一种研究不同抗氧化剂复合使用在水包油乳状液中相互作用机理的方法与流程

本发明涉及一种研究不同抗氧化剂复合使用在水包油乳状液中相互作用机理的方法。
背景技术：
：为了改善乳状液脂质的氧化稳定性，除加入单一抗氧化剂外，往往还会尝试性地将不同的抗氧化剂进行复合使用而达到抗氧化活性协同增效效应。最常见的复合抗氧化剂协同增效机制是自由基转移机制，作用机理用公式表示为：rh+roo·→r+rooh，lh+r→l·+rh；其中，rh为低位阻或主抗氧剂，lh为较高位阻或次抗氧剂。rh可以有效或更快地捕获氧化自由基或过氧自由基，发挥高抗氧化活性而被消耗，同时，lh能够提供氢原子，使高活性的抗氧剂再生，使之保持长久的抗氧化效能。目前，许多研究已经证明了这一作用机理。目前评价不同抗氧化剂之间相互作用的模型有很多，常用的包括orac、dpph自由基清除、frap和β-胡萝卜素-亚油酸氧化法。但是采用这些模型经常会得到不一致的结果。另外，由于这些模型都是均一体系，而真实乳状液是一个复杂体系，其中常有一些其他的物理属性会影响抗氧化物质之间的作用，比如油相和水相及乳化剂的存在会影响抗氧化物质的分布，从而影响水溶性和油溶性抗氧化物质在油水界面的作用。因此在这些模型当中检测到的抗氧化物质之间的作用并不能如实反映它们在乳状液中的情况，目前迫切需要发展一种新的检测方法。目前尚未见有关没食子酸酯与α-生育酚在乳状液中的相互作用的报道，因此在明确没食子酸酯在乳状液中分布的基础上，有必要进一步对它们之间的相互作用方式及其机理进行评价。技术实现要素：本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种研究不同抗氧化剂复合使用在水包油乳状液中相互作用机理的方法。本发明采用的技术方案为：一种研究不同抗氧化剂复合使用在水包油乳状液中相互作用机理的方法，其特征在于，包含如下步骤：s1.计算两种抗氧化剂的相互作用指数；s2.测定抗氧化剂在乳状液中的分布。s3.利用荧光猝灭法判断不同抗氧化剂之间作用类型及距离。s4.利用循环伏安法测定抗氧化物质氧化还原电势，从热力学角度验证抗氧化剂之间给电子方向。s1中利用氢过氧化物和己醛的lagtime计算相互作用指数。s2中采用直接离心法得到乳状液水相，测定其中抗氧化剂的含量。s2中利用16-arn2+与抗氧化剂的反应速率kobs间接反映抗氧化剂在界面层的分布情况。s3中根据stern-volmer方程、位点结合模型和lineweawer-burk双倒数曲线方程，获得不同抗氧化剂结合的结合类型、结合位点数和结合常数等参数，通过这些参数判断不同抗氧化剂之间的相互作用情况。有益效果：该发明提供了一种研究不同抗氧化剂复合使用在水包油乳状液中相互作用机理的方法。附图说明图1为单一抗氧化剂对乳状液过氧化值(a)和己醛(b)的影响以及复合抗氧化剂对乳状液过氧化值(c)和己醛(d)的影响。图2为没食子酸及其烷基酯与α-生育酚在乳状液中的相互作用指数。图3为复合添加没食子酸及其烷基酯与α-生育酚乳状液水相中抗氧化剂的分布。图4为乳状液中r0(a)，r3(b)，r8(c)，r12(d)，r18(e)对α-生育酚的荧光猝灭图。图5为没食子酸及其烷基酯对α-生育酚的荧光猝灭stern-volmer图。图6为log[(f0–f)/f]与lg[q]的关系图。图7为没食子酸及其烷基酯与α-生育酚在乙腈(a)，pbs(b)和tween20胶束(c)三种体系中的循环伏安曲线。