侧向流分析物检测的制作方法

文档序号:17438372发布日期:2019-04-17 04:25阅读:247来源:国知局
侧向流分析物检测的制作方法

本发明申请主张2016年7月28日提交的美国专利申请no.15/222,376的优先权益,其还主张2016年6月27日提交的美国临时专利申请no.62/355,133的优先权益。上述相关专利申请以其全部内容作为参考并入本文。

序列表

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本发明公开涉及检测样品中一种或多种分析物的方法和装置。具体地,本说明书提供了改善的侧向流分析物检测方法和装置的实施方式。

发明背景

侧向流测定将多种试剂和处理步骤组合在一个容器中,从而提供了液体样品中多种分析物,包括抗原,如激素,例如,用于妊娠测试的人绒毛膜促性腺激素(hcg)、抗体,如抗传染剂抗体和半抗原,如药物滥用的存在与否的相对方便和快速的检测。

常规侧向流测定提供了可渗透测试条,其配置以(a)将含有分析物的样品暴露于可检测试剂,其可以与所述分析物结合;和(b)将与所述可检测试剂结合的分析物被动输送(例如,通过毛细管作用)至所述测试条的检测区,在此它被固定至所述测试条约几分钟。可以(例如)用存在于所述测试条上的固定化试剂固定与所述可检测试剂结合的分析物。为了有利于被动输送,所述测试条通常包含处于流体连通的一种或多种可渗透材料。

常规侧向流测定可以比使用相同类型的固定化试剂的相当的板测定更昂贵,具体地,这是因为样品可以在约几分钟内在毛细管作用的影响下流过所述侧向流测试条。通过比较,可以配置常规板测定,从而在存在固定化试剂的情况下将样品培育通常在30分钟至2小时之间的长得多的时间段。为了补偿减少的接触时间,相对于相当的板测定,侧向流测定通常配置以更高浓度的固定化试剂和/或可检测试剂以确保可以存在足够的固定化试剂以捕获至少所述分析物的可检测部分,具体地,当所述分析物预期以低浓度存在于样品中时。当所述固定化试剂较为昂贵时,成本差异可以变得巨大(例如,单克隆抗体固定化试剂的测定量的成本可以显著更高)。

在侧向流测定中对高浓度可检测试剂的需要还可以影响测试灵敏度,特别是如果过量的未结合的可检测试剂难以从测试条上清洗掉时。这些过量的未结合的可检测试剂可以产生防碍检测信号的显著背景噪音。

另外,将所述固定化试剂和另一种所需的测定组分在测试条上固定为单一组合防止了不同测定组分组合的混合和匹配,从而导致灵活性降低和测定组分的可能浪费,例如,如果需要检测不同类型的分析物时。

因此,需要更灵活,更灵敏和/或不太昂贵的侧向流测定。

在本说明书中对任何现有技术的提及不是且不应作为对在任何国家中该现有技术构成公知常识的一部分的承认或任何形式的说明。

发明概述

某些实施方式可以提供检测分析物的测定平台。在某些实施方式中,该测定平台可以包括(例如)渗透区,其可以配置(例如)以输送可以包括分析物的至少一部分样品,并且任选地可以配置其它渗透区(例如)以接收至少一部分样品。在某些实施方式中,该渗透区可以包括(例如)多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂可以能够形成分析物复合物,其可以包含所述多种肽-标签试剂中的至少一种和所述分析物。在某些实施方式中,所述其它渗透区可以配置以接收来自所述渗透区的样品部分。在某些实施方式中,所述其它渗透区可以包含(例如)相对于所述多种肽-标签试剂,例如,以至少100:1,例如至少125:1、200:1或300:1(基于重量:重量)的比值存在的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以固定所述多种肽-标签试剂中的至少一种。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以固定所述分析物复合物。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以结合至所述其它渗透区的至少一部分。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的至少一种以及所述多种抗-肽试剂中的至少一种中的至少一种可以是结合伴侣。

在某些实施方式中,所述输送可以包括(例如)被动运输、毛细管作用、润湿、芯吸(wicking)或其两种或更多种的组合。

在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的至少一种可以结合至所述其它渗透区的至少一部分。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的至少一种可以包括(例如)多种共价缀合的肽标签。在某些其它实施方式中,存在于所述多种肽-标签试剂中的至少一种上的大部分或全部所述多种共价缀合的肽标签可以包括单一类型的肽标签。在某些其它实施方式中,存在于所述多种肽-标签试剂中的至少一种上的大部分或全部所述多种共价缀合的肽标签可以包括两种、三种或四种类型的肽标签。在某些实施方式中,大部分或全部所述多种肽-标签试剂可以包括共价缀合其上的单一类型的肽标签。在某些实施方式中,大部分或全部所述多种肽-标签试剂可以包括两种、三种或四种类型的共价缀合其上的肽标签。在某些实施方式中,所述多种结合的肽标签中的一种类型中的大部分,例如占优势的部分或者基本上全部(在某些其它实施方式中,大于90%,大于95%或者大于98%的某种类型的结合的肽标签)共价缀合至所述多种肽-标签试剂中的仅一种类型。

在某些实施方式中,所述所述多种肽-标签试剂中的至少一种可以包括(例如)能够与分析物结合的捕获剂,例如,单克隆抗体、affimer或者能够与分析物结合的适体(aptamer)。在某些其它实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的至少一种中的每一种可以包括单一捕获剂。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂可以包括单一类型的捕获剂。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂可以包括两种、三种或四种类型的捕获剂(并且在一些实施方式中,两种、三种或四种类型的肽标签,并且一些实施方式中,每种类型的肽标签仅单一类型的肽标签)。

在某些实施方式中,所述共价缀合的肽标签中的至少一种可以能够与所述多种抗-肽试剂中的至少一种结合。在某些其它实施方式中,所述多种抗-肽试剂中的至少一种可以是单一抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以包括单一类型的抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以包括两种、三种或四种类型的抗-肽试剂。

在某些实施方式中,所述渗透区还可以包括(例如)多种可检测试剂,并且任选地所述分析物复合物还可以包括(例如)所述多种可检测试剂中的至少一种,例如,所述多种可检测试剂中的一种。在某些实施方式中,所述多种可检测试剂可以包括单一类型的可检测试剂。在某些实施方式中,所述多种可检测试剂可以包括两种、三种或四种类型的可检测试剂。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以相对于所述多种可检测试剂,基于重量:重量,以至少8:1的比值存在。

在某些实施方式中,所述测定平台或部件或其子组件可以储存在预定温度,例如,在4℃、室温、小于10℃、小于20℃的温度,在小于30℃的温度。在某些实施方式中,在使用之前和/或使用之后,所述测定平台或部件或其子组件可以储存在预定温度,例如,在4℃、室温、小于10℃、小于20℃的温度,或者在小于30℃的温度。在某些实施方式中,所述测定平台在预定温度可以具有至少两个月的储存期,例如,至少2个月、6个月或至少1年的储存期。在某些实施方式中,在使用之前,在小于20℃的预定储存温度,所述测定平台可以具有至少两个月的储存期,例如,使用之前,在小于20℃的预定储存温度,具有至少2个月的储存期,使用之前,在小于20℃的预定储存温度,具有至少6个月的储存期,或者使用之前,在小于30℃的预定储存温度,具至少1年的储存期。

在某些实施方式中,所述测定平台或部件或其子组件,例如,所述多种肽-标签试剂和/或所述多种抗-肽试剂可以在低光照条件下储存,如在密封容器中储存。在某些实施方式中,在使用之前和/或使用之后,所述测定平台或部件或其子组件,例如,所述多种肽-标签试剂和/或所述多种抗-肽试剂可以在低光照条件下储存,如在密封容器中储存。

某些实施方式可以提供(例如)用于检测预定分析物的测定平台,其包括:i)配置以输送包含预定分析物的样品的渗透区,所述渗透区包含多种肽-标签试剂,所述多种肽-标签试剂能够形成包含所述多种肽-标签试剂中的至少一种和预定分析物的分析物复合物;和ii)配置以接收来自所述渗透区的样品的至少一部分的其它渗透区,所述其它渗透区包含:相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在的多种抗-肽试剂,所述多种抗-肽试剂配置以固定所述多种肽-标签试剂中的至少一种。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以固定所述分析物复合物。

某些实施方式可以提供侧向流装置。在某些实施方式中,所述侧向流装置可以包括(例如)通过(例如)所述侧向流装置的可渗透子组件的至少一部分限定的流程(flowpath)。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)释放区,所述释放区可以包括(例如)多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)检测区,所述检测区可以包括(例如)相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在于所述流程中的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述释放区可以配置(例如)以将所述多种肽-标签试剂中的至少一部分释放到所述流程中。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂中的至少一种可以是配置以释放的所述多种肽-标签试剂中的至少一部分中的至少一种的结合伴侣。

在某些实施方式中,所述流程的至少一部分的特征可以在于被动运输、毛细管作用、润湿、芯吸或其两种或更多种的组合。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂可以结合,可释放地结合或不结合至所述可渗透子组件的至少一部分。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂的至少一部分(例如,大部分,占优势的部分或者基本上全部(在某些其它实施方式中,基于重量:重量,大于90%,大于95%或者大于98%))可以从所述可渗透子组件的至少一部分迁移、溶解、断开和/或扩散。

在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以结合至所述可渗透子组件的至少一部分。在某些实施方式中,配置以释放的所述多种肽-标签试剂中的至少一部分的至少一部分可以结合至所述可渗透子组件的至少其它部分。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以固定配置以释放的所述多种肽-标签试剂中的至少一部分的至少一部分。在某些其它实施方式中,在通过所述多种抗-肽试剂固定之前,配置以释放的所述多种肽-标签试剂中的至少一部分的至少一种可以能够与分析物结合(并且可以(例如)结合)。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的至少一部分的至少一种可以包括(例如)多种共价缀合的肽标签,其中所述共价缀合的肽标签中的至少一种可以能够与所述多种抗-肽试剂中的至少一种结合(并且可以(例如)结合)。在某些其它实施方式中,所述所述多种抗-肽试剂中的至少一种可以是所述多种抗-肽试剂中的一种。在某些实施方式中,所述检测区可以定位在所述释放区下游的流程中。

在某些实施方式中,所述释放区还可以包括(例如)多种可检测试剂,并且所述分析物复合物还可以包括(例如)所述多种可检测试剂中的至少一种。在某些其它实施方式中,所述多种可检测试剂可以结合,可释放地结合或不结合至所述可渗透子组件。在某些其它实施方式中,所述释放区可以配置以将所述多种可检测试剂中的至少一部分进一步释放到所述流程中。在某些其它实施方式中,所述多种可检测试剂中的至少一部分可以能够从所述可渗透子组件的至少一部分迁移、溶解、断开和/或扩散(并且可以(例如)迁移、溶解、断开或扩散)。

某些实施方式可以提供(例如)侧向流装置,其包括:(i)通过所述侧向流装置的可渗透子组件限定的流程;(ii)释放区,其包含多种肽-标签试剂,所述释放区配置以将所述多种肽-标签试剂中的至少一部分释放到所述流程中;和(iii)检测区,其包含相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在于所述流程中的多种抗-肽试剂,其中所述多种抗-肽试剂中的至少一种是所述多种肽-标签试剂中所释放的至少一部分的至少一种的结合伴侣。

某些实施方式可以提供侧向流装置。在某些实施方式中,所述侧向流装置可以配置以检测至少两种分析物,例如,至少三种分析物、至少四种分析物、至少五种分析物、至少六种分析物、至少七种分析物、至少八种分析物、至少九种分析物或者配置以检测至少十种分析物。在某些实施方式中,所述侧向流装置可以配置以检测多达十种分析物。在某些实施方式中,所述侧向流装置可以包括(例如)通过(例如)所述侧向流装置的可渗透子组件的至少一部分限定的流程。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)释放区,所述释放区可以包括(例如)多种第一肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)检测区,所述检测区可以包括(例如)相对于所述多种第一肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在于所述流程中的多种第一抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述释放区可以配置(例如)以将所述多种第一肽-标签试剂中的至少一部分释放到所述流程中。在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂中的至少一种可以配置以固定配置以释放的所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种。在某些实施方式中,所述释放区还可以包括(例如)多种第二肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述检测区还可以包括(例如)多种第二抗-肽试剂,其可以配置以固定配置以释放的所述多种第二肽-标签试剂中的至少一部分的至少一种。

在某些实施方式中,所述多种第一肽-标签试剂可以包括(例如)第一类型的肽标签,并且所述多种第二肽-标签试剂可以包括(例如)第二类型的肽标签。在某些实施方式中,所述第一类型的肽标签和所述第二类型的肽标签可以是不同类型的肽标签和/或肽序列。在某些实施方式中,所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种可以包括(例如)多种共价缀合的第一肽标签。在某些其它实施方式中,存在于所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种上的大部分或全部所述多种共价缀合的第一肽标签可以包括第一类型的肽标签。在某些实施方式中,大部分或全部所述多种第一肽-标签试剂可以包括共价缀合其上的第一类型的肽标签。在某些实施方式中,所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种可以包括(例如)多种共价缀合的第二肽标签。在某些其它实施方式中,存在于所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种上的大部分或全部所述多种共价缀合的第二肽标签可以包括第二类型的肽标签。在某些实施方式中,大部分或全部所述多种第二肽-标签试剂可以包括共价缀合其上的第二类型的肽标签。

在某些实施方式中,所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种可以包括(例如)能够与第一分析物结合的第一捕获剂,例如,第一单克隆抗体、第一affimer或者第一适体。在某些其它实施方式中,所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种中的每一种可以包括单一第一捕获剂。在某些实施方式中,所述多种第一肽-标签试剂可以包括单一类型的第一捕获剂。在某些实施方式中,所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种可以包括(例如)能够与第二分析物结合的第二捕获剂,例如,第二单克隆抗体、第二affimer或者第二适体。在某些其它实施方式中,所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种中的每一种可以包括单一第二捕获剂。在某些实施方式中,所述多种第二肽-标签试剂可以包括单一类型的第二捕获剂。

在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂可以包括第一类型的抗-肽试剂,并且所述多种第二抗-肽试剂可以包括第二类型的抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述第一类型的抗-肽试剂和所述第二类型的抗-肽试剂可以是不同类型的抗-肽试剂。在某些其它实施方式中,所述第一类型的抗-肽试剂可以能够与所述第一类型的肽标签结合,并且所述第二类型的抗-肽试剂可以能够与所述第二类型的肽标签结合。在某些其它实施方式中,所述第一类型的抗-肽试剂可以是所述第一类型的肽标签的特异性结合伴侣,并且所述第二类型的抗-肽试剂可以是所述第二类型的肽标签的特异性结合伴侣。

在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂可以与所述多种第二抗-肽试剂交替布置。在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂的至少一部分可以与所述多种第二抗-肽试剂的至少一部分分隔。在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂的至少一部分可以相对于所述流程的流向位于所述多种第二抗-肽试剂的至少一部分的下游。在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂的至少一部分和所述多种第二抗-肽试剂的至少一部分可以彼此分隔并且相对于流程所限定的流向并排布置。

某些实施方式可以提供(例如)侧向流装置,其包括(i)通过所述侧向流装置的可渗透子组件所限定的流程;(ii)释放区,其包括:(a)多种第一肽-标签试剂,所述释放区配置以将所述多种第一肽-标签试剂的至少一部分释放到流程中;和(b)多种第二肽-标签试剂,所述释放区配置以将所述多种第二肽-标签试剂的至少一部分释放到流程中;和(iii)检测区,其包括:(a)相对于所述多种第一肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在于所述流程中的多种第一抗-肽试剂,其中所述多种第一抗-肽试剂中的至少一种是配置以释放的所述多种第一肽-标签试剂的至少一部分的至少一种的结合伴侣;和(b)相对于所述多种第二肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在于所述流程中的多种第二抗-肽试剂,其中所述多种第二抗-肽试剂中的至少一种是配置以释放的所述多种第二肽-标签试剂的至少一部分的至少一种的结合伴侣。

