本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种新的荷移-高效液相法测定氨基丁醇的含量。
技术背景
氨基丁醇，是重要的药物中间体，在有机合成和药物生产中有着广泛的用途，如用于抗结核药物盐酸乙胺丁醇的合成，用于合成青霉烯类抗生素，R-3-氨基丁醇还是抗艾滋新药度鲁特韦的不可缺少的手性源中间体。由于氨基丁醇没有紫外吸收，传统的检测方法主要用气相检测进行检测，而气相色谱由于其应用范围较窄，没有普遍配置于常规实验室。而液相色谱由于通用性广，在常规实验室中更为常见，因此开发一种利用液相色谱方法来快速检测氨基丁醇具有重要意义。
自1952年Mulliken首先提出电荷传递理论(charge transfer theory)以来，荷移反应引起广大科研人员的研究探索。荷移反应是基于电子给体和电子受体之间的电荷转移从而形成荷移络合物的一种反应。荷移络合物往往具有颜色，利用荷移反应，可以调节药物水溶性，增强药物稳定性。在检测方面，由于荷移络合物的形成，能使吸收光谱发生较大幅度的红移，并且往往在紫外或可见光区域具有较大的特定吸收峰，所以利用这个特性可以避开其他药物制剂或其他物质的干扰，提高检测方法的选择性。
现在，荷移反应一般采用待测物质作为电子供体，荷移试剂作为电子受体。如利用荷移分光光度法测定四氯苯醌(TCBQ)与萘普生的荷移反应，该反应在554nm有吸收波长；TCBQ与环丙沙星的荷移反应，在550nm处有吸收波长，线性范围为35-195μg/mL。还可以利用荷移液相法准确快速地测定左氧氟沙星含量，测定盐酸普萘洛尔的含量，以及硫酸胍基丁胺等一些无紫外吸收的药物。
氨基丁醇上的氮原子存在孤对电子，能与缺电子的荷移试剂四氯苯醌发生荷移络合。该方法简便快捷，试剂稳定，并且重复性好，适合用于无紫外吸收的氨基丁醇含量的快速检测。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种新的测定氨基丁醇含量的高效液相色谱方法，可以采用配置更普遍的液相色谱简单快捷的实现定性定量检测氨基丁醇。
为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：
一种用于测定氨基丁醇含量的高效液相色谱方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
步骤一：荷移反应
将氨基丁醇加入水中，以四氯苯醌为荷移试剂，在一定温度下，控制缓冲溶液的pH，四氯苯醌的浓度及用量以及反应时间，进行络合反应，得到荷移络合后的氨基丁醇，反应式如下：
步骤二：含量检测
利用高效液相色谱-紫外检测器对络合后的氨基丁醇进行定性定量测定。
所述述的缓冲溶液的pH为8-9.5，优选的为8.2-8.8。
所述的缓冲溶液用量为1-4mL，优选的为1-2mL。
所述的水浴反应温度为50-70℃，优选的为55-65℃。
所述的水浴反应时间为60-90min，优选的为60min。
所述的荷移试剂浓度为0.001mol/L-0.003mol/L，优选的为0.002mol/L，荷移试剂用量为4-10mL，优选的为5mL。
所述的紫外检测器的检测波长为330-370nm，优选的为350nm。
所述的反相高效液相色谱使用的为普通反相柱。
所述的反相高效液相色谱的流动相由水溶液和有机溶剂组成，有机溶剂为甲醇，水溶液中加入适量三乙胺，三乙胺浓度为0.001％-0.02％，优选的为0.001％，流动相中有机溶剂与水溶液的体积比例范围为5％-50％。
所述的流动相0.8-1.2mL/min，优选的为1.0mL/min。
本发明中，反相高效液相色谱的优选分析条件为：
Extend反相C18柱，流动相为甲醇(5％-50％)-三乙胺水溶液，方法为梯度洗脱，紫外检测波长为350nm，流速为1.0mL/min，柱温为25℃，进样量为10ul。
与现有技术相比，本发明所取得的进步效果在于：
本发明给出了氨基丁醇的荷移络合方法，通过控制反应条件，生成氨基丁醇与四氯苯醌的络合产物，并建立了络合后的氨基丁醇的定性定量的高效液相色谱-紫外检测器分析方法。本方法操作简便，重现性好，准确性高，便于无紫外吸收的氨基丁醇的快速含量检测。
附图说明
图1：水与荷移试剂四氯苯醌的空白对照液相图
图2：氨基丁醇与荷移试剂四氯苯醌的样品液相图
图3：氯化铵与荷移试剂四氯苯醌的铵离子干扰情况液相图
具体实施方法：
以下结合附图对本发明进行进一步详述：