具体实施方案以下结合具体实例对本发明的具体实施方案作进一步详细说明1.相互作用指数计算将抗氧化剂a和抗氧化剂b按摩尔质量浓度1:1加入乳状液中，定期测定乳状液中脂质氢过氧化物和己醛的含量，并比较与单独添加a或b时乳状液的氢过氧化物和己醛的lagtime，计算a与b的相互作用指数。2.复合抗氧化剂在乳状液中的分布情况水相中的分布:取适量乳状液于试管中，加入一定浓度的a+b，加入edta溶液抑制氧化，低温高速离心2次，保留水相待测。界面层的分布：取适量的乳状液，加入一定浓度的a+b混合均匀，依次加入16-arn2+乙腈溶液和ned乙醇溶液反应，每隔1min测定反应液在572nm的吸光度值，直至吸光度值不变为止，根据吸光度值随时间的变化得到二级反应速率常数kobs。3.荧光猝灭法分析不同抗氧化剂之间相互作用制备乳状液，加入edta溶液抑制氧化，添加一定浓度b混合均匀作为储备液；在激发波长295nm条件下扫描得储备液的荧光光谱；取适量储备液于比色皿中，依次添加固定体积的a溶液，每添加一次涡旋混合，荧光分光光度计扫描，直到乳状液荧光不变化为止。4.循环伏安法测定抗氧化剂的氧化还原电位分别配制一定浓度的a、b乙腈溶液，pbs溶液及tween20溶液，添加bu4npf6作为相对应的支持电解质。移取适量抗氧化剂溶液至电解池中待测，以玻璃碳为工作电极，饱和甘汞电极作参比电极，铂丝为辅助电极。连接好电路，打开电化学工作站，选择1.5v和-0.5v分别作为起始电位与终止电位，灵敏度为10-4a/v，0.1v/s作为扫描速度，25℃测溶液的循环伏安曲线。没食子酸及其酯化物和α-生育酚的氧化还原电位测定参照wilson等[101]的方法，首先分别配制2mm浓度的没食子酸及其酯化合物、α-生育酚的乙腈溶液，另外配制没食子酸、trolox的pbs溶液(10mm，ph7.0)及tween20溶液(1％，10mmpbs)。0.5mbu4npf6添加到溶液中(乙腈、tween20)作为相对应的支持电解质。移取适量上述各个溶液至电解池中待测，以玻璃碳为工作电极，饱和甘汞电极作参比电极，铂丝为辅助电极。连接好电路，打开电化学工作站，选择1.5v和-0.5v分别作为起始电位与终止电位，灵敏度为10-4a/v，0.1v/s作为扫描速度，25℃测溶液的循环伏安曲线，从热力学角度判断两者之间给电子方向。实施案例上述抗氧化剂a分别为没食子酸(r0)、没食子酸丙酯(r3)、没食子酸辛酯(r8)、没食子酸月桂酯(r12)、没食子酸十八酯(r18)，b为α-生育酚(toh)。1.乳状液的制备配制1l10mm的磷酸盐缓冲液(ph＝7.0)，加入0.1gtween20。取1w％玉米油溶于99w％pbs缓冲液，高速分散搅拌2min得到粗乳液，用高压均质机在40mpa均质两次得到乳状液，最后加入nan3(0.02％,w/v)作为抑菌剂。2.抗氧化剂相互作用指数的计算分别取1mmolr0、r3、r8、r12、r18与1mmol的α-生育酚混合溶于100ml的甲醇溶液中，取适量加入乳状液中，使其在乳状液中的最终浓度为30μm，充分搅拌使其混合均匀。取5ml转移至顶空瓶中，密封，25℃避光保存，每天测定乳状液的过氧化值和己醛含量。2.1乳状液过氧化值的测定fe2+储备液：等体积0.132mbacl溶液和0.144mfeso4·7h2o溶液混合，离心取上清液，用棕色容量瓶密封保存；fe3+标准贮备溶液：4.9769gfeso4·7h2o溶液溶于50ml去离子水中，加入100ml浓h2so4，加温溶解后滴入20％kmno4溶液，直至溶液红色不褪色且保持30s不变，定容至1l，摇匀，储备液每毫升含100μgfe3+。