1.一种一枝蒿提取物的质量控制方法,其特征在于该控制方法采用紫外分光光度法,高效液相法进行一枝蒿提取物中总黄酮和蒙花苷的含量测定,具体操作按下列步骤进行:
紫外分光光度法:
a. 对照品溶液的制备:
取蒙花苷精密称定,加甲醇制成每1mL含蒙花苷20-30 µg的溶液;
b. 标准曲线的制备:
量取对照品溶液2mL、4mL、6mL、8mL、10mL分别置10mL量瓶中,用甲醇稀释到10mL,以甲醇试剂为空白,于紫外分光光度法在320-330nm波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线;
c. 供试品溶液的制备与测定法:
取一枝蒿提取物3.0-10.0mg,精密称定,置10mL量瓶中,用甲醇超声提取20分钟,室温定容至10mL,从中再精密取0.5mL置10mL量瓶中再用甲醇稀释到10mL,测定其吸光度,根据吸光度值,从回归方程中求出供试品中一枝蒿提取物总黄酮的含量;
高效液相法:
d、色谱条件与系统适应性:
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,0.2%甲酸溶液为流动相B,按时间0,8,25,50,55,60;流动相A 10,13.5,19,29,80,80;流动相B 90,86.5,81,71,20,20进行梯度洗脱,流速:1mL/min,检测波长:320-330 nm,柱温:30℃,进样量:10μL,理论塔板数按一蒙花苷峰计算应不低于4000;
e、对照品溶液的制备:
取蒙花苷对照品,精密称定,加甲醇制成每1mL含蒙花苷20-30 µg的溶液;
f、供试品溶液的制备:
取一枝蒿提取物20-50 mg,精密称定,置25mL量瓶中,加入甲醇20mL超声提取10分钟,室温定容至25mL,滤过,取续滤液用微孔滤膜滤过;
d. 测定法:
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10μL,分别注入液相色谱仪,即得到一枝蒿提取物蒙花苷含量。