一种测定帕利哌酮缓释片中有关物质的方法与流程

本发明涉及高效液相色谱技术领域，具体涉及一种高效液相色谱法测定帕利哌酮缓释片中有关物质的方法。

背景技术：
帕利哌酮属于治疗精神分裂症急性期的药物，帕利哌酮缓释片生产储存过程中可能存在多种杂质，对于帕利哌酮缓释片中存在的杂质需进行质量控制，因此，实现帕利哌酮及其有关物质的分离与检测，对其质量控制方面具有重要的现实意义。

技术实现要素：
本发明的目的是建立一种测定帕利哌酮缓释片中有关物质的方法，可以更好的控制帕利哌酮缓释片的质量，更好的对帕利哌酮缓释片中可能存在的杂质进行检测。本发明的技术方案是：高效液相色谱测定帕利哌酮缓释片中有关物质的方法，它包括如下步骤：系统测试液的制备：称取杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品、杂质E对照品适量，置量瓶中，另称取帕利哌酮对照品适量，加甲醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含杂质A3.75μg、杂质B3.75μg、杂质C3.75μg杂质D3.75μg、杂质E3.75μg、帕利哌酮25μg的混合溶液，作为系统测试液；对照品溶液制备：精密称取帕利哌酮对照品适量，精密称定，用甲醇溶解并用稀释液稀释制成每1mL约含25µg的溶液即得；供试品溶液制备：精密称取本品适量置容量瓶中加甲醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含帕利哌酮2.5mg的溶液，作为供试品溶液；空白溶液的制备：甲醇；测定：高效液相色谱仪的固定相为十八烷基键合硅胶，流动相A为0.1mol/l甲酸铵缓冲液，流动相B为乙腈，流动相C为甲醇：正丙醇=1:1，柱温为30℃～36℃，检测波长为270nm～280nm。吸取对照品溶液、供试品溶液、空白溶液各10µl注入液相色谱仪，记录色谱图。计算对照品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99，对照品溶液峰形对称，理论塔板数以帕利哌酮计达到2000以上；高效液相色谱法测定帕利哌酮缓释片中有关物质的方法，所述流动相A为0.1mol/l甲酸铵缓冲液，流动相B为乙腈，流动相C为甲醇：正丙醇=1:1，其运行的比例变化为过程见表1梯度表；每片帕利哌酮缓释片中，单个杂质量不得超过30μg，杂质总量不得超过60μg。本发明的有益效果是：本发明应用高效液相色谱测帕利哌酮缓释片中有关物质，分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高，通过检测帕利哌酮缓释片中有关物质，控制每片帕利哌酮缓释片中单个杂质量不得超过30μg，杂质总量不得超过60μg，更好的对帕利哌酮缓释片中可能存在的杂质进行检测，可以更好控制帕利哌酮缓释片的质量。附图说明：图1为实施例1方法摸索色谱图；图2为实施例2方法摸索色谱图；图3为实施例3方法摸索色谱图；图4为实施例4流动相的确定色谱图；图5为实验例7系统适用性实验色谱图；图6为帕利哌酮杂质A峰面积与浓度曲线关系图；图7为帕利哌酮杂质C峰面积与浓度曲线关系图；图8为帕利哌酮杂质B峰面积与浓度曲线关系图；图9为帕利哌酮杂质E峰面积与浓度曲线关系图；图10为帕利哌酮峰面积与浓度曲线关系图；图11为帕利哌酮杂质D峰面积与浓度曲线关系图；图12为流动相比例变化测试结果对比图；图13为柱温变化结果对比图；图14为流速变化测试结果对比图；图15为pH变化结果对比；图16为检测波长变化结果对比；图17为色谱柱变化结果对比；图18为杂质A分子结构式；图19为杂质B结构式；图20为杂质C结构式；；图21为杂质D结构式；图22为杂质E结构式；图23为帕利哌酮结构式。以下通过实施例形式再对本发明的内容作进一步详细说明，但不应就此理解为本发明上述主题范围内仅限于以下实施例。在不脱离本发明上述技术前提下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的相应替换或变更的修改，均包括在本发明的范围内。实施例1流动相的确定。系统测试液的制备：称取杂质A对照品、杂质B对照品、杂质C对照品、杂质D对照品、杂质E对照品适量，置量瓶中，另称取帕利哌酮对照品适量，加甲醇溶液溶解并稀释制成每1ml中约含杂质A3.75μg、杂质B3.75μg、杂质C3.75μg杂质D3.75μg、杂质E3.75μg、帕利哌酮25μg的混合溶液，作为系统测试液。色谱柱：C18，250×4.6mm,5μm波长：275nm流速：1.25ml/min进样量：10μl柱温：35℃流动相A：5gm/l乙酸铵缓冲液pH=6.0，流动相B：甲醇，梯度表见表2。结果见图1。结论：杂质E和主峰不能分离。实施例2流动相的确定。系统测试液的制备，同实施例1色谱柱：C18，250×4.6mm,5μm波长：275nm流速：1.25ml/min进样量：10μl柱温：35℃流动相A：0.1mol/l甲酸铵缓冲液流动相B：乙腈流动相C：甲醇-四氢呋喃=1:1运行梯度见表3。结果见图2。结论：四氢呋喃稳定剂对检测有干扰。实施例3流动相的确定。系统测试液的制备，同实施例1。色谱柱：C18，250×4.6mm,5μm波长...