一种用于烯肟菌胺净化的固相萃取装置和烯肟菌胺检测方法与流程

本发明涉及农药残留检测技术领域，具体而言，涉及一种用于烯肟菌胺净化的固相萃取装置和烯肟菌胺检测方法。

背景技术：

烯肟菌胺是近几年国内农药企业推出的种高效、低毒的新品种，也是上海市农业部门推荐使用的农药品种，被广泛应用于水果、蔬菜和粮食等作物。但是，目前在相关国家标准、行业标准和文献中无检测方法，不利于农产品中烯肟菌胺残留量的监控，所以十分必要开展烯肟菌胺的快速、准确的检测方法研究。

目前关于水果、蔬菜和粮食中烯肟菌胺的残留检测方法主要有气相色谱法、液相色谱法、液相色谱-串联质谱法和气相色谱-串联质谱法。前处理多采用固相萃取小柱和分散固相萃取净化。烯肟菌胺净化方法通常是使用传统的固相萃取柱来进行净化，但是，此方法操作复杂，耗时耗力，且产生了大量的废弃物，对环境产生较大破坏。传统的固相萃取spe(solidephaseextraction)是一种基于色谱分离的样品前处理方法，利用吸附剂将液体样品中的特定化合物吸附，与样品的基质和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱，达到分离或者富集目标化合物的目的，整个过程需要活化、上样、淋洗、洗脱待测物等多个步骤。

目前，尚缺乏操作简单、价格低廉的能够用于蔬菜中烯肟菌胺净化的前处理固相萃取柱。

鉴于此，特提出本发明。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种用于烯肟菌胺净化的固相萃取装置，采用该固相萃取装置可以方便、简单地对去除待测样品中对烯肟菌胺检测有干扰的物质，提高烯肟菌胺检测结果的灵敏度。

本发明的另一目的在于提供一种烯肟菌胺检测设备，其包括有上述用于烯肟菌胺净化的固相萃取装置，该检测设备通过固相萃取装置，可以方便、简单地对去除待测样品中对烯肟菌胺检测有干扰的物质，提高烯肟菌胺检测结果的灵敏度。

本发明的另一目的在于提供一种烯肟菌胺检测方法。

本发明是这样实现的：

一方面，本发明提供了一种用于烯肟菌胺净化的固相萃取装置，其包括：萃取柱；

萃取柱的内部设置有空腔，萃取柱的一端设置有溶剂入口，另一端设置有溶剂出口，溶剂入口和溶剂出口均与空腔相连通；

萃取柱的空腔中设置有由净化材料填充的净化层，净化材料包括mgso4(无水硫酸镁)、psa(乙二胺-n-丙基硅烷化硅胶)、c18(十八烷基硅烷键合硅胶)和gcb(石墨化炭黑)。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，萃取柱的空腔中设置第一筛板和第二筛板，第一筛板位于净化层靠近溶剂入口的一侧，第二筛板位于净化层靠近溶剂出口的一侧。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，萃取柱具有底板，溶剂出口位于底板上，底板上设置有引流管，引流管与溶剂出口连通。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，在净化层中，mgso4、psa、c18和gcb的重量比为(1-2):(0.1-0.3):(0.1-0.3):(0.01-0.03)。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，mgso4、psa、c18和gcb以混合方式填充在净化层中。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，mgso4、psa、c18和gcb以分层的方式填充在净化层中。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，在从溶剂入口往溶剂出口的方向上，净化层包括依次层叠设置的mgso4层、psa层、c18层和gcb层。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，在从溶剂入口往溶剂出口的方向上，净化层包括依次层叠设置的gcb层、c18层、psa层和mgso4层。

当然需要说明的是，mgso4层、psa层、c18层和gcb层4个吸附层的排列顺序并不限于上述的方式，其可以根据实际情况进行排列。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，萃取柱的材质为聚丙烯。

另一方面，本发明提供了一种烯肟菌胺检测设备，其包括有上述的用于烯肟菌胺净化的固相萃取装置。

另一方面，本发明提供了一种烯肟菌胺检测方法，其包括：采用上述的用于烯肟菌胺净化的固相萃取装置对待测样品进行净化处理。

本发明具有以下有益效果：

采用本发明提供的固相萃取装置对待测样品检测时，直接将待测样品从溶剂入口加入到萃取柱的空腔中，待测样品流经由mgso4、psa、c18和gcb材料填充的净化层后，其中的对烯肟菌胺有干扰作用的物质例如有机酸、脂肪、色素等被有效去除，待测样品被净化后从溶剂出口流出，目标化合物烯肟菌胺直接通过，再被收集，用于到液相色谱串联质谱法分析，检测其中的烯肟菌胺，采用本发明提供的固相萃取装置可以直接地对烯肟菌胺待测样品进行净化处理，样品的基质和干扰化合物被净化层吸附，目标化合物烯肟菌胺直接通过，从而大大提高工作效率和准确度，减小基质效应和对仪器的污染，达到既定量准确又快速简便的效果。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明实施例1提供的固相萃取装置的内部结构示意图。

图2为本发明实施例1提供的固相萃取装置的装有待测溶液时的内部结构示意图。

图3为图1的俯视图。

图4为图1的仰视图。

图中：100-固相萃取装置；110-萃取柱；111-空腔；112-溶剂入口；113-溶剂出口；114-净化层；115-第一筛板；116-第二筛板；117-引流管；118-底板；119-推杆；119a-推头；119b-端帽。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。

