定性检测临床标本中的C-反应蛋白。该实用新型是由底板、吸水板、硝酸纤维素膜、颜色颗粒固定垫、样品吸液层、MAX线组成，底板中部为硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜上有一条C-反应蛋白单克隆抗体试验线和一条羊抗鼠多克隆抗体控制线，在底板一端端头为吸水板，另一端头为样品吸液层，硝酸纤维素膜两端分别与吸水板与颜色固定垫相互交叠连接，在颜色颗粒固定垫上压有样品吸液层。但是所述样品吸液层有三层材料叠加组成，第一层为无纺布层、第二层为玻璃纤维层、第三层为无纺布层。三层样品垫带来的问题是检测所需的样品液(全血/血清/血浆)量较大，且所述样品垫材质并不能很好过滤掉血液中的红细胞，这使得定性检测的结果可靠性降低。此外，金标抗体位于颜色颗粒垫的右端和硝酸纤维素膜交叠在一起，这样容易出现胶体金释放很慢和展层不均的问题。
发明内容为了解决上述现有技术存在的问题，本实用新型提供了一种快速灵敏、定性检测临床标本(全血/血清/血浆)中C-反应蛋白的胶体金检测试纸条，该试纸条一方面通过采用两层样品垫，并且两层样品垫材质中至少有一个是全血滤膜，另一方面改变胶体金标记抗体位置，使其能有效地阻拦红细胞，抗原与胶体金标记抗体充分结合、展层更均一、灵敏度更高和结果更可靠。[0006]本实用新型题所采用的技术方案是本实用新型提供一种新型人C-反应蛋白胶体金检测试纸条，包括底衬和吸水纸，附着在底衬上从左到右依次紧密相连的是叠放在一起的第一层样品垫和第二层样品垫、涂覆金标人C-反应蛋白抗体的金标膜、硝酸纤维素膜和吸水纸，所述第一层样品垫和第二层样品垫中至少有一个样品垫的材质是全血滤膜，所述金标人C-反应蛋白抗体位于金标膜的左端或中间。所述试纸条的第一层样品垫完全覆盖在第二层样品垫上。所述金标人C-反应蛋白抗体为胶体金的鼠抗人C-反应蛋白单克隆抗体I。所述金标膜的材质为玻璃纤维素膜或硝酸纤维素膜。所述硝酸纤维素膜中部平行设有一条包被鼠抗人C-反应蛋白单克隆抗体II的检测线和一条包被兔抗鼠IgG抗体的控制线。所述鼠抗人C-反应蛋白单克隆抗体I和II是利用ELISA双抗体夹心法从若干株杂交瘤细胞中筛选出来的。本实用新型具有如下有益效果I.本实用新型通过采用两层样品垫，并且两层样品垫中至少有一个样品垫的材质是全血滤膜，解决了现有技术C反应蛋白胶体金检测试纸条在全血诊断过程中不能有效阻拦红细胞的问题，提高了胶体金试纸条检测结果的可靠性；2.本实用新型通过调整胶体金标记抗体位置，使抗原与胶体金标记抗体反应时间更充分，展层更均一，提高了灵敏度与胶体金试纸条检测结果的可靠性。
图I为新型人C-反应蛋白胶体金检测试纸条结构示意图。图2为金标膜上金标人C-反应蛋白抗体位置示意图；a、金标抗体位于金标膜左端山、金标抗体位于金标膜中间。图3为新型人C-反应蛋白胶体金检测试纸条阳性结果图。图4为新型人C-反应蛋白胶体金检测试纸条阴性结果图。其中，I、底衬；2、第一层样品垫；3、第二层样品垫；4、金标膜；5、硝酸纤维素膜；6、吸水纸；7、金标人C-反应蛋白抗体；8、检测线；9、控制线。
具体实施方式
以下结合附图和具体实施方式
