肝吸虫囊蚴分离设备及其使用方法与流程

本发明涉及食品安全检测和疾病预防控制技术领域，尤其是涉及一种肝吸虫囊蚴分离设备及该分离设备的使用方法。

背景技术：

目前，从鱼肉等生物组织中分离肝吸虫囊蚴采用消化后水洗沉淀法。具体过程为：取30至50克鱼肉等生物组织切碎或搅碎后放入5至10倍体积的消化液(含1％胃蛋白酶和1％盐酸)，在37℃环境下消化16小时，然后将消化物过筛网除去大块的消化残渣，包含囊蚴的滤液装入如图1所示的锥形容器100'内，加满清水或缓冲液清洗；经至少20分钟自然沉淀后倒掉上层液体，保留下层沉淀物；继续加满清水或缓冲液清洗，如此重复4至5次至大部分杂质被除去。倒掉绝大部分上层液体，留取少许包含囊蚴沉淀物在低倍显微镜或解剖镜下观察。

现有分离肝吸虫囊蚴无专用设备，其过程采用普通玻璃瓶、金属筛、锥形量杯等替代物，其中，关系囊蚴分离是否成功的水洗沉淀过程需要反复重复多次进行，其缺点主要为：

(1)水洗过程人为因素影响大，反复重复此过程很容易丢失囊蚴；

(2)经水洗沉淀后的含囊蚴浓缩物多杂质且容积过大，不利于镜检；

(3)整个操作过程随意性强，不容易标准化。上述缺点对检测结果会造成较大误差；

(4)最后，重复多次水洗过程耗时较多，全部水洗沉淀过程至少需要90分钟。

技术实现要素：

为了解决上述存在的技术问题至少之一，本发明的一个目的在于提供一种结构简单、减少多次洗涤时囊蚴的丢失，且能够一次性完成镜检的肝吸虫囊蚴分离设备。

本发明的另一个目的在于提供一种用于上述分离设备的使用方法，能够使操作按照标准化进行、减少人力物力，且操作时间短。

本发明第一方面提供的肝吸虫囊蚴分离设备，包括：

初分离室，所述初分离室的两端分别开设有上开口和下开口，且所述上开口处设置有第一过滤网；

上盖，所述上盖与所述初分离室可拆卸的连接，并能够密封所述上开口；

分离沉淀室，所述分离沉淀室的上端与所述初分离室的下端相连接，并与所述下开口相连通，且所述下开口处设置有第二过滤网；

样品富集室，所述样品富集室的上端与所述分离沉淀室的下端相连接并连通，且所述样品富集室与所述分离沉淀室的连通处设置有第三过滤网；

样品收集器，所述样品收集器的上端具有开口，且所述开口处与所述样品富集室的下端可拆卸的连接并连通；和

支架，所述支架与所述初分离室的下端连接，并能够将肝吸虫囊蚴分离设备支撑在水平面上，且所述样品收集器与所述支架所在的支撑面之间具有间隙。

在上述技术方案中，优选的，所述初分离室呈筒状，所述分离沉淀室和所述样品富集室分别呈锥形。

进一步的，所述初分离室呈圆筒形，所述分离沉淀室和所述样品富集室分别呈圆锥形。

这样的设计能够使经过第二过滤网后的清洁分离物快速沉淀浓缩，使分离后的纯净囊蚴经过样品富集室快速沉淀到样品收集器中，提高了产品的浓缩沉淀时间，进而提高了产品的工作效率。

在上述任一技术方案中，优选的，所述第一过滤网为凹网，且所述第一过滤网为耐酸的金属材料制成，并在所述第一过滤网的周边设置有金属边框。

进一步的，所述第一过滤网的网孔数目为20至30目。

在上述任一技术方案中，优选的，所述第二过滤网和所述第三过滤网分别为平网，且所述第二过滤网和所述第三过滤网分别为耐酸的金属材料或尼龙制成，并在所述第二过滤网和所述第三过滤网的周边分别设置有金属边框。

