本发明涉及食品领域。具体地，本发明涉及生牛乳中明胶的检测方法。
背景技术：
：明胶是由动物的皮肤、韧带、肌腱中的胶原经酸或碱部分水解或在水中煮沸而产生，无色或微黄透明的脆片或粗粉状，在35～40℃水中溶胀形成凝胶(含水为自重5～10倍)。广泛用于食品和制作黏合剂、感光底片、滤光片等，且价格便宜、易得。明胶溶于热水后，掺入牛乳中可增加密度和蛋白含量，使之变得粘稠，再加水可增加乳的体积。但是，过量使用明胶会对身体造成危害。然而，目前生牛乳中明胶的检测方法仍有待改进。技术实现要素：本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本发明提出了生牛乳中明胶的检测方法。本发明的方法能够准确地检测出生牛乳中的明胶含量，且操作简单、快速、安全。需要说明的是，本发明是基于发明人的下列发现而完成的：现有技术中，利用明胶能够与苦味酸反应产生沉淀的特性，以实现对明胶的检测。此外，生牛乳中含有蛋白，大多数技术采用预先利用硝酸汞沉淀蛋白，以防止其对后续沉淀的观察造成干扰。但是，硝酸汞作为一种重金属，对于环境会造成污染。有鉴于此，发明人经过大量实验发现，三氯乙酸沉淀乳蛋白的效果最好。由此，根据本发明的生牛乳中明胶的检测方法能够准确地检测出生牛乳中的明胶含量，且操作简单、快速、安全。为此，本发明提出了一种生牛乳中明胶的检测方法。根据本发明的实施例，所述生牛乳中明胶的检测方法包括：将所述生牛乳与三氯乙酸溶液进行混合，并将所得到的混合液进行过滤，收集滤液；将所述滤液与苦味酸溶液接触，观察所得到的反应液的变化；基于所述反应液的变化，确定所述生牛乳中是否含有明胶，其中，基于1mL所述生牛乳，所述三氯乙酸溶液的用量为1mL。发明人在众多沉淀蛋白的试剂中发现，三氯乙酸沉淀蛋白的效果最好。其他的沉淀蛋白试剂的效果不佳，例如硫酸铵使蛋白质在水中的溶解度降低，会产生“盐析”现象，使蛋白质溶解；乙酸铅、乙酸锌是重金属盐，易对环境造成污染，会使蛋白质变性沉淀，不能再溶解；硫酸铜、亚铁氰化钾溶液有颜色，对后续检测造成干扰；醇类试剂的沉淀效果一般，滤液较少，且容易有乳蛋白残留，影响检测准确性；而三氯乙酸不会改变蛋白质性质，能够很好的将蛋白质沉淀。进一步地，发明人发现，生牛乳和三氯乙酸溶液的体积关系显著影响检测结果的准确性。经过深入研究发现，所述生牛乳与所述三氯乙酸溶液的体积相同时，检测结果的准确性较高。若三氯乙酸溶液的用量过少，沉淀不完全，残存的乳蛋白会对后续检测造成影响，容易造成误判，导致含量结果偏高；若三氯乙酸溶液的用量过多，会增加反应体系的量，导致蛋白质产生蓄积沉淀，反应液颜色变化不明显，容易造成误判，且造成试剂浪费。由此，根据本发明的生牛乳中明胶的检测方法能够准确地检测出生牛乳中的明胶含量，且操作简单、快速、安全。需要说明的是，本发明所使用的术语“反应液的变化”应作广义理解，例如是反应液颜色的变化、是否出现浑浊或者浑浊程度等。根据本发明的实施例，前面所述生牛乳中明胶的检测方法还可以具有下列附加技术特征：根据本发明的实施例，所述反应液出现浑浊现象，是所述生牛乳中含有不少于0.2质量％明胶的指示；或所述反应液并未出现浑浊现象，是所述生牛乳中含有少于0.2质量％明胶的指示。发明人经过大量实验得到上述反应液现象对应的生牛乳中明胶含量。由此，根据本发明的生牛乳中明胶的检测方法能够准确地检测出生牛乳中的明胶含量，且操作简单、快速、安全。根据本发明的实施例，所述三氯乙酸溶液浓度为200g/L。发明人经过大量实验发现，三氯乙酸溶液浓度会影响检测结果准确性，当三氯乙酸溶液浓度为200g/L时，检测结果准确性较高。若三氯乙酸溶液的浓度过高，造成浪费，提高了成本；若三氯乙酸的浓度过低，沉淀不完全，残存的乳蛋白会对后续检测造成影响，容易造成误判，导致含量结果偏高。由此，根据本发明的生牛乳中明胶的检测方法能够准确地检测出生牛乳中的明胶含量，且操作简单、快速、安全。根据本发明的实施例，所述苦味酸溶液浓度为20g/L。由此，根据本发明的生牛乳中明胶的检测方法能够准确地检测出生牛乳中的明胶含量，且操作简单、快速、安全。根据本发明的实施例，将2mL所述滤液与2mL所述苦味酸溶液接触。发明人发现，若滤液用量过多，与苦味酸反应不充分，导致检测结果偏低；若滤液用量过少，苦味酸的颜色掩盖滤液的颜色，容易出现假阳性现象，导致检测结果偏高。由此，根据本发明的生牛乳中明胶的检测方法能够准确地检测出生牛乳中的明胶含量，且操作简单、快速、安全。根据本发明的实施例，所述方法包括：向所述滤液中加入所述苦味酸溶液并混匀，观察所述反应液的变化；基于下列指标，确定所述生牛乳中明胶含量：所述反应液不透明，是所述生牛乳中含有大于0.5质量％明胶的指示；或所述反应液呈半透明状(即部分光线能透过溶液，略有浑浊)，是所述生牛乳中含有0.2～0.5质量％明胶的指示；或所述反应液呈透明状，是所述生牛乳中含有少于0.2质量％明胶的指示。