取适量fe3+标准贮备溶液用甲醇：正丁醇(2:1，v/v)混合液定容稀释10倍即得到fe3+标准工作液。fe3+标准曲线的制作：分别移取0、10、20、40、80、100、200、400μl的fe3+标准工作溶液于10ml试管中，分别加入20μl3.94m硫氰酸钾溶液，用甲醇：正丁醇(2:1，v/v)混合溶液定容至5ml。涡旋混合10s，室温避光静置20min，甲醇正丁醇混合液作为空白对照，在510nm波长下测定吸光度值。重复三次测定，以吸光度平均值对相应fe3+的含量(μg)绘制标准曲线。乳状液的过氧化值的测定：取1ml乳状液，加入5ml异辛烷：异丙醇(2:1，v/v)混合溶液，涡旋混合，再以5000r/min离心5min。取1ml上清液，加入20μl硫氰酸钾和20μl氯化亚铁溶液，再用甲醇：正丁醇(2:1，v/v)混合溶液定容至5ml，涡旋混合10s，室温下避光静置20min，以甲醇正丁醇混合溶液作空白对照，在510nm波长下测定吸光度值。计算公式：pov＝(a×n×0.5×k)/(55.86×m×2)×1000式中：pov为样品的过氧化值，meq/kg；a为测得样品液的吸光度；k为测得fe3+标准曲线的斜率；55.86为fe的原子量；m样品中油脂的质量，g；0.5为o/fe的摩尔比；n为吸取上清液的体积分数；2为氧换算为过氧化值的系数。计算结果精确至0.01。2.2乳状液己醛含量的测定己醛标准曲线的制作：配制含0.001mol己醛的标准液，分别稀释成含己醛0.002，0.005，0.01，0.02，0.04，0.06，0.08，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8μmol的梯度标准液，顶空进样gc-ms测定己醛含量，以己醛浓度为横坐标，己醛峰面积为纵坐标做标准曲线。样品测定：隔天取分装的装有乳状液的顶空瓶进样。顶空进样条件：炉温65℃；定量环温度110℃；传输线温度130℃；gc平衡时间13min；进样瓶加热平衡时间10min；顶空瓶瓶内压10psi；瓶加压时间0.5min；填充定量环时间0.5min；定量环平衡时间0.5min；进样时间1min。gc-ms工作条件：色谱柱：agilenthp-5ms(30m×250μm×0.25μm)；分流比：7:1；流速1ml/min；柱温65℃；传输线温度280℃；离子源温度230℃；四级杆温度150℃。2.3没食子酸及其烷基酯与α-生育酚的相互作用指数计算氧化产物从少量被检测到转变成大量产生的拐点对应的时间就是lagtime(p≤0.05)，以e表示。相互作用指数q＝实验测得值/理论期望值＝[(e空白-e(a+b)]/{[e空白-ea]+[e空白-eb]}，其中，a和b分别代表没食子酸及其烷基酯和α-生育酚，a+b表示两者复合使用，空白组指不添加抗氧化剂。若q＝1，没食子酸丙酯与α-生育酚表现为相加作用；q>1，为协同作用，反之，q<1，为拮抗作用3.没食子酸及其烷基酯与α-生育酚复合使用在水相中的分布取适量乳状液于试管中，分别加入100μm的没食子酸及其烷基酯与α-生育酚的混合溶液，加入200μmedta溶液抑制氧化，4℃下15000r/min高速离心1h，取下层乳清再次离心30min，小心吸取下层水液，合并两次水液过0.22μm有机滤膜，即为待测液。液相色谱条件如表格所示：4.