HPLC测定面条树中鸭脚树叶碱含量的方法与流程

文档序号:14712368发布日期:2018-06-16 00:39阅读:199来源:国知局
技术简介:
本发明针对面条树中鸭脚树叶碱含量测定方法缺失的问题,提出一种基于HPLC的高效检测方法。通过建立标准曲线,优化提取工艺(超声+碱性氧化铝柱纯化)及色谱条件(ThermoGold C18柱,甲醇-水-二乙胺流动相),实现鸭脚树叶碱的精准定量,解决了传统方法操作复杂、结果偏差大的难题,为面条树药材质量控制提供可靠依据。
关键词:HPLC测定方法,鸭脚树叶碱含量

本发明涉及测定面条树中鸭脚树叶碱含量的方法,尤其涉及一种HPLC测定面条树中鸭脚树叶碱含量的方法。



背景技术:

面条树(Alstonia scholaris)为两广及云南等地少数民族用药,生长于低丘陵山地疏林中,产于广西广东、云南、台湾等地,其性苦,凉,具有止咳、祛痰、消炎的作用,用于慢性支气管炎,百日咳。目前对面条树的相关质量研究较少。



技术实现要素:

本发明的目的旨在提供一种HPLC测定面条树中鸭脚树叶碱含量的方法。

本发明的目的通过以下技术方案来实现:一种HPLC测定面条树中鸭脚树叶碱含量的方法,包括以下步骤:

(1)制备对照品溶液:取鸭脚树叶碱对照品与甲醇制成对照品溶液;

(2)制备待测样品溶液:精密取面条树样品加甲醇稀释,制得待测样品溶液;

(3)取对照品溶液注入高效液相色谱仪测定,建立鸭脚树叶碱标准曲线;

(4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪测定,获得鸭脚树叶碱的峰面积,从而根据标准曲线获得鸭脚树叶碱含量;

所述步骤(3)和(4)的色谱条件:250mm×4.60mm,5μm,Thermo Gold C18色谱柱;流动相:甲醇-水-二乙胺=45:55:0.005;流速:1.0ml·min-1;检测波长:287nm;柱温:35℃;进样体积:10μl。

所述步骤(1)中,精密称定鸭脚树叶碱对照品14.00mg,置于10ml量瓶中,加甲醇制成每1mL含1.3832mg鸭脚树叶碱的溶液,作为对照品溶液。

所述步骤(2)中,取面条树叶粉碎,精密称定2g,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25ml,称定重量,超声处理30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液5ml,加在碱性氧化铝柱上,用50ml甲醇洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加甲醇适量使溶解,移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得待测样品溶液。

与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:

与现有技术相比,本发明提供的方法操作简单,高效省时,鉴定结果客观准确。

具体实施方式

实施例1

(1)制备对照品溶液:精密称定鸭脚树叶碱对照品14.00mg,置于10ml量瓶中,加甲醇制成每1mL含1.3832mg鸭脚树叶碱的溶液,作为对照品溶液。

(2)制备待测样品溶液:取面条树叶粉碎(过三号筛)约2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25ml,称定重量,超声处理30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液5ml,加在碱性氧化铝柱(100~200目,2g,内径1cm)上,用50ml甲醇洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加甲醇适量使溶解,移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得待测样品溶液。

(3)分别精密吸取对照品储备液1.0ml分别置1,2,10,20,100ml量瓶中,加甲醇定容,摇匀,分别取样注入高效液相色谱仪进行测定。以鸭脚树叶碱进样量(X,μg)为横坐标,以峰面积(Y)为纵坐标,进行线性回归,回归方程为Y=451.67X-0.13,r=0.9999(n=5)。

色谱条件:250mm×4.60mm,5μm,Thermo Gold C18色谱柱;流动相:甲醇-水-二乙胺=45:55:0.005;流速:1.0ml·min-1;检测波长:287nm;柱温:35℃;进样体积:10μl。

(4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪进行测定,获得鸭脚树叶碱峰面积,根据回归方程计算得到鸭脚树叶碱的含量。取不同批号的面条树样品3批分别进行测定,鸭脚树叶碱含量分别为:0.10%、0.15%、0.16%。

本发明可用其他的不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概述。本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不是限制,因此凡是依据本发明的实质技术对以上实施例所作的任何细微修改、等同变化与修饰,均属于本发明技术方案的范围内。

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