发明人发现，苦味酸和滤液混匀后，所得到的沉淀会均匀分散于整个反应体系，通过观察反应液的透明程度，可以对生牛乳中明胶含量进行判定。由此，根据本发明的生牛乳中明胶的检测方法能够准确地检测出生牛乳中的明胶含量，且操作简单、快速、安全。另外，本发明提出了一种生牛乳中明胶的检测方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：(1)取5mL生牛乳，放入50mL三角瓶中，加入200g/L三氯乙酸溶液5mL，混合均匀，静置3分钟后，用定量滤纸过滤，收集滤液；(2)取2mL所述滤液于试管中，然后沿所述试管内壁缓慢加入20g/L苦味酸溶液2mL，混合均匀，观察所述反应液的变化；(3)基于下列指标，确定所述生牛乳中明胶含量：所述反应液呈不透明状，是所述生牛乳中含有大于0.5质量％明胶的指示；或所述反应液呈半透明状，是所述生牛乳中含有0.2～0.5质量％明胶的指示；或所述反应液呈透明状，是所述生牛乳中含有少于0.2质量％明胶的指示。由此，根据本发明的生牛乳中明胶的检测方法能够准确地检测出生牛乳中的明胶含量，且操作简单、快速、安全。本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。具体实施方式下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。苦味酸(2,4,6-三硝基苯酚)溶液：称取固体苦味酸于烧杯中，用冷却的蒸馏水定容至后，将定容好的溶液倒入烧杯中，在热水浴中加热溶解，然后将液体冷却，待结晶析出后将上清液倒入棕色试剂瓶中，避光保存。实施例1在该实施例中，按照下列方法对生牛乳中明胶进行检测：1、取5mL生牛乳，放入干净干燥的50mL三角瓶中，加入200g/L三氯乙酸溶液5mL，边加边摇匀，静置3分钟后，用定量滤纸过滤，收集滤液。2、取2.0mL滤液于试管中，然后沿试管内壁加入浓度为20g/L的苦味酸溶液2.0mL(使用一次性吸管或刻度吸管)，混合均匀，得到反应液。3、迎光(或在黑色背景下)上下左右移动不同方位，观察反应液的变化，结果如表1所示。表1生牛乳中明胶的判定结果生牛乳中明胶含量反应液现象＜0.2％清亮透明0.2～0.5％轻微浑浊，半透明＞0.5％浑浊，不透明实施例2准确性分析1、阴性样品制备：取不含明胶的生牛乳做为阴性对照样品。2、阳性样品制备：向不含明胶的生牛乳中加入不同量明胶，制成明胶含量分别为0.15％、0.20％、0.25％、0.50％、1.00％、2.00％的梯度样品。3、分别按照实施例1的方法测定阳性样品中明胶含量，检测结果如表2所示。可以看出，本发明的方法能够准确地测定出明胶含量。表2准确性分析明胶含量(％)反应液现象0.00清亮透明0.15清亮透明0.20(检出限)轻微浑浊，半透明0.25轻微浑浊，半透明0.50轻微浑浊，半透明1.00浑浊，不透明2.00浑浊，不透明实施例3稳定性分析随机选取不同来源的生牛乳，按照实施例2的方法测定阳性样品中的明胶含量，结果如表3所示。结果表明，本发明的方法能够准确地检测明胶含量。表3稳定性分析样品明胶含量(％)反应液现象10.00清亮透明20.15清亮透明30.20轻微浑浊，半透明40.25轻微浑浊，半透明50.50轻微浑浊，半透明61.00浑浊，不透明72.00浑浊，不透明80.20轻微浑浊，半透明90.25轻微浑浊，半透明100.50轻微浑浊，半透明对比例1按照实施例2的方法，采用实施例1的方法测定不同阳性样品中的明胶含量，区别在于，三氯乙酸溶液的用量为10mL。结果如表4所示。三氯乙酸溶液的用量为10mL时，会增加反应体系的量，导致蛋白质产生蓄积沉淀，反应液颜色变化不明显，容易造成误判。表4准确性分析明胶含量(％)反应液现象0.00清亮透明0.15清亮透明0.20清亮透明0.25清亮透明0.50轻微浑浊，半透明1.00轻微浑浊，半透明2.00浑浊，不透明对比例2按照实施例2的方法，采用实施例1的方法测定不同阳性样品中的明胶含量，区别在于，三氯乙酸溶液的浓度为150g/L。实验发现，三氯乙酸浓度过低，滤液中仍残留少量乳蛋白，导致其出现浑浊，对后续检测造成干扰。对比例3按照实施例2的方法，采用实施例1的方法测定不同阳性样品中的明胶含量，区别在于，在实施例1的步骤2中，取5mL滤液于试管中。结果如表5所示。滤液添加量过多会使反应现象不明显，造成假阴性，容易出现误判。表5准确性分析明胶含量(％)反应液现象0.00清亮透明0.15清亮透明0.20清亮透明0.25清亮透明0.50轻微浑浊，半透明1.00轻微浑浊，半透明2.00浑浊，不透明在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。当前第1页1 2 3