没食子酸及其烷基酯与α-生育酚复合使用在界面层的分布取1ml现配的乳状液，加入20μl30mm的没食子酸及其烷基酯与α-生育酚的混合溶液，涡旋1min，超声处理30min得到含抗氧化剂的乳状液；取10μl0.017m的16-arn2+乙腈溶液与30μl乳状液混合，再与1ml0.01m的ned乙醇溶液反应，没食子酸及其烷基酯，16-arn2+和ned的终浓度分别为30μm，170μm和0.01m，每隔1min测定反应液在572nm的吸光度值，直至吸光度值不变为止，根据吸光度值随时间的变化得到二级反应速率常数kobs。5.荧光猝灭法分析没食子酸及其烷基酯与α-生育酚的相互作用制备乳状液，加入50μl200μm的edta溶液抑制氧化，添加一定量α-生育酚甲醇溶液使其终浓度为200μm，室温下振荡混合1h作为储备液；在激发波长295nm条件下扫描得到储备液的荧光光谱；取2-3ml储备液于比色皿中，加入0.1m没食子酸及其烷基酯溶液，每次添加5μl，涡旋混合2min，荧光分光光度计扫描得猝灭光谱。以α-生育酚为荧光剂，没食子酸及其烷基酯为荧光猝灭剂得到激发波长295nm下的荧光光谱，根据stern-volmer方程、位点结合模型，获得没食子酸及其烷基酯与α-生育酚结合的结合类型、结合位点数和结合常数等参数，通过这些参数判断乳状液中没食子酸酯与α-生育酚的相互作用情况。6.循环伏安法测定没食子酸及其烷基酯、α-生育酚的氧化还原电位具体实施方式5中，a、b乙腈浓度为2mm，pbs溶液浓度为10mm，tween20溶液浓度为10mm,bu4npf6的浓度为0.5m。结果如下：1.没食子酸及其烷基酯和α-生育酚复合使用对乳状液氧化及其产物测定由图1a，c可知，与空白组对照没食子酸及其烷基酯都提高了乳状液的氧化稳定性，比较乳状液氧化过程中氢过氧化物和己醛的生成滞后时间长短，得出抗氧化强弱顺序为：r3>r12>r8>r0>r18。分别比较图1a与c，b与d，与添加单一抗氧化剂的乳液相比，30μm没食子酸及其烷基酯和30μmα-生育酚的复合使用，乳状液的过氧化值和己醛含量上升速率减慢。其中，没食子酸与没食子酸十八酯与α-生育酚复合使用(t-r0，t-r18)，氢过氧化物和己醛含量从开始(第0天)到显著上升的时间点(也叫“lagtime”)略微增长了1-2天，没食子酸辛酯和没食子酸月桂酯与α-生育酚复合使用(t-r8，t-r12)，氢过氧化物和己醛的lagtime约增长了4-5天，没食子酸丙酯r3与α-生育酚复合使用(t-r3)，氢过氧化物和己醛的lagtime增长最多，约6-7天。可见，没食子酸丙酯与α-生育酚的复合使用对乳液氧化稳定性提高的最多，即两者在乳液中复合使用的抗氧化效率显著高于单独添加的情形。相互作用指数大于1的有r3，r8和r12，其中，r3值最大，r8和r12相当，可见，这三类酯与α-生育酚在乳液中是协同作用；相互作用指数小于1的是没食子酸十八酯，约0.6左右，可见，没食子酸十八酯与α-生育酚在乳液中是拮抗作用；没食子酸r0的相互作用指数在1.0左右，表明，没食子酸在乳液中与α-生育酚相互作用表现为相加作用，还可能表现为拮抗作用。2.没食子酸及其烷基酯与α-生育酚在乳状液中的分布各抗氧化剂在水相中的含量分别为r093.7363μm，r320.5842μm，r821.6723μm，r1225.6923μm，r183.8578μm和α-生育酚0.11095μm。