实施例1氨基丁醇与四氯苯醌的络合
氨基丁醇标准液：精密称取无色的氨基丁醇溶液0.1g于100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释到刻度线，得1mg/mL的标准液。四氯苯醌(TCBQ)溶液：精密称取浅黄色四氯苯醌0.0492g于100mL容量瓶中，用无水乙醇稀释到刻度线，得0.002mol/L的四氯苯醌溶液。取氨基丁醇溶液1mL，四氯苯醌溶液5ml，pH8.4缓冲液1mL于10mL具塞试管内，加水至刻度线，60℃水浴60min，反应结束后迅速冷却至室温，氨基丁醇络合物溶液颜色变为紫色。
实施例2：液相谱图分析
2-1水与荷移试剂四氯苯醌的空白对照液相色谱分析
四氯苯醌(TCBQ)溶液：精密称取四氯苯醌0.0492g于100mL容量瓶中，用无水乙醇稀释到刻度线，得0.002mol/L的四氯苯醌溶液。取蒸馏水1mL，四氯苯醌溶液5ml，pH8.4缓冲液1mL于10mL具塞试管内，加水至刻度线，60℃水浴60min，反应结束后迅速冷却至室温，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：50％甲醇-0.001％三乙胺水溶液梯度洗脱，紫外检测波长为350nm，柱温为25℃，流速为1mL/min，进样体积为10ul。保留时间2.239以及8.365处出现两个空白溶剂峰。
2-2氨基丁醇与荷移试剂四氯苯醌的样品液相色谱分析
氨基丁醇标准液：精密称取无色的氨基丁醇溶液0.1g于100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释到刻度线，得1mg/mL的标准液。四氯苯醌(TCBQ)溶液：精密称取浅黄色四氯苯醌0.0492g于100mL容量瓶中，用无水乙醇稀释到刻度线，得0.002mol/L的四氯苯醌溶液。取氨基丁醇溶液1mL，四氯苯醌溶液5ml，pH8.4缓冲液1mL于10mL具塞试管内，加水至刻度线，60℃水浴60min，反应结束后迅速冷却至室温，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：50％甲醇-0.001％三乙胺水溶液梯度洗脱，紫外检测波长为350nm，柱温为25℃，流速为1mL/min，进样体积为10ul。在保留时间8.932处有一主样品峰。
2-3氯化铵与荷移试剂四氯苯醌的铵离子干扰情况液相色谱分析
氯化铵标准液：精密称取氯化铵0.1g于100mL容量瓶中，用蒸馏水稀释到刻度线，得1mg/mL的标准液。四氯苯醌(TCBQ)溶液：精密称取浅黄色四氯苯醌0.0492g于100mL容量瓶中，用无水乙醇稀释到刻度线，得0.002mol/L的四氯苯醌溶液。取氨基丁醇溶液1mL，四氯苯醌溶液5ml，pH8.4缓冲液1mL于10mL具塞试管内，加水至刻度线，60℃水浴60min，反应结束后迅速冷却至室温，采用高效液相色谱进行检测分析。液相色谱条件：50％甲醇-0.001％三乙胺水溶液梯度洗脱，紫外检测波长为350nm，柱温为25℃，流速为1mL/min，进样体积为10ul。保留时间2.632处有一主峰，对氨基丁醇络合物的出峰没有影响。
实施例3高效液相色谱条件优化考察
3-1三乙胺浓度条件优化考察分析
在流动相水溶液中分别加入0.001％,0.005％,0.01％,0.015％,0.02％这五个三乙胺浓度，用相同样品进行色谱分析。液相色谱条件：50％甲醇-0.001％三乙胺水溶液梯度洗脱，紫外检测波长为350nm，柱温为25℃，流速为1mL/min，进样体积为10ul。根据峰形情况，优选的三乙胺浓度为0.001％。
3-2液相色谱流速条件优化考察分析
在色谱分析过程中，改变流动相的流速，选择0.4,0.6,0.8,1.0,1.2ml/min这五个流速，用相同样品进行色谱分析。液相色谱条件：50％甲醇-0.001％三乙胺水溶液梯度洗脱，紫外检测波长为350nm，柱温为25℃，流速为1mL/min，进样体积为10ul。根据峰形情况，优选的流速为1.0mL/min。
3-3液相色谱柱温条件优化考察分析
在色谱分析过程中，改变柱温，选择15,20,25,30,35℃这五个温度，用相同样品进行色谱分析。液相色谱条件：50％甲醇-0.001％三乙胺水溶液梯度洗脱，紫外检测波长为350nm，柱温为25℃，流速为1mL/min，进样体积为10ul。根据峰形情况，优选的柱温为25℃。