某些实施方式可以提供组件。在某些实施方式中,所述组件可以包括(例如)可渗透部件,所述可渗透部件可以具有沉积在其至少部分上的多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述组件还可以包括(例如)其它可渗透部件,所述其它可渗透部件可以与所述可渗透部件流体连通。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂可以能够形成分析物复合物。在某些实施方式中,所述分析物复合物可以包括(例如)所述多种肽-标签试剂中的至少一种和分析物。在某些实施方式中,所述其它可渗透部件可以具有结合至其至少部分上的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在。此外,在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以能够固定所述多种肽-标签试剂中的至少一种的至少一种。

在某些实施方式中,所述可渗透部件和所述其它可渗透部件之间所述多种肽-标签试剂和/或所述分析物的流体连通可以包括(例如)被动运输、毛细管作用、润湿、芯吸或其两种或更多种的组合。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂可以结合,可释放地结合或不结合至所述可渗透部件的至少一部分。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的至少一部分可以从所述可渗透部件的至少一部分迁移、溶解、断开和/或扩散。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的至少一种和所述多种肽-标签试剂中的至少一种中的至少一种可以是结合伴侣。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的至少一种的至少一种可以包括(例如)多种共价缀合的肽标签,其中所述共价缀合的肽标签中的至少一种可以能够与所述多种抗-肽试剂中的至少一种结合。在某些其它实施方式中,所述多种抗-肽试剂中的至少一种可以是单一抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述可渗透部件可以配置(例如)以将所述分析物复合物与所述其它可渗透部件流体连通。在某些实施方式中,所述可渗透部件还可以包括(例如)多种可检测试剂,并且任选地所述分析物复合物还可以包括(例如)所述多种可检测试剂中的至少一种。在某些其它实施方式中,所述多种可检测试剂可以结合,可释放地结合或不结合至所述可渗透部件。在某些其它实施方式中,所述多种可检测试剂中的至少一部分可以从所述可渗透部件的至少一部分迁移、溶解、断开和/或扩散。

某些实施方式可以提供(例如)组件,其包括:i)可渗透部件,其具有沉积在其至少部分上的多种肽-标签试剂,所述多种肽-标签试剂能够形成分析物复合物,所述分析物复合物包含所述多种肽-标签试剂中的至少一种和预定的分析物;和(ii)与所述可渗透部件流体连通的其它可渗透部件,所述其它可渗透部件具有与其至少部分结合的多种抗-肽试剂,所述多种抗-肽试剂相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在,所述多种抗-肽试剂能够固定所述多种肽-标签试剂中的至少一种的至少一种。

某些实施方式可以在检测以低浓度,例如,在样品中处于小于1miu/ml的浓度,或者在样品中处于小于1mm的浓度或者处于小于10ng/ml的浓度存在的分析物的方法中使用所述组件。在某些实施方式中,所述分析物浓度可以在0.001-1mm的范围内,例如,分析物浓度在0.01-1mm、0.1-1mm、0.25-1mm的范围内,或者分析物浓度在0.25-0.75mm的范围内。在某些实施方式中,所述分析物浓度可以在0.001-10ng/ml的范围内,例如,分析物浓度在0.01-10ng/ml、0.1-10ng/ml、1-7.5ng/ml的范围内,或者分析物浓度在2.5-7.5ng/ml的范围内。在某些实施方式中,所述方法可以包括将样品沉积到所述装置上。在某些其它实施方式中,所述方法可以包括通过测量信噪比为至少1.67的检测信号来检测所述目标分析物。在某些实施方式中,如果以类似方式配置和/或使用装置,例如,如果所述装置包含相同或相似的量的所述多种肽-标签试剂,相同或相似的量的所述多种抗-肽试剂和/或相同或相似的量的所述多种可检测试剂,但是其中不存在分析物时,所述信噪比可以定义为检测信号与所获得的检测信号的比值。

某些实施方式可以提供组件。在某些实施方式中,所述组件可以包括(例如)可渗透部件,所述可渗透部件可以具有沉积在其至少部分上的多种第一肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述组件还可以包括(例如)其它可渗透部件,所述其它可渗透部件可以与所述可渗透部件流体连通。在某些实施方式中,所述多种第一肽-标签试剂可以能够形成第一分析物复合物。在某些实施方式中,所述第一分析物复合物可以包括(例如)所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种和第一分析物。在某些实施方式中,所述其它可渗透部件可以具有结合至其至少部分上的多种第一抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂可以相对于所述多种第一肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在。在某些其它实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂可以能够固定所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种的至少一种。在某些实施方式中,所述可渗透部件还可以具有(例如)沉积在其至少部分上的多种第二肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述多种第二肽-标签试剂可以能够形成第二分析物复合物。在某些实施方式中,所述第二分析物复合物可以包括(例如)所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种和第二分析物。在某些实施方式中,所述其它可渗透部件还可以具有(例如)结合至其至少部分上的多种第二抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种第二抗-肽试剂可以能够固定所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种的至少一种。

在某些实施方式中,所述多种第一肽-标签试剂和所述多种第二肽-标签试剂可以在所述可渗透部件上交替布置。在某些实施方式中,所述多种第一肽-标签试剂和所述多种第二肽-标签试剂或其部分可以在所述可渗透部件上彼此分隔。

在某些实施方式中,所述多种第一肽-标签试剂和所述多种第二肽-标签试剂可以包括两种或更多种不同类型的肽-标签试剂,例如,两种不同类型的肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述多种第一肽-标签试剂和所述多种第二肽-标签试剂可以包括两种或更多种不同类型的捕获剂,例如,两种不同类型的捕获剂。在某些实施方式中,所述多种第一肽-标签试剂和所述多种第二肽-标签试剂可以包括两种或更多种不同类型的共价缀合的肽标签,例如,两种不同类型的肽-标签。

在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂和所述多种第二抗-肽试剂可以包括两种或更多种不同类型的抗-肽试剂,例如,两种不同类型的抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂和所述多种第二抗-肽试剂可以共同具有一种或多种类型的抗-肽试剂,例如,共同具有一种类型的抗-肽试剂。

在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂和所述多种第二抗-肽试剂可以在所述可渗透部件上交替布置。在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂和所述多种第二抗-肽试剂或其部分可以在所述可渗透部件上彼此分隔。

在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂的至少一部分可以结合在所述检测区的第一子区中。在某些实施方式中,所述多种第二抗-肽试剂的至少一部分可以结合在所述检测区的第二子区中。在某些实施方式中,所述第一子区和所述第二子区可以重叠。在某些实施方式中,所述第一子区和所述第二子区可以分离。在某些实施方式中,在所述部分迁移通过所述第二子区之前,所述样品部分或者所述样品部分的部分可以迁移通过所述第一子区。

某些实施方式可以提供(例如)组件,其包括:(i)可渗透部件,其具有:(a)沉积在其至少部分上的多种第一肽-标签试剂,所述多种第一肽-标签试剂能够形成第一分析物复合物,所述第一分析物复合物包含所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种和第一预定分析物;和(b)沉积在其至少部分上的多种第二肽-标签试剂,所述多种第二肽-标签试剂能够形成第二分析物复合物,所述第二分析物复合物包含所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种和第二预定分析物;和(ii)与所述可渗透部件流体连通的其它可渗透部件,所述其它可渗透部件具有:(a)结合至其至少部分上的多种第一抗-肽试剂,所述多种第一抗-肽试剂相对于所述多种第一肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在,所述多种第一抗-肽试剂能够固定所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种的至少一种;和(b)结合至其至少部分上的多种第二抗-肽试剂,所述多种第二抗-肽试剂相对于所述多种第二肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在,所述多种第二抗-肽试剂能够固定所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种的至少一种。

某些实施方式可以提供可渗透组件。在某些实施方式中,所述可渗透组件可以包括(例如)通过(例如)所述可渗透组件限定的流程。在某些实施方式中,所述可渗透组件还可以包括(例如)样品区。在某些实施方式中,所述可渗透组件还可以包括(例如)检测区。在某些实施方式中,所述样品区还可以包括(例如)多种分析物复合物。在某些其它实施方式中,所述多种分析物复合物可以包括(例如)多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述检测区可以包括(例如)相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在于所述流程中的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以能够固定所述多种肽-标签试剂中的至少一部分。

在某些实施方式中,所述样品区可以配置(例如)以将所述多种分析物复合物中的至少一部分释放到所述流程中。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以布置在所述样品区下游的流程中。在某些实施方式中,所述样品区和所述检测区可以彼此空间相关,例如,彼此邻接、相邻和/或共线。在某些实施方式中,所述检测区可以放置在(例如)外壳(casing)中。在某些其它实施方式中,所述外壳可以定义(例如)邻近所述检测区布置的观察孔、窗和/或透明部分。在某些其它实施方式中,所述样品区可以放置在(例如)所述外壳中。在某些其它实施方式中,所述样品区可以配置(例如)以接收通过(例如)所述外壳所限定的样品入口的多种分析物。

某些实施方式可以提供(例如)可渗透组件,其包括:(i)通过所述可渗透组件限定的流程;(ii)样品区,其包含:多种分析物复合物,所述多种分析物复合物包含多种肽-标签试剂;和(iii)检测区,其包含:相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在于所述流程中的多种抗-肽试剂,所述多种抗-肽试剂能够固定所述多种肽-标签试剂的至少一部分。

某些实施方式可以提供组件。在某些实施方式中,所述组件可以包括(例如)可渗透部件,所述可渗透部件具有沉积在其至少部分上的多种分析物复合物。在某些实施方式中,所述装置还可以包括(例如)其它可渗透部件,所述其它可渗透部件可以配置(例如)以接收来自所述可渗透部件的所述分析物复合物的至少一部分。在某些实施方式中,所述多种分析物复合物可以包括(例如)多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述其它可渗透部件可以具有结合至其至少部分上的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在。此外,在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以将所述多种肽-标签试剂中的至少一种固定至所述可渗透组件。

在某些实施方式中,所述可渗透部件和所述其它可渗透部件可以彼此空间相关,例如,彼此邻接、相邻和/或共线。在某些实施方式中,所述可渗透部件可以包括(例如)吸收剂垫。在某些实施方式中,所述可渗透部件可以放置在(例如)外壳中。在某些其它实施方式中,所述可渗透部件可以配置(例如)以接收通过(例如)所述外壳所限定的样品入口的多种分析物。在某些实施方式中,所述其它可渗透部件可以包括(例如)至少一种多孔膜。在某些实施方式中,所述其它可渗透部件可以放置在(例如)所述外壳中。在某些其它实施方式中,所述外壳可以定义(例如)邻近所述其它可渗透部件布置的观察孔、窗和/或透明部分。在某些实施方式中,所述组件还可以包括(例如)布置在所述其它可渗透部件下游流程中的吸收剂部件。

某些实施方式可以提供(例如)组件,其包括:(i)可渗透部件,其具有沉积在其至少部分上的多种分析物复合物,所述可渗透部件配置以输送所述分析物复合物中的至少一部分,所述多种分析物复合物包含多种肽-标签试剂;和(ii)其它可渗透部件,其配置以接收来自所述可渗透部件的所述分析物复合物的至少一部分,所述其它可渗透部件具有结合至其至少部分上的多种抗-肽试剂,所述多种抗-肽试剂:(a)相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在;和(b)配置以将所述多种肽-标签试剂中的至少一种固定至所述可渗透组件。

某些实施方式可以提供用于检测分析物的侧向流装置。在某些实施方式中,所述侧向流装置可以包括(例如)通过(例如)所述侧向流装置的可渗透子组件限定的流程。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)样品区,所述样品区可以配置(例如)以接收分析物并将所述分析物释放到所述流程中。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)释放区,所述释放区可以包括多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)检测区,所述检测区可以包括相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在于所述流程中的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述释放区可以配置(例如)以将所述多种肽-标签试剂中的至少一部分释放到所述流程中。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂中的至少一种可以是配置以释放的所述多种肽-标签试剂中的至少一部分中的至少一种的结合伴侣。

在某些实施方式中,所述释放区可以定位在所述样品区下游的流程中。在某些实施方式中,所述检测区可以定位在所述释放区下游的流程中。在某些实施方式中,所述样品区和所述释放区可以彼此空间相关,例如,彼此邻接、相邻和/或共线。在某些实施方式中,所述释放区和所述检测区可以彼此空间相关,例如,彼此邻接、相邻和/或共线。在某些实施方式中,所述样品区和所述检测区可以不必彼此空间相关,例如,彼此不邻接、不相邻和/或不共线。在某些实施方式中,所述释放区和所述检测区可以放置在(例如)外壳中。在某些其它实施方式中,所述样品区可以放置在(例如)所述外壳中。在某些其它实施方式中,所述样品区可以配置(例如)以接收通过(例如)所述外壳所限定的样品入口的分析物。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)多种可检测试剂。在某些其它实施方式中,可以与所述分析物分开地将所述多种可检测试剂引入到所述可渗透子组件中。在某些其它实施方式中,所述多种可检测试剂可以结合至所述多种肽-标签试剂上游、下游、并排或与之交替布置的可渗透子组件。

某些实施方式可以提供(例如)用于检测预定分析物的侧向流装置,其包括:(i)通过所述侧向流装置的可渗透子组件限定的流程;(ii)配置以接收预定分析物和将所述预定分析物释放到流程中的样品区;(iii)包含多种肽-标签试剂的释放区,所述释放区配置以将所述多种肽-标签试剂的至少一部分释放到所述流程中;和(iv)检测区,其包含相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在于所述流程中的多种抗-肽试剂,其中所述多种抗-肽试剂的至少一种是所释放的所述多种肽-标签试剂的至少一部分的至少一种的结合伴侣。

某些实施方式可以提供侧向流装置。在某些实施方式中,所述侧向流装置可以包括(例如)第一可渗透部件,其可以配置(例如)以接收含有分析物的样品并且任选地输送所述分析物。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括第二可渗透部件,其可以配置(例如)以接收来自所述第一部件的分析物。在某些实施方式中,所述第二可渗透部件可以具有沉积在其至少部分上的多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂可以能够形成分析物复合物。在某些实施方式中,所述分析物复合物可以包括(例如)所述多种肽-标签试剂中的至少一种和所述分析物。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)第三可渗透部件,其可以配置(例如)以接收来自所述第二可渗透部件的所述分析物复合物。在某些实施方式中,所述第三可渗透部件可以具有结合至其至少部分上的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在。此外,在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以固定所述所述多种肽-标签试剂中的至少一种的至少一种。

在某些实施方式中,所述第一可渗透部件和所述第二可渗透部件可以彼此空间相关,例如,彼此邻接、相邻和/或共线。在某些实施方式中,所述第二可渗透部件和所述第三可渗透部件可以彼此空间相关,例如,彼此邻接、相邻和/或共线。在某些实施方式中,所述第一可渗透部件和所述第三可渗透部件可以不必彼此空间相关,例如,彼此不邻接、不相邻和/或不共线。在某些实施方式中,第二可渗透部件和第三可渗透部件可以放置在(例如)外壳中。在某些其它实施方式中,所述第一可渗透部件可以放置在(例如)所述外壳中。在某些其它实施方式中,所述第一可渗透部件可以配置(例如)以接收通过(例如)所述外壳所限定的样品入口的样品。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)多种可检测试剂。在某些其它实施方式中,所述分析物复合物还可以包含(例如)结合至所述多种可检测试剂中的一个或多个,例如,所述多种可检测试剂中的一个的分析物。在某些其它实施方式中,可以与所述样品分开地将所述多种可检测试剂引入到所述侧向流装置中。在某些其它实施方式中,所述多种可检测试剂可以结合至所述多种肽-标签试剂上游、下游、并排或与之交替布置的第二可渗透部件。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)定位在所述第一,第二和第三可渗透部件下游流程中的吸收剂部件。在某些其它实施方式中,所述吸收剂部件的吸收性可以超过所述第一可渗透部件的吸收性,例如,可以被所述吸收剂部件吸收的液体的量可以超过所述第一可渗透部件所吸收的量的至少2,例如,至少5、10、25、50或者至少100倍。

