一种基于荧光传感阵列的快速筛查早中晚期乳腺癌技术的制作方法

本发明涉及的是乳腺癌技术领域，具体的说是一种基于荧光传感器阵列的快速筛查早中晚期乳腺癌技术。

背景技术：

女性乳腺是由皮肤、纤维组织、乳腺腺体和脂肪组成的，乳腺癌是发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。乳腺并不是维持人体生命活动的重要器官，原位乳腺癌并不致命；但由于乳腺癌细胞丧失了正常细胞的特性，细胞之间连接松散，容易脱落。癌细胞一旦脱落，游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身，形成转移，危及生命。目前乳腺癌已成为威胁女性身心健康的常见肿瘤。

全球乳腺癌发病率自20世纪70年代末开始一直呈上升趋势。美国8名妇女一生中就会有1人患乳腺癌。中国不是乳腺癌的高发国家，但不宜乐观，近年我国乳腺癌发病率的增长速度却高出高发国家1～2个百分点。据国家癌症中心和卫生部疾病预防控制局2012年公布的2009年乳腺癌发病数据显示：全国肿瘤登记地区乳腺癌发病率位居女性恶性肿瘤的第1位，女性乳腺癌发病率(粗率)全国合计为42.55/10万，城市为51.91/10万，农村为23.12/10万。乳腺癌已成为当前社会的重大公共卫生问题。自20世纪90年代全球乳腺癌死亡率呈现出下降趋势；究其原因，一是乳腺癌筛查工作的开展，使早期病例的比例增加；二是乳腺癌综合治疗的开展，提高了疗效。乳腺癌已成为疗效最佳的实体肿瘤之一。

现有的乳腺癌筛查一般采用的是X射线钼靶成像技术、CT、核磁共振、多普勒彩超、微创活检法等等；X射线钼靶成像技术在检查时，X射线对人体辐射伤害较大；CT、核磁共振、多普勒彩超这三种技术的缺点是：仪器设备昂贵并且需要专业的技术人员操作，检测成本高；微创活检法的缺点是：病人需要忍受穿刺的巨大痛苦，检测时间长；以上技术的共同缺点是每次只能检测一个样本。

技术实现要素：

本发明的目的在于针对现有技术的缺陷和不足，提供了一种基于荧光传感器阵列的快速筛查早中晚期乳腺癌技术，可以同时检测多个血清样本，需要的血清样本量少，且对人体无辐射伤害，检测时间短，成本低，且无需专业技术人员。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种基于荧光传感器阵列的快速筛查早中晚期乳腺癌技术，它的方法是：首先制备由六种新型双配体金纳米簇组成的荧光阵列传感器，然后将早中晚期乳腺癌病人及健康人血清分别各自加入到制备的阵列传感器中孵育2h，最后通过凝胶成像仪采集荧光差异信号，输入SPSS 16.0处理得到不同样本的三维阵列图像，最终得到早中晚期乳腺癌及健康人的阵列区分指纹图谱。

进一步，所述荧光阵列传感器的制备方法是：350μL 1M NaOH加入到2mL 10mM MUA溶液中，然后，150μL 10mM HAuCl4、2.5mL0.03g/mL异亮氨酸(Iso)(苏氨酸(Thr)、丝氨酸(Ser)、脯氨酸(Pro)、甲硫氨酸(Met)、丙氨酸(Ala))加入到上述混合溶液，混合溶液在室温下静置2h，得到六种橙红色荧光双配体功能化的金纳米簇，用PBS(pH＝3.4)溶液分别将其稀释20倍，获得AuNCs(1/20)，各取200μL加入到96孔板中，得到荧光阵列传感器。

进一步，所述早中晚期乳腺癌及健康人的阵列区分方法是：96孔板中，4μL不同阶段乳腺癌患者血清(早期、中期、晚期)和健康人血清分别加入到200μL六种AuNCs(1/20)中，在室温下孵育2h；随后，通过凝胶成像仪获得荧光强度差异变化图像，在统计分析软件SPSS 16.0中使用线性判别分析对荧光数据进行处理，得到早中晚期乳腺癌及健康人的三维阵列区分指纹图谱并且与医院的检测结果一致。

本发明的有益效果为：可以同时检测多个血清样本，需要的血清样本量少，且对人体无辐射伤害，检测时间短，成本低，且无需专业技术人员。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本发明的不同阶段乳腺癌患者血清(早、中、晚)和健康血清基于阵列传感，在95％的置信度下，利用LDA获得的荧光响应模式标准图；

图2是本发明的乳腺钼靶x线造影(A)早期、(B)中期、(C)晚期的扫描图；

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及具体实施方式，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施方式仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本具体实施方式采用以下技术方案：

一种基于荧光传感器阵列的快速筛查早中晚期乳腺癌技术，它的方法是：首先制备由六种新型双配体金纳米簇组成的荧光阵列传感器，然后将早中晚期乳腺癌病人及健康人血清分别各自加入到制备的阵列传感器中孵育2h，最后通过凝胶成像仪采集荧光差异信号，输入SPSS 16.0处理得到不同样本的三维阵列图像，最终得到早中晚期乳腺癌及健康人的阵列区分指纹图谱。

所述荧光阵列传感器的制备方法是：350μL 1M NaOH加入到2mL 10mM MUA溶液中，然后，150μL 10mM HAuCl4、2.5mL0.03g/mL异亮氨酸(Iso)(苏氨酸(Thr)、丝氨酸(Ser)、脯氨酸(Pro)、甲硫氨酸(Met)、丙氨酸(Ala))加入到上述混合溶液，混合溶液在室温下静置2h，得到六种橙红色荧光双配体功能化的金纳米簇，用PBS(pH＝3.4)溶液分别将其稀释20倍，获得AuNCs(1/20)，各取200μL加入到96孔板中，得到荧光阵列传感器。

所述早中晚期乳腺癌及健康人的阵列区分方法是：96孔板中，4μL不同阶段乳腺癌患者血清(早期、中期、晚期)和健康人血清分别加入到200μL六种AuNCs(1/20)中，在室温下孵育2h；随后，通过凝胶成像仪获得荧光强度差异变化图像，在统计分析软件SPSS16.0中使用线性判别分析对荧光数据进行处理，得到早中晚期乳腺癌及健康人的三维阵列区分指纹图谱(参看图1)并且与医院的检测结果(参看图2)一致。

本具体实施方式的优点：可以同时检测多个血清样本，需要的血清样本量少，且对人体无辐射伤害，检测时间短，成本低，且无需专业技术人员。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。