进一步的，所述第二过滤网的网孔数目为40至50目，所述第三过滤网的网孔数目为50至70目。

在上述任一技术方案中，优选的，所述的肝吸虫囊蚴分离设备还包括样品收集部；

所述样品收集部的形状与所述样品收集器的形状相匹配，且所述样品收集部的上端与所述样品富集室的下端相连接并连通，所述样品收集部的下端与所述样品收集器的开口处可拆卸的连接并连通。

进一步的，所述支架的高度大于所述分离沉淀室、所述样品富集室和所述样品收集部的高度之和，以使所述样品收集容器与所述样品收集部连接时，所述样品收集器和所述支架所在的支撑面之间具有间隙。

在上述任一技术方案中，优选的，所述样品收集器的开口处设置有内螺纹，所述样品收集部的下端设置有与所述内螺纹相配合的外螺纹。

进一步的，所述样品收集器的开口处的内螺纹占所述样品收集器高度的三分之一。

在上述任一技术方案中，优选的，所述初分离室的上开口处设置有外螺纹，所述上盖上设置有与所述外螺纹相配合的内螺纹；或，所述初分离室的上开口处设置有卡接部，所述上盖上设置有与所述卡接部相配合的卡扣。

在上述任一技术方案中，优选的，所述初分离室、所述分离沉淀室和所述样品富集室的外壁面上分别设置有刻度值。

本发明提供的肝吸虫囊蚴分离设备，经过初分离室、分离沉淀室、样品富集室、样品收集器和支架的优化集成，再经过第一过滤网、第二过滤网和第三过滤网的设置，使消化后的组织消化物经过三次的过滤沉淀浓缩，代替了现有技术中的分次水洗，避免了多次洗涤时囊蚴的丢失，同时，还能有效去除组织消化后的大块杂质，可以将大小为150微米左右的囊蚴充分富集到样品收集器内，进而进行一次性镜检，使其容易按照标准化进行，减少人力物力，降低成本，提高了产品的使用效率。

本发明第二方面提供的肝吸虫囊蚴分离设备的使用方法，包括：

步骤S1，打开上盖，加入约300mL生理盐水或洁净水，扭松样品收集器，使液体完全充满分离设备底部，不留气泡，扭紧样品收集器；

步骤S2，补充生理盐水或洁净水至300mL刻度值位置，将消化后的组织消化物约300mL倒入第一过滤网内，使液体自然下落，加入完毕后液面约位于600mL刻度值位置；

步骤S3，盖紧上盖，垂直静置30分钟至40分钟，在此期间按照水平方向轻轻敲击初分离室部分2至3次，使震动下传，辅助囊蚴顺利通过第二过滤网和第三过滤网；

步骤S4，保持上盖为盖紧状态，扭下样品收集器，沉淀后的囊蚴集中收集在样品收集器的下半部分；

步骤S5，吸取全部分离物到载玻片或小平皿，低倍显微镜或解剖镜下观察囊蚴；

步骤S6，使用完毕后打开上盖，倒掉液体，对分离设备进行充分清洗，晾干后进行下次使用。

进一步的，在步骤S2后,还包括步骤S201，就是在步骤S2后步骤S3前，提起第一层过滤网，弃去消化后的组织消化物残渣。

使用本分离设备对消化后的组织消化物中肝吸虫囊蚴进行分离提取，获得的分离物纯净度高，能够一次性完成镜检，同时，用该分离设备进行操作减少了人力物力，降低了产品的操作成本，另外，省去了多步水洗的过程，使操作时间大大减小，提高了产品的分离效率，进而提高了产品的使用性能。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述部分中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为现有技术中的锥形容器的立体结构示意图；

图2为本发明实施例提供的肝吸虫囊蚴分离设备的结构示意图；

图3为图1所示的第一过滤网的俯视图；

图4为图1所示的样品收集器剖视的结构示意图；

图5为本发明另一实施例提供的肝吸虫囊蚴分离设备的使用方法流程图；附图标记：

1-上盖；2-初分离室；3-分离沉淀室；

4-样品富集室；5-样品收集器；6-样品收集部；

7-第一过滤网；8-第二过滤网；9-第三过滤网；

10-支架；51-内螺纹；71-金属边框；

100'-锥形容器。

具体实施方式

下面将结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

在本发明的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。

在本发明的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。

图2为本发明实施例提供的肝吸虫囊蚴分离设备的结构示意图；图3为图1所示的第一过滤网的俯视图；图4为图1所示的样品收集器剖视的结构示意图；如图2-4所示，本发明第一方面的实施例提供的肝吸虫囊蚴分离设备，包括：初分离室2、上盖1、分离沉淀室3、样品富集室4、样品收集器5和支架10；