与添加单一抗氧化剂相比较，没食子酸及其烷基酯和α-生育酚在乳液水相中的分布不产生影响，没食子酸90％以上分布在水相中，没食子酸丙酯，辛酯，月桂酯在水相中含量约20％-30％，主要分布在油滴内部或界面层，没食子酸十八酯和α-生育酚在水相含量低；α-生育酚主要分布在油滴中，没食子酸及其烷基酯在水相中分布越多，与油滴中α-生育酚的接触机会就会越少，即产生抗氧化协同作用的概率就越低，但需要注意的是，没食子酸十八酯在水相中含量特别低是由于与tween20形成胶束结构导致的，胶束结构中的r18与α-生育酚相互作用概率很低，因此，t-r0，t-r18复合使用对乳液氧化稳定性没有明显的提高，t-r3，t-r8，t-r12复合使用乳液氧化稳定性显著提高，结合之前乳液界面层抗氧化剂分布的实验结果，r3在界面层的分布最多，与α-生育酚的接触概率最大，发生相互作用的机率高于其他烷基酯，因此，没食子酸及其烷基酯与α-生育酚复合使用产生抗氧化协同与它们在乳液中的分布密切相关。表1抗氧化剂与16-arn2+在乳状液界面层中的反应速率常数kobs抗氧化剂kobs(m-1s-1)没食子酸(r0)106.37没食子酸丙酯(r3)381.22没食子酸辛酯(r8)212.47没食子酸月桂酯(r12)276.56没食子酸十八酯(r18)118.50α-生育酚(toh)116.72由表1可知，没食子酸丙酯二级反应速率常数381m-1s-1最大，与其他烷基酯相比大小顺序为：r3>r12>r8>r18>r0。没食子酸丙酯在乳液中抗氧化活性最强，且其他烷基酯在乳液中的抗氧化活性强弱与二级反应速率常数大小顺序相关，即抗氧化剂的二级反应速率常数越大，在乳状液界面层的分布越多，在乳状液中的抗氧化活性越强，可见，没食子酸及其烷基酯和α-生育酚在乳状液中的抗氧化活性与其在乳状液界面层中的分布紧密相关。3.没食子酸及其烷基酯对α-生育酚的荧光猝灭结果图4a至e分别为r0，r3，r8，r12，r18的荧光猝灭图。图中最顶端为无猝灭剂下α-生育酚的荧光曲线，接下来的为逐步递增没食子酸及其烷基酯浓度的α-生育酚荧光猝灭曲线，说明α-生育酚内源性荧光不同程度的被没食子酸及其酯化物所猝灭。在相同条件(温度、浓度和ph)下，猝灭剂均造成α-生育酚荧光曲线峰值的所在波长位置发生红移，表明该荧光猝灭条件下，没食子酸及其烷基酯与α-生育酚在乳液中发生了相互作用。最大红移量在10nm～30nm之间，其中，最大红移量的大小顺序为：r3＞r8＞r12＞r18＞r0，明没食子酸丙酯与α-生育酚在乳液中产生的相互作用最强。4.荧光猝灭参数表2没食子酸及其酯化物的静态猝灭常数(ks)猝灭剂种类r0r3r8r12r18ks(×104m-1)0.2721.4680.7140.6350.19以f0/f对浓度[q]作图，得到stern-volmer图，图5显示，没食子酸及其酯化物对α-生育酚的荧光猝灭stern-volmer图都是直线，相关直线回归方程分别为：r0(y＝0.00272x+0.75374，r2＝0.99448)，r3(y＝0.01468x+2.78626r2＝0.9362)，r8(y＝0.00714x+1.66406，r2＝0.88401)，r12(y＝0.00635x+0.9688，r2＝0.9979)，r18(y＝0.0019x+1.11773，r2＝0.9860)。由于直线的斜率为ksv，故stern-volmer猝灭常数ksv分别为r0：0.272×104m-1，r3：1.468×104m-1，r8：0.714×104m-1，r12：0.635×104m-1，r18：0.19×104m-1，猝灭类型均为静态猝灭，根据静态猝灭理论，ksv＝ks，故得到没食子酸及其酯化物的ks。