一种测定牛奶中八氯苯乙烯的方法与流程

本发明涉及一种测定牛奶中八氯苯乙烯的方法。

背景技术：

八氯苯乙烯CAS号：29082-74-4;62601-62-1，分子式：C₈Cl₈，分子量：379.7096，英文名称1,2,3,4,5-pentachloro-6-(trichloroethenyl)benzene，是一种对人体有害的持久性有机污染物物质，广泛存在于工业产品当中，含有特殊结构的多氯代芳香化合物，被美国环保局列为12种I级优先控制的PBT物质之一，可以通过居民的饮水和食物链进入人体。牛奶作为一种高蛋白食品，是人们获取蛋白质的主要来源之一。当前由于工业污染的不断加剧，在自然环境里面存在大量的八氯苯乙烯。通过牧草、饮水等环节八氯苯乙烯都可以迁移到人体里面，并不断的集聚。另外，在一些包装材料里面也可能含有八氯苯乙烯，当这些包装材料用来制作盛装牛奶的盒子和瓶子的时候，八氯苯乙烯会渗入牛奶当中，进一步进入人体内。八氯苯乙烯的长期积累会对人体造成严重伤害。过量的八氯苯乙烯可以造成慢性中毒，造成畸胎，肿瘤和免疫功能下降，最严重的是生殖系统障碍，造成男性的精子减少，雄性退化，乃至男性不育症的高发。育龄妇女长期受该物质的污染，会使受孕胎儿畸形的可能性大大增加，使胎儿的五官、肢体或性器官的局部畸形。另外透过食物链放大与生物体转化后的该物质，其可能对于生态系统与我们自己的健康产生更大的杀伤力。而目前对于该物质的检测方法研究的很少，为了保证广大居民牛奶饮用安全，建立一种有效简单的测定牛奶中八氯苯乙烯的方法特别的重要。

技术实现要素：

本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供了一种测定牛奶中八氯苯乙烯的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

一种测定牛奶中八氯苯乙烯的方法，包括如下步骤：

（1）样品的预处理：先用乙腈振荡提取牛奶样品，然后向混合液中加入盐进行盐析，离心，取上层乙腈提取液；

（2）步骤（1）的乙腈提取液用膜过滤后，上高效液相色谱仪进行检测，检测波长为220-260nm，色谱柱为C₁₈柱，流动相为三氟乙酸的水溶液和乙腈。

优选地，步骤（1）中所述盐为氯化钠与硫酸镁的混合物。

更优选地，所述氯化钠与硫酸镁的质量比为1:1。

振荡提取时，优选的牛奶样品与乙腈的体积比为1:1。

盐析时，按浓度为0.05-0.15g/ml向混合液中加入盐，盐的浓度优选为0.1g/ml。

优选地，步骤（2）中所述三氟乙酸的水溶液的体积百分比浓度为0.3%，pH值为3～4。

优选地，步骤（2）中所述三氟乙酸的水溶液和乙腈的体积比为90:10。

本发明的优点

该方法样品处理简单，有机溶剂使用量少，符合绿色化学的理念，仪器设备要求相对较低，适合在基层检测部门推广应用，用于大量牛奶样品中八氯苯乙烯样品的筛选工作。

附图说明

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1是100μg/L加标浓度的色谱图；

图2是八氯苯乙烯在不同波长下的吸收曲线。

具体实施方式

以下结合附图对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1

1、样品前处理条件

量取5.0ml牛奶样品，装入15ml具塞离心管中，加入5ml乙腈，涡旋30s，放入振荡仪中，剧烈振荡5min。振荡完成之后加入0.5g氯化钠和0.5g无水硫酸镁，再振荡5min。8000rpm离心5min，离心完之后，用一次性吸管吸取上层乙腈提取液于另一个离心管中。用一次性注射器吸取1-1.5ml提取液，过0.22μm复合滤膜过滤头到进样瓶中，上机测定。

2、仪器条件

高效液相色谱仪（waters2695）-二级阵列管检测器，色谱柱Xcharge C₁₈ column (250mm×4.6mm, 5 µm,100A)，流动相为水和乙腈，水：乙腈（v：v，90:10），其中，水含有0.3%的三氟乙酸（v:v），使用前用浓氨水调节pH值到3-4。进样体积为20ul，色谱柱柱温为30±5℃。

3、最大吸收波长的确定

设定检测波长为200-400nm进行扫场实验，优化出最佳的检测波长，如图2所示。实验结果表明，在220-260nm具有较佳的吸收，其中检测波长为233nm时，目标检测化合物八氯苯乙烯有最大吸收，此时检测方法的灵敏度最好。在该方法中，最后选定检测器的波长为233nm，100μg/L加标浓度的色谱图如图1所示。

4、方法的准确度、精密度和灵敏度

向空白牛奶样品中加入八氯苯乙烯标准品。使用上述样品前处理方法处理之后，上机测定，测定加标回收率、相对标准偏差、最低检出限和最低定量限等数据。该方法的准确度由加标回收率来体现，加标实验测得回收率为70-81%。准确度由相对标准偏差（RSD）来体现，测得该方法对牛奶样品检测RSD小于15%。灵敏度由最低检出限和最低定量限来体现。最低检出限（LOD）按照3倍性噪比计算，最低定量限（LOQ）按照10倍性噪比计算：该方法的最低检出限为10 μg/ml，最低定量限为33μg/ml。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。