具体地，所述初分离室2的两端分别开设有上开口和下开口，且所述上开口处设置有第一过滤网7；所述上盖1与所述初分离室2可拆卸的连接，并能够密封所述上开口；所述分离沉淀室3的上端与所述初分离室2的下端相连接，并与所述下开口相连通，且所述下开口处设置有第二过滤网8；所述样品富集室4的上端与所述分离沉淀室3的下端相连接并连通，且所述样品富集室4与所述分离沉淀室3的连通处设置有第三过滤网9；所述样品收集器5的上端具有开口，且所述开口处与所述样品富集室4的下端可拆卸的连接并连通；所述支架10与所述初分离室2的下端连接，并能够将肝吸虫囊蚴分离设备支撑在水平面上，且所述样品收集器5与所述支架所在的支撑面之间具有间隙。

如图2所示，在本发明的一个实施例中，进一步的，所述初分离室2呈筒状，所述分离沉淀室3和所述样品富集室4分别呈锥形。

进一步的，所述初分离室2呈圆筒形，所述分离沉淀室3和所述样品富集室4分别呈圆锥形。

在该实施例中，这样的设计能够使经过第二过滤网8后的清洁分离物快速沉淀浓缩，使分离后的纯净囊蚴经过样品富集室4快速沉淀到样品收集器5中，提高了产品的浓缩沉淀时间，进而提高了产品的工作效率。

如图2和图3所示，在本发明的一个实施例中，进一步的，所述第一过滤网7为凹网，且所述第一过滤网7为耐酸的金属材料制成，并在所述第一过滤网7的周边设置有金属边框71。

进一步的，耐酸金属材料为铜或铝，当然，对于本领域的技术人员来说也可以选择其它的耐酸金属，均应在本申请的保护范围之内。

在该实施例中，第一过滤网7为凹网，且为耐酸的金属材料制成，一方面，增加了第一过滤网7的强度，提高了产品的可靠性，另一方面，凹网的设计增加了第一过滤网7的过滤面积，保证了初次分离的顺利完成，提高了产品的使用性能。

如图2所示，在本发明的一个实施例中，进一步的，所述第二过滤网8和所述第三过滤网9分别为平网，且所述第二过滤网8和所述第三过滤网9分别为耐酸的金属材料或尼龙制成，并在所述第二过滤网8和所述第三过滤网9的周边分别设置有金属边框。

进一步的，所述第二过滤网8的直径与所述第一过滤网7的直径相同。

在该实施例中，第二过滤网8和第三过滤网9分别为平网，增加了消化物的过滤效率，提高了产品的分离效率，同时，第二过滤网8和第三过滤网9分别为金属材料或尼龙制成，并在过滤网的周边都设置有金属边框，这就增加了第二过滤网8和第三过滤网9的结构强度，提高了产品的可靠性。

如图2所示，在本发明的一个实施例中，进一步的，所述的肝吸虫囊蚴分离设备还包括样品收集部6；

所述样品收集部6的形状与所述样品收集器5的形状相匹配，且所述样品收集部6的上端与所述样品富集室4的下端相连接并连通，所述样品收集部6的下端与所述样品收集器5的开口处可拆卸的连接并连通。

在该实施例中，样品收集部6的设置，并与样品收集器5的形状相匹配，使样品收集器5对分离物囊蚴的收集更加方便，同时，也使样品收集器5的安装与拆卸更加容易，进一步的提高了产品的操作效率。

进一步的，所述支架10的高度大于所述分离沉淀室3、所述样品富集室4和所述样品收集部6的高度之和，以使所述样品收集容器与所述样品收集部6连接时，所述样品收集器5和所述支架10所在的支撑面之间具有间隙。

