基于激光诱导荧光与液相色谱联用的真菌毒素检测方法与流程

1.基于激光诱导荧光与液相色谱联用的真菌毒素检测方法，其特征在于，其通过在高效液相色谱的色谱柱后连接激光诱导荧光检测器，构成激光诱导荧光与液相联用的真菌毒素的检测装置，并采用所述检测装置测定试样中真菌毒素的色谱峰面积，根据真菌毒素的标准曲线换算得到试样中真菌毒素的含量。

2.如权利要求1所述的基于激光诱导荧光与液相色谱联用的真菌毒素检测方法，其特征在于，其包括以下步骤：

步骤一、制备待检测样品；

步骤二、用稀释剂制备一系列的不同浓度的真菌毒素的标准溶液，采用所述检测装置依次对一系列真菌毒素的标准溶液进行检测，记录一系列标准溶液对于的色谱峰面积值，建立真菌毒素的浓度与色谱峰面积的关系方程式；

步骤三、将步骤一得到的样品用稀释剂溶解制得待检测供试品，采用所述检测装置对所述待检测供试品进行检测，记录所述待检测供试品对应的色谱峰面积值，将该色谱峰面积值带入步骤二中得到的关系方程式中，解出样品中真菌毒素的含量。

3.如权利要求2所述的基于激光诱导荧光与液相色谱联用的真菌毒素检测方法，其特征在于，步骤一中待检测样品的制备方法具体为：

S1、取5～25g的待检测试样粉碎后与2～10g的氯化钠和20～100mL的提取剂混匀，然后经滤纸过滤后收集滤液，取10～30mL的滤液加入40～80mL的水稀释，并用玻璃纤维纸过滤，得样品提取液；其中，所述提取剂为体积浓度为40～90％的甲醇水溶液或体积浓度为40～90％的乙腈水溶液；

S2、将免疫亲和柱连接于50.0mL注射器下方，移取10～30mL的步骤S1得到的样品提取液注入注射器中，调节注射器内部的压力使得样品提取液以2～10mL/min流速通过免疫亲和柱，直至2～3mL的空气通过免疫亲和柱，然后用5～20mL的去离子水淋洗免疫亲和柱两次，并使2～3mL的空气通过免疫亲和柱后用1～5mL色谱级甲醇洗脱，控制甲醇的流速为1～5mL/min，收集全部洗脱液，将洗脱液用真空泵抽干，即得。

4.如权利要求3所述的基于激光诱导荧光与液相色谱联用的真菌毒素检测方法，其特征在于，真菌毒素为黄曲霉毒素、赭曲霉毒素或玉米赤霉烯酮。

5.如权利要求4所述的基于激光诱导荧光与液相色谱联用的真菌毒素检测方法，其特征在于，黄曲霉毒素对应的所述稀释剂为体积浓度为45％的甲醇水溶液；赭曲霉毒素对应的所述稀释剂为体积比为96:102:2的乙腈、水和冰醋酸的混合溶液；玉米赤霉烯酮对应的所述稀释剂为体积比为46:46:8的乙腈、水和甲醇的混合溶液。

6.如权利要求5所述的基于激光诱导荧光与液相色谱联用的真菌毒素检测方法，其特征在于，所述检测装置中激光诱导荧光检测器的激发波长为260～410nm，发射波长450～510nm。

7.如权利要求6所述的基于激光诱导荧光与液相色谱联用的真菌毒素检测方法，其特征在于，一系列的黄曲霉毒素的标准溶液的浓度分别为0.5ng/mL、1.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL和20.0ng/mL；

一系列的赭曲霉毒素的标准溶液的浓度分别为1.0ng/mL、2.5ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL和50.0ng/mL；

一系列的玉米赤霉烯酮的标准溶液的浓度分别为10ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL和500ng/mL。

8.如权利要求7所述的基于激光诱导荧光与液相色谱联用的真菌毒素检测方法，其特征在于，所述试样为食品或饲料。