某些实施方式可以提供(例如)侧向流装置,其包括:(i)第一可渗透部件,其配置以接收含有预定分析物的样品并输送所述预定分析物;(ii)第二可渗透部件,其配置以接收来自所述第一部件的预定分析物,所述第二可渗透部件具有沉积在其至少部分上的多种肽-标签试剂,所述多种肽-标签试剂能够形成分析物复合物,所述分析物复合物包含所述多种肽-标签试剂中的至少一种和所述预定分析物;和(iii)第三可渗透部件,其配置以接收来自所述第二可渗透部件的分析物复合物,所述第三可渗透部件具有结合至其至少部分上的多种抗-肽试剂,所述多种抗-肽试剂:(a)相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在;和(b)配置以固定所述多种肽-标签试剂中的至少一种的至少一种。

某些实施方式可以提供用于检测分析物的侧向流装置。在某些实施方式中,所述侧向流装置可以包括(例如)通过(例如)所述侧向流装置的可渗透子组件限定的流程。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括溶剂区,其可以配置(例如)以接收溶剂并且任选地将所述溶剂部分流通至所述流程。在某些实施方式中,所述侧向流装置可以配置(例如)以接收所述侧向流装置的样品区中的样品并且任选地将所述样品的至少一部分引入所述流程。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)释放区,所述释放区可以包括多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括检测区,所述检测区可以包括相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在于所述流程中的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述样品的至少一部分可以含有所述分析物。在某些实施方式中,所述释放区可以配置(例如)以将所述多种肽-标签试剂中的至少一部分释放到所述流程中。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以固定配置以释放的所述多种肽-标签试剂的至少一部分的至少一小部分。在某些实施方式中,所述样品区可以定位在所述释放区下游的流程中。

在某些实施方式中,所述释放区可以定位在所述样品区下游的流程中。在某些实施方式中,所述样品可以是固体、凝胶、致密样品和/或凝结样品。在某些实施方式中,所述样品可以溶解,混合,被动混合和/或扩散到所述溶剂中。在某些实施方式中,所述分析物可以从所述样品中迁移、溶解、断开和/或扩散到所述溶剂中。在某些实施方式中,所述释放区可以放置在(例如)外壳中。在某些其它实施方式中,所述样品区可以放置在(例如)外壳中。在某些其它实施方式中,可以将所述样品通过(例如)所述外壳所限定的样品入口引入到所述侧向流装置中。在某些实施方式中,所述溶剂区可以配置(例如)以通过(例如)所述外壳所限定的溶剂入口接收溶剂。在某些其它实施方式中,所述样品入口可以成形以使所述样品涂布、移液和/或涂片到所述样品区。

某些实施方式可以提供(例如)用于检测预定分析物的侧向流装置,其包括:(i)通过所述侧向流装置的可渗透子组件所限定的流程;(ii)溶剂区,其配置以接收溶剂并将所述溶剂部分连通至所述流程;(iii)样品区,其配置以接收样品并将所述样品的至少一部分引入至所述流程,所述样品的所述至少一部分含有预定分析物;(iv)释放区,其包括多种肽-标签试剂,所述释放区配置以将所述多种肽-标签试剂的至少一部分释放到所述流程中;和(v)检测区,其包含相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在于所述流程中的多种抗-肽试剂,所述多种抗-肽试剂配置以固定所释放的所述多种肽-标签试剂的至少一部分的至少一部分。

某些实施方式可以提供侧向流装置。在某些实施方式中,所述侧向流装置可以包括(例如)第一可渗透部件,其可以配置(例如)以接收溶剂。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)第二可渗透部件,所述第二可渗透部件可以与所述第一可渗透部件流体连通。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)第三可渗透部件,所述第三可渗透部件可以与所述第一可渗透部件流体连通。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)第四可渗透部件,所述第四可渗透部件可以与至少所述第二和所述第三可渗透部件流体连通。在某些实施方式中,所述第二可渗透部件可以配置(例如)以接收含有分析物的样品。在某些实施方式中,所述第三可渗透部件可以具有沉积其上的多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述第四可渗透部件可以具有相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值与之结合的多种抗-肽试剂。

某些实施方式可以提供(例如)侧向流装置,其包括:(i)配置以接收溶剂的第一可渗透部件;(ii)与所述第一可渗透部件流体连通的第二可渗透部件,所述第二可渗透部件配置以接收含有预定分析物的样品;(iii)与所述第一可渗透部件流体连通的第三可渗透部件,所述第三可渗透部件具有沉积其上的多种肽-标签试剂;和(iv)与至少所述第二和所述第三可渗透部件流体连通的第四可渗透部件,所述第四可渗透部件具有相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值与之结合的多种抗-肽试剂。

某些实施方式提供了侧向流方法,其包括(例如)检测方法、制备侧向流装置的方法和制备侧向流试剂盒的方法。本文考虑了其它类型的侧向流方法。

某些实施方式可以提供方法。在某些实施方式中,所述方法可以包括(例如)将可以包含分析物的样品暴露于多种肽-标签试剂以形成分析物复合物。在某些其它实施方式中,所述方法可以包括(例如)将所述分析物复合物暴露于多种可检测试剂以产生包含所述多种可检测试剂的至少一种的分析物复合物。在某些实施方式中,所述方法可以包括(例如)将可以包含分析物的样品暴露于多种可检测试剂以形成分析物复合物。在某些其它实施方式中,所述方法可以包括(例如)将所述分析物复合物暴露于多种肽-标签试剂以产生包含所述多种肽-标签试剂中的至少一种的分析物复合物。在某些实施方式中,所述方法还可以包括(例如)将所述分析物复合物输送至侧向流装置的检测区。在某些实施方式中,所述分析物复合物可以包括(例如)分析物和所述多种肽-标签试剂中的至少一种。在某些实施方式中,所述检测区可以包括(例如)相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以能够固定所述多种肽-标签试剂中的至少一种的至少一种。

在某些实施方式中,输送可以包括(例如)侧向流装置上的整体运输、被动运输、毛细管作用、润湿、芯吸或其两种或更多种的组合。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的至少一种的至少一种可以包括(例如)多种共价缀合的肽标签,其中所述共价缀合的肽标签中的至少一种可以配置(例如)以结合所述多种抗-肽试剂中的至少一种。在某些实施方式中,所述分析物复合物可以在所述侧向流装置的一部分上形成。在某些实施方式中,所述分析物复合物的至少一部分可以不必在所述侧向流装置的任何部分上形成。在某些实施方式中,所述方法还可以包括(例如)在形成所述分析物复合物之前,将所述多种肽-标签试剂从所述侧向流装置的一部分上的结合态释放,例如,通过将所述多种肽-标签试剂暴露于样品和/或溶剂。在某些实施方式中,所述方法还可以包括(例如)将液体中的所述多种肽-标签试剂引入到所述侧向流装置。在某些实施方式中,形成所述分析物复合物还可以包括(例如)将至少一部分样品和至少一部分所述多种肽-标签试剂暴露于溶剂。在某些其它实施方式中,可以在所述多种肽-标签试剂的至少一部分之前、之后或同时,将所述至少一部分样品暴露于溶剂。在某些实施方式中,所述方法还可以包括(例如)将所述分析物复合物固定至所述侧向流装置的一部分。在某些实施方式中,所述方法还可以包括(例如)将所述分析物复合物固定至所述检测区的一部分。在某些实施方式中,所述方法还可以包括(例如)将所述多种肽-标签试剂中的至少一种的至少一种与所述多种抗-肽试剂中的至少一种结合。在某些其它实施方式中,所述方法还可以包括(例如)将所述多种可检测试剂从所述侧向流装置的一部分上的结合态释放,例如,通过将所述多种可检测试剂暴露于样品和/或溶剂。在某些其它实施方式中,所述方法还可以包括(例如)将液体中的所述多种可检测试剂引入到所述侧向流装置。在某些实施方式中,所述方法还可以包括(例如)检测所述固定的分析物复合物。在某些其它实施方式中,所述方法可以包括(例如)通过检测结合至所述固定的分析物复合物的可检测试剂来检测所述固定的分析物复合物。

在某些实施方式中,所述检测可以在小于2小时,例如,在小于90分钟、80分钟、70分钟、60分钟、50分钟、40分钟、30分钟、20分钟、18分钟、16分钟、14分钟、12分钟、10分钟、9分钟、8分钟、7分钟、6分钟、5分钟、4分钟、3分钟、2分钟或者小于1分钟内完成。在某些实施方式中,所述检测可以在1分钟至20分钟之间的范围内,例如,在1分钟至5分钟,5分钟至15分钟,5分钟至10分钟之间的范围内,或者在3分钟至8分钟之间的范围内完成。在某些实施方式中,所述检测可能需要至少10分钟,例如,至少15分钟、20分钟、30分钟、45分钟或者至少1小时。

某些实施方式可以提供(例如)方法,其包括:(i)将包含预定分析物的样品暴露于多种肽-标签试剂以形成分析物复合物,所述分析物复合物包含预定分析物和所述多种肽-标签试剂中的至少一种;和(ii)将所述分析物复合物输送至侧向流装置的检测区,所述检测区包含相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在的多种抗-肽试剂,所述多种抗-肽试剂能够固定所述多种肽-标签试剂中的至少一种的至少一种。

某些实施方式可以提供方法。在某些实施方式中,所述方法可以配置以检测至少两种分析物,例如,至少两种分析物、至少三种分析物、至少四种分析物、至少五种分析物、至少六种分析物、至少七种分析物、至少八种分析物、至少九种分析物或者检测至少十种分析物。在某些实施方式中,所述方法可以配置以检测多达十种分析物。在某些实施方式中,所述方法可以包括(例如)将可以包含第一分析物和第二分析物的样品暴露于多种肽-标签试剂以形成至少第一分析物复合物和第二分析物复合物。在某些实施方式中,所述方法还可以包括(例如)将至少所述第一分析物复合物和所述第二分析物复合物输送至侧向流装置的检测区。在某些实施方式中,所述第一分析物复合物可以包括(例如)所述第一分析物和所述多种肽-标签试剂中的至少第一种。在某些实施方式中,所述第二分析物复合物可以包括(例如)所述第二分析物和所述多种肽-标签试剂中的至少第二种。在某些实施方式中,所述检测区可以包括(例如)相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以能够固定所述多种肽-标签试剂中的至少一种的至少一种。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置以固定所述第一分析物复合物和所述第二分析物复合物。

在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的第一种可以包括第一类型的肽标签和第一类型的捕获剂。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的第二种可以包括第二类型的肽标签和第二类型的捕获剂。在某些其它实施方式中,所述第一类型的肽标签和所述第二类型的肽标签可以是不同类型的肽标签和/或肽序列。在某些其它实施方式中,所述第一类型的捕获剂和所述第二类型的捕获剂可以是不同类型的捕获剂,例如,不同类型的抗体。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以包括至少两种类型的抗-肽试剂。在某些其它实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以包括第一类型的抗-肽试剂,其可以配置以结合所述第一类型的肽标签,并且所述多种抗-肽试剂还可以包括第二类型的抗-肽试剂,其可以配置以结合所述第二类型的肽标签。在某些其它实施方式中,所述第一类型的抗-肽试剂可以是所述第一类型的肽标签的特异性结合伴侣,并且所述第二类型的抗-肽试剂可以是所述第二类型的肽标签的特异性结合伴侣。

某些实施方式可以提供(例如)检测至少两种分析物的方法,其包括:(i)将包含第一分析物和第二分析物的样品暴露于多种肽-标签试剂以形成第一分析物复合物和第二分析物复合物,(a)所述第一分析物复合物包含第一分析物和所述多种肽-标签试剂中的至少第一种;和(b)所述第二分析物复合物包含第二分析物和所述多种肽-标签试剂中的至少第二种;和(ii)将所述第一分析物复合物和所述第二分析物复合物输送至侧向流装置的检测区,所述检测区包含相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在的多种抗-肽试剂,所述多种抗-肽试剂配置以固定所述第一分析物复合物和所述第二分析物复合物。

某些实施方式(例如)可以提供方法。在某些实施方式中,所述方法可以包括(例如)将可以包含第一分析物和第二分析物的样品暴露于多种第一肽-标签试剂和多种第二肽-标签试剂以形成第一分析物复合物和第二分析物复合物。在某些实施方式中,所述方法还可以包括(例如)将所述第一分析物复合物和所述第二分析物复合物输送至侧向流装置的检测区。在某些实施方式中,所述第一分析物复合物可以包括(例如)所述第一分析物和所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种。在某些实施方式中,所述第二分析物复合物可以包括(例如)所述第二分析物和所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种。在某些实施方式中,例如,所述检测区可以包括(例如)相对于多种第一肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在的多种第一抗-肽试剂。在某些其它实施方式中,例如,所述检测区可以包括(例如)相对于多种第二肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在的多种第二抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂可以配置以固定所述第一分析物复合物。在某些实施方式中,所述多种第二抗-肽试剂可以配置以固定所述第二分析物复合物。

在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂的至少一部分可以结合在所述检测区的第一子区中。在某些实施方式中,所述多种第二抗-肽试剂的至少一部分可以结合在所述检测区的第二子区中。在某些实施方式中,所述第一子区和所述第二子区可以重叠。在某些实施方式中,所述第一子区和所述第二子区可以分离。在某些实施方式中,在所述部分的至少一部分迁移通过所述第二子区之前,所述样品部分可以迁移通过所述第一子区。

某些实施方式可以提供(例如)检测至少两种分析物的方法,其包括:(i)将包含第一分析物和第二分析物的样品暴露于多种第一肽-标签试剂和多种第二肽-标签试剂以形成第一分析物复合物和第二分析物复合物,(a)所述第一分析物复合物包含所述第一分析物和所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种;和(b)所述第二分析物复合物包含所述第二分析物和所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种;和(ii)将所述第一分析物复合物和所述第二分析物复合物输送至侧向流装置的检测区,所述检测区包含:(a)相对于所述多种第一肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在的多种第一抗-肽试剂,所述多种第一抗-肽试剂配置以固定所述第一分析物复合物;和(b)多种第二抗-肽试剂,其配置以固定所述第二分析物复合物。

某些实施方式可以提供多用侧向流测试试剂盒。在某些实施方式中,所述多用侧向流试剂盒可以包括(例如)通用接收器,其中所述通用接收器可以配置(例如)以接收多种可渗透部件中的任一种并且任选地使所述多种可渗透部件中的任一种与检测区流体连通。在某些实施方式中,所述检测区可以包括(例如)至少一种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多用侧向流试剂盒还可以包括所述多种可渗透部件的第一可渗透部件。在某些实施方式中,所述多用侧向流试剂盒还可以包括所述多种可渗透部件的第二可渗透部件。在某些实施方式中,所述第一可渗透部件可以包括(例如)可以能够与第一预定类型的分析物结合的第一肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述第二可渗透部件可以包括(例如)可以能够与第二预定类型的分析物结合的第二肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述第一和第二肽-标签试剂中的每一个可以是所述至少一种抗-肽试剂中的至少一种的结合伴侣。