支架10的高度大于上述三者的高度总和，方便了样品收集器5的拿取。

如图2和图4所示，在本发明的一个实施例中，进一步的，所述样品收集器5的开口处设置有内螺纹51，所述样品收集部6的下端设置有与所述内螺纹51相配合的外螺纹。

进一步的，所述样品收集器5的开口处的内螺纹占所述样品收集器5高度的三分之一。

在该实施例中，样品收集器5的开口处设置有内螺纹，样品收集部6的下端设置有与内螺纹相配合的外螺纹，螺接方便简单，提高了产品的操作效率，同时，样品收集器5内螺纹的设置，并样品收集器5的上部和三分之一处，能够使液体快速充盈，内螺纹使产品不易存留气泡，方便产品的快速操作。

在本发明的一个实施例中，进一步的，所述初分离室2的上开口处设置有外螺纹，所述上盖1上设置有与所述外螺纹相配合的内螺纹；或，所述初分离室2的上开口处设置有卡接部，所述上盖1上设置有与所述卡接部相配合的卡扣。

在该实施例中，初分离室2设置外螺纹与上盖1的内螺纹相螺接，方便上盖1的盖设，并有利于上盖1盖紧初分离室2的上开口，提高了产品的装配效率和可靠性；另外，也可以在初分离室2上设置有卡接部，上盖1上设置卡扣，使上盖1与初分离室2进行卡接，方便产品装配，提高了产品的操作效率。

在本发明的一个实施例中，进一步的，所述初分离室2、所述分离沉淀室3和所述样品富集室4的外壁面上分别设置有刻度值。

在该实施例中，初分离室2、分离沉淀室3和样品富集室4的外壁面上分别设置有刻度值，方便产品进行分离提取时溶液容量的保证，使产品能够按照程序进行标准化操作。

如图2至图4所示，在本发明的一个具体实施例中，初分离室2呈圆筒状，并在其上部设置外螺纹，同时，初分离室2与分离沉淀室3一体式连接，初分离室2容量约为450毫升，外直径设置为8厘米，高度为9厘米，上盖1也呈圆筒状，并具有与初分离室2的外螺纹相配合的内螺纹，上盖1的内直径为8厘米，高度设置在1.5厘米至2.0厘米；分离沉淀室3呈圆锥形，在与初分离室2连接处设置2.5毫米宽圆形平台，为了承载第二过滤网8，分离沉淀室3的容积约为240毫升，且分离沉淀室3上端口外直径为8.0厘米，下端口的外直径为3.0厘米，分离沉淀室3的高度为5.8厘米；样品富集室4呈圆锥形，上部与分离沉淀室3一体式连接，在二者的连接处同样设置有2.5毫米宽的圆形平台，为了承载第三过滤网9，样品富集室4的容积约为7.0毫升，样品富集室4的上端口的外直径为3.0厘米，下端口的外直径为0.8厘米，样品富集室4的高度为2.2厘米；样品收集部6呈圆筒状，且上、下两端开口，上部连接样品富集室4，下部连接带有半部内螺纹的样品收集器5，样品收集部6容积约为12毫升，外直径为0.8厘米，样品收集部6的高度约为1.5厘米；样品收集器5呈圆筒状，其上端设置开口，底部封闭，容量约为0.7毫升，样品收集器5的高度约为1.4厘米，且样品收集器5的内直径为0.8厘米，并在样品收集器5的上部设置0.5厘米高度的内螺纹51，使样品收集器呈半部螺纹式圆筒状，并与样品收集部6螺接，同时，使样品收集器5的下部内壁面设置1.0厘米的光滑内壁面为样品收集区，样品收集区的容量约为0.5毫升；支架10呈圆筒形，支架10的外径为8厘米，其侧面全封闭或部分开放，下部为开放，方便样品收集器5的拆卸，支架10的上部与初分离室2下部连接，支架10的高度大于分离沉淀室3、样品收集室和样品收集部6三者总高度之和的2到3毫米；另外，第一过滤网7用耐酸金属制成凹网，并在第一过滤网7的周边设置金属边框，第一过滤网7的网孔目数为20到30目，第一过滤网7的网区直径为8厘米，凹面高度为1.5厘米，金属边框的直径为8.4厘米；第二过滤网8用耐酸的金属或尼龙制成平网，其周边设置金属边框，金属边框的外直径为7.9厘米，第二过滤网8的网区直径为7.8厘米，第二过滤网8的网孔目数为40到50目；第三过滤网9用耐酸的金属或尼龙制成平网，其周边设置金属边框，边框外直径为2.9厘米，第三过滤网9区直径为2.8厘米，第三过滤网的网孔目数为50至70目。

