1.一种单克隆抗体的胶体碳标记方法,其特征在于,包括以下步骤:
A制备胶体碳纳米颗粒;
B胶体碳最适PH值确定;
C向800ul的0.02M硼酸缓冲液中加入100ul的抗Bt-Cry1Ab/Ac的单克隆抗体M03,涡旋振荡1分钟混匀;
D向步骤C制得的混合液中加入质量体积比为20ul 1.5%的EDC溶液,于室温条件下盘旋式摇晃20分钟;
E向步骤D制得的混合液中加入150~300ul的胶体碳纳米颗粒,于恒温摇床中300转,20~30℃放置1.5~3小时;
F向步骤E制得的混合液中加入100ul含20%BSA的硼酸缓冲液,继续于恒温摇床中300转,20~30℃放置4~8小时;
G将步骤F制得的混合液放于12000g的离心机离心20分钟,留取沉淀,用0.02M硼酸缓冲液反复重新悬浮、离心、洗涤3~6次;
H最终将1ml的0.02M硼酸盐缓冲液重悬沉淀并于超声破碎仪中,超声分散;即得胶体碳标记的Bt-Cry1Ab/Ac抗体。
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体的胶体碳标记方法,其特征在于,步骤E中混合液中加入胶体碳纳米颗粒200ul。
3.根据权利要求1所述的单克隆抗体的胶体碳标记方法,其特征在于,步骤E中混合液在恒温摇床反应温度为25℃,放置2小时。
4.根据权利要求1所述的单克隆抗体的胶体碳标记方法,其特征在于,步骤F中混合液在恒温摇床反应温度为25℃,放置5小时。
5.根据权利要求1所述的单克隆抗体的胶体碳标记方法,其特征在于,步骤G中0.02M硼酸缓冲液反复重新悬浮、离心、洗涤4次。
6.根据权利要求1所述的单克隆抗体的胶体碳标记方法,其特征在于,步骤H中超声分散超声波分散机采用超声变幅杆直径6毫米,输出功率60%,超声波分散时间:超声开时3秒,关时3秒,总时长5分钟。