某些实施方式可以提供(例如)多用侧向流测试试剂盒,其包括:(i)通用接收器,所述通用接收器配置以接收多种可渗透部件中的任一种并且使所述多种可渗透部件中的任一种与检测区流体连通,所述检测区包含至少一种抗-肽试剂;(ii)所述多种可渗透部件的第一可渗透部件,其包括能够与第一预定分析物结合的第一肽-标签试剂;和(iii)所述多种可渗透部件的第二可渗透部件,其包括能够与第二预定分析物结合的第二肽-标签试剂,其中所述第一和第二肽-标签试剂中的每一个是所述至少一种抗-肽试剂中的至少一种的结合伴侣。

某些实施方式可以提供用于检测分析物的分散流装置。在某些实施方式中,所述分散流装置可以包括多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述分散流装置可以包括中央释放区,其可以配置以将所述多种肽-标签试剂引入到分散流程。在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以布置在所述中央释放区周围的分散流程中。在某些实施方式中,所述分散流装置可以配置以固定所述多种肽-标签试剂中的至少一种。在某些实施方式中,所述分散流程可以是径向流程。

某些实施方式可以提供(例如)分散流装置,其包括:(i)多种肽-标签试剂;(ii)中央释放区,其配置以将所述多种肽-标签试剂引入到分散流程中;和(iii)相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在的多种抗-肽试剂,所述多种抗-肽试剂:(a)布置在所述中央释放区周围的分散流程中;和(b)能够固定所述多种肽-标签试剂中的至少一种。

某些实施方式可以提供分散流装置。在某些实施方式中,所述分散流装置可以配置以检测多种不同类型的分析物,例如,至少两种不同类型的分析物,至少三种不同类型的分析物,至少四种不同类型的分析物,至少五种不同类型的分析物,至少六种不同类型的分析物,至少七种不同类型的分析物,至少八种不同类型的分析物,至少九种不同类型的分析物,或者配置以检测至少十种不同类型的分析物。在某些实施方式中,所述分散流装置可以配置以检测多达十种不同类型的分析物。在某些实施方式中,所述分散流装置可以包括多种肽-标签试剂。

在某些实施方式中,所述分散流装置可以包括中央样品区,其可以配置以将含有多种分析物的样品连通至分散流程。在某些其它实施方式中,所述分散流程可以包括第一子程(sub-path)。在某些实施方式中,所述分散流程还可以包括第二子程。在某些实施方式中,所述第一子程可以包括多种第一肽-标签试剂,所述多种第一肽-标签试剂的至少一部分能够选择性结合第一类型的分析物。在某些其它实施方式中,所述第一子程还可以包括多种第一抗-肽试剂,所述多种第一抗-肽试剂的至少一部分能够选择性结合所述多种第一肽-标签试剂的至少一部分。在某些其它实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂可以相对于所述多种第一肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在。在某些其它实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂可以配置以固定所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种。在某些实施方式中,所述第二子程可以包括多种第二肽-标签试剂,所述多种第二肽-标签试剂的至少一部分能够选择性结合第二类型的分析物。在某些其它实施方式中,所述第二子程还可以包括多种第二抗-肽试剂,所述多种第二抗-肽试剂的至少一部分能够选择性结合所述多种第二肽-标签试剂的至少一部分。在某些其它实施方式中,所述多种第二抗-肽试剂可以相对于所述多种第二肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在。在某些其它实施方式中,所述多种第二抗-肽试剂可以配置以固定所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种。

在某些实施方式中,所述分散流程可以沿所述分散流装置所限定的径向方向流动。在某些其它实施方式中,可以通过一段所述分散流程限定所述第一子程。在某些其它实施方式中,可以通过另一段所述分散流程限定所述第二子程。在某些实施方式中,可以通过所述分散流装置的可渗透子组件限定所述分散流程。

在某些实施方式中,所述第一子程和所述第二子程流体连通。在某些实施方式中,所述第一子程和所述第二子程流体不连通。

某些实施方式可以提供(例如)用于检测多种分析物的分散流装置,其包括:中央样品区,其配置以将含有多种分析物的样品连通至分散流程,所述分散流程包括:(i)第一子程,其包括:(a)多种第一肽-标签试剂;和(b)相对于所述多种第一肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在的第一多种抗-肽试剂,所述多种第一抗-肽试剂能够固定所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种;和(ii)第二子程,其包括:(a)多种第二肽-标签试剂;和(b)所述第二子程包括能够固定所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种的第二多种抗-肽试剂。

某些实施方式可以提供用于检测多种分析物的分散流装置。在某些实施方式中,所述分散流装置可以包括中央样品区,其可以配置以将含有多种分析物的样品释放至第一分散流程和第二分散流程。在某些实施方式中,所述分散流装置还可以包括第一分散流程中的第一释放区,其可以配置以将多种第一肽-标签试剂释放到所述第一分散流程。在某些实施方式中,所述分散流装置还可以包括第二分散流程中的第二释放区,其可以配置以将多种第二肽-标签试剂释放到所述第二分散流程。在某些实施方式中,所述分散流装置还可以包括多种第一抗-肽试剂,其可以相对于所述多种第一肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在。在某些其它实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂可以布置在第一释放区下游的第一分散流程中。在某些其它实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂可以配置以固定所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种。在某些实施方式中,所述分散流装置还可以包括多种第二抗-肽试剂。在某些其它实施方式中,所述多种第二抗-肽试剂可以布置在第二释放区下游的第二分散流程中。在某些其它实施方式中,所述多种第二抗-肽试剂可以配置以固定所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种。

在某些实施方式中,所述多种第一抗-肽试剂可以布置在第一检测区中。在某些实施方式中,所述多种第二抗-肽试剂可以布置在第二检测区中。在某些其它实施方式中,所述第一检测区和所述第二检测区可以流体连通。在某些其它实施方式中,所述第一检测区和所述第二检测区可以不必流体连通。在某些其它实施方式中,所述第一检测区和所述第二检测区可以处于所述分散流装置的不同段。在某些实施方式中,所述第一分散流程和所述第二分散流程可以处于所述分散流装置的不同段。

某些实施方式可以提供(例如)分散流装置,其包括:(i)中央样品区,其配置以将含有多种分析物的样品释放到第一分散流程和第二分散流程中;(ii)所述第一分散流程中的第一释放区,其配置以将多种第一肽-标签试剂释放到第一分散流程中;(iii)所述第二分散流程中的第二释放区,其配置以将多种第二肽-标签试剂释放到第二分散流程;(iv)相对于所述多种第一肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在的多种第一抗-肽试剂,所述多种第一抗-肽试剂:(a)布置在所述第一释放区下游的第一分散流程中;和(b)能够固定所述多种第一肽-标签试剂中的至少一种;和(v)多种第二抗-肽试剂,其布置在所述第二释放区和所述第二释放区下游的第二分散流程中,所述多种第二抗-肽试剂能够固定所述多种第二肽-标签试剂中的至少一种。

某些实施方式可以提供制备侧向流装置的方法。在某些实施方式中,所述制备方法可以包括将多种肽-标签试剂在可渗透组件的第一部分上条带化(striping)。在某些实施方式中,所述制备方法可以包括将多种抗-肽试剂与所述可渗透组件的第二部分结合。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在于测试条上。在某些实施方式中,所述可渗透组件的第二部分与所述可渗透组件的第一部分流体连通。

某些实施方式可以提供(例如)制备侧向流装置的方法,其包括:(i)将多种抗-肽试剂与可渗透组件的部分结合;(ii)将多种肽-标签试剂在所述可渗透组件的第二部分上条带化,所述可渗透组件的第二部分与所述可渗透组件的第一部分流体连通,所述多种肽-标签试剂中的至少一种与所述多种抗-肽试剂中的至少一种形成特异性结合对,其中所述多种抗-肽试剂相对于所述肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在于所述测试条上。

某些实施方式可以提供制备多种侧向流装置的方法。在某些实施方式中,所述方法可以包括制备一定量的通用检测部件。在某些实施方式中,所述方法还可以包括制备一定量的释放部件。在某些实施方式中,所述方法还可以包括(例如)将一定量的释放部件中的每一个与一定量的通用检测部件中不同的一个组装成流体连通。在某些实施方式中,每个通用检测部件可以具有常见类型的抗肽固定化试剂。在某些实施方式中,制备一定量的通用检测部件可以包括(例如)将不同的多种常见类型的抗-肽试剂固定到一个或多个片材上,例如,一个片材上,并分开所述一个或多个片材以形成多个通用检测部件。在某些实施方式中,制备一定量的释放部件可以包括(例如)将多种不同类型的肽-标签试剂在一个或多个片材,例如,一个片材上条带化,并分开所述一个或多个片材以形成多个释放部件。在某些其它实施方式中,每个不同类型的肽-标签试剂可以与常见类型的抗-肽试剂形成特异性结合对。在某些实施方式中,每个不同的多种常见类型的抗-肽试剂可以相对于每个多种不同类型的肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在。在某些实施方式中,至少一种不同的多种常见类型的抗-肽试剂可以相对于所述多种不同类型的肽-标签试剂中的至少一种,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在。

在某些实施方式中,每个所述多种不同类型的肽-标签试剂可以包括不同的多种肽标签。在某些其它实施方式中,每个不同的多种肽标签中的至少一种可以是一种类型的肽标签,其可以是常见类型的抗-肽试剂的结合伴侣。

在某些实施方式中,装置、侧向流装置、组件、可渗透组件、分散流装置、侧向流测试试剂盒或者多用侧向流测试试剂盒可以包括对照区。在某些其它实施方式中,所述对照区可以配置以提供所述装置工作的指示。在某些其它实施方式中,所述对照区可以配置以非选择性捕获存在于所述样品中的物质,例如,蛋白质、抗体、大分子、颗粒等。在某些实施方式中,所述对照区可以包括(例如)蛋白质a和/或蛋白质g。

某些实施方式可以提供(例如)制备多种侧向流装置的方法,其包括:(i)制备一定量的通用检测部件,其具有常见类型的抗肽固定化试剂,其包括:将不同的多种常见类型的抗-肽试剂固定至多种通用检测部件中的每一个;(ii)制备一定量的释放部件,其包括:将多种不同类型的肽-标签试剂在所述多种释放部件中的每一个上条带化,所述不同类型的肽标签试剂中的每一个与所述常见类型的抗-肽试剂形成特异性结合对;和(iii)将一定量的释放部件中的每一个与一定量的通用检测部件中不同的一个组装成流体连通,其中所述不同的多种常见类型的抗-肽试剂中的至少一种相对于所述多种不同类型的肽-标签试剂中的至少一种,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在。

某些实施方式可以提供(例如)侧向流装置,其包括(i)通过所述侧向流装置的可渗透子组件所限定的流程;(ii)释放区,其包括:(a)多种第一肽-标签试剂,所述释放区配置以将所述多种第一肽-标签试剂的至少一部分释放到流程中;和(b)多种第二肽-标签试剂,所述释放区配置以将所述多种第二肽-标签试剂的至少一部分释放到流程中;和(iii)检测区,其包括:(a)相对于所述多种第一肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在于所述流程中的多种第一抗-肽试剂,其中所述多种第一抗-肽试剂中的至少一种是配置以释放的所述多种第一肽-标签试剂的至少一部分的至少一种的结合伴侣;和(b)相对于所述多种第二肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在于所述流程中的多种第二抗-肽试剂,其中所述多种第二抗-肽试剂中的至少一种是配置以释放的所述多种第二肽-标签试剂的至少一部分的至少一种的结合伴侣。

某些实施方式可以提供(例如)用于检测多种分析物的测定平台,其包括:(i)可渗透释放区,其配置以输送包含第一分析物和第二分析物的样品,所述渗透区包括:(a)多种第一肽-标签试剂,所述多种第一肽-标签试剂的至少一部分能够形成包含所述第一分析物的第一分析物复合物;和(b)多种第二肽-标签试剂,所述多种第二肽-标签试剂的至少一部分能够形成包含所述第二分析物的第二分析物复合物;和(ii)可渗透检测区,其配置以接收至少一部分输送样品,所述可渗透检测区包括:(a)相对于所述多种第一肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1的比值存在的多种第一抗-肽试剂,所述多种第一抗-肽试剂配置以固定所述多种第一肽-标签试剂的至少一部分中的至少一种;和(b)多种第二抗-肽试剂,其配置以固定所述多种第二肽-标签试剂的至少一部分中的至少一种。

附图说明

图1:侧向流检测装置的示意图。

图2:溶剂-驱动的侧向流检测装置的示意图。

图3:多用侧向流测试试剂盒的示意图。

图4:径向流检测装置的示意图。

图5:多分析物侧向流检测装置的示意图。

发明详述

某些实施方式提供了检测一种或多种分析物的侧向流装置和系统,例如:测定平台、侧向流装置、组件、专用试剂盒、多用试剂盒和分散流装置。本文考虑了其它类型的侧向流装置。某些实施方式提供了检测一种或多种分析物的侧向流方法,其包括(例如)检测方法、制备侧向流装置的方法和制备侧向流试剂盒的方法。本文考虑了其它类型的侧向流方法。

适合的分析物可以包括肽-标签试剂能够结合的任何分析物(例如,可以设计或选择所述肽-标签试剂以结合预定分析物)。在某些实施方式中,所述分析物可以是预定分析物,例如,对其选自了特定类型的肽-标签试剂的分析物。在某些实施方式中,所述分析物可以包括(例如)蛋白质、微生物或其片段、病毒或其片段、肽、生物标志物、抗体(例如,抗传染剂的抗体)或其片段、核酸、大分子、小分子、药物、激素(例如,人绒毛膜促性腺激素)或其片段、半抗原或其片段等。在某些实施方式中,所述分析物可以是迄今为止已使用已知免疫测定程序测定的或者已知通过这些程序可检测的任何分析物(参见,例如,“theimmunoassayhandbook”,第四版,d.wild主编,elsevierltd.(2013))。本文还考虑了其它类型的分析物。

蛋白质分析物可以包括(例如)磷蛋白。磷蛋白的范围是已知,其包括(例如)磷酸化erk、s6p240/44、aktpt308或aktps473。在某些实施方式中,所述分析物可以包括(例如)细胞信号通路组分、细胞因子或肿瘤抑制剂。在某些实施方式中,所述分析物可以包括(例如)磷酸化、甲基化或糖基化蛋白质等。在某些实施方式中,所述分析物可以包括(例如)磷酸化-erk1/2;总erk1/2;磷酸化-akt1/2/3;总akt1/2/3;磷酸化-nf-kβp65;总nf-kβp65;磷酸化-l-kb;总-kbp;磷酸化-stat3;总stat3;磷酸化-stat5a/b;磷酸化-jnk1/2/3;总jnk1/2/3;磷酸化-p38mapk;总p38mapk;磷酸化-p53;总p53;磷酸化-p70s6k;总p70s6k;和gapdh。在其它实施方式中,所述蛋白质可以包括(例如)在包括(但不限于)人、小鼠、大鼠、兔、猫、狗、猪、母牛、鸡和猴子的物种中的急性期蛋白质,例如,c-反应蛋白、结合珠蛋白、血液结合素、α-1酸性糖蛋白、簇集蛋白、α-2-巨球蛋白、血清淀粉状蛋白a(saa)或血清淀粉状蛋白p(sap)。在某些实施方式中,所述蛋白质可以包括(例如)蛋白质的特殊形式或状态、内原性蛋白或者转染的蛋白。