在该具体实施例中，一方面，使产品设备结构简单，同时，容易对其标准化操作，提高对分离物的获得纯度，同时，方便对各过滤网使用后的清洗。

本发明提供的肝吸虫囊蚴分离设备，经过初分离室、分离沉淀室、样品富集室、样品收集器和支架的优化集成，再经过第一过滤网、第二过滤网和第三过滤网的设置，使消化后的组织消化物经过三次的过滤沉淀浓缩，代替了现有技术中的分次水洗，避免了多次洗涤时囊蚴的丢失，同时，还能有效去除组织消化后的大块杂质，可以将大小为150微米左右的囊蚴充分富集到样品收集器内，进而进行一次性镜检，使其容易按照标准化进行，减少人力物力，降低成本，提高了产品的使用效率。

图5为本发明另一实施例提供的肝吸虫囊蚴分离设备的使用方法流程图；如图5所示，本发明第二方面的实施例提供的肝吸虫囊蚴分离设备的使用方法，包括：

步骤S1，打开上盖，加入约300mL生理盐水或洁净水，扭松样品收集器，使液体完全充满分离设备底部，不留气泡，扭紧样品收集器；

步骤S2，补充生理盐水或洁净水至300mL刻度值位置，将消化后的组织消化物约300mL倒入第一过滤网内，使液体自然下落，加入完毕后液面约位于600mL刻度值位置；

步骤S3，盖紧上盖，垂直静置30分钟至40分钟，在此期间按照水平方向轻轻敲击初分离室部分2至3次，使震动下传，辅助囊蚴顺利通过第二过滤网和第三过滤网；

步骤S4，保持上盖为盖紧状态，扭下样品收集器，沉淀后的囊蚴集中收集在样品收集器的下半部分；

步骤S5，吸取全部分离物到载玻片或小平皿，低倍显微镜或解剖镜下观察囊蚴；

步骤S6，使用完毕后打开上盖，倒掉液体，对分离设备进行充分清洗，晾干后进行下次使用。

进一步的，在步骤S2后还包括步骤S201，就是在步骤S2后步骤S3前，提起第一层过滤网，弃去消化后的组织消化物残渣。

进一步的，在步骤S1中，加入溶液时，样品收集部要完全充满液体，不留气泡，可以旋转松动半部螺纹式样品收集器，使液体自然下落完成此步骤。待液体完全充满分离设备下半部分，尤其是半部螺纹式样品收集器时扭紧样品收集器。补充液体至300mL刻度值位置。

在步骤S4中，样品收集器收获到的液体体积约为500微升。

需要说明的是，在用该分离设备分离提取时，需要注意的是，(1)鱼肉等待检组织取30至50克，加入消化液量最多为300mL；消化前应去除鱼骨、鱼皮和鱼鳞等杂物，清洗干净。(2)预先加入300mL生理盐水或洁净水的目的是充盈分离装置和稀释消化物，使分离过程顺利进行，并减少分离物中杂质，有利于显微镜观察。分离设备下部的液体充盈必需完全，不留大气泡，尤其是“半部螺纹式样品收集器”部位，否则会影响囊蚴自然下沉浓缩过程。

使用本分离设备对消化后的组织消化物中肝吸虫囊蚴进行分离提取，获得的分离物纯净度高，能够一次性完成镜检，同时，用该分离设备进行操作减少了人力物力，降低了产品的操作成本，另外，省去了多步水洗的过程，使操作时间大大减小，提高了产品的分离效率，进而提高了产品的使用性能。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。