实施例1

请参考图1-图4，本实施例提供的用于烯肟菌胺净化的固相萃取装置100，其包括萃取柱110。

萃取柱110的内部设置有空腔111，萃取柱110的一端设置有溶剂入口112，另一端设置有溶剂出口113，溶剂入口112和溶剂出口113均与空腔111相连通；

萃取柱110的空腔111中设置有由净化材料填充的净化层114，净化材料包括mgso4、psa、c18和gcb。

进一步地，萃取柱110的空腔111中设置第一筛板115和第二筛板116，第一筛板115位于净化层114靠近溶剂入口112的一侧，第二筛板116位于净化层114靠近溶剂出口113的一侧。

筛板的材质是聚乙烯多孔材料，其主要是起到过滤的作用。第一筛板115和第二筛板116的圆周壁与萃取柱110的内侧壁固定连接以压实或固定净化层114。

进一步地，萃取柱110具有底板118，溶剂出口113位于底板118上，底板118上设置有中空的引流管117，引流管117与溶剂出口113连通。引流管117可以将经净化处理后的待测样品引流到容器中被收集。

进一步地，在本实施例中，固相萃取装置100还具有推杆119，推杆119的一端的端部具有推头119a，推头119a的外直径与萃取柱110的内直径相匹配。推杆119可在空腔111内滑动。

推杆119的作用在于当空腔111装入带净化的溶液中，操作者可通过推压推杆119的操作对溶液施加一定的压力，使溶液可以缓慢通过第二筛板116、净化层114和第一筛板115，从引流管117中流出，并被收集到容器中。

为了便于操作者推拉推杆119，推杆119的另一端端部设置有端帽119b，端帽119b的可方便操作者对推杆119施加压力或拉力。

进一步地，mgso4、psa、c18和gcb的质量比为(1-2):(0.1-0.3):(0.1-0.3):(0.01-0.03)；

其中，以萃取柱110的内部空腔111容积5ml为例，其填充mgso4100-200mg、psa10-60mg、c1810-60mg和gcb10-60mg。

例如，本实施例中，萃取柱110的内部空腔111容积设为5ml，其填充mgso4150mg、psa35mg、c1835mg和gcb35mg。以混合方式填充。

使用本实施例提供的用于烯肟菌胺净化的固相萃取装置进行烯肟菌胺前处理的方法如下：

将固相萃取装置保持在竖直状态下，直接将待测样品(溶液)从溶剂入口加入到萃取柱的空腔中，往空腔中放入第二筛板和与之相连的推杆，推动推杆，待测样品流经净化层后，从引流管流出，引流管下方可放置收集容器，将净化后的待测样品收集。被净化后的待测样品再利用液相色谱串联质谱法进行分析。

待测样品在流过净化层时，目标化合物烯肟菌胺直接通过，待测样品含有的有机酸、脂肪、色素等干扰物被有效去除，进而提高后续检测分析的灵敏度，可满足农产品中烯肟菌胺的痕量检测分析要求。

本实施例提供的固相萃取装置可以直接对待测样品进行净化，制作更加简单、使用方便，单个固相萃取装置的成本低例如不超过10元，且操作简单，满足了国内外烯肟菌胺检测及样品前处理的要求。

实验例

在蔬菜(芹菜、青菜、黄瓜、西红柿以及接球甘蓝)中添加浓度分别为10μg/kg、20μg/kg和40μg/kg的烯肟菌胺，使用实施例1的固相萃取装置净化后，测定计算结果显示，烯肟菌胺的回收率((检测值/添加值)*100％)为91.0％～103.4％，相对标准偏差(rsd)为1.2％～4.6％。试验回收率和相对标准偏差均可以满足分析方法要求。

检测方法如下：

提取：准确称取样品10g(精确到0.01g)于50ml离心管中，加入乙腈20ml，高速涡旋混匀20min，然后加入氯化钠约5g，立即涡旋混匀约30s，于8000rpm离心5min，上清液备用。

净化：吸取上清液约1.0ml于烯肟菌胺净化的固相萃取装置中，用注射器推杆让其通过净化装置滴入进样小瓶中，收集约0.5ml，用lc-ms/ms测定。

1.3仪器条件

1.3.1液相色谱条件

流动相a为甲醇，b为10mmol/l乙酸铵+0.1％甲酸水溶液；流速：0.4ml/min；梯度洗脱程序：0min，5％a；0～1.0min，95％a；1.0～3.0min，95％a；3.0～3.6min，5％a；3.6～4.0min，5％a。柱温：45℃；进样量：5μl。

1.3.2.质谱条件

电喷雾离子源(esi)正离子模式；毛细管电压：2.5kv；离子源温度：150℃；脱溶剂温度：450℃，雾化气(氮气)流速：1000l/h；锥孔气(氮气)流速：150l/h；碰撞气(氩气)流速：0.11l/h。质谱参数见表1。

表1质谱参数

检测结果见表2

表2

从表2可以看出，烯肟菌胺的回收率((检测值/添加值)*100％)为91.0％～103.4％，相对标准偏差(rsd)为1.2％～4.6％。试验回收率和相对标准偏差均可以满足分析方法要求。

以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。