在某些实施方式中,所述分析物可以包括(例如)生物标志物,例如,癌症生物标志物(例如,前列腺癌生物标志物或肠癌生物标志物)或糖尿病肾病疾病生物标志物。在某些实施方式中,所述分析物可以包括(例如)对于植物或污染物诊断中的检测有用的分析物。在某些其它实施方式中,所述分析物可以包括(例如)对于人或兽医诊断中的检测有用的分析物。在某些实施方式中,所述分析物可以能够从所述样品迁移、溶解、断开或扩散至溶剂。适合的溶剂可以包括(例如)水、乙醇、缓冲溶液、ph-平衡溶液、有机溶剂或其两种或更多种的组合。

在某些实施方式中,所述分析物或多种分析物中任一种的浓度可以处于0-100ng/ml,例如,1-100ng/ml之间,1-50ng/ml之间,1-25ng/ml之间,10-50ng/ml之间的范围,1-10ng/ml之间的范围。在某些实施方式中,所述分析物、所述一种或多种分析物的浓度可以低于1ng/ml。在某些实施方式中,所述分析物或多种分析物中任一种的浓度可以大于50ng/ml。在某些实施方式中,所述分析物或多种分析物中任一种的浓度可以为100ng/ml或以下,例如,50ng/ml或以下,10ng/ml或以下,1ng/ml或以下,100pg/ml或以下或10pg/ml或以下,1pg/ml或以下,100fg/ml或以下,10fg/ml或以下或1fg/ml或以下。在某些实施方式中,所述分析物或多种分析物中任一种的浓度可以大于10ng/ml,大于1ng/ml,大于100pg/ml或大于10pg/ml,大于1pg/ml,大于100fg/ml,大于10fg/ml或大于1fg/ml。在某些实施方式中,所述分析物或多种分析物中任一种的浓度可以在1fg/ml至100ng/ml的范围内,例如,1fg/ml至10ng/ml,1fg/ml至1ng/ml,10fg/ml至100ng/ml,10fg/ml至10ng/ml,10fg/ml至1ng/ml,100fg/ml至100ng/ml,100fg/ml至10ng/ml,100fg/ml至1ng/ml,1pg/ml至100ng/ml,1pg/ml至10ng/ml的范围内,或者1pg/ml至1ng/ml的范围内。

在某些实施方式中,分析物或者多种分析物中的任一种的浓度可以在0miu/ml(毫国际单位每毫升)至100miu/ml的范围内,例如,0.25miu/ml至0.5miu/ml,0.5miu/ml至1miu/ml,1miu/ml至2miu/ml,2miu/ml至5miu/ml,5miu/ml至10miu/ml,10miu/ml至15miu/ml,15miu/ml至25miu/ml,25miu/ml至50miu/ml的范围内或者50miu/ml至100miu/ml的范围内。在某些实施方式中,分析物或多种分析物中的任一种的浓度可以小于100miu/ml,小于50miu/ml,小于25miu/ml,小于15miu/ml,小于10miu/ml,小于5miu/ml,小于2miu/ml,小于1miu/ml,小于0.5miu/ml或者小于0.25miu/ml。

在某些实施方式中,所述分析物可以具有10da至10,000,000kda范围内的分子量,例如,10da至25da、25da至75da、75da至100da、100da至200da、200da至300da、300da至500da、500da至750da、750da至200da、100da至1kda、1kda至10kda、10kda至15kda、15kda至20kda、20kda至25kda、25kda至50kda、50kda至75kda、75kda至100kda、100kda至125kda、125kda至150kda、150kda至175kda、175kda至200kda、200kda至250kda、250kda至500kda、500kda至1,000kda、1,000kda至5,000kda、5,000kda至10,000kda、10,000kda至1,000,000kda、1,000,000kda至10,000,000kda、75kda至400kda、100kda至200kda范围内的分子量,或者125kda至175kda范围内的分子量。

某些实施方式可以提供任选地,在存在一种或多种类型非分析物抗体的情况下,用于检测样品中至少一种类型的分析物的测定平台。在某些实施方式中,例如,所述测定平台可以包括(例如)至少一种类型的肽-标签试剂和至少一种类型的抗-肽标签。在某些实施方式中,所述至少一种类型的抗-肽试剂中的一种与所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种的结合亲合力或速率常数可以与所述至少一种类型的抗-肽试剂中的一种与一种或多种类型的非分析物抗体中的任一种的结合亲合力或速率常数大致相同。在某些实施方式中,所述至少一种类型的抗-肽试剂中的一种与所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种的结合亲合力或速率常数可以比所述至少一种类型的抗-肽试剂中的一种与一种或多种类型的非分析物抗体中的任一种的结合亲合力或速率常数大至少2倍,例如,大至少5、10、25、50、75或至少100倍。在某些实施方式中,所述至少一种类型的抗-肽试剂中的一种与所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种的结合亲合力或速率常数可以比所述至少一种类型的抗-肽试剂中的一种与一种或多种类型的非分析物抗体中的任一种的结合亲合力或速率常数大2-1000倍的范围,例如,在大2-500,2-100,2-10,10-250,20-100倍的范围内或者在大5-50倍的范围内。

在某些实施方式中,所述至少一种类型的抗-肽试剂中的一种与所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种之间的解离常数可以与所述至少一种类型的抗-肽试剂中的一种与一种或多种类型的非分析物抗体中任一种之间的解离常数大致相同。在某些实施方式中,所述至少一种类型的抗-肽试剂中的一种与所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种之间的解离常数可以比所述至少一种类型的抗-肽试剂中的一种与一种或多种类型的非分析物抗体中的任一种之间的解离常数大至少2倍,例如,大至少5、10、25、50、75或至少100倍。在某些实施方式中,所述至少一种类型的抗-肽试剂中的一种与所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种之间的解离常数可以比所述至少一种类型的抗-肽试剂中的一种与一种或多种类型的非分析物抗体中的任一种之间的解离常数大2-1000倍的范围,例如,在大2-500,2-100,2-10,10-250,20-100倍的范围内或者在大5-50倍的范围内。

在某些实施方式中,所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种可以与一种或多种预定类型的分析物中的一种形成第一特异性结合对,其中所述特异性结合对可以具有大于10-6m的解离常数(kd)。在其它实施方式中,所述第一特异性结合对可以具有大于10-7m,10-8m或者10-9m的kd。在某些实施方式中,所述第一特异性结合对可以具有10-8m至10-12m范围内的解离常数(kd)。在某些实施方式中,所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种可以与至少一种类型的抗-肽试剂中的一种形成第二特异性结合对,其中所述第二特异性结合对可以具有大于10-6m的解离常数(kd)。在其它实施方式中,所述第二特异性结合对可以具有大于10-7m,10-8m或者10-9m的kd。在某些实施方式中,所述第二特异性结合对可以具有10-8m至10-12m范围内的解离常数(kd)。在某些实施方式中,所述第一特异性结合对可以具有10-8m至10-12m范围内的kd和所述第二特异性结合对可以具有大于10-6m范围内的kd。在某些实施方式中,所述第二特异性结合对可以具有10-8m至10-12m范围内的kd和所述第一特异性结合对可以具有大于10-6m范围内的kd。

在某些实施方式中,所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种可以以1ng至50ng之间的范围内的量,例如,3ng至30ng,4ng至20ng,4ng至15ng,5ng至10ng之间的范围或者5ng至8ng之间的范围内的量,例如,6.5ng的量存在于所述测定平台中。在某些实施方式中,所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种可以以小于10ng的量,例如,小于9ng、8ng、7.5ng、7ng、6.5ng、6ng、5.5ng、5ng、4.5ng、4ng、3.5ng、3ng、2.5ng或者以小于2ng的量存在于所述测定平台中。

在某些实施方式中,所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种可以以10ng/cm2至500ng/cm2之间范围内的通过所述所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种条带化的测试条面积的量,例如,30ng/cm2至300ng/cm2,40ng/cm2至200ng/cm2,40ng/cm2至150ng/cm2,50ng/cm2至100ng/cm2之间范围内或者50ng/cm2至80ng/cm2之间范围内,例如,65ng/cm2的通过所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种条带化的测试条面积的量存在于所述测定平台中。在某些实施方式中,所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种可以以小于100ng/cm2的通过所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种条带化的测试条面积的量,例如,小于90ng/cm2、80ng/cm2、75ng/cm2、70ng/cm2、65ng/cm2、60ng/cm2、55ng/cm2、50ng/cm2、45ng/cm2、40ng/cm2、35ng/cm2、30ng/cm2、25ng/cm2或者小于20ng/cm2的通过所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种条带化的测试条面积的量存在于所述测定平台中。在某些其它实施方式中,通过所述至少一种类型的肽-标签试剂中的一种条带化的测试条面积可以具有0.01-5cm2,例如,0.1-2cm2,0.15-2cm2范围内的表面积,或者0.25-1cm2范围内的表面积。

某些实施方式可以提供侧向流装置或系统以检测分析物。所述侧向流装置或系统可以包括(例如)多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂可以能够形成分析物复合物,其可以包含所述多种肽-标签试剂中的至少一种和所述分析物。在某些实施方式中,所述侧向流装置或系统还可以包括(例如)相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以(例如)至少100:1的比值存在的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述侧向流装置或系统还可以包括(例如)多种可检测试剂,并且任选地,所述分析物复合物还可以包括(例如)所述多种可检测试剂中的至少一种。

在某些实施方式中,所述样品可以是可以或可以不含有所述分析物的任何混合物、组合物或溶液。在某些测定中,例如,确定分析物可以不存在于样品中可以是有用的。在某些实施方式中,所述样品可以包括(例如)实验室样品、医学样品、生物样品、水样、食品样品、农业样品、血清样品、含有血清的样品、细胞裂解液或其两种或更多种的组合。所述样品可以包括(例如)尿、血液或者人或动物的另一种体液。

在某些实施方式中,所述样品可以是液体,例如,水溶液、混悬液或液体混合物;固体;凝胶;或凝结物质。在某些实施方式中,所述样品可以在溶剂中溶解、混合、被动混合或者扩散。在某些实施方式中,可以对所述样品进行预处理,例如,可以对所述样品进行预澄清、浓缩、稀释或处理以从所述样品中除去一种或多种组分或杂质。

肽-标签试剂可以包括(例如)可以能够与所述分析物结合的试剂,例如,抗体,包括(例如)单克隆抗体、多克隆抗体、多价抗体、嵌合抗体、多重特异性抗体或抗体片段;适体;affimer;蛋白质;蛋白质受体;蛋白质配体;或融合蛋白,其包括(例如)免疫球蛋白融合伴侣、稳定受体或配体的融合伴侣或者提供结合靶标的融合伴侣。

在某些实施方式中,所述肽-标签试剂可以具有100da至10,000kda范围内的分子量,例如,100da至1kda、1kda至10kda、10kda至25kda、25kda至50kda、50kda至75kda、75kda至100kda、100kda至125kda、125kda至150kda、150kda至175kda、175kda至200kda、200kda至250kda、250kda至500kda、500kda至1,000kda、1,000kda至5,000kda、5,000kda至10,000kda、75kda至400kda、100kda至200kda范围内的分子量或者125kda至175kda范围内的分子量。

在某些实施方式中,所述肽-标签试剂可以能够结合至所述分析物的表位,例如,所述肽-标签试剂可以包括互补决定簇区或其部分,其可以能够与所述分析物的一个或多个表位,例如,磷酸化-表位结合。在某些实施方式中,所述分析物可以是所述肽-标签试剂的靶标。在某些实施方式中,所述肽-标签试剂可以非共价结合至所述分析物,例如,可释放地结合,部分结合,氢键结合,阴离子结合或者其两种或更多种的组合。

在某些实施方式中,所述肽-标签试剂还可以包括(例如)多种肽标签。在某些实施方式中,所述肽-标签试剂还可以包括(例如)多种单一类型的肽标签。在某些实施方式中,所述肽-标签试剂还可以包括(例如)两种、三种或四种类型的肽标签中的多种。在某些实施方式中,所述多种肽标签可以附接、缀合和/或共价结合至所述肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述多种肽标签可以通过交联至所述肽-标签试剂来结合至所述肽-标签试剂。在某些其它实施方式中,所述交联可以包括(例如)通过伯胺的共价缀合。在某些实施方式中,dna重组技术可以用于形成包含多种肽标签的肽-标签试剂。

在某些实施方式中,所述多种肽标签可以包括(例如)1-50或2-50个范围内的肽标签,如5-8、3-7、2-5、10-15、15-20个的范围内或者25-50个的范围内的肽标签。在某些实施方式中,所述多种肽标签可以包括(例如)不超过50个肽标签,如不超过12个,不超过10个,不超过8个,不超过7个,不超过6个,不超过5个或者不超过3个肽标签。在某些实施方式中,所述多种肽标签可以是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个肽标签。

适合的肽标签可以包括flag-标签,例如,dykddddk(seqidno:1);具有氨基酸序列kritveealahpyleqyydptde(seqidno:2)的肽标签;具有氨基酸序列hhhhhh(seqidno:3)的肽标签;具有氨基酸序列eqkliseedl(seqidno:4)的肽标签;具有氨基酸序列ypydvpdya(seqidno:5)的肽标签;具有氨基酸序列ytdiemnrlgk(seqidno:6)的肽标签;具有氨基酸序列qpelapedped(seqidno:7)的肽标签;具有氨基酸序列cdykddddk(seqidno:8)的肽标签;flag八肽;多肽蛋白标签;或者不包括多个具有相同电荷的连续氨基酸的多肽序列。在某些其它实施方式中,适合的肽标签还可以结合其它亲合标签使用,例如,多组氨酸标签(his-标签)、ha-标签或者myc-标签。在某些实施方式中,所述肽标签中的至少一部分可以不必是天然存在的。在某些实施方式中,适合的肽标签不会使其所附接的肽-标签试剂变性或失活。在某些实施方式中,所述适合的肽标签中的至少一种比flag-标签更亲水。在某些实施方式中,可以通过用特异性蛋白酶、肠激酶(肠肽酶)处理,从它们所附接的肽-标签试剂中除去所述适合的肽标签中的至少一部分。在某些实施方式中,所述适合的肽标签中的至少一部分可以不必是在从中采集样品的生物体中天然存在的。在某些实施方式中,适合的肽标签可以包括具有不超过100个氨基酸,例如,不超过50个,不超过30个,不超过20个,不超过15个,不超过12个,不超过10个,不超过9个或者不超过8个氨基酸的氨基酸序列。在某些实施方式中,适合的肽标签可以包括具有4-100个氨基酸的范围内,例如,4-50、4-30、4-20、6-15、6-12、8-20、8-15个的范围内或者8-12个氨基酸的范围内的氨基酸序列。

在某些实施方式中,抗-肽试剂可以包括(例如)能够与所述多种肽标签中的至少一种结合的试剂,例如,所述多种肽标签中的至少10%、25%、50%、90%或95%,如(例如)所述多种肽标签中的每一个。在某些实施方式中,适合的抗-肽试剂可以包括(例如)抗体,包括(例如)单克隆抗体、多克隆抗体、多价抗体、嵌合抗体、多重特异性抗体或抗体片段;适体;affimer;蛋白质;蛋白质受体;蛋白质配体;或融合蛋白,其包括(例如)免疫球蛋白融合伴侣、稳定受体或配体的融合伴侣或者提供结合靶标的融合伴侣。

在某些实施方式中,所述抗-肽试剂可以具有100da至10,000kda范围内的分子量,例如,100da至1kda、1kda至10kda、10kda至25kda、25kda至50kda、50kda至75kda、75kda至100kda、100kda至125kda、125kda至150kda、150kda至175kda、175kda至200kda、200kda至250kda、250kda至500kda、500kda至1,000kda、1,000kda至5,000kda、5,000kda至10,000kda、75kda至400kda、100kda至200kda范围内的分子量或者125kda至175kda范围内的分子量。