静态猝灭常数ks反映猝灭剂与处于基态的荧光基团形成非荧光复合物的程度和效率，没食子酸及其烷基酯对α-生育酚的静态猝灭常数ks大小顺序为：r3>r8>r12>r0>r18，可见，没食子酸丙酯与α-生育酚形成非荧光复合物的效率最高，也就是说，没食子酸丙酯与α-生育酚的相互作用最显著。值得注意的是，没食子酸丙酯与α-生育酚的复合使用，乳液抗氧化效率提升的最多，并且乳状液抗氧化效率提升大小与没食子酸及其烷基酯的ks大小顺序一致，说明，在乳状液中，没食子酸及其烷基酯分别与α-生育酚发生荧光猝灭，静态猝灭常数ks反映了没食子酸及其烷基酯与α-生育酚相互作用的强弱，相互作用的强弱与它们在乳液中复合使用产生的抗氧化效果紧密相关。表3没食子酸酯对α-生育酚猝灭的表观静态猝灭结合常数(ka)和结合位点数(n)猝灭剂种类r0r3r8r12r18ka(×104m-1)0.06385.78061.65540.47618.1105n1.19420.81750.89361.04270.5309因为没食子酸及其烷基酯对α-生育酚的荧光猝灭均存在静态猝灭，猝灭剂与α-生育酚有基态复合物形成。将log[(f0–f)/f]对[q]作图6，相关直线回归方程分别为：r0(y＝1.19423x-3.1950，r2＝0.99417)，r3(y＝0.34513x-0.5681，r2＝0.9742)，r8(y＝0.89356x-1.7811，r2＝0.97881)，r12(y＝1.04267x-2.3222，r2＝0.9932)，r18(y＝0.53087x-1.0909，r2＝0.9906)。分别根据直线的截距和斜率计算得出没食子酸及其烷基酯与α-生育酚的表观静态猝灭结合常数ka和结合位点数n，由表3可知，没食子酸十八酯n值约为0.5，其他烷基酯的n值约为1。ka反映静态猝灭条件下，猝灭剂与荧光基团之间的实际结合能力和亲和力，没食子酸十八酯和没食子酸丙酯的ka值最大，大小顺序为r18>r3>r8>r12>r0。静态猝灭常数和猝灭图谱λem红移的研究结果都表明没食子酸丙酯与α-生育酚相互作用最强，而ka值却是没食子酸十八酯最大。可能因为没食子酸十八酯的非极性最大，在水相中含量特别低，在乳状液中易发生自我凝聚，形成水溶性差的聚合物或与tween20形成胶束结构，因此，在聚合或胶束形成过程中，没食子酸十八酯与α-生育酚的结合能力可能发生突变而导致其ka值变大。5.没食子酸及其烷基酯与α-生育酚的循环伏安曲线由图7a，没食子酸及其酯化物与α-生育酚在乙腈体系的循环伏安曲线中，r0，r3，r8，r12和α-生育酚都含有两个氧化峰，且r0，r3，r8，r12的氧化峰电位约为900mv和1200mv，α-生育酚的氧化峰电位约为600mv和1300mv，而r18只含有一个氧化峰，约1100mv，扫描产生两个氧化峰的原因可能是，没食子酸及其烷基酯和α-生育酚与电极反应产生两种还原产物，还原产物重新在电极上氧化便产生了两种氧化峰，两种氧化峰的峰电流强弱不同，600mv氧化峰电流大于1200mv的氧化峰，900mv氧化峰电流大于1300mv氧化峰，在相同的扫速下，峰电流越大说明其电化学活性越高，因此，峰电位900mv和600mv的氧化峰为没食子酸及其烷基酯和α-生育酚的特征氧化峰。