对本实用新型作进一步说明。如图1-4所示，一种新型人C-反应蛋白胶体金检测试纸条，包括底衬I和吸水纸6，附着在底衬I上从左到右依次紧密相连的是叠放在一起的第一层样品垫2和第二层样品垫3、涂覆金标人C-反应蛋白抗体7的金标膜4、硝酸纤维素膜5和吸水纸6，所述第一层样品垫2和第二层样品垫3中至少有一个样品垫的材质是全血滤膜，所述金标人C-反应蛋白抗体7位于金标膜4的左端或中间。所述试纸条的第一层样品垫2完全覆盖在第二层样品垫3上。所述金标人C-反应蛋白抗体7为胶体金的鼠抗人C-反应蛋白单克隆抗体I。所述金标膜4的材质为玻璃纤维素膜或硝酸纤维素膜。所述硝酸纤维素膜5中部平行设有一条包被鼠抗人C-反应蛋白单克隆抗体II的检测线8和一条包被兔抗鼠IgG抗体的控制线9。所述鼠抗人C-反应蛋白单克隆抗体I和II是利用ELISA双抗体夹心法从若干株杂交瘤细胞中筛选出来的。本实用新型人C-反应蛋白胶体金试纸条的制作采用公知技术ELISA双抗夹心法从若干株杂交瘤细胞中筛选出结合人C-反应蛋白不同抗原表位的单克隆抗体I和II。底衬I上面从左到右依次粘贴叠放在一起的第一层样品垫2和第二层样品垫3、金标膜4、硝酸纤维素膜5和吸水纸6 ;金标人C-反应蛋白抗体7位于金标膜4的左端或中间；金标膜4左端覆盖于第二层样品垫3 二分之一区域下；硝酸纤维素膜5左侧I 2 mm
区域覆盖于金标膜4的下，其右侧覆盖于吸水纸6十分之一区域下，最后用切割机切成指定宽度的试纸条。使用方法采集全血、血清或血浆放入干净的样杯中，将样品点在试纸条样品垫处，8 14分钟内观察结果。显色区位两条红色线，则检测结果为阳性；仅控制区出现红色带时，结果为阴性；控制区未出现红色线，表明试纸无效。
权利要求1.一种新型人C-反应蛋白胶体金检测试纸条，包括底衬(I)和吸水纸(6)，其特征在于附着在底衬(I)上从左到右依次紧密相连的是叠放在一起的第一层样品垫(2)和第二层样品垫(3)、涂覆金标人C-反应蛋白抗体(7)的金标膜(4)、硝酸纤维素膜(5)和吸水纸(6)，所述第一层样品垫(2)和第二层样品垫(3)中至少有一个样品垫的材质是全血滤膜，所述金标人C-反应蛋白抗体(7)位于金标膜(4)的左端或中间。
2.根据权利要求I所述一种新型人C-反应蛋白胶体金检测试纸条，其特征在于所述试纸条的第一层样品垫(2)完全覆盖在第二层样品垫(3)上。
3.根据权利要求I所述一种新型人C-反应蛋白胶体金检测试纸条，其特征在于所述金标人C-反应蛋白抗体(7)为胶体金的鼠抗人C-反应蛋白单克隆抗体I。
4.根据权利要求I所述一种新型人C-反应蛋白胶体金检测试纸条，其特征在于所述金标膜(4)的材质为玻璃纤维素膜或硝酸纤维素膜。
5.根据权利要求I所述一种新型人C-反应蛋白胶体金检测试纸条，其特征在于所述硝酸纤维素膜(4)中部平行设有一条包被鼠抗人C-反应蛋白单克隆抗体II的检测线(8)和一条包被兔抗鼠Ig G抗体的控制线(9)。
专利摘要本实用新型提供一种新型人C-反应蛋白胶体金检测试纸条，涉及临床医学检验领域，包括底衬(1)和吸水纸(6)，其特征在于附着在底衬(1)上从左到右依次紧密相连的是叠放在一起的第一层样品垫(2)和第二层样品垫(3)、涂覆金标人C-反应蛋白抗体的金标膜(4)、硝酸纤维素膜(5)和吸水纸(6)，所述第一层样品垫(2)和第二层样品垫(3)中至少有一个样品垫的材质是全血滤膜，所述金标人C-反应蛋白抗体位于金标膜(4)的左端或中间。本实用新型试纸条能有效地阻拦红细胞，抗原与胶体金标记抗体充分结合、展层更均一、灵敏度更高和结果更可靠。
文档编号G01N33/68GK202583214SQ201220196339
公开日2012年12月5日 申请日期2012年5月4日 优先权日2012年5月4日
发明者苏恩本, 王路海, 周超, 颜彬, 沈小娟 申请人:南京基蛋生物科技有限公司