在某些实施方式中,所述多种肽标签中的至少一种可以是所述抗-肽试剂的靶标。在某些实施方式中,所述多种肽标签中的至少一种和所述抗-肽试剂可以是特异性结合伴侣。在某些实施方式中,所述抗-肽试剂可以包括(例如)对于所述肽标签中的至少一种或者所述肽标签中的至少一种的一部分,如(例如),对于具有氨基酸序列dykddddk(seqidno:1)的肽标签;具有氨基酸序列cdykddddk(seqidno:8)的肽标签;具有氨基酸序列kritveealahpyleqyydptde(seqidno:2)的肽标签;具有氨基酸序列hhhhhh(seqidno:3)的肽标签;具有氨基酸序列eqkliseedl(seqidno:4)的肽标签;具有氨基酸序列ypydvpdya(seqidno:5)的肽标签;ytdiemnrlgk(seqidno:6);或者具有氨基酸序列qpelapedped(seqidno:7)的肽标签具有高度选择性的结合区域。例如,所述抗-肽试剂的结合区域可以对于所述肽标签中的至少一种的至少60%的氨基酸序列,如所述肽标签中的至少一种的70%、80%、90%、95%或100%的氨基酸序列具有高度选择性。对具有氨基酸序列dykddddk(seqidno:1)的肽标签具有高度选择性的可商购的抗-肽抗体包括sigma-aldrich产品号f7425、f3040、f1804、f3165、f4042、f2555和sab4200071。在某些实施方式中,只有当所述肽标签占据肽-标签试剂上特定类型的位置时,例如,附接在n末端位置的肽,所述抗-肽试剂可以对肽标签具有选择性。在其它实施方式中,所述抗-肽试剂可以对肽标签如何定位在抗-肽试剂上不敏感。

在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少100:1、125:1、150:1、200:1、250:1、300:1、400:1、500:1、750:1或1000:1的比值存在。在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以100:1-1000:1,100:1-500:1,100:1-300:1,250:1-300:1,300:1-1000:1,300:1-500:1,300:1-400:1,300:1-350:1,325:1-375:1,300:1-310:1,310:1-320:1,320:1-330:1,330:1-340:1,340:1-350:1或350:1-360:1的范围内的比值存在。

在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种肽-标签试剂,基于摩尔:摩尔,以至少100:1、125:1、150:1、200:1、250:1、300:1、400:1、500:1、750:1或1000:1的比值存在。在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种肽-标签试剂,基于摩尔:摩尔,以100:1-1000:1,100:1-500:1,100:1-300:1,250:1-300:1,300:1-1000:1,300:1-500:1,300:1-400:1,300:1-350:1,325:1-375:1,300:1-310:1,310:1-320:1,320:1-330:1,330:1-340:1,340:1-350:1或350:1-360:1的范围内的比值存在。

可检测试剂可以包括(例如)可以能够与所述分析物结合的试剂,例如,抗体,包括(例如)单克隆抗体、多克隆抗体、多价抗体、嵌合抗体、多重特异性抗体或抗体片段;适体;affimer;蛋白质;蛋白质受体;蛋白质配体;或融合蛋白,其包括(例如)免疫球蛋白融合伴侣、稳定受体或配体的融合伴侣或者提供结合靶标的融合伴侣,或者提供可检测信号的融合伴侣。在某些实施方式中,所述可检测试剂可以能够结合至所述分析物的表位,例如,所述可检测试剂可以包括互补决定簇区或其部分,其可以能够与所述分析物的一个或多个表位,例如,磷酸化-表位结合。

在某些实施方式中,所述可检测试剂可以具有100da至10,000kda范围内的分子量,例如,100da至1kda、1kda至10kda、10kda至25kda、25kda至50kda、50kda至75kda、75kda至100kda、100kda至125kda、125kda至150kda、150kda至175kda、175kda至200kda、200kda至250kda、250kda至500kda、500kda至1,000kda、1,000kda至5,000kda、5,000kda至10,000kda、75kda至400kda、100kda至200kda范围内的分子量或者125kda至175kda范围内的分子量。

在某些实施方式中,所述分析物可以是所述可检测试剂的靶标。在某些实施方式中,所述可检测试剂可以非共价结合至所述分析物,例如,可释放地结合,部分结合,氢键结合,阴离子结合或者其两种或更多种的组合。

在某些实施方式中,所述可检测试剂中的一种或多种可以包括(例如)可以能够产生可检测信号的可检测标记。在某些实施方式中,所述信号的大小或另一种特征可以与样品中分析物的量或浓度有关。在某些实施方式中,所述可检测标记可以应用于或者结合至所述可检测试剂的另一部分以形成完整的可检测试剂。在某些实施方式中,所述可检测标记可以整合至所述可检测试剂的其余部分。例如,所述可检测试剂可以包括作为融合伴侣、标记的氨基酸或者标记的核苷酸的可检测标记。

适合的可检测标签可以包括(例如)抗原;酶;荧光团;淬灭剂;放射性同位素;发光标记物;化学发光标记物;一种或多种镧系离子,例如eu3+、sm3+、tb3+和/或dy3+、可以能够pcr扩增的核酸;有色颗粒,包括(例如)有色乳胶珠、金属溶胶(例如,胶体金)、金标记物或者染料标记物;可以能够通过荧光共振能量转移相互作用的标签;和可以能够化学转移邻位相互作用的标签。

在某些实施方式中,如果存在,可以通过可检测试剂或者可检测标记直接产生或者通过可以产生可检测信号的其它分子,如(例如)可以包含酶的其它分子间接产生可检测信号。在某些实施方式中,可检测信号包括(但不限于)光信号,其包括(例如)具有通过人的视觉可检测的颜色或者不具有颜色的信号;染色剂;和可以用检测器检测的信号,其包括(例如)分光光度计、荧光计,例如,能够测量时间分辨荧光的荧光计、光度计、放射性-基计数器或者电化学检测器。在某些实施方式中,所述检测器可以是手持检测器、实验室中的检测器和/或移动检测器。在某些实施方式中,可检测信号可以包括如果存在一个信号,当通过能够检测信号的检测器测量时,任何上述类型信号,例如,淬灭信号的缺少。

在免疫测定程序中作为可检测标签有用的金属溶胶及其它类型的有色颗粒是已知的。参见,例如,美国专利no.4,313,734;horisberger,evaluationofcolloidalgoldasacytochromicmarkerfortransmissionandscanningelectronmicroscopy,biol.cellulaire,36,253258(1979);leuvering等人,solparticleimmunoassay,j.immunoassay,1(1):7791(1980)和frens,controllednucleationfortheregulationoftheparticlesizeinmonodispersegoldsuspensions,nature,physicalscience,241:2022(1973)。

金属溶胶,例如,胶体金的使用可以产生可见可检测信号。在某些实施方式中,可检测标签可以包括(例如)提供红色可检测信号的胶体金。在某些实施方式中,可检测标签可以包括(例如)平均粒度在50-100nm的范围内的胶体金,如(例如)平均粒度在55-90,55-85,40-47,60-80,60-75或65-75nm的范围内的胶体金。在某些实施方式中,可检测标签可以包括(例如)平均粒度大于50nm,大于52nm,大于55nm,大于57nm,大于60nm或者大于100nm的胶体金。

在某些实施方式中,可检测标签可以包括(例如)颗粒,其至少一部分的形状可以为基本或主要球形的。在某些实施方式中,所述可检测标签的至少一部分可以包括具有基本或主要非球形形状的颗粒。在某些实施方式中,可检测标签可以包括(例如)可以为基本或主要单分散的或者具有窄粒度分布的颗粒,例如,如通过coultern4颗粒分析仪(beckmancoulter,fullerton,calif.)所确定的,大于50%,75%或者95%的单分散性。

可以用作可检测标签的抗原可以包括(例如)可以通过第二可检测试剂靶向的可检测试剂的任何抗原成分。在某些实施方式中,抗体可以用作第二可检测试剂以检测抗原可检测标签。在某些其它实施方式中,所述抗体第二可检测试剂可以是荧光或酶标记的。在其中可以与所述分析物结合的所述可检测试剂的部分是抗体的一部分的实施方式中,所述抗体第二可检测试剂可以对所述可检测试剂上的抗原具有结合亲合力。

可以用作可检测标签的酶包括(例如)导致所述可检测试剂的一部分转化为可检测产物的酶。在某些实施方式中,所述转化可以导致颜色或荧光的变化或者通过所述可检测试剂的电化学信号的产生。这些酶可以包括(例如)辣根过氧化物酶(hrp)、碱性磷酸酶(ap)、β-半乳糖苷酶、乙酰胆碱酯酶、荧光素酶或催化酶。

可以用作可检测标签的放射性同位素包括(例如)3h、14c、32p、35s或131i。在某些实施方式中,在存在放射性标记的氨基酸的情况下,通过编码所述可检测试剂的mrna的翻译,所述放射性同位素可以缀合至可检测试剂或者引入到可检测试剂。放射性同位素和用于将放射性同位素缀合至分子,如蛋白质的方法在本领域中是已知的并且包括通过slater(radioisotopesinbiology:apracticalapproach,oxforduniversitypress,2002)所讨论的方法。可以使用γ、β或闪烁计数器检测放射性同位素。

可以用作可检测标签的荧光团包括(例如)试卤灵;荧光素,包括(例如)异硫氰酸荧光素,fitc;罗丹明,包括(例如)四甲若丹明异硫氰酸盐,tritc;绿色荧光蛋白,gfp;和藻胆蛋白,包括(例如)别藻蓝蛋白、藻蓝蛋白、藻红蛋白和藻红蓝蛋白,或者任何上述的衍生物。

在某些实施方式中,可以使荧光团经受所应用的刺激,例如,适合激发波长的光以促进荧光。作为另外一种选择,在某些实施方式中,可以通过荧光能量共振转移(fret)伴侣,例如,供体分子提供刺激。当所述荧光团接近所述fret伴侣时,例如,在所述分析物复合物形成期间,可以通过fret伴侣使所述荧光团激发并发荧光。fret供体可以包括发光和/或荧光剂。

在某些实施方式中,可检测标签可以包括(例如)淬灭剂。当接近时,淬灭剂可能能够从荧光团吸收激发能量并且可以用于抑制荧光团的发射。就此而言,所述反应类似于fret反应,除了读数为荧光损失外。

可以用作可检测标签的发光化合物包括(例如)化学发光化合物和生物发光化合物。在某些实施方式中,这些化合物可以用于标记所述可检测试剂。在某些实施方式中,可以通过检测化学反应期间所产生的发光性的存在来确定化学发光标签的存在。有用的化学发光标记化合物的实例包括(但不限于)鲁米诺、异鲁米诺、热吖啶鎓酯(theromaticacridiniumester)、咪唑、吖啶鎓盐和草酸酯。在某些实施方式中,通过检测发光性的存在来确定生物发光抗体的存在。生物发光化合物的实例包括(但不限于)萤光素、荧光素酶和水母发光蛋白。

可以用作可检测标签的核酸包括可以能够pcr扩增和/或杂交至探针的适合的核酸。所述核酸可以具有足够长度以允许正向和/或反向引物的结合。在某些实施方式中,所述核酸标签可以包含在适体中或者结合至蛋白质。在某些实施方式中,可以通过实施其中扩增并测量所述核酸标签的pcr反应或者使用具有与所述核酸标签的至少一部分互补的序列的标记的核酸探针来检测核酸可检测标签。制备并将可检测核酸标签结合至可检测试剂的方法在本领域中是已知的并且包括us2009/0053701中所述的方法。

可以能够进行来源于化学转移邻位相互作用的检测的可检测标签可以包括(例如)光激活指示剂前体,例如,结合至颗粒(如珠)的光激活指示剂前体,其可以激活(例如,通过单线态氧激活)以形成光激活指示剂。在某些实施方式中,可以(例如,通过辐照)刺激所述光激活指示剂以产生可测量的光信号。适合的光激活指示剂前体可以包括(例如)红荧烯、铕、铕螯合物、钐或铽。在其中光激活指示剂前体结合至珠的实施方式中,适合的珠可以包括(例如)乳胶珠和磁珠。

在某些实施方式中,当通过光辐照时,光激活指示剂可以能够产生光信号。在某些其它实施方式中,辐照的光可以具有250-1100nm范围内的波长,例如,300-1000nm,450-950nm之间,360-441nm之间,620-700nm之间,600-630nm之间,620-650nm之间,640-700nm之间,650-700nm之间,670-690nm之间,680-700nm之间或者660-680nm之间的范围中的光,如波长620nm、630nm、640nm、650nm、660nm、670nm、675nm、680nm、685nm、690nm或者波长700nm的光。

在某些实施方式中,当辐照时,所述光激活指示剂可以在500-625nm范围内的波长,如在525-575nm,525-550nm之间,540-560nm之间,540-550nm之间,590-620nm,600-625nm之间或者在610-620nm范围内的波长,如在520nm,530nm,535nm,540nm,545nm,550nm,555nm,560nm,600nm,605nm,610nm,615nm,620nm的波长或者在625nm的波长发荧光(即,发射荧光)。

在某些实施方式中,分析物的检测可以包括检测可以来源于所述多种可检测标签的至少一部分与所述可渗透检测部件的至少一部分之间的相互作用的光发射的减少或增加。在某些实施方式中,例如,在使用淬灭剂、fret荧光团或者光激活指示剂前体作为至少一种可检测标签的某些实施方式中,可以在所述可渗透检测部件的至少一部分上提供或整合相互作用组分。例如,在其中所述可检测标签的至少一部分包括荧光团的某些实施方式中,所述可渗透检测部件的至少一部分可以包括fret伴侣(供体或受体)或者淬灭剂。在某些实施方式中,在其中所述多种可检测标签的至少一部分包括淬灭剂的其它实施方式中,所述可渗透检测部件的至少一部分可以包括适合的荧光团。在某些实施方式中,所述多种可检测标签的至少一部分可以包括化学转移相互作用受体,例如,光激活指示剂前体,并且任选地所述可渗透检测部件的至少一部分可以包括化学转移相互作用供体,例如,一旦通过适当光源刺激,能够提供单线态氧的供体。在某些实施方式中,所述多种可渗透检测部件的至少一部分可以包括化学转移相互作用受体,例如,光激活指示剂前体,并且任选地所述可检测标签的至少一部分可以包括化学转移相互作用供体,例如,一旦通过适当光源刺激,能够提供单线态氧的供体。

在某些实施方式中,检测所述可渗透检测膜的至少一部分上的固定的分析物复合物的存在可以使用时间分辨荧光(trf)和(荧光能量共振转移)fret技术,包括(例如)如ep569,496、美国专利no.5,527,684或者美国专利no.6,861,264中所述的trf-fret技术。

在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种可检测试剂,基于重量:重量,以至少0.1:1、1:1、2:1、5:1、8:1、10:1、15:1、25:1、50:1、100:1、300:1或500:1的比值存在。在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于多种可检测试剂,基于重量:重量,以0.1:1-500:1,0.1:1-300:1,0.1:1-300:1,0.1:1-500:1,2:1-500:1,2:1-100:1,2:1-50:1,2:1-25:1,2:1-15:1,5:1-15:1,5:1-15:1,5:1-10:1,5:1-8:1或8:1-10:1的范围内的比值存在。

在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种可检测试剂,基于摩尔:摩尔,以至少0.1:1、1:1、2:1、5:1、8:1、10:1、15:1、25:1、50:1、100:1、300:1或500:1的比值存在。在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于多种可检测试剂,基于摩尔:摩尔,以0.1:1-500:1,0.1:1-300:1,0.1:1-300:1,0.1:1-500:1,2:1-500:1,2:1-100:1,2:1-50:1,2:1-25:1,2:1-15:1,5:1-15:1,5:1-15:1,5:1-10:1,5:1-8:1或8:1-10:1的范围内的比值存在。