循环伏安法有两个重要的实验参数，峰电流之比和峰电位之差，若峰电流之比阴极峰电流与阳极峰电流比值的绝对值约等于1，阴极峰电位与阳极峰电位之差的绝对值约为60mv(25℃)，即δep＝2.22rt/nf，则为可逆电极反应，反之则不可逆。r0，r3，r8，r12还原峰电位约为500mv，α-生育酚和r18的还原峰电位分别约为-100mv和300mv，没食子酸及其烷基酯和α-生育酚的峰电流之比不为1且峰电位之差远大于60mv，因此，没食子酸及其烷基酯和α-生育酚在乙腈体系中与电极的反应是不可逆的。图7b为没食子酸及其酯化物与α-生育酚在磷酸盐缓冲液体系中的循环伏安曲线，考虑各抗氧化剂在磷酸盐缓冲液中的溶解问题，测定了r0，r3和水溶性生育酚trolox的循环伏安曲线。没食子酸有两个峰电位分别约500mv和900mv的氧化峰，根据其峰电流强弱，峰电位约500mv的氧化峰为没食子酸的氧化峰；r3和α-生育酚的氧化峰电位分别约为550mv和170mv；r0，r3和α-生育酚的峰电流之比不为1且峰电位之差都大于60mv，因此，r0，r3和α-生育酚在磷酸盐缓冲液体系中与电极的反应是不可逆的。图7c为没食子酸及其酯化物与α-生育酚在tween20体系中的循环伏安曲线，考虑各抗氧化剂在tween20体系中的溶解问题，测定了r0，r3，α-生育酚和水溶性生育酚trolox的循环伏安曲线。没食子酸有两个峰电位分别约500mv和900mv的氧化峰，根据其峰电流强弱，峰电位约500mv的氧化峰为没食子酸的氧化峰；r3，α-生育酚和水溶性生育酚的氧化峰电位分别约为550mv，300mv和270mv；r0，r3，α-生育酚和水溶性生育酚的峰电流之比不为1且峰电位之差都大于60mv，因此，r0，r3，α-生育酚和水溶性生育酚在tween20体系中与电极的反应是不可逆的。表4没食子酸酯与α-生育酚在乙腈体系中的氧化峰电位抗氧化剂氧化峰电位(mvvs饱和甘汞电极)r0(acn)897.7±0.6r3(acn)865.3±7.5r8(acn)881.0±2.0r12(acn)896.7±0.6r18(acn)1063.7±10.6α-toh(acn)591.0±1.7r0(pbs，ph7)516.3±5.1r3(pbs，ph7)565.7±4.2trolox(pbs，ph7)170.3±1.5r0(tween20，ph7)547.3±7.8r3(tween20，ph7)544.0±2.0α-toh(tween20，ph7)308.7±47.7trolox(tween20，ph7)267.0±1.7没食子酸及其烷基酯和α-生育酚在三种体系中的循环伏安曲线中，都含有氧化峰和还原峰。没食子酸及其烷基酯与α-生育酚的氧化峰电位结果见表4，在乙腈溶剂体系中，没食子酸及其酯化物的氧化峰电势相近在865～1063mv(vs饱和甘汞电极)，显著高于α-生育酚的591mv。我们还测定了在10mm磷酸盐缓冲液(ph＝7.0)体系及1％tween20磷酸盐缓冲液(ph＝7.0)体系中抗氧化剂的氧化峰电位，由于α-生育酚不溶于水，因此用trolox替代α-生育酚用于分析。结果显示，没食子酸及其酯化物在pbs体系中的氧化峰电位大大降低，在516～565mv之间，但相比trolox还是要高；在tween20胶束体系中，没食子酸及其酯化物氧化峰电位在544～547mv之间，还是比α-生育酚和trolox的氧化峰电位高。综上可知，在乙腈体系，磷酸盐缓冲液体系和tween20胶束体系中，没食子酸及其酯化物的氧化峰电位都比α-生育酚高，说明α-生育酚自发向没食子酸及其酯化物传递电子。当前第1页12