在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少0.1:1、1:1、2:1、5:1、8:1、10:1、15:1、25:1、50:1、100:1、300:1或500:1的比值存在。在某些其它实施方式中,所述多种可检测试剂可以相对于多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以0.1:1-500:1,0.1:1-300:1,0.1:1-300:1,0.1:1-500:1,2:1-500:1,2:1-100:1,2:1-50:1,10:1-50:1,20:1-50:1,25:1-45:1,30:1-45:1,30:1-40:1,35:1-40:1或37:1-40:1范围内的比值存在。

在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以至少0.1:1、1:1、2:1、5:1、8:1、10:1、15:1、25:1、50:1、100:1、300:1或500:1的比值存在。在某些其它实施方式中,所述多种可检测试剂可以相对于多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以0.1:1-500:1,0.1:1-300:1,0.1:1-300:1,0.1:1-500:1,2:1-500:1,2:1-100:1,2:1-50:1,10:1-50:1,20:1-50:1,25:1-45:1,30:1-45:1,30:1-40:1,35:1-40:1或37:1-40:1范围内的比值存在。

在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种可检测试剂,基于重量:重量,以5:1-20:1的范围内的比值存在,并且所述多种抗-肽试剂可以相对于多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以100:1-500:1的范围内的比值存在。在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种可检测试剂,基于重量:重量,以5:1-10:1的范围内的比值存在,并且所述多种抗-肽试剂可以相对于多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以150:1-400:1的范围内的比值存在。在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种可检测试剂,基于重量:重量,以5:1-10:1的范围内的比值存在,并且所述多种抗-肽试剂可以相对于多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以200:1-500:1的范围内的比值存在。在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种可检测试剂,基于重量:重量,以6:1-10:1的范围内的比值存在,并且所述多种抗-肽试剂可以相对于多种肽-标签试剂,基于重量:重量,以250:1-400:1的范围内的比值存在。

在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种可检测试剂,基于摩尔:摩尔,以5:1-20:1的范围内的比值存在,并且所述多种抗-肽试剂可以相对于多种肽-标签试剂,基于摩尔:摩尔,以100:1-500:1的范围内的比值存在。在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种可检测试剂,基于摩尔:摩尔,以5:1-10:1的范围内的比值存在,并且所述多种抗-肽试剂可以相对于多种肽-标签试剂,基于摩尔:摩尔,以150:1-400:1的范围内的比值存在。在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种可检测试剂,基于摩尔:摩尔,以5:1-10:1的范围内的比值存在,并且所述多种抗-肽试剂可以相对于多种肽-标签试剂,基于摩尔:摩尔,以200:1-500:1的范围内的比值存在。在某些实施方式中,多种抗-肽试剂可以相对于所述多种可检测试剂,基于摩尔:摩尔,以6:1-10:1的范围内的比值存在,并且所述多种抗-肽试剂可以相对于多种肽-标签试剂,基于摩尔:摩尔,以250:1-400:1的范围内的比值存在。

在某些实施方式中,所述分析物复合物可以包括(例如)结合至一个肽-标签试剂的分析物。在某些实施方式中,所述分析物复合物可以包括(例如)结合至多个肽-标签试剂的分析物,例如,结合至2、3、小于5、小于10个肽-标签试剂或者结合至10-20个的范围内的肽-标签试剂的分析物。在某些实施方式中,所述分析物复合物还可以包括(例如)结合至一个可检测试剂的分析物。在其它实施方式中,所述分析物复合物可以包括(例如)结合至多个可检测试剂的分析物,例如,结合至2、3、小于5、小于10个可检测试剂或者结合至10-20个的范围内的可检测试剂的分析物。例如,所述分析物复合物可以包括结合至1个肽-标签试剂和1个可检测试剂,或者2个肽-标签试剂和1个可检测试剂的分析物。在某些实施方式中,所述分析物复合物可以包括(例如)结合至2个或以上的分析物的肽-标签试剂,例如,结合至2、3、小于5、小于10个分析物或者结合至10-20个的范围内的分析物的肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述分析物复合物可以包括(例如)结合至2个或以上的分析物的可检测试剂,例如,结合至2、3、小于5、小于10个分析物或者结合至10-20个的范围内的分析物的可检测试剂。例如,所述分析物复合物可以包括3个结合至2个肽-标签试剂和1、2或3个可检测试剂的分析物;或者(例如)所述分析物复合物可以包括2个结合至3个肽-标签试剂和6个可检测试剂的分析物。

在某些实施方式中,至少一种肽-标签试剂可以能够结合至所述分析物的第一表位,并且至少一种可检测试剂可以能够结合至所述分析物的第二表位。在某些实施方式中,所述分析物的第一表位和所述分析物的第二表位的表位类型可以是相同类型的表位。在某些实施方式中,所述分析物的第一表位和所述分析物的第二表位的表位类型可以是两种不同的表位类型。在某些实施方式中,所述分析物的第一表位和所述分析物的第二表位的表位类型可能共有它们序列同一性的一部分,例如,共有至少75%、80%、85%、90%或至少95%的序列同一性;或者与它们的序列共有至少75%、80%、85%、90%或至少95%的序列同一性,但是相对于所述序列的末端部分,不必需处于相同位置。在某些实施方式中,所述至少一种肽-标签试剂和所述至少一种可检测试剂可以是相同类型的抗体。在某些实施方式中,所述至少一种肽-标签试剂和所述至少一种可检测试剂可以是不同类型的抗体。在某些实施方式中,所述分析物的第一表位和/或所述分析物的第二表位是磷酸化-表位。在某些实施方式中,所述分析物的第一表位和所述分析物的第二表位可以在所述分析物的共有部分中重叠。在某些实施方式中,所述分析物的第一表位和所述分析物的第二表位可以不必重叠,但是可以彼此非常接近,例如,彼此在50nm以内,例如,25nm以内,10nm以内,5nm以内,1nm以内或者彼此在5埃以内。在某些实施方式中,所述分析物的第一表位和所述分析物的第二表位可以彼此远离,例如,彼此相距至少1nm,例如,彼此相距至少2nm、5nm、10nm、25nm或至少50nm。在某些实施方式中,所述分析物的第一表位和所述分析物的第二表位可以彼此在10埃-10nm的范围内,例如,彼此在10埃-5nm,10埃-3nm或25埃-3nm的范围内。在某些实施方式中,所述分析物的第一表位和所述分析物的第二表位不重叠并且可以彼此足够远离以使得在所述至少一种肽-标签试剂和所述至少一种可检测试剂之间不存在空间相互作用或者基本不存在空间相互作用。在某些实施方式中,可以分别通过所述至少一种肽-标签试剂和所述至少一种可检测试剂结合所述第一和第二表位。

某些实施方式可以提供检测分析物的测定平台。在某些实施方式中,该测定平台可以包括(例如)渗透区,其可以配置(例如)以输送可以包括所述分析物的至少一部分样品,和任选地其它渗透区,其可以配置(例如)以接收至少一部分所述样品。在某些实施方式中,该渗透区可以包括(例如)多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂可以能够形成分析物复合物,其可以包含所述多种肽-标签试剂中的至少一种和所述分析物。在某些实施方式中,所述其它渗透区可以配置以接收来自所述渗透区的样品部分的至少一部分。在某些实施方式中,所述其它渗透区可以包括(例如)相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量和/或摩尔:摩尔,以(例如)至少100:1的比值存在的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以固定所述多种肽-标签试剂中的至少一种。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以固定所述分析物复合物(例如,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以.01-99.95%的概率,例如,10-99.95%,10-25%,10-50%,25-75%,50%-75%的概率或者75-99.95%的概率固定所述分析物复合物)。在某些其它实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以固定至少5%的所述多种肽-标签试剂,例如至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或至少99.9%的所述多种肽-标签试剂,或者全部所述多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以固定5%-100%的范围内的所述多种肽-标签试剂,例如,10%-95%,10%-75%,10%-50%,25%-95%,25%-75%,20%-50%,50%-100%,50%-75%,75%-100%的范围内的所述多种肽-标签试剂,或者固定75%-99.95%的范围内的所述多种肽-标签试剂。。

在某些实施方式中,所述渗透区可以与所述测定平台的另一种部分,例如,所述其它渗透区相区分。例如,在某些实施方式中,所述渗透区的可区分特征可以包括(但不限于)以下特征中的任何一种或多种:包括多种肽-标签试剂;配置以成为引入样品的装置部分;配置以成为引入分析物的装置部分;配置以使所述分析物与所述多种肽-标签试剂和/或可检测试剂接触;配置以使所述样品的至少一部分(和/或所述多种肽-标签试剂、可检测试剂、分析物和/或分析物复合物的一部分)通过被动运输、毛细管作用、润湿、芯吸或其两种或更多种的组合连通;包括材料,所述材料可以是(例如)吸收性、纤维性或多孔性的;并且包括配置以将所述肽-标签试剂和/或可检测试剂的至少一部分引入所述样品的释放区。本文考虑了所述渗透区的其它独特特征。在某些其它实施方式中,所述另一种部分,例如,所述其它渗透区可以不必包括一个或多个上述可区分特征。

在某些实施方式中,所述其它渗透区可以与所述测定平台的另一种部分,例如,所述渗透区相区分。例如,在某些实施方式中,所述其它渗透区的可区分特征可以包括(但不限于)以下特征中的任何一种或多种:包括多种抗-肽试剂;配置以通过被动运输、毛细管作用、润湿、芯吸或其两种或更多种的组合接收所述样品的至少一部分(和/或所述多种肽-标签试剂、可检测试剂、分析物和/或分析物复合物的一部分);包括检测区,其可以配置以成为可以固定所述分析物复合物的装置部分;配置以成为可以检测分析物的装置部分;包括材料,所述材料可以是(例如)吸收性、纤维性或多孔性的;并且包括膜,其包括(例如)硝化纤维素膜。本文考虑了所述其它渗透区的其它独特特征。

在某些实施方式中,所述渗透区和所述其它渗透区可以不重叠。在其它实施方式中,所述渗透区的至少一部分和所述其它渗透区的至少一部分可以重叠。在某些实施方式中,所述渗透区可以包含在所述其它渗透区之内。在某些实施方式中,所述其它渗透区可以包含在所述渗透区之内。

某些实施方式可以提供侧向流装置。在某些实施方式中,所述侧向流装置可以包括(例如)通过(例如)所述侧向流装置的可渗透子组件的至少一部分限定的流程。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)释放区,所述释放区可以包括(例如)多种肽-标签试剂。在某些实施方式中,所述侧向流装置还可以包括(例如)检测区,所述检测区可以包括(例如)相对于所述多种肽-标签试剂,基于重量:重量和/或摩尔:摩尔,以(例如)至少100:1的比值存在于所述流程中的多种抗-肽试剂。在某些实施方式中,所述释放区可以配置(例如)以将所述多种肽-标签试剂中的至少一部分释放到所述流程中。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂中的至少一种可以是所述多种肽-标签试剂中的至少一种的结合伴侣。

在某些实施方式中,所述可渗透子组件可以包括一个或多个可渗透部件,例如,1、2、3、4或5个可渗透部件。适合的可渗透部件的实例包括(例如)可渗透条、纤维垫和多孔膜。在某些实施方式中,所述可渗透部件中的一个或多个可以能够润湿。在某些实施方式中,所述可渗透部件中的一个或多个可以包括以开放空间交替布置的固体材料基质,如纤维或颗粒。在某些实施方式中,所述开放空间可以包括(例如)孔、通道、微通道、纤维之间的空间,通过相邻和/或装填颗粒(例如,颗粒,如微球体)所形成的尖端等。本文考虑了其它类型的开放空间。在某些实施方式中,可以将样品,例如,液体、混悬液或溶液引入到可渗透子组件的一部分并通过被动运输、毛细管作用、润湿、芯吸或其两种或更多种的组合将其输送通过所述子组件的至少其它部分的开放空间。

在某些实施方式中,所述流程的特征可以在于将样品的流量或迁移输送通过所述可渗透子组件的至少一部分。在某些实施方式中,所述流程的特征可以在于由通过所述子组件中的至少一部分中的开放空间的样品和/或其部分的输送所产生的一般、平均或净流体流向。在某些实施方式中,所述流程在所述可渗透子组件的横截面中可以不必是均一的。例如,在某些实施方式中,样品可以更快速地流动或迁移通过较大的开放空间和/或所述可渗透子组件的边界附近,例如,所述可渗透子组件的表面,例如,上表面,或者边缘附近或其上。

在某些实施方式中,所述流程的至少一部分可以是大致平行、直线、汇合或分离的。在某些实施方式中,所述流程的至少一部分可以是径向流程。

在某些实施方式中,所述释放区可以包括所述可渗透子组件的一部分。在某些其它实施方式中,所述多种肽-标签试剂可以结合,可释放地结合或不结合至所述可渗透子组件的至少一部分。在其中所述多种抗-肽试剂的至少一部分可以不结合至所述子组件上的实施方式中,可以将所述多种肽-标签试剂与样品一起引入到所述子组件的一部分中,或者与所述样品分开引入并在所述可渗透子组件的开放空间中溶解或混悬在所述样品中。在其中所述多种肽-标签试剂结合或可释放地结合在所述释放区中的某些实施方式中,所述释放区可以配置以进一步将所述多种肽-标签试剂中的至少一部分释放到所述流程中。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的至少一部分可以从所述可渗透子组件的至少一部分,例如,所述释放区迁移、溶解、断开和/或扩散。在某些实施方式中,在与所述样品和/或溶剂接触后,所述多种肽-标签试剂中的至少一部分可以从所述可渗透子组件的至少一部分迁移、溶解、断开和/或扩散。

在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以配置(例如)以固定配置以释放,例如,在所述子组件的检测区中释放的所述多种肽-标签试剂中的至少一部分的至少一小部分。在某些其它实施方式中,在通过所述多种抗-肽试剂固定之前,配置以释放的所述多种肽-标签试剂中的至少一部分的至少一种可以能够与分析物结合。

在某些实施方式中,所述检测区可以包括所述可渗透子组件的一部分。在某些其它实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以结合至所述可渗透子组件的至少一部分。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以被动结合。在某些实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以通过非共价相互作用结合。适合的相互作用的实例包括(例如)静电相互作用、亲水相互作用、疏水相互作用、离子静电相互作用、范德华力相互作用或者两种或更多种这些相互作用的组合。在一些实施方式中,所述抗-肽试剂可以主动结合,例如,共价结合至所述固体基底。

在某些实施方式中,所述可渗透子组件的至少一部分可以包括多个接头,其可以有利于所述多种抗-肽试剂的共价键合。适合的接头可以包括(例如)谷胱甘肽、马来酸酐、金属螯合物或马来酰亚胺。在某些其它实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以暴露于所述可渗透子组件中的至少一部分中的所述开放空间,例如,存在于所述检测区中的开放空间中的至少一部分。

在某些其它实施方式中,所述多种可检测试剂中的至少一部分可以结合,可释放地结合或不结合至所述可渗透子组件的至少一部分。。在其中所述多种可检测试剂的至少一部分可以不结合至所述子组件上的某些实施方式中,可以将所述可检测试剂与样品一起引入到所述子组件的一部分中,或者与所述样品分开引入并在所述可渗透子组件上溶解或混悬在所述样品中。在其中所述多种可检测试剂结合或可释放地结合在所述释放区中的某些实施方式中,所述释放区可以配置以进一步将所述多种可检测试剂中的至少一部分释放到所述流程中。在某些其它实施方式中,所述多种可检测试剂中的至少一部分可以能够从所述可渗透子组件中的至少一部分,例如,所述释放区中迁移、溶解、断开或扩散。在某些实施方式中,在与所述样品和/或溶剂接触后,所述多种可检测试剂中的至少一部分可以从所述可渗透子组件的至少一部分迁移、溶解、断开和/或扩散。

某些实施方式可以提供组件。在某些实施方式中,所述组件可以包括(例如)可以具有沉积在其至少部分上的多种肽-标签试剂和任选地沉积在其至少部分上的多种可检测试剂的可渗透释放部件。在某些实施方式中,所述组件还可以包括(例如)可渗透检测部件,所述可渗透检测部件可以与所述可渗透释放部件流体连通。在某些实施方式中,所述可渗透检测部件可以具有结合至其至少部分上的多种抗-肽试剂。

在某些实施方式中,所述可渗透释放部件可以吸收所述多种肽-标签试剂中的至少一部分和/或所述多种可检测试剂中的至少一部分。在某些实施方式中,所述可渗透释放部件可以允许释放所述多种肽-标签试剂中的至少一部分和/或所述多种可检测试剂中的至少一部分。在某些实施方式中,所述可渗透释放部件可以为所述组件的至少一部分提供结构支持。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的至少一部分和/或所述多种可检测试剂中的至少一部分可以在所述可渗透释放部件上条带化。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂中的至少一部分和/或所述多种可检测试剂中的至少一部分可以在所述可渗透释放部件上干燥。如本文所解释的,所述条带和/或干燥的肽-标签试剂和/或可检测试剂可以从所述可渗透释放部件的至少一部分迁移、溶解、断开和/或扩散至样品或溶剂。在某些实施方式中,所述多种肽-标签试剂和/或多种可检测试剂中的至少一部分可以能够与存在于所述可渗透释放部件上的液体样品被动混合。在某些实施方式中,可以能够在所述可渗透释放垫上形成本文考虑的分析物复合物类型中的任何一种或多种。

在某些实施方式中,所述可渗透释放部件可以包括吸水、亲水材料,如(例如)吸收性材料。适合的可渗透释放部件材料可以包括(例如)棉绒;纤维素材料,或者由纤维素与聚合物纤维材料,如聚酰胺或人造丝纤维一起制成的材料;和玻璃纤维材料。例如,适合的材料可以包括棉绒纸,如s&s903和s&sgb002(得自schleicherandschuell,inc.,keene,n.h.)和bfc180(得自whatman,fairfield,n.j.);纤维素材料,如由纤维素与聚酰胺制成的grade939,由纤维素共混纤维制成的grade989和由纤维素和人造丝与聚酰胺制成的grade1278和grade1281(得自ahlstromcorporation,mt.hollysprings,pa.);和玻璃纤维,如lydall硼硅酸盐(得自lydall,inc.,rochester,n.h.)。

在某些实施方式中,可以封闭所述可渗透释放部件以防止非特异性结合。在某些实施方式中,可以用含有牛血清白蛋白(bsa)和非离子表面活性剂,如聚乙二醇,例如,以商品名tritonx-100出售的聚乙二醇(得自rohm&haasco.,philadelphia,pa.),例如,约3%bsa和约0.1%tritonx-100的组合的水溶液涂覆所述可渗透释放部件。

在某些实施方式中,所述可渗透检测部件可以由可以允许所述多种抗-肽试剂与之结合的物质形成。在某些实施方式中,所述可渗透检测部件可以包括聚合物材料,例如,可以允许所述抗-肽试剂的至少一部分被动结合或吸收其上的微孔膜或膜。在这些实施方式中,可以不必通过化学或物理固定将所述多种抗-肽试剂结合至所述可渗透检测部件。在其它实施方式中,所述多种抗-肽试剂可以通过化学或物理固定结合至所述可渗透检测部件。

在某些实施方式中,适合的可渗透检测部件材料可以包括(例如)硝化纤维素、尼龙、电荷-改性的尼纶、聚偏氟乙烯、聚醚砜或类似材料或者这些材料的组合的微孔聚合物层。在某些实施方式中,适合的可渗透检测部件材料可以具有0.1μm至20μm之间的范围内,例如,1μm至3μm之间,3μm至10μm,10μm至20μm之间的范围内或者5μm至20μm之间的范围内的孔径。

在某些实施方式中,所述可渗透检测部件可以包括硝化纤维素膜,其包括(例如)具有添加的去污剂和/或表面活性剂的硝化纤维素膜。在某些实施方式中,所述可渗透检测部件可以包括硝化纤维素膜,其包括(例如)包含单独的硝化纤维素或者混合的硝化纤维素酯,如与硝酸和/或其它酸的酯组合的膜。在某些其它实施方式中,可以将硝化纤维素膜可渗透检测部件涂覆或层压至半透明或透明聚合物薄膜上以为所述膜提供物理支持。在某些实施方式中,所述可渗透检测部件可以包括已浇铸到聚酯薄膜上的硝化纤维素聚合物,如在某些实施方式中,所述可渗透检测部件可以包括已层压到聚酯薄膜上或者层压到除聚酯之外的另一种衬底材料上的硝化纤维素膜。适合的衬底材料可以包括(例如)预层压或预浇铸的平面片材。

在某些实施方式中,可以通过将所述可渗透释放部件的下游边缘重叠在所述可渗透检测部件的上游边缘上,然后将所得双相材料粘合至透明聚合物薄膜或片材,借此保持所述两种部件就位来将所述可渗透释放部件和所述可渗透检测部件连接。在其它实施方式中,所述可渗透释放部件和所述可渗透检测部件可以以不重叠平接连接,并粘合至透明聚合物薄膜或片材,借此保持所述两种部件就位。在某些实施方式中,所述连接的部件可以提供用于输送所述样品、肽-标签试剂、可检测试剂、分析物、分析物复合物或者任何上述组合的连续流程。输送可以包括(例如)被动运输、毛细管作用、润湿、芯吸或其两种或更多种的组合。在某些实施方式中,所述连接的部件流体连通。

在某些实施方式中,所述可渗透释放部件和所述可渗透检测部件中的至少一种具有横跨各个部件的至少一部分的至少一个流体通道,其最小截面宽度在具有所述分析物复合物的分子体积的球体直径的3-20倍的范围内。在某些实施方式中,所述至少一种气流通道的最小截面宽度为具有所述分析物复合物的分子体积的球体直径的小于10,10到20或者大于20倍。

图1显示了代表性侧向流检测装置100的示意图。根据该实施方式,吸收剂样品垫106,可渗透释放部件108,可渗透检测部件110和吸收剂芯吸垫112贴在背衬卡102上至流体连通。可以将含有分析物的液体样品引入到吸收剂样品垫106并通过毛细管作用流体连通至可渗透释放部件108,其中所述分析物可以遇到至少一种肽-标签试剂和任选地处于所述液体样品中的可检测试剂,此时它可以结合以形成分析物复合物。然后,所述分析物复合物可以通过可渗透释放部件108的其余部分流体连通,并可以将其引入至可渗透检测部件110。所述分析物复合物将继续在可渗透检测部件110中流动直至它被固定其上。液体样品的一部分,包括潜在地非固定化的分析物复合物将流过可渗透检测部件110并被吸收到芯吸垫112上。

图2显示了溶剂-驱动的侧向流检测装置200的示意图。根据该实施方式,吸收剂溶剂垫204,可渗透样品部件206,可渗透释放部件208、可渗透检测部件210和吸收剂芯吸垫212贴在背衬卡202上至流体连通。可以将液体溶剂引入到吸收剂溶剂垫204并且通过毛细管作用流体连通至可渗透样品垫206,在此所述溶剂可以溶解或混悬存在于所述样品中的分析物。然后,含有分析物的溶剂可以流向可渗透释放部件208,在此所述分析物可以遇到至少一种肽-标签试剂和任选地处于所述溶剂中的可检测试剂,此时所述分析物可以结合以形成分析物复合物。然后,所述分析物复合物可以通过可渗透释放部件208的其余部分流体连通,并可以将其引入至可渗透检测部件210。所述分析物复合物将继续在可渗透检测部件210中流动直至它被固定其上。溶剂的一部分,包括潜在地非固定化的分析物复合物将流过可渗透检测部件210并被吸收到芯吸垫212上。

图3中显示了可配置以检测三种类型分析物中的任一种的多用侧向流测试试剂盒300的示意图。根据该实施方式,将吸收剂样品垫306,用于可渗透释放部件308的通用接收器,可渗透检测部件310和吸收剂芯吸垫312贴在背衬卡302上,使可渗透检测部件310和吸收剂芯吸垫312流体连通。可以将分别任选地含有不同类型的肽-标签试剂和/或可检测试剂的第一可渗透释放部件308a、第二可渗透释放部件308b或者第三可渗透释放部件308c插入通用接收器308以使所述插入的部件与吸收剂样品垫306和可渗透检测部件310流体连通。

图4显示了用于检测八种(8)不同的分析物的代表性径向流检测装置400的示意图。根据该实施方式,将吸收剂样品垫406居中布置并与可渗透释放部件408、可渗透检测部件410和吸收剂芯吸垫412流体连通。可以将任选地含有多种不同类型的分析物的液体样品引入吸收剂样品垫406并通过毛细管作用径向(分开地)流动至可渗透释放部件408,在此每种分析物可以遇到它可以结合的至少一种肽-标签试剂和它可以结合的液体样品中的可检测试剂,此时它可以结合以形成分析物复合物。然后,所述分析物复合物可以通过可渗透释放部件408的其余部分流体连通,并可以将其引入至可渗透检测部件410。所述分析物复合物将继续在可渗透检测部件410中流动直至它被固定其上。液体样品的一部分,包括潜在地非固定化的分析物复合物将流过可渗透检测部件410并被吸收到芯吸垫412上。为了可检测地区分可以存在于所述样品中的多达八种类型的分析物中的每一种,可以将装置400分成8个部分,如通过虚线414a-h所示。在每个部分中,可以将不同的多种肽-标签试剂和不同的多种可检测试剂在存在于每个部分中的所述释放区408部分上条带化,从而形成条带408a-h。在每个部分内,可以将不同的多种肽-标签试剂和不同的多种可检测试剂一起依次条带化或者相对于样品流向并排条带化。在每个部分内,可以将多种抗-肽试剂在存在于每个部分中的检测区410部分上条带化,从而形成条带410a-h。在某些示例性实施方式中,存在于每个部分中的抗-肽试剂类型可以是相同的。在其它示例性实施方式中,可以在两个或更多个部分中使用不同类型的抗-肽试剂。在某些实施方式中,一个或多个所述部分可以是流体连通的。在某些实施方式中,一个或多个所述部分不必处于流体连通,例如,通过虚线414a-h表示的一个或多个部分分隔符还可以表示流体屏障(例如,塑料壁)的存在,其防止两个或更多个部分之间的流体连通。如根据图4显而易见的,在某些实施方式中,可以容易地将径向流检测装置配置以具有少于或多于八个(8)部分,并且借此可以配置以检测少于或多于八种(8)不同类型的分析物。

图5中显示了用于检测六种(6)不同分析物的代表性多分析物侧向流检测装置500的示意图。根据该实施方式,吸收剂样品垫506,可渗透释放部件508,可渗透检测部件510和吸收剂芯吸垫512贴在背衬卡502上至流体连通。可以将任选地含有多种不同类型的分析物的液体样品引入到吸收剂样品垫506并且通过毛细管作用流体连通至可渗透释放部件508,在此每种分析物可以遇到它可以结合的至少一种肽-标签试剂和它可以结合的液体样品中的可检测试剂,此时它可以结合以形成分析物复合物。然后,借此所形成的每个分析物复合物可以通过可渗透释放部件508的其余部分流体连通,并可以将其引入至可渗透检测部件510。每个分析物复合物将继续在可渗透检测部件510中流动直至它被固定其上。液体样品的一部分,包括潜在地非固定化的分析物复合物将流过可渗透检测部件510并被吸收到芯吸垫512上。用多种六种(6)类型的肽-标签试剂和六种(6)类型的可检测试剂对可渗透释放部件508条带化以提供与所述六种(6)类型分析物中的每一种结合所需的试剂类型。所述多种六种(6)类型的肽-标签试剂和所述多种六种(6)类型的可检测试剂可以一起在区域508a中条带化。作为另外一种选择,所述多种六种(6)类型的肽-标签试剂可以在区域508a中条带化并且所述多种六种(6)类型的可检测试剂可以一起在区域508b中条带化。可以用多种多达六种(6)或以上的类型的抗-肽试剂对可渗透检测部件510条带化,每种抗-肽试剂能够固定化至少一种类型的肽-标签试剂。所述多种六种(6)或以上类型的抗-肽试剂可以一起在区域510a中条带化。作为另外一种选择,一个或多个其它区域510b-f可以用于分别对所述多种六种(6)或以上类型的抗-肽试剂条带化。另外,可渗透检测部件510可以包括对照区510g,其配置以提供所述装置工作的指示,例如,通过可检测地捕获存在于所述样品中的任何类型的颗粒。如根据图5显而易见的,在某些实施方式中,通过调整肽-标签试剂、可检测试剂和抗-肽试剂的数目和类型以及条带化方案,可以容易地将所述多分析物侧向流检测装置配置以检测少于或多于六种(6)分析物。

实施例

侧向流测试条的制备

释放垫:用封闭缓冲液(10mm硼酸盐,3%bsa,1%pvp-40,0.25%tx-100)封闭milliporegfdx玻璃纤维垫,干燥并干燥储存。然后,根据表1,用可检测试剂和任选地肽-标签试剂对所述干燥的玻璃纤维垫喷雾,然后在约40℃干燥并干燥储存。

检测膜:根据表1,使用biodotfrontline分配器,以约1μl/cm的分配速率,用固定化试剂对sartoriusunisartcn140硝化纤维素膜条带化,干燥并干燥储存。然后,用封闭缓冲液(10mm磷酸盐,0.1%蔗糖,0.1%bsa,0.2%pvp-40,ph7.2)封闭所述硝化纤维素膜,在约40℃干燥并干燥储存。

表1.缀合物垫和检测膜的制备

层压和组件:每个侧向流测试条包括:(1)与检测膜一端上方具有2mm重叠的缀合物垫,(2)与所述检测膜另一端上方具有2mm重叠的芯吸垫,和(3)其上贴了缀合物垫-检测膜-芯吸垫构造的粘合剂背衬卡。在以下实施例中使用了160个测试条(分别基于制备a和制备b,各80个)。

实施例1:以表2所示的浓度实施了一系列hcg检测实验。在每个实验中,将40μlhcg溶液沉积在所述缀合物垫上并使其运行8分钟。然后,将清洗溶液沉积在所述缀合物垫上并使其运行7分钟。通过使用esets012gold读数器对存在于所述测试区中的可检测试剂进行检测获得了结果,并将其在表2中报告。

表2.实施例1的检测结果

*每个实验重复4-8次,从而分别对侧向流测试条的制备a和制备b产生了总计80次实验。

在本说明书中提及的所有专利公开和专利申请以每个单独的专利公开或专利申请具体并且单独表明作为参考并入本文的相同程度作为参考并入本文。

尽管在本文中已显示和描述了本发明的某些实施方式,但是对于本领域技术人员显而易见的是仅通过举例说明提供这些实施方式。旨在以下列权利要求定义本发明的范围和处于这些权利要求范围内的方法和结构,并且以此同样涵盖了它们的等价形式。

序列表

<110>tgr生物科学私人有限公司

<120>侧向流分析物检测

<130>013018-0009-999

<140>

<141>

<150>62/355,133

<151>2016-06-27

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<210>1

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<213>人工序列

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<223